WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

КАШУРО

Вадим Анатольевич

ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ СИСТЕМЫ

ГЛУТАТИОНА В ОЦЕНКЕ ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ

ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ

14.00.46 – клиническая лабораторная диагностика 14.00.16 – патологическая физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Санкт-Петербург 2009 2

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Военно-медицинская академия имени С.М.

Кирова» МО РФ Научные консультанты:

доктор медицинских наук профессор Карпищенко Анатолий Иванович доктор медицинских наук профессор Белевитин Александр Борисович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профессор Кузнецов Валерий Валентинович доктор медицинских наук профессор Васильев Андрей Глебович доктор медицинских наук профессор Ивницкий Юрий Юрьевич

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П.Павлова» МЗСР РФ

Защита диссертации состоится 22 декабря 2009 года в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 215.002.08 в Военно-медицинской академии имени С.М. Кирова (194044, г. Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, дом 6)

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Военномедицинской академии имени С.М. Кирова

Автореферат разослан “_” 2009 года

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук профессор Ю.А Митин

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность. Химиотерапия является одним из перспективных направлений в онкологии, значение которой с каждым годом возрастает.

Решающую роль в эффективности противоопухолевого действия химиопрепарата играет его доза. Однако, увеличение дозы в большинстве случаев приводит к развитию побочных реакций, обусловленных токсическим повреждением нормальных органов и тканей (Ганцев Ш.Х., 2004). Побочное действие цитостатиков – «ахиллесова пята» химиотерапии опухолевых заболеваний. По данным некоторых авторов, почти в 25% случаев лечение цитостатиками приходится прекращать из-за развития выраженных побочных эффектов (Блохин Н.Н., 1998; Корман Д.В., 2006). В связи с этим поиск адекватной противоопухолевой терапии заслуживает пристального внимания и требует решения ряда проблем, связанных, прежде всего, с ранней диагностикой и коррекцией побочных токсических эффектов химиотерапевтических препаратов (Гершанович М.Л., 2004).



Основной причиной развития токсических эффектов противоопухолевой терапии является общность мишеней цитостатической терапии в опухоли и в нормальных органах и тканях (Катцунг Б.Г., 1998; Жуков Н.В., Тюляндин С.А., 2008). Развивающаяся при применении цитостатиков токсичность является фактически продолжением их терапевтической активности и характеризует их низкий терапевтический индекс. В этой связи, побочное действие цитостатиков подобно токсическому поражению, реализация которого происходит через различные механизмы повреждения клетки (Grant R.L., et al., 1997). К этим механизмам относятся повреждения генетического аппарата клетки; активация процессов свободнорадикального окисления; повреждения клеточных мембран;

нарушения процессов синтеза белка и клеточного деления; повреждающее действие избытка ионов Ca2+ в клетке; нарушения энергетического обмена (Барабой В.А. и др., 1998; Глушков С.И., 2006).

Тем не менее, патогенез побочного действия противоопухолевых препаратов, несмотря на кажущуюся полноту, изучен фрагментарно. Успехи последних десятилетий, достигнутые в изучении патогенеза опухолевых заболеваний и их лечения, открыли новые грани токсичности, обусловленные дизрегуляторными изменениями в клетке, а не прямым поражением цитостатиком биологически значимых структур. В частности, дизрегуляторные расстройства связаны с нарушением регуляции тиолдисульфидного статуса, потерей чувствительности рецепторов к специфичным лигандам, развитием общей и метаболической иммунодепрессии (Антонов В.Г., Козлов В.К., 2004).

Важнейшим условием нормальной жизнедеятельности клеток является поддержание определенного редокс-состояния в цитоплазме, поскольку оно играет существенную роль в таких процессах, как синтез ДНК, экспрессия генов, ферментативная активность и др. (Дмитриев Л.Ф., 2000; Смирнова Г.В., Октябрьский О.Н., 2005). Изменения редокс-состояния внутриклеточного содержимого и отдельных молекул, являющиеся следствием стрессовых воздействий или результатом активности самих клеток, вовлечены в регуляцию многих клеточных процессов, в том числе и устойчивости к токсичности. Физиологически неадекватная редокс-регуляция способна инициировать комплекс изменений аналогичных прямому действию токсиканта на различные клеточные структуры.

Экспериментально и клинически доказано, что в токсическом действии противоопухолевых средств одна из ведущих ролей принадлежит повышенной наработке АФК и реакциям СРО, приводящим к оксидативной модификации нуклеиновых кислот, белков и липидов (Стручков В. А., 1980; Блохин Н.Н., Переводчикова Н.И., 1984; Альберт А., 1989; Минаева Л.В., 2007). Регуляцию изменяющейся при этом в окислительную сторону внутриклеточной среды осуществляют различные редокс-буферы, важнейшим из которых является система глутатиона, участвующая в утилизации АФК и перекисных соединений (Кулинский В.И., 1990; Mannervik B., 1989; Meister A., 1983).





Таким образом, внутриклеточный уровень восстановленного глутатиона и ферментов его обмена являются маркерами активности процессов СРО и, следовательно, устойчивости клетки к токсическим повреждениям. В целостном организме количество опухолевых клеток не превышает 1% (Антонов В.Г., Козлов В.К., 2004). Их вклад в системные показатели редоксобмена невелик. Поэтому системные показатели отражают состояние редоксобмена прежде всего в нормальных клетках. Учитывая способность цитостатиков изменять интенсивность СРО в сторону окислительного стресса в нормальных клетках, изменения системных показателей редокс-баланса в крови отражает его состояние именно в нормоцитах.

Редокс-изменения предшествуют морфологическим и структурным нарушениям в нормальных клетках (гепатоцитах, миокардиоцитах, энтероцитах и др.). В этой связи, отклонения системных маркеров редоксобмена от нормальных значений отражают текущее состояние и направление возможного изменения редокс-обмена. Эритроциты являются частью нормального пула клеток, и закономерности нарушения редокс-баланса в эритроцитах идут параллельно аналогичным изменениям во всех других нормальных клетках. Эритроциты играют ключевую роль в межорганном и интегративной системы, отражают состояние общего редокс-статуса организма, в том числе и состояние редокс-статуса при действии цитостатиков (Колесниченко Л.С. и др., 2007; Kyлинский В.И. и др., 2007). В этой связи, изменения редокс-обмена в эритроцитах отражают в той или иной степени его изменения в других клетках. Однако диагностические возможности определения показателей системы глутатиона в эритроцитах для оценки побочного действия противоопухолевых препаратов практически не изучены.

В развитии системы диагностики токсических поражений основной упор делается на маркеры цитолитического синдрома внутренних органов, креатинкиназы отмечается не только при поражении сердечной мышцы, но и при опухолях предстательной железы, мочевого пузыря, желудочнокишечного тракта (Тиц Н., 1997). И хотя среди пациентов кардиологического профиля этот тест имеет чувствительность 97% и специфичность 67% для Цитостатики даже в высоких кумулятивных дозах не вызывают острого повреждения структуры кардиомиоцитов, поэтому уровень сердечного тропонина T и активность креатинкиназы MB не изменяются при развитии токсической кардиомиопатии (Гершанович М.Л., 2004). Трансаминазы аспартатаминотрансферазы – сердца. Тем не менее, при токсических поражениях печени так же, как и при заболеваниях сердца преобладает повышение активности аспартатаминотрансферазы (Тиц Н., 1997).

Таким образом, изучение показателей обмена глутатиона, играющего важную роль в поддержании нормальной жизнедеятельности клетки и организма в целом и обеспечивающего многоуровневую и эффективную защиту тканей от повреждающего действия противоопухолевых препаратов, представляется актуальным для создания новых подходов ранней диагностики токсического действия средств химиотерапии и возможности их коррекции.

Целью исследования явилось определение возможности использования показателей обмена глутатиона в эритроцитах в качестве лабораторных тестов для прогнозирования и диагностики развития побочных эффектов при токсическом действии средств химиотерапии и эффективности их коррекции средствами фармакотерапии.

Для достижения поставленной цели предстояло решить следующие задачи исследования:

- определить особенности изменений показателей обмена глутатиона и перекисного окисления липидов в различных органах и в эритроцитах белых беспородных крыс при однократном и повторном введении циклофосфана (ЦФ) в различных дозах;

- определить особенности изменений показателей обмена глутатиона и перекисного окисления липидов в различных органах и в эритроцитах белых беспородных крыс при однократном и повторном введении доксорубицина (ДР) в различных дозах;

-определить особенности изменений показателей обмена глутатиона и перекисного окисления липидов в различных органах и в эритроцитах белых беспородных крыс с лимфосаркомой Плисса при повторном введении ЦФ;

- исследовать влияние на показатели обмена глутатиона и перекисного окисления липидов в различных органах и в эритроцитах лабораторных животных лекарственных средств различных фармакологических групп (антиоксиданты, антигипоксанты, производные глутатиона и предшественники его синтеза), используемых для защиты клеток от повреждающего действия цитостатиков;

- определить особенности изменений показателей системы глутатиона и перекисного окисления липидов в эритроцитах пациентов, получающих средства химиотерапии (включая ЦФ и ДР);

оценить информативность показателей системы глутатиона в эритроцитах для диагностики тяжести цитотоксического повреждения внутренних органов при применении средств химиотерапии (ЦФ, ДР) и эффективности средств фармакологической коррекции.

использования ряда показателей обмена глутатиона и процессов ПОЛ в эритроцитах пациентов, получающих полихимиотерапию, для оценки тяжести побочного действия ДР и ЦФ. Впервые проведена комплексная оценка показателей системы глутатиона и процессов перекисного окисления липидов в тканях печени, почек, сердца, головного мозга и в эритроцитах лабораторных животных (здоровых и с лимфосаркомой Плисса) при однократном и повторном введении ЦФ и ДР в различных дозах. Наряду с определением содержания восстановленного глутатиона, свободных сульфгидрильных групп белков, продуктов перекисного окисления липидов и оценки динамики их сдвигов, исследованы патобиохимические изменения, связанные с нарушением активности ферментов обмена глутатиона. Проведен анализ причин, вызывающих нарушения обмена глутатиона и активацию процессов перекисного окисления липидов в исследуемых тканях и органах.

цитостатиков динамика изменений ряда показателей системы глутатиона в эритроцитах (концентрация ВГ, СГ, МДА и активность Г-6-ФДГ, ГР, ГП) отражает состояние его обмена в повреждаемых тканях внутренних органов (печень, сердце, почки) и эффективность проводимой цитопротекторной терапии. Для оценки риска развития и тяжести цитотоксического поражения тканей внутренних органов, эффективности применяемых препаратов динамического исследования показателей системы глутатиона в эритроцитах пациентов перед каждым новым циклом полихимиотерапии и на 7-е сутки после введения ДР и ЦФ.

Практическое значение работы заключается в том, что полученные в показателей системы глутатиона в органах и тканях лабораторных животных и в эритроцитах человека при применении ЦФ и ДР позволяют сформулировать представление о патогенетических механизмах цитотоксического действия исследования данные о динамике состояния показателей системы глутатиона и процессов ПОЛ в эритроцитах могут быть использованы в качестве лабораторных тестов оценки тяжести поражения и прогноза исхода интоксикации. Выявленное патогенетическое значение нарушений системы глутатиона может служить основанием для поиска новых эффективных лекарственных средств, обладающих цитопротекторными свойствами, для профилактики и лечения побочных эффектов применения исследуемых препаратов.

Положения, выносимые на защиту:

цитотоксических эффектов противоопухолевых средств подтверждается экспериментальными данными о нарушениях обмена глутатиона в органах мишенях (ДР – сердечная мышца, ЦФ – печень), их усилении в результате кумуляции цитостатиков и частичной коррекции при использовании цитопротекторных препаратов;

- исследование обмена глутатиона в эритроцитах и органах мишенях фармакологических препаратов, а поиск новых средств, действие которых связано с нормализацией обмена глутатиона, является современным направлением фармакологической защиты тканей от побочных эффектов кумулятивного действия ЦФ и ДР;

- определение показателей обмена глутатиона в эритроцитах пациентов, получающих полихимиотерапию, является патогенетически обоснованным для их применения в клинической практике при решении вопросов оценки риска развития побочных эффектов действия ДР и ЦФ и их тяжести, а также для фармакологической коррекции.

Реализация результатов исследования. Рекомендации, разработанные на основании полученных в ходе диссертационного исследования данных, используются в научной работе и учебном процессе на кафедрах клинической биохимии и лабораторной диагностики, патологической физиологии, военной токсикологии и медицинской защиты Военно-медицинской академии.

Диссертационное исследование выполнено в рамках плановых НИР шифр «Циклофосфан», «Цитотоксичность».

Апробация работы. Результаты работы доложены на Всеармейской экстремальных ситуациях» (Санкт-Петербург, 2003), Российском Международном симпозиуме «Медицинские и биологические проблемы, связанные с уничтожением химического оружия» (Волгоград, 2003), XXXVI World Congress on Military Medicine (Санкт-Петербург, 2005), Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 40-летию НИО обитаемости и профессионального отбора ВМедА (Санкт-Петербург, 2007), Всероссийской научно-практической конференции, посвященной, 45-летию ФГУП «НИИГПЭЧ» ФМБА России (Санкт-Петербург, 2007), 3-й Международной научной конференции «Донозология-2007» (Санкт-Петербург, 2007), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы лабораторной диагностики» (Санкт-Петербург, 2008), Российской научной конференции «Медико-биологические проблемы токсикологии и радиологии»

(Санкт-Петербург, 2008), Российской и Всеармейской научно-практической конференции «Вопросы нефрологии в практике терапевта и эндокринолога»

(Санкт-Петербург, 2008).

Публикации. По теме научно-исследовательской работы опубликовано 40 печатных работ, из них в рекомендуемых ВАК изданиях – 7.

Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на странице машинописного текста и состоит из введения, 6 глав, включающих исследования, полученных результатов исследований и их обсуждения, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. В диссертации приведены 33 рисунка и 119 таблиц (46 в тексте и 73 в приложении). Список литературы содержит 261 библиографический источник, из них 99 отечественных и 162 иностранных публикации.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

беспородных крысах-самцах массой 190–210 г из питомника РАМН «Рапполово», общая схема проведения которого представлена в табл. 1.

Схема проведения экспериментального исследования Токсиканты Дозы, режим * - в том числе 50 особей с перевитой лимфосаркомой Плисса Для коррекции цитотоксического действия через 30 мин после введения ЦФ или ДР животным внутрибрюшинно вводили один из следующих препаратов: ацетилцистеин – в виде 3 % официнального раствора, 150 мг/кг, глутоксим – в виде 1% водного раствора, 100 мг/кг, изопропиловый эфир глутатиона – в виде 5% водного раствора, 500 мг/кг, кардиоксан – в виде 0,8% раствора (на растворе Хартмана), 48 мг/кг, мексидол – в виде 1 % водного раствора, 50 мг/кг, ремаксол – в виде 10% водного раствора (по янтарной кислоте), 118 мг/кг, трисан – виде 1% официнального раствора, 15 мг/кг, цитофлавин – в виде 10% официнального раствора, 118 мг/кг.

Контрольным животным (отравленным или интактным) в те же сроки внутрибрюшинно вводили физиологический раствор в дозе 10 мл/кг массы тела.

В процессе клинического исследования проводили оценку влияния доксорубицина на состояние системы глутатиона и динамику интенсивности процессов перекисного окисления липидов в эритроцитах пациентов в различные сроки нахождения в стационаре. Исследование проводили на базе хирургического отделения Ленинградского областного онкологического диспансера (г.п. Кузьмолово, Ленинградская обл.) в процессе лечения пациенток, поступивших для курсовой полихимиотерапии рака молочной железы. Всем больным, включенным в исследование, проводилось лечение по схеме FAC: циклофосфан 500 мг/м2, внутривенно капельно; доксорубицин мг/м2, внутривенно капельно по методике, рекомендованной производителем;

5-фторурацил 500 мг/м2, внутривенно капельно. Продолжительность цикла полихимиотерапии. Профилактическое назначение антиэметиков осуществлялось в соответствии с общепринятыми методиками, принятыми в онкологических центрах.

Наряду с группой больных, получавших полихимиотерапию по выбранной схеме, была выделена группа пациенток, лечение которых дополнялось применением токсикомодифицирующим препаратом глутоксимом. 1,5 % раствор глутоксима вводили в день начала очередного цикла полихимиотерапии однократно подкожно через сутки в течение 14 дней.

Назначение препарата осуществляли методом случайной выборки.

Оценку состояния системы глутатиона и интенсивности процессов перекисного окисления липидов проводили в эритроцитах пациентов перед каждым циклом химиотерапии и на 7-й день после введения препаратов.

Оценка безопасности лечения осуществлялась на основании регистрации нежелательных явлений. Побочные эффекты регистрировали соответственно критериям шкалы Карновского, при этом путем целенаправленного опроса больных выявляли и отмечали наличие или отсутствие ожидаемых реакций.

На протяжении всего периода терапии осуществлялся контроль показателей функции костного мозга, печени и почек, при этом полный анализ крови и биохимическое исследование крови выполнялись перед каждым циклом химиотерапии и на 7-й день после введения препаратов.

При выполнении клинического раздела работы также анализировали анамнез заболевания, медицинскую документацию догоспитального этапа, данные объективного исследования при поступлении в лечебное учреждение и в динамике, результаты других дополнительных методов обследования (ЭКГ, данные рентгенологического исследования).

Контрольную группу составили здоровые доноры (40 женщин) в возрасте от 43 до 61 года.

У экспериментальных животных в тканях печени, почек, сердца, головного мозга и эритроцитах, а также в эритроцитах пациентов, определяли содержание восстановленного глутатиона (ВГ), уровень свободных сульфгидрильных групп белков (СГ) и активность ферментов системы глутатиона и сопряженных систем – глутатионредуктазы (ГР), глюкозо-6фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ), глутатионпероксидазы (ГП), глутатион-Sтрансферазы (ГТ) и каталазы. Для оценки интенсивности процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в тканях животных определяли концентрацию диеновых конъюгатов (ДК) и малонового диальдегида (МДА).

определяли согласно методике G. Bellomo et al. (1990). Определение Концентрацию МДА определяли по методу M. Uchiyama (1978). Определение активности ферментов системы глутатиона проводили в гемолизате центрифугирования гомогенатов тканей в течение часа при 150000 g на ультрацентрифуге L8-М («Beckman», США). Активность глутатионредуктазы определяли по методу I. Garlberg, B. Mannervik (1985), глюкозо-6фосфатдегидрогеназы – по A. Kornberg et al. (1955), глутатионпероксидазы – по методу А.Н. Гавриловой и Н.Ф. Хмары (1986) с использованием в качестве субстрата гидроперекиси трет-бутила, каталазы – по М.А. Королюку (1988), глутатион-S-трансферазы – методом W.H. Habig, W.B. Jakoby (1981). Расчет активности ферментов производили на грамм белка или гемоглобина (в гемолизате эритроцитов). Концентрацию белка определяли методом Лоури в модификации G.L. Peterson (1977), гемоглобина – гемиглобинцианидным методом.

аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, содержание мочевины, креатинина, общего билирубина) в сыворотке крови экспериментальных животных и больных определяли на автоматическом биохимическом анализаторе «Synchron» («Beckman Соulter», США), активность щелочной фосфатазы и концентрацию мочевины на автоматическом биохимическом анализаторе Hitachi – 902 Automatik («Hitachi», Япония).

Статистическую обработку полученных результатов проводили на персональном компьютере с помощью пакета прикладных программ «SPSS 16.0». В каждой группе рассчитывали средние значения и ошибку среднего.

Проводился корреляционный анализ изменений показателей системы глутатиона в эритроцитах и ткани печени отравленных животных.

Достоверность различий с соответствующей контрольной группой оценивали по t-критерию Стьюдента. Приведенные в тексте и таблицах значения представляли в виде Xср mx. Для установления различий между несколькими группами по нескольким вариантам значений различных переменных одновременно применялся дискриминантный анализ.

Проведенное клинико-экспериментальное исследование, посвященное изучению состояния системы глутатиона и сопряженных биохимических процессов в различных тканях лабораторных животных и в эритроцитах человека при применении циклофосфана и доксорубицина, подтвердило, что указанной биохимической системе принадлежит одно из ведущих мест в механизмах естественной цитопротекции, а нарушения ее функционирования имеют существенное значение в патогенезе развития нежелательных побочных эффектов противоопухолевых препаратов. Изучение состояния системы глутатиона в условиях воздействия цитостатиков является важным для поиска новых подходов к профилактике и лечению цитотоксических поражений тканей ряда органов, которые могут быть основаны на использовании препаратов, нормализующих состояние изучаемой системы цитопротекции – системы глутатиона.

Анализ полученных данных показал, что для полноценной реализации основных функций системы глутатиона, таких как поддержание тиолдисульфидного равновесия, антиоксидантная защита и конъюгация при применении циклофосфана и доксорубицина необходимо три фактора: 1) достаточный уровень восстановленного глутатиона; 2) адекватная активность ферментов антиоксидантной защиты; 3) наличие энергетических ресурсов для осуществления рециклирования восстановленного глутатиона и процессов конъюгации.

На направленность изменений показателей системы глутатиона существенно влияли условия применения цитостатика (дозовая нагрузка, временной фактор, токсикокинетические и токсикодинамические особенности его метаболизма), характер исследуемой ткани и тканевые особенности обмена глутатиона.

Ярко выраженный дозозависимый характер снижения показателей системы глутатиона наблюдался во всех исследуемых органах. Межтканевые отличия характеризовались тем, что наиболее существенные нарушения обмена глутатиона отмечались в тканях, в которых происходило развитие побочного гепато-, нефро- или кардиотоксического эффекта. Так, при применении кардиотоксического цитостатика доксорубицина максимальное по степени снижение концентрации ВГ отмечалось в тканях сердца (более, чем 10-кратное), циклофосфана – в тканях печени (более, чем 3-кратное) (Рис. 1).

Более умеренные сдвиги были обнаружены в эритроцитах, а снижение содержания глутатиона в тканях головного мозга было наименее значимым.

Центральное место в патогенезе цитотоксического действия ЦФ при однократном введении в больших дозах (200 и 400 мг/кг) принадлежало снижению внутриклеточного уровня ВГ, который необратимо расходовался на процессы конъюгации с различными метаболитами ксенобиотика, а также превращался в окисленную форму в процессах детоксикации АФК и органических перекисей. Истощение резервов системы глутатиона сопровождалось также выраженным повышением концентрации продуктов ПОЛ, снижением активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, каталазы (Рис.2). Данные изменения лежат в основе нарушений ряда функций липидов.

Рис. 1. Изменения концентрации ВГ в тканях сердца и в эритроцитах крыс при однократном введении доксорубицина в дозе 7,47 мг/кг В отличие от интоксикации высокими дозами, повторное введение ЦФ характеризующегося постепенной мобилизацией, а затем расходованием резервов системы глутатиона. За периодом напряжения адаптивных процессов следовал период компенсации, направленный на временное возмещение поврежденных функций системы глутатиона в процессе интоксикации. Если Подтверждением этого может служить двухфазный характер изменений, который отмечался и при исследовании активности ряда ферментов системы глутатиона в наиболее повреждаемой ткани – печени.

Рис. 2. Изменения концентрации ВГ, активности ГП и Г-6-ФДГ в тканях печени крыс при однократном введении циклофосфана в дозе 200 мг/кг Например, введение ЦФ в дозе 20 мг/кг приводило к повышению активности ГР в течение 3 суток с последующим достоверным ее снижением.

При исследовании ГП и каталазы компенсаторная активация (p0,05) этих ферментов в ткани печени наблюдалась на 5-е сутки эксперимента при использовании дозы токсиканта 20 мг/кг (в 1,37 и 1,30 раза, соответственно).

Однако при исследовании активности Г-6-ФДГ в ткани печени периода компенсаторных изменений выявлено не было. Напротив, в течение всего эксперимента наблюдалось достоверное выраженное дозозависимое ее снижение, которое можно объяснить наличием в активном центре фермента сульфгидрильной группы (Рис. 3).

Снижение активности Г-6-ФДГ при повторном введении ЦФ может быть связано с необратимым алкилированием тиоловых групп энзима активными метаболитами ЦФ и повреждающим действием на молекулы фермента АФК и свободных радикалов (Голиков С.Н., 1986). В свою очередь, усиленное расходование НАДФ·Н в глутатионредуктазной и цитохром P-450-редуктазной реакциях усугубляет процессы истощения резервов компенсаторного ответа Подтверждением роли активации СРО и алкилирования SН-групп в снижении активности Г-6-ФДГ может служить выраженное снижение концентрации сульфгидрильных групп и повышение уровня ДК, МДА в ткани печени.

Рис. 3. Изменения активности Г-6-ФДГ и ГП в тканях печени крыс при повторном введении циклофосфана в дозе 20 мг/кг Угнетение активности ферментов редокс-циклирования глутатиона, происходившее при введении доксорубицина, также подтверждает важную роль нарушений обмена глутатиона в патогенезе развития доксорубициновой кардиомиопатии. Динамика снижения уровня ВГ в тканях сердечной мышцы корреляционную связь с динамикой уменьшения активности Г-6-ФДГ и ГР.

Снижение уровня ВГ в сердечной мышце, существенно превосходящее по времени сроки интенсификации процессов ПОЛ, подтверждает, что истощение расходованием на осуществление антиоксидантной защиты кардиомиоцитов, сколько нарушением ферментативного звена восстановления глутатиона (Рис.

4).

Рис. 4. Изменения концентрации ВГ и МДА в тканях сердца крыс при однократном введении доксорубицина в дозе 7,47 мг/кг Угнетением активности ферментов редокс-циклирования глутатиона объясняется мощное снижение концентрации ВГ в тканях печени, почек и в эритроцитах крыс с перевитой лимфосаркомой Плисса. На первый взгляд, обратимое расходование ВГ на обезвреживание АФК, активно образующихся в результате характерного для различных форм онкологической патологии снижения активности Г-6-ФДГ вследствие недостатка глюкозо-6-фосфата изза преобладания процессов гликолиза. Длительная прооксидантная нагрузка приводит к истощению запасов ВГ и уменьшению активности ферментов антиперекисной защиты ГП и ГТ. Все это служит основой для перехода оксидативного стресса в декомпенсированную фазу (табл. 2).

Изменения некоторых показателей системы глутатиона в тканях различных органов при однократном введении циклофосфана в дозе 20 мг/кг экспериментальным животным с лимфосаркомой Плисса Показате ммоль/г без лечения ткани опухоль Плисса ммоль/г без лечения ткани опухоль Плисса Г-6-ФДГ мин г мин г * - достоверность отличия p0,05 по сравнению с группой контроля.

- достоверность отличия p0,05 по сравнению с нелеченой опухолью Плисса Проведенный анализ полученных данных указывает на взаимосвязь механизмов повреждений системы глутатиона и реализации цитотоксических эффектов исследуемых противоопухолевых препаратов. Исследование динамики изменений активности ферментов обмена глутатиона (ГР, Г-6-ФДГ, ГП, ГТ) и сопряженных биохимических процессов (интенсивности протекания процессов ПОЛ, состояния тиол-дисульфидного равновесия, активности каталазы) позволило представить участие системы глутатиона в патогенезе побочного цитотоксического действия исследуемых цитостатиков в следующем виде:

1. Метаболизм циклофосфана и доксорубицина с участием цитохрома P приводит к образованию их активных метаболитов (гидроксифосфамида и доксорубицинола), свободнорадикальных промежуточных метаболитов (циклофосфана – карбониевого иона, доксорубицина – семихиноновых радикалов) и активных форм кислорода.

2. В результате глутатионовой конъюгации активных метаболитов доксорубицина и циклофосфана происходит необратимое потребление ВГ, восполняемое за счет синтеза глутатиона de novo, возможности которого весьма ограничены.

3. Увеличение наработки АФК приводит к более интенсивному, хотя и глутатионпероксидазной реакции и переходу его в окисленную форму.

4. Обезвреживание свободнорадикальных промежуточных продуктов метаболизма карбониевого иона и семихиноновых радикалов также может привести к снижению уровня восстановленного глутатиона. В условиях нарастающего потребления ВГ на процессы конъюгации и обезвреживания АФК уровень концентрации трипептида сохраняется за счет активации как рециклирования. В то же время увеличение наработки продуктов СРО приводит к индукции активности ферментов АОЗ. Данные изменения характеризуют компенсаторный период при применении исследуемых цитостатиков.

5. Последующая возрастающая прооксидантная нагрузка, нарушение тиолдисульфидного статуса приводят к истощению резервов системы red-oxциклирования глутатиона (относительный дефицит, а затем и снижение активности глутатионредуктазы и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы вследствие потребления глюкозо-6-фосфата и снижения уровня НАДФ·H), а затем и к уменьшению глутатионпероксидазной активности. Все это декомпенсированную фазу в связи с невозможностью поддержания необходимого тканевого уровня восстановленного глутатиона.

6. Снижение активности ряда ферментов обмена глутатиона может быть вызвано в результате прямого их повреждения цитостатиками или их метаболитами, свободными радикалами или грубыми расстройствами процессов биосинтеза энзимов этой биохимической системы. Высокая алкилирующая способность метаболитов ЦФ, образующихся в процессе активации системой цитохрома P450, лежит в основе их взаимодействия не только с ВГ, но и с функциональными (в том числе и с сульфгидрильными) группами различных биомолекул (Голиков С.Н., 1986). Процессы обратимого S-тиолирования функциональных групп белков окисленным глутатионом и образование смешанных дисульфидов также может приводить к снижению содержания СГ (Кулинский В.И., 1990). Последнее изменение имеет неоднозначное значение: во-первых, сохранение в клетке пула глутатиона; во-вторых, защита SH-групп белков от необратимой их модификации как продуктами метаболизма ЦФ, так и свободными радикалами и продуктами ПОЛ. Таким образом, система глутатиона принимает участие в защите тиольных групп различных белков и сохранении активности ряда ферментов. Однако в условиях дефицита ресурса глутатиона, в значительном количестве расходуемого в процессах конъюгации, закономерным является нарушение тиолового статуса.

7. Нарастание активности перекисного окисления липидов, снижение энергетического метаболизма клетки, возникающего в результате повреждения митохондриальных мембран, алкилирования SH-зависимых ферментов цикла Кребса и нарушений в клетке равновесия между белковыми тиолами и дисульфидами. Как известно, обмен глутатиона в тканях (как за счет биосинтеза de novo, так и за счет его восстановления из окисленной формы) является энергоемким процессом и требует, по крайней мере, затрат 3-х молекул АТФ на одну молекулу субстрата. Кроме того, развитие различных форм гипоксии закономерно приводит к повышенной митохондриальных мембран приводят к усугублению угнетения клеточного дыхания, развитию энергодефицитных состояний и может способствовать формированию патогенетического порочного круга.

Таким образом, нарушения системы глутатиона при применении циклофосфана и доксорубицина, несмотря на специфические особенности их действия, протекают по единому патогенетическому механизму.

Расширение представлений об особенностях функционирования системы глутатиона в условиях применения противоопухолевых препаратов в различных дозах и режимах введения имеет не только теоретическое значение, связанное с уточнением роли изучаемой системы цитопротекции в патогенезе побочного действия цитостатиков, но и существенное практическое значение.

Они позволяют не только определить роль нарушений системы глутатиона в реализации цитотоксических эффектов исследуемых цитостатиков, но и показать возможные маркеры цитотоксичности. Перспективным направлением практического использования показателей системы глутатиона является возможность оценки с их помощью тяжести цитотоксических поражений противоопухолевых средств.

Полученные биохимические данные изменений показателей системы глутатиона подтверждаются одновременно проведенным морфологическим исследованием тканей печени в различные сроки повторного введения ЦФ, которое выявило сопряжение нарастающих морфологических признаков повторной интоксикации (выраженность жировой дистрофии, гиперхромия ядер, расширение синусоидов) с увеличением кумулятивного эффекта ксенобиотика.

предположение о возможности использования определения показателей системы глутатиона в эритроцитах для диагностической оценки степени тяжести цитотоксических эффектов при повторном воздействии исследуемых цитостатиков. Это подтверждается одинаковым характером изменений показателей данной системы во внутренних органах и в эритроцитах.

Рис. 5. Изменение активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в ткани печени и эритроцитах при повторном введении ЦФ в суточной дозе 20 мг/кг Например, динамика изменений активности Г-6-ФДГ в клетках красной крови коррелировала с таковыми в ткани печени. Была установлена прямая положительная корреляционная связь, коэффициент корреляции составил при введении ЦФ в дозе 20 мг/кг – 0,65 (Рис. 5), при дозе 40 мг/кг – 0,53. При применении доксорубицина между содержанием восстановленного глутатиона в тканях сердца и в эритроцитах через сутки после повторных воздействий (коэффициент корреляции – 0,95).

Кроме того, в ходе экспериментального исследования проведена сравнительная оценка между сроками появления и выраженностью изменений маркеров гепато- и нефротоксичности ВОЗ (АЛТ, АСТ, ЩФ, содержания глутатиона при повторном введении ЦФ в суточной дозе 20 мг/кг в течение суток (табл. 3).

Сроки появления и выраженность изменений маркеров гепатотоксичности, показателей системы глутатиона и морфологических признаков поражения печени при повторном введении ЦФ в суточной дозе мг/кг Активность снижение на 10–20% снижение на 25–50% снижение более, чем Концентрация МДА повышение на 30– повышение на 50– повышение более, печени билирубина Установлено, что изменения таких показателей обмена глутатиона, как активность Г-6-ФДГ, ГР, содержание ДК, МДА происходили в более ранние сроки и выявлялись при отсутствии достоверных изменений со стороны большинства общеизвестных биохимических показателей, а к окончанию эксперимента носили более выраженный характер.

Правильность предположения о возможности использования показателей системы глутатиона для оценки побочных цитотоксических поражений паренхиматозных органов при применении противоопухолевых средств подтвердили результаты дискриминантного анализа, с помощью которого удалось по показателям системы глутатиона в эритроцитах экспериментальных животных с максимальной четкостью провести разделение животных на три группы: с выраженными и незначительными морфологическими признаками поражения печени и их отсутствием (Рис. 6).

Применение результатов дискриминантного анализа в алгоритме обследования животных дало возможность правильно прогнозировать выраженные токсические поражения печени: чувствительность метода составила 97%, специфичность – 93%.

цитопротекции, основанное на данных динамического исследования не только уровня ВГ, но и активности ферментов обмена глутатиона, а также показателей ПОЛ позволяет в дальнейшем сформулировать подходы к использованию цитопротекторной терапии побочного действия противоопухолевых препаратов. При этом, основываясь на преобладании тех или иных патогенетических механизмов воздействия противоопухолевых средств на состояние системы глутатиона, поиск и применение препаратов цитопротекции может быть построен с учетом их специфичности воздействия на естественную систему защиты клетки. Таким образом, открывается перспектива использования таких препаратов, патогенетическое действие которых будет направлено на коррекцию определенных звеньев системы глутатиона.

Канонические дискриминантные функции Рис. 6. Распределение значений канонических функций дискриминации в 1, 2 и 3 группах животных при введении ЦФ в дозе 40 мг/кг.

Выявленные механизмы цитотоксического действия циклофосфана и доксорубицина, связанные с нарушениями системы глутатиона, позволили обосновать направления цитопротекторной терапии:

1. Применение препаратов экзогенного глутатиона (изопропиловый эфир глутатиона), предшественников его синтеза (ацетилцистеин) и производных окисленного глутатиона (глутоксим) было направлено на увеличение пула восстановленного глутатиона, расходующегося на процессы конъюгации с ксенобиотиками и их метаболитами, репарации поврежденных биомолекул.

комплексообразователей (кардиоксан) было направлено на снижение промежуточных продуктов метаболизма цитостатиков.

3. Применение антигипоксантов (цитофлавин, трисан) было направлено на устранение нарушений энергетического обмена.

Проведенное исследование показало, что реализация цитопротекторных свойств этих препаратов, несмотря на разный механизм их действия, патогенетически связана с восстановлением повреждений системы глутатиона и нарушений ее функций. Причем воздействие разных препаратов на принципиально одинаковыми эффектами: положительным влиянием на динамику концентрации ВГ и СГ; снижением интенсивности протекания процессов ПОЛ; увеличением активности ферментов восстановления глутатиона; стимулирующим влиянием на активность антиоксидантных ферментов.

Выраженность воздействия препаратов фармакологической коррекции на показатели системы глутатиона была различной. Так, при однократном введении ЦФ наибольшее влияние на показатели системы глутатиона отмечалось при использовании изопропилового эфира глутатиона. Препарат предупреждения снижения уровня ВГ в тканях печени (тогда как действие антигипоксантов и антиоксидантов было обратимо), но и максимально предупреждал накопление продуктов ПОЛ в тканях, а также оказывал глутатионпероксидазы. Все эти данные не только подтвердили лидирующую роль срыва механизмов глутатионовой конъюгации при реализации цитотоксических эффектов действия ЦФ, но и указывают на то, что цитопротекции в условиях цитотоксического воздействия ЦФ может явиться Неслучайно наиболее выраженное положительное влияние на систему метаболического предшественника синтеза глутатиона – ацетилцистеина. Его применение приводило к повышению уровня восстановленного глутатиона в тканях паренхиматозных органов и в эритроцитах экспериментальных животных. Повышение концентрации ВГ закономерно приводило и к восстановлению показателей тиол-дисульфидного обмена, повышению активности ферментативного звена системы глутатиона и снижению интенсивности процессов СРО. У животных с лимфосаркомой Плисса наиболее эффективное влияние на показатели системы глутатиона оказал глутоксим (Рис. 7).

Рис. 7. Влияние глутоксима на изменения показателей системы глутатиона в эритроцитах крыс с лимфосаркомой Плисса при повторном введении ЦФ в суточной дозе 20 мг/кг в течение 10 суток При его введении в тканях печени и в эритроцитах концентрация ВГ и СГ восстанавливалась до уровня здоровых животных, отмечалось снижение интенсивности протекания процессов ПОЛ, увеличение активности ферментов восстановления глутатиона. Причем механизм действия данного препарата, учитывая невозможность его проникновения внутрь клетки, связан, вероятнее всего, с сенситизацией клеточных рецепторов к различным лигандам.

Система глутатиона по многим параметрам соответствует понятиям скрининговой системы при выборе средств цитопротекции. Так, результаты проведенного исследования показали, что при повторном введении доксорубицина АЦЦ, цитофлавин, изопропиловый эфир глутатиона и мексидол по выраженности кардиопротекторных свойств, по крайней мере, не уступают и даже превосходят кардиоксан (Рис. 8). Более того, в отличие от последнего они защищали от повреждения клетки красной крови.

Рис. 8. Динамика изменений активности Г-6-ФДГ в тканях сердца и в эритроцитах крыс при фармакологической коррекции повторного введения доксорубицина в дозе 2,27 мг/кг Эти же препараты, в отличие от кардиоксана, использование которого не позволяло предотвратить снижение активности ключевого фермента пентозофосфатного шунта и глутатионредуктазы, оказали положительное влияние на интенсивность свободнорадикальных процессов и, что особенно важно, на активность ферментов редокс-циклирования глутатиона, так как нарушения именно в этом звене системы глутатиона при применении ДР, видимо, детерминируют дальнейшую цепь патологических событий.

Данные о наличии положительных корреляций между изменениями состояния системы глутатиона в эритроцитах и тканях внутренних органов лабораторных животных при применении фармакологических средств указывают и на возможность использования показателей системы глутатиона для оценки эффективности назначения ряда цитопротекторов. Применение цитопротекторных препаратов приводило не только к существенному снижению выраженности нарушений обмена глутатиона в ткани печени, но и к уменьшению выраженности гистологических признаков поражения в гепатоцитах, где определялась мелкокапельная жировая и зернистая дистрофия, пространства Диссе были несколько расширены. Исследование лимфосаркомой Плисса, не леченых и леченных циклофосфаном, не в полной мере отражало тяжесть морфологических изменений, наблюдавшихся в этих тканях, и поэтому может использоваться для оценки эффективности цитопротекторной терапии лишь в качестве дополнительного теста к показателям системы глутатиона.

Подтверждение возможности использования показателей системы глутатиона в эритроцитах в качестве лабораторных диагностических тестов для оценки эффективности фармакологической коррекции побочного действия циклофосфана было получено с помощью дискриминантного анализа, максимальной четкостью провести разделение животных на группы, не получавшие цитопротекторы (с выраженными морфологическими признаками поражения печени), получавшие цитопротекторы (с незначительными морфологическими признаками поражения печени) и здоровые (без признаков поражения печени). Кроме того, результаты дискриминантного анализа препаратов-предшественников глутатиона, что указывает на возможность использования показателей системы глутатиона в качестве скрининговой патогенетической терапии (Рис 9).

Канонические дискриминантные функции Рис. 9. Распределение значений канонических функций дискриминации в 1-й, 2-й и 3-й группах животных при введении ЦФ в дозе 40 мг/кг и препаратов фармакологической коррекции Клиническое исследование подтвердило патогенетическую значимость изменений активности Г-6-ФДГ и ГР и показало высокую диагностическую информативность определения их активности в эритроцитах пациентов при полихимиотерапии циклофосфаном и доксорубицином.

пациентов с цитотоксическими осложнениями на 7-е сутки после введения цитостатиков и дальнейшее отсутствие восстановления их активности к возможностей восстановления глутатиона. Определение содержания МДА в полихимиотерапии.

сопровождается накоплением продуктов ПОЛ в эритроцитах, выраженность которого соответствует тяжести токсического действия препаратов. Обращает на себя внимание, что в группе больных с выраженными осложнениями нарастание концентрации МДА в эритроцитах было более интенсивным и происходило в более ранние сроки, что свидетельствует о низких резервах антиоксидантной защиты.

Глутоксим, применявшийся в качестве токсикомодифицирующего препарата при полихимиотерапии РМЖ, также оказал положительное действие на систему глутатиона, достоверно повышая в эритроцитах пациентов концентрацию ВГ, активность Г-6-ФДГ, глутатионредуктазы и каталазы. Таким образом, выраженная цитопротекторная активность коррекционной терапии.

Исследование лабораторных показателей гепато- и нефротоксичности у циклофосфаном и доксорубицином показало незначительные колебания билирубина) на протяжении всего исследования у больных с отсутствием существенных осложнений со стороны паренхиматозных органов.

Выраженные признаки гепатотоксичности были отмечены в 2-х случаях после 3-го и 4-го цикла полихимиотерапии, что проявилось повышением активности АЛТ в 2,1 раза и увеличением концентрации билирубина в 1,8 раза (p0,05) по сравнению со значениями перед началом химиотерапии. Следует отметить, что на 7-й день после второго курса ПХТ и перед началом третьего курса концентрация билирубина и активность трансаминаз в сыворотке крови в этой группе больных были в пределах нормы. В то же время такие показатели системы глутатиона в эритроцитах этих пациентов, как концентрация сульфгидрильных групп белков, активность Г-6-ФДГ и каталазы были достоверно ниже, чем показатели доноров не только после второго курса ПХТ, но и перед началом третьего. Таким образом, изменения показателей системы глутатиона в эритроцитах больных происходили в более ранние сроки по сравнению с лабораторными показателями цитолиза печени в сыворотке крови.

эритроцитах больных перед третьим циклом ПХТ позволил правильно спрогнозировать по исходным данным вероятность развития выраженных осложнений с точностью 97,1%, а по результатам кросс-проверки – 91,4%.

Таким образом, полученные данные экспериментального и клинического исследований существенно расширяют наши представления о механизмах цитотоксичности и естественной цитопротекции, подтверждают участие системы глутатиона в патогенезе побочного действия ЦФ и ДР и перспективность практического использования показателей обмена глутатиона для оценки и прогноза тяжести цитотоксических поражений паренхиматозных органов, определяют направления поиска новых средств цитопротекции и оценки их эффективности в условиях эксперимента и клиники.

ВЫВОДЫ

1. Изучение системы глутатиона в условиях эксперимента позволило установить, что применение доксорубицина приводит к наиболее выраженным ее нарушениям в тканях сердца, а циклофосфана – в тканях печени. Данные изменения указывают на наличие взаимосвязи между нарушениями обмена глутатиона и реализацией цитотоксических эффектов исследуемых противоопухолевых препаратов.

2. Нарастание выраженных морфологических признаков токсического повреждения ткани печени при повторном введении ЦФ и миокарда – при повторном введении ДР совпадает с динамикой изменений показателей системы глутатиона в результате кумулятивных эффектов цитостатиков.

3. Изменения активности Г-6-ФДГ, ГР, содержания ДК, МДА при повторном введении ЦФ происходили в более ранние сроки (3 – 5-е сутки) и предшествовали появлению морфологических признаков повреждения печени (5 – 7-е сутки), а также биохимических показателей цитолиза печени – АЛТ, АСТ, билирубин (7 –10-е сутки).

нормализацией обмена глутатиона (повышение пула ВГ за счет введения экзогенного глутатиона или предшественников его синтеза (АЦЦ, изопропиловый эфир глутатиона); уменьшением процессов СРО за счет антиоксидантов (мексидол, ремаксол) и комплексообразователей (кардиоксан);

стимуляцией энергетических процессов антигипоксантами (цитофлавин, трисан); усилением регуляторных процессов (глутоксим)), могут быть использованы в качестве средств фармакологической защиты тканей паренхиматозных органов от побочных эффектов кумулятивного действия ЦФ и ДР.

5. В условиях курсового применения ЦФ И ДР динамика изменений показателей системы глутатиона в эритроцитах (концентрация ВГ, СГ, МДА и активность Г-6-ФДГ, ГР, ГП) отражает состояние его обмена в повреждаемых тканях внутренних органов (печень, сердце, почки) и эффективность проводимой цитопротекторной терапии.

6. Определение концентрации ВГ, СГ, МДА и активности Г-6-ФДГ, ГР, ГП в эритроцитах пациентов, получающих полихимиотерапию, является патогенетически обоснованным для их применения в качестве лабораторных тестов оценки тяжести побочного действия ДР и ЦФ.

7. Для оценки риска развития и тяжести цитотоксического поражения тканей внутренних органов, эффективности применяемых препаратов динамического исследования показателей системы глутатиона в эритроцитах пациентов перед каждым новым циклом полихимиотерапии и на 7-е сутки после введения ДР и ЦФ.

больных раком молочной железы, пролеченных по схеме САF + глутоксим, улучшение их состояния по шкале Карновского с нормализацией показателей скрининговой оценки цитопротекторных свойств как общеизвестных, так и новых перспективных препаратов фармакологической коррекции.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В схему комплексного клинико-инструментального обследования больных РМЖ, проходящих курс полихимиотерапии, для оценки степени тяжести цитотоксического поражения паренхиматозных органов и сердечной концентрации ВГ, МДА.

предотвращения побочных цитотоксических эффектов действия цитостатиков целесообразно включение фармакологических препаратов, обладающих антиоксидантными и антигипоксантными свойствами (например, мексидол), а также препаратов-предшественников синтеза глутатиона – ацетилцистеина и препаратов окисленного глутатиона – глутоксима.

3. В протокол скрининговой оценки цитопротекторных свойств как общеизвестных, так и новых перспективных препаратов фармакологической коррекции рекомендуется включение динамического определения показателей обмена глутатиона в эритроцитах (активность Г-6-ФДГ, ГР, ГП, концентрация ВГ, МДА).

4. Полученные данные о патогенетическом и диагностическом значении противоопухолевых препаратов рекомендуется использовать в процессе дополнительного образования врачей-специалистов в области клинической лабораторной диагностики, токсикологии, онкологии и др.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Глушков С.И. Состояние системы глутатиона в тканях различных органов при остром отравлении циклофосфаном / С.И. Глушков, Кашуро В.А., Т.М.

Новикова // Медицинские аспекты радиационной и химической безопасности:

Материалы Российской научной конференции, г. Санкт-Петербург, 11– октября 2001 г. – СПб: ВМА, 2001. – С. 296–298.

2. Кашуро В.А. Динамика активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в эритроцитах и тканях печени лабораторных животных при отравлениях циклофосфаном / В.А. Кашуро, А.И. Карпищенко, С.А. Куценко и др. // Тезисы докладов Всероссийской научной конференции, посвященной 110летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военномедицинской академии и 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Г.Е. Владимирова, 31 января – 1 февраля 2002 г. – СПб. – 2002. – С. 35.

3. Кашуро В.А. Динамика изменений концентраций сульфгидрильных групп тканевых белков в эритроцитах и тканях печени лабораторных животных при отравлениях циклофосфаном / В.А. Кашуро, С.А. Куценко, С.И. Глушков и др.

// Тезисы докладов Всероссийской научной конференции, посвященной 110летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военномедицинской академии и 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Г.Е. Владимирова, 31 января – 1 февраля 2002 г. – СПб. – 2002. – С. 36.

4. Кашуро В.А. Динамика концентрации восстановленного глутатиона в эритроцитах и тканях печени лабораторных животных при отравлениях циклофосфаном / В.А. Кашуро, А.И. Карпищенко, С.А. Куценко и др. // Тезисы докладов Всероссийской научной конференции, посвященной 110летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военномедицинской академии и 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Г.Е. Владимирова, 31 января – 1 февраля 2002 г. – СПб. – 2002. – С. 34–35.

5. Смирнов В.В. Процессы перекисного окисления липидов в тканях щитовидной железы при узловом эутиреоидном зобе и раке щитовидной железы /В.В. Смирнов, А.И. Карпищенко, Н.Е. Кушлинский и др. // Тезисы докладов Всероссийской научной конференции, посвященной 110-летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военномедицинской академии и 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Г.Е. Владимирова, 31 января – 1 февраля 2002 г. – СПб. – 2002. – С. 81.

6. Смирнов В.В. Глутатион-зависимая антиоксидантная система в тканях щитовидной железы при узловом эутиреоидном зобе и раке щитовидной железы СПб / В.В. Смирнов, А.И. Карпищенко, Н.Е. Кушлинский и др. // Тезисы докладов Всероссийской научной конференции, посвященной 110летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военномедицинской академии и 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Г.Е. Владимирова, 31 января – 1 февраля 2002 г. – СПб. – 2002. – С. 81–82.

7. Аксенов В.В. Состояние системы глутатиона в тканях сердца при острых отравлениях доксорубицином / В.В. Аксенов, А.А. Новик, С.И. Глушков и др.

// Тезисы научных докладов III съезда биохимического общества, 26 июня – июля 2002 г. – СПб. – 2002. – С. 132.

8. Кашуро В.А. Состояние системы глутатиона в тканях лабораторных животных при острых отравлениях циклофосфаном / В.А Кашуро, А.И.

Карпищенко, С.А.Куценко и др. // Тезисы научных докладов III съезда биохимического общества, 26 июня – 1 июля 2002 г. – СПб. – 2002. – С. 171– 172.

антиоксидантной системы в тканях щитовидной железы при узловом эутиреоидном зобе и раке щитовидной железы / В.В. Смирнов, В.В. А.И.

Карпищенко, Н.Е. Кушлинский и др. // Клиническая лабораторная диагностика. – 2002. – № 10. – С. 8–9.

10. Глушков С.И. Нарушения состояния системы глутатиона как основа реализации цитотоксических эффектов действия ксенобиотиков / С.И. Глушков, С.А. Куценко, А.И. Карпищенко и др. // Медико-гигиенические аспекты обеспечения работ с особо опасными химическими веществами /Труды научнопрактической конференции, посвященной 40-летию НИИГПЭЧ. – СПб. – 2002.

– С. 228–229.

11. Кашуро В.А. Экспериментальная оценка возможности использования показателей системы глутатиона в лабораторной диагностике отравлений ипритами / В.А. Кашуро, С.И. Глушков, В.В. Аксенов и др. // Медико-гигиенические аспекты обеспечения работ с особо опасными химическими веществами /Труды научно-практической конференции, посвященной 40-летию НИИГПЭЧ. – СПб. – 2002. – С. 229–230.

12. Кашуро В.А. Изучение влияния препарата «Трисан» на систему глутатиона при остром отравлении циклофосфаном / В.А. Кашуро, В.В. Пастушенков, А.И. Карпищенко и др. // Материалы Всеармейской Научно-практической конференции «Терапевтическая помощь в экстремальных ситуациях». – СПб.С. 227–228.

13. Глушков С.И. Влияние сукцинатсодержащего препарата Ремаксол на состояние цитопротекторной системы глутатиона в тканях печени при острых отравлениях циклофосфаном / С.И. Глушков, В.А. Кашуро, С.А.Куценко и др.

// Тезисы докладов X Российского национального конгресса «Человек и лекарство», 7–11 апреля 2003 г. – М. – 2003. – С. 613.

14. Глушков С.И. Влияние сукцинатсодержащего препарата Ремаксол на состояние цитопротекторной системы глутатиона в тканях почек при острых отравлениях циклофосфаном / С.И. Глушков, В.А. Кашуро, С.А. Куценко и др.

// Тезисы докладов X Российского национального конгресса «Человек и лекарство», 7–11 апреля 2003 г. – М. – 2003. – С. 613–614.

15. Глушков С.И.. Состояние системы глутатиона в тканях печени крыс при острых отравлениях циклофосфаном / С.И. Глушков, С.А. Куценко, В.А Кашуро и др. // Токсикологический вестник. – 2003. – №.4. – С. 25–30.

16. Глушков С.И. Изучение системы глутатиона при острых отравлениях циклофосфаном и диалкил-производным фосфорилтиохолина – перспективный метод оценки состояния здоровья персонала объектов уничтожения химического оружия / С.И. Глушков, С.А. Куценко, В.А. Кашуро и др. // «Медицинские и биологические проблемы, связанные с уничтожением химического оружия». Тезисы докладов международного симпозиума.


Волгоград 26–28 августа 2003 года. – Волгоград. – 2003. – С. 205–206.

17. Глушков С.И. Фармакологическая коррекция системы глутатиона – перспективное направление профилактики и терапии острых и повторных отравлений нейро- и цитотоксикантами / С.И. Глушков, В.А. Кашуро, С.А.

Куценко и др. // «Медицинские и биологические проблемы, связанные с уничтожением химического оружия». Тезисы докладов международного симпозиума. Волгоград 26–28 августа 2003 года. – Волгоград. – 2003. – С. 215.

18. Глушков С.И. Система глутатиона как перспективное направление изучения цитотоксических эффектов действия ксенобиотиков / С.И. Глушков, С.А.

Куценко, Т.М. Новикова и др. // Тезисы докладов 2-го съезда токсикологов России. – М: Российский регистр потенциально опасных химических и биологических веществ Минздрава России, 2003. – С. 77–78.

19. Glushkov S.I. Research into glutathione system at acute intoxications by cyclophosphane and phosphorylthiocholine derivatives. A promising method for health state evaluathion of personnel of chemical weapon destruction facilities / S.A.

Kutsenko, S.I. Glushkov, V.A. Kashuro et al. // Medical and Biological Aspects of Chemical Weapons Stockpile Demilitarization. Internatonal Symposium Proceedings. Volgograd, August 26–28, 2003. – Volgograd. – P. 58–59.

20. Glushkov S.I. Pharmacological correction of glutathione system as a promising aim of prophylaxis and therapy of acute and repeated poisonings by neuro- and cytotoxicants / S.I. Glushkov, V.A. Kashuro, S.A. Kutsenko et al. // Medical and Biological Aspects of Chemical Weapons Stockpile Demilitarization. Internatonal Symposium Proceedings. Volgograd, August 26–28, 2003. – Volgograd. – P. 67.

21. Кашуро В.А. Показатели перекисного окисления липидов при острых отравлениях циклофосфаном / В.А. Кашуро, С.И. Глушков, В.В. Смирнов // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. – СПб., 2004. – С. 100–101.

22. Глушков С.И.. Исследование эффективности антиоксидантных препаратов в качестве средств медицинской защиты при отравлениях алкилирующими агентами / С.И. Глушков, В.А Кашуро, В.В.Смирнов // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. – СПб., 2004. – С.

351–352.

23. Глушков С.И.. Синтетические производные глутатиона - новый подход к поиску антидотов резорбтивного действия ипритов/ С.И. Глушков, В.А Кашуро, Т.М. Новикова и др. // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. – СПб., 2004. – С. 350–351.

24. Глушков С.И. Влияние препарата «Мексидол» на содержание в тканях сердца лабораторных животных малонового диальдегида и глутатиона при повторной интоксикации доксорубицином в дозе 0,3 LD50 / С.И. Глушков, С.А.

Куценко, В.В. Аксенов и др. // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. – СПб., 2004. – С. 358–359.

25.

циклофосфана и состояния системы глутатиона / С.И. Глушков, В.А. Кашуро, С.А. Куценко и др. // Вестник СПГМА им. И.И. Мечникова. – 2004. – №3. – С.

62– 67.

26. Glushkov S.I. The alteration in the glutathione system by the influence of cyclophosphamide and the drugs of pharmacological correction / A.I. Karpischenko, S.I. Glushkov, V.A. Kashuro et al. // XXXVI World Congress on Military Medicine.

– St. Petersburg, 2005. – P. 224.

27. Кашуро В.А. Cостояние системы глутатиона и перекисного окисления липидов в тканях печени и почек при острых отравлениях циклофосфаном / В.А. Кашуро, Карпищенко А.И., Глушков С.И. и др. // Нефрология.– 2006.– №2.– С. 81–85.

28. Кашуро В.А. Cостояние системы глутатиона в тканях паренхиматозных органов лабораторных животных при повторном введении циклофосфана / В.А. Кашуро, С.И. Глушков, А.И. Карпищенко, Т.М. Новикова // Нефрология.– 2006.– №4.– С. 82–86.

29. Кашуро В.А. Гепаторпротекторная активность мексидола при острых интоксикациях циклофосфаном / В.А. Кашуро, С.И. Глушков, А.И. Карпищенко и др. // Вестник СПГМА им. И.И. Мечникова. – 2007. – №1 (8). – С. 136– 139.

30. Кашуро В.А. Активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в тканях экспериментальных животных при повторном введении циклофосфана / В.А.

Кашуро, Л.В. Минаева, С.И. Глушков // Актуальные вопросы повышения работоспособности и восстановления здоровья военнослужащих и гражданского населения в условиях чрезвычайных ситуаций: Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 40-летию НИО обитаемости и профессионального отбора ВМедА. – СПб, 2007. – С. 205– 206.

31. Кашуро В.А. Активность глутатионпероксидазы в тканях экспериментальных животных при повторном введении циклофосфана / В.А. Кашуро, работоспособности и восстановления здоровья военнослужащих и гражданского населения в условиях чрезвычайных ситуаций: Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 40-летию НИО обитаемости и профессионального отбора ВМедА. – СПб, 2007. – С. 205– 206.

32. Кашуро В.А. Активность глутатионредуктазы в тканях экспериментальных животных при повторных введениях циклофосфана / В.А. Кашуро, Л.В.

Минаева, С.И. Глушков и др. // Актуальные проблемы химической безопасности в Российской Федерации. – СПб, 2007. – С. 246.

33. Кашуро В.А. Изменения концентрации малонового диальдегида в тканях экспериментальных животных при повторных введениях циклофосфана / В.А.

Кашуро, Л.В. Минаева, С.И. Глушков и др. // Актуальные проблемы химической безопасности в Российской Федерации. – СПб, 2007. – С. 247.

34. Кашуро В.А. Изучение влияния препарата трисан на систему глутатиона при повторных введениях циклофосфана / В.А. Кашуро, В.Л. Пастушенков, Л.В. Минаева и др. // Проблемы диагностики и коррекции эндоэкологического статуса в современных условиях: 3-я международная научная конференция Донозология – 2007. – СПб,2007. – С. 97.

35. Кашуро В.А. Изменение концентрации восстановленного глутатиона в эритроцитах при химиотерапии / В.А.Кашуро, К.А. Федоров, С.И. Глушков, и др. // Сборник трудов совместного заседания секции №4 «Токсикология, высокотоксичными веществами» Проблемной комиссии ФМБА России, Санкт-Петербургского отделения Всероссийского общества токсикологов и Ученого Совета ФГУП «НИИГПЭЧ» ФМБА России.16 ноября 2007 г. – СПб. – 2007. – С.252– 253.

36. Шилов Ю.В. Токсические эффекты циклофосфана и подходы к их фармакологической коррекции / Ю.В. Шилов, В.А. Кашуро, Л.В. Минаева и др. // Вестник Российской Военно-медицинской академии. – 2008. – №3 (23). – С.

68– 72.

37. Кашуро В.А Токсикомодифицирующее действие глутоксима при применении циклофосфана / В.А. Кашуро, В.Г. Антонов, Л.В. Минаева, С.И.

Глушков // Актуальные проблемы лабораторной диагностики: Всероссийская научно-практическая конференция, посвященная 115-летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военно-медицинской академии, Санкт-Петербург, 27-28 марта 2008 г. – СПб. – 2008. – С. 29.

38. Лютов В.В. Хемопротективный эффект N-ацетилцистеина против экспериментальных животных / В.В. Лютов, В.А. Кашуро, В.В. Аксенов // Вопросы нефрологии в практике терапевта и эндокринолога. – СПб., 2008. – С.

52.

39. Грашин Р.А. Активность про- и антиоксидантных процессов в культурах кератиноцитов больных псориазом / Р.А. Грашин, В.В. Барбинов, В.Г.

Антонов и др. // Вестник Российской Военно-медицинской академии. – 2008. – №4 (24). – С. 115– 125.

40. Кашуро В.А. Изменение концентрации малонового диальдегида в тканях экспериментальных животных с перевитой лимфосаркомой Плиса в условиях повторного введения циклофосфана / В.А. Кашуро // Вестник Российской Военно-медицинской академии. – 2009. – №1 (25). – С. 481– 482.



 


Похожие работы:

«ДЕМКИНА ВЕРА АЛЕКСАНДРОВНА ОСТРЫЕ ВИРУСНЫЕ ЭНЦЕФАЛИТЫ У ДЕТЕЙ: КЛИНИКОИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ 14.00.10 – инфекционные болезни 14.00.36 – аллергология и иммунология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва 2008 Работа выполнена в ФГУН Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии Роспотребнадзора Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор ГОРЕЛОВ Александр Васильевич доктор медицинских наук, профессор...»

«Стаценко Владислав Игоревич СОСТОЯНИЕ ФЕРМЕНТНЫХ СИСТЕМ БИОТРАНСФОРМАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ (СYР3А4 И СYР2С9) У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМИ ДИФФУЗНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ПЕЧЕНИ 14.03.06 – фармакология, клиническая фармакология АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Волгоград – 2013 г. 1 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Волгоградский государственный медицинский...»

«ВАСИЛЕВСКАЯ ИРИНА ВАЛЕНТИНОВНА Отдаленные результаты операций протезирования митрального клапана в раннем детском возрасте (14.01.05. - кардиология) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва - 2012 г. 2 Диссертационная работа выполнена в Научном Центре сердечнососудистой хирургии им. А. Н. Бакулева РАМН. Научный руководитель : Доктор медицинских наук, профессор Шаталов Константин Валентинович Официальные оппоненты : Доктор...»

«Лыткина Ирина Николаевна СОЗДАНИЕ УНИФИЦИРОВАННОЙ СИСТЕМЫ УПРАВЛЕНИЯ ЭПИДЕМИЧЕСКИМ ПРОЦЕССОМ КОРИ, КРАСНУХИ И ЭПИДЕМИЧЕСКОГО ПАРОТИТА 14.02.02 - эпидемиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва - 2011 2 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Первый Московский медицинский университет им. И.М.Сеченова Росздрава Научный консультант : доктор медицинских наук, профессор...»

«ХАДЖИХАРАЛАМБУС КИРИЛЛОС КОМПЛЕКСНЫЙ ПОДХОД К ЛЕЧЕНИЮ ПЕРЕЛОМОВ ВЕРТЛУЖНОЙ ВПАДИНЫ В ОСТРОМ ПЕРИОДЕ 14.01.15 – травматология и ортопедия АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук МОСКВА 2013 Работа выполнена на кафедре травматологии и ортопедии медицинского факультета Федерального Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ, г. Москва. Научный...»

«Емельянова Александра Николаевна КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ВАРИАНТОВ АНАТОМИЧЕСКОГО СТРОЕНИЯ ВЕРХНЕЧЕЛЮСТНОЙ И ЛОБНОЙ ПАЗУХ. 14.01.03 – болезни уха, горла и носа АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Курск – 2012 2 ГБОУ ВПО государственный медицинский университет Курский министерства здравоохранения РФ. Научный руководитель : доктор медицинских наук, профессор Пискунов Игорь Серафимович Рязанцев Сергей Валентинович Официальные оппоненты :...»

«Чернышёв Антон Александрович ИДИОПАТИЧЕСКИЕ ЖЕЛУДОЧКОВЫЕ АРИТМИИ У ДЕТЕЙ И ПОДРОСТКОВ: КЛИНИКО-ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА И РЕЗУЛЬТАТЫ ЛЕЧЕНИЯ 14.01.05 – кардиология 14.01.08 – педиатрия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Томск – 2011 Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте кардиологии Сибирского отделения РАМН Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор...»

«Калинкин Дмитрий Евгеньевич ПРОФИЛАКТИКА И ЛЕЧЕНИЕ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОЙ ОСТРОЙ ЗАДЕРЖКИ МОЧЕИСПУСКАНИЯ 14.00.27 - Хирургия 14.00.40. - Урология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук ТОМСК-2003 Работа выполнена в Сибирском государственном медицинском университете Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор Тихонов Виктор Иванович Доктор медицинских наук, профессор Гудков Александр Владимирович Официальные оппоненты : доктор...»

«НУРМУХАМЕТОВА СВЕТЛАНА РАФАИЛОВНА КЛИНИКО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЭПИЛЕПСИИ В Г. СТЕРЛИТАМАК 14.01.11 – нервные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва-2013 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Башкирский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации. Научный руководитель : доктор медицинских наук,...»

«ХАЛИМАН Евгений Александрович ОптИМИзАцИя стЕржНЕвыХ АппАрАтОв вНЕшНЕй фИксАцИИ дЛя ЛЕчЕНИя дИАфИзАрНыХ пЕрЕЛОМОв дЛИННыХ кОстЕй НИжНИХ кОНЕчНОстЕй (экспериментально-клиническое исследование) 14.01.15 – травматология и ортопедия АвтОрЕфЕрАт диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Иркутск – 2012 Работа выполнена в ГБОУ ВПО Иркутский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации....»

«ГУБСКИЙ Леонид Васильевич КЛИНИКО-ТОМОГРАФИЧЕСКИЕ СОПОСТАВЛЕНИЯ И ОЦЕНКА ВНУТРИЧЕРЕПНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ ПРИ ИНСУЛЬТЕ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ НИЗКОПОЛЬНОЙ МАГНИТНОРЕЗОНАНСНОЙ ТОМОГРАФИИ 14.00.13 – нервные болезни 14.00.19- лучевая диагностика, лучевая терапия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва, 2009 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Российский государственный медицинский...»

«Умаров Алимхан Алгириевич ПРИМЕНЕНИЕ СВЕТОВЫХ ФИЗИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ПРОТЕЗНОГО ЛОЖА И ПАРОДОНТА В КЛИНИКЕ ОРТОПЕДИЧЕСКОЙ СТОМАТОЛОГИИ Специальность: 14.01.14 – Стоматология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Воронеж – 2011 1 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Воронежская государственная медицинская...»

«САЛАСЮК Алла Сергеевна ОСОБЕННОСТИ ТЕЧЕНИЯ И МЕДИКАМЕНТОЗНОЙ ТЕРАПИИ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО СИНДРОМА У МУЖЧИН 14.01.04 Внутренние болезни Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Волгоград 2013 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Волгоградский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации доктор медицинских наук, профессор...»

«БЕРГЕН Татьяна Андреевна ИССЛЕДОВАНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ АНАТОМИИ КОЛЕННОГО СУСТАВА ПОСЛЕ ОПЕРАТИВНОГО ВМЕШАТЕЛЬСТВА ПО ДАННЫМ МАГНИТНОРЕЗОНАНСНОЙ ТОМОГРАФИИ 14.00.19 – лучевая диагностика, лучевая терапия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Томск – 2009 1 Работа выполнена в НУЗ ДКБ на станции Новосибирск-главный ОАО РЖД, в Институте Международный томографический центр СО РАН (г. Новосибирск). Научный руководитель : доктор медицинских наук...»

«Малинникова Елена Юрьевна КЛИНИКО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕПАТИТА Е в РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 14.02.02 – эпидемиология 14.01.09 – инфекционные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени доктора медицинских наук Москва – 2014 2 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов имени М.П. Чумакова Российской Академии медицинских наук Научные консультанты: член-корреспондент РАМН, доктор...»

«Гейн Сергей Владимирович РОЛЬ -ЭНДОРФИНА В НЕЙРОЭНДОКРИННОЙ РЕГУЛЯЦИИ ФУНКЦИЙ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ 14.00.36 Аллергология и иммунология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Пермь - 2007 Работа выполнена в аналитической лаборатории Института экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН, Пермь Научный консультант : академик РАН и РАМН Черешнев Валерий Александрович Официальные оппоненты : доктор медицинских наук, профессор Юшков Владимир...»

«Землянская Инга Владимировна Сравнительная оценка результатов закрытия дефектов перегородок сердца и открытого артериального протока с помощью эндоваскулярного и открытого хирургического вмешательства (14.01. 05 - кардиология) (14.01.13 - лучевая диагностика, лучевая терапия) АВТОРЕФЕРАТ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ ДОКТОРА МЕДИЦИНСКИХ НАУК Москва – 2011 2 Диссертационная работа выполнена в Научном Центре сердечнососудистой хирургии им. А. Н. Бакулева РАМН НАУЧНЫЕ...»

«Онищукова Елена Андреевна СИСТЕМНАЯ ЭНЗИМОТЕРАПИЯ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА С У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ 14.01.09 – инфекционные болезни Автореферат Диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2011 Работа выполнена в ГБОУ ВПО Московский государственный медикостоматологический университет Минздравсоцразвития РФ Научный руководитель : Доктор медицинских наук, профессор Сундуков Александр Вадимович Официальные оппоненты : Доктор медицинских наук, профессор...»

«БУЛАНОВА Ирина Анатольевна ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ ЛАКТОСОДЕРЖАЩИХ ПРОБИОТИКОВ ПРИ ОСТРЫХ ВОДЯНИСТЫХ ДИАРЕЯХ У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА. 14.00.10 – инфекционные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Архангельск – 2008 1 Работа выполнена в ГОУ ВПО Северный государственный медицинский университет (г. Архангельск) Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации на кафедре детских инфекционных...»

«БОРОВКОВ ВАЛЕНТИН НИКОЛАЕВИЧ МЕДИКО-СОЦИАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ПРЕДОТВРАТИМОСТИ ПОТЕРЬ ЗДОРОВЬЯ ВСЛЕДСТВИЕ ТРАНСПОРТНОГО ТРАВМАТИЗМА Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук по специальности 14.02.03 – Общественное здоровье и здравоохранение Москва – Работа выполнена в ФГУ...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.