WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

АПСАЛЯМОВА

Саида Олеговна

ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ ИНФАРКТА МИОКАРДА

С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ТЭС-ТЕРАПИИ

(экспериментальное исследование)

14.03.03 – патологическая физиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Краснодар – 2013

Работа выполнена в государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Кубанский государственный Медицинский Университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО КубГМУ Минздрава России).

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Каде Азамат Халидович;

Научный консультант: доктор биологических наук, профессор Колесникова Наталья Владиславовна.

Официальные оппоненты:

Порядин Геннадий Васильевич, доктор медицинских наук, профессор, членкорреспондент РАМН, государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова», кафедра патофизиологии и клинической патофизиологии, заведующий кафедрой;

Петросян Эдуард Арутюнович, доктор медицинских наук, профессор, государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, кафедра оперативной хирургии и топографической анатомии, профессор.

Ведущая организация:

государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Защита состоится 18 декабря 2013 года в 13.00 часов на заседании диссертационного совета Д208.038.02 на базе ГБОУ ВПО КубГМУ Минздрава России по адресу: 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4.



С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО КубГМУ Минздрава России.

Автореферат разослан «_» ноября 2013 г.

Учный секретарь диссертационного совета Д208.038. доктор медицинских наук, доцент Лапина Наталья Викторовна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность. В РФ показатели заболеваемости и смертности от сердечнососудистых заболеваний имеют угрожающий масштаб - 56,4% всех летальных исходов. В трудоспособном возрасте (от 25 до 64 лет) 38 % смертей обусловлены заболеваниями системы кровообращения, при этом вклад в общую смертность мужчин (36 %) и женщин (41 %) практически одинаков. Это самые высокие значения в мире (Коган Е.В., 2008; Оганов Р.Г., 2009). Одно из самых распространенных заболеваний сердечно-сосудистой системы у взрослых является ишемическая болезнь сердца (ИБС) (Оганов Р.Г., 2009).

Распространенность ИБС во второй половине ХХ века пробрела размеры эпидемии, хотя отдельные ее проявления были известны давно (Гребенщикова И.А. и соавт., 2011). Широкое распространение этого заболевания у людей наиболее работоспособного возраста, превратило ИБС в важную медицинскую и социальную проблему.

Самое частое осложнение ИБС - инфаркт миокарда (ИМ). Смертность от ИМ, по-прежнему остается высокой и составляет в России 39% от общего показателя смертности (Беленков Ю.И., Оганов Р.Г., 2008). В течение первого года после ИМ летальный исход регистрируется у 6,5 - 11% пациентов, причем около 50% из них погибают внезапно (Ревишвили А.Ш., Неменущий Н.М., 2007).

Более 300 случаев ИМ на каждые 100 тысяч жителей ежегодно регистрируются в крупных городах России. Совсем недавно он считался болезнью пожилых людей, но в последние годы наметилась тревожная тенденция - ИМ быстро «молодеет». Только в 2011 г. в России было зафиксировано 180000 случаев острых инфарктов миокарда. Острый инфаркт миокарда (ОИМ) является одной из основных причин смертности - 39% от общего числа. Причем в первые 15 минут после начала заболевания погибают 30 40% больных. Примерно столько же - в последующие 2 часа (Гафарова А.В., Гафаров В.В., 2009).

Развитие ОИМ влечт за собой возникновение системной и локальной воспалительной реакции, активации белков острой фазы (БОФ), в частности компонентов системы комплемента, С-реактивного белка (СРБ), орозомукоида, 1-антитрипсина, калликреина, трансферрина, кининов (Зорин Н.А. и соавт., 2009; Барабаш О.Л. и соавт., 2010). Выработка СРБ регулируется цитокинами, в том числе интерлейкином-6 (ИЛ-6), интерлейкином-1 (ИЛ-1) и фактором некроза опухоли- (ФНО-) (Biasucci L.M. et al., 2000; Скворцова В.И. и соавт, 2007; Фуштей И.М. и соавт., 2007).

Таким образом, большой интерес представляет изучение специфических маркеров воспаления - цитокинов, которые могут быть прогностически более значимыми в определении процессов, связанных с дестабилизацией течения атеросклероза сосудов. Некоторые из них, например ИЛ-1, ИЛ-6, ФНОобладают провоспалительными свойствами, действие других, в частности интерлейкин-10 (ИЛ-10), связано с противовоспалительными реакциями (Zarma J. et al., 2002; Богова О.Т., Чукаева И.И., 2003; Sun M. et al., 2003).





Чукаева И.И. и соавт. (2007), Палеев Ф.Н. и соавт. (2009), Тращенко А.С., (2010), показали существенную роль ИЛ-1, ИЛ-6, интерлейкина-8 (ИЛ-8), ИЛ-10, ФНО- в прогрессировании атеросклероза, в процессах дестабилизации атеросклеротической бляшки, в оценке риска внезапной смерти, развития острого коронарного синдрома у больных ИБС, особенно при нестабильных формах заболевания. Представляется перспективным использование комплексной оценки концентрации ряда цитокинов при прогнозировании течения острых коронарных событий.

Перспективным является использование противовоспалительных цитокинов в качестве средств патогенетической терапии ИБС и ее осложнений (Ланкин В.З. и соавт., 2000; Rakhit R.D. et al., 2005; Залесский В.Н., 2008).

Однако, терапевтическое использование таких соединений на практике для лечения пациентов пока малореально. Поэтому современная наука ищет альтернативные, немедикаментозные способы коррекции дисбаланса про- и противовоспалительных цитокинов. Одним из таких методов может стать метод ТЭС-терапии.

Немедикаментозный метод ТЭС-терапии, предложенный профессором В.П. Лебедевым и соавт. (1983), направлен на избирательную активацию защитных (антиноцицептивных) механизмов мозга, работа которых осуществляется с участием -эндорфинов и серотонина (5-ОТ), обладает многообразием эффектов, общей направленностью которых является нормализация гомеостаза. Все эффекты по механизму делят на 2 типа:

центральные (анальгезия, стабилизация гемодинамики и т. д. (Лебедев В.П. и соавт., 1986; Кацнельсон Я.С., Леоско А.Я., 1987; Гриненко А.Я. и соавт., 1988;

Крупицкий Е.М. и соавт., 1998)) и периферические (модуляция динамики острофазного ответа при воспалении, ускорение заживления кожных ран, язвенных дефектов слизистой оболочки желудка, очага некроза при инфаркте миокарда, пиелонефрите (Лебедев В.П., 1986; Шапоренко Р.В., 2008;

Губарева Е.А., 2009; Борисенко В.Г., 2009; Тиликин В.С., 2012)).

Изучено влияние ТЭС-терапии на репаративные процессы у больных ИМ и доказано, что происходит ускорение формирования постинфарктного рубца и развитие компенсаторной гипертрофии внеинфарктных отделов миокарда, уменьшается число случаев появления сердечной недостаточности и число рецидивов ангинозных болей, улучшается общее состояние гемодинамики (Голиков А.П., Рябинин В.А., Лебедев В.П. и соавт., 1989; Зюзина Н.А., 2006;

Губарева Е.А., 2009; Борисенко В.Г., 2009). Однако, до сих пор, открытым остается вопрос о возможности использования ТЭС-терапии с целью коррекции дисбаланса цитокинов в острейший период ИМ, который является важным патофизиологическим фактором развития и течения острой патологии сердца.

Цель исследования. Использование ТЭС-терапии для улучшения состояния миокарда путем восстановления цитокинового статуса и уровня эндорфинов при остром инфаркте миокарда.

Задачи исследования:

1. Изучить показатели цитокинового статуса (уровень про- и противоспалительных цитокинов) в сыворотке крови экспериментальных животных с моделированным инфарктом миокарда и взаимосвязь их уровня с морфологическим состоянием миокарда.

2. Изучить динамику показателей цитокинового профиля (уровень про- и противоспалительных цитокинов) и морфологического состояния миокарда при остром инфаркте миокарда под влиянием ТЭС-терапии.

3. Изучить динамику содержания опиоидных пептидов (-эндорфина) в сыворотке крови животных с моделированным инфарктом миокарда.

4. Изучить влияние ТЭС-терапии на динамику уровня опиоидных пептидов (-эндорфина) в сыворотке крови животных с инфарктом миокарда в эксперименте.

Научная новизна Впервые выявлена динамика показателей цитокинового статуса в сыворотке крови при применении ТЭС-терапии у животных с инфарктом миокарда.

Впервые выявлена взаимосвязь между динамикой уровня цитокинов в сыворотке крови и выраженностью повреждения миокарда у животных с экспериментальным инфарктом и при применении ТЭС-терапии.

Впервые показаны закономерности динамики уровня -эндорфинов в сыворотке крови у животных с инфарктом миокарда при применении ТЭСтерапии.

Практическая значимость Экспериментальные исследования показали возможности ТЭС-терапии в коррекции цитокинового дисбаланса и эндорфинного профиля при ОИМ.

Использование ТЭС-терапии для коррекции нарушений показателей цитокинового статуса, активации стресс-лимитирующей системы уменьшает повреждение миокарда в острейший период ОИМ. Это позволит улучшить реабилитацию и сократить сроки пребывания больных в стационаре.

Кроме того, метод ТЭС-терапии доступен, прост в выполнении и не требует больших экономических затрат.

Основные положения, выносимые на защиту 1. Динамика показателей цитокинового статуса при остром инфаркте миокарда имеет однонаправленный характер в сторону превалирования провоспалительного звена и резкого ограничения активности противовоспалительного, что ассоциируется со значительными повреждениями структуры миокарда.

2. При развитии острого инфаркта миокарда опиоидергическая система реагирует прогрессирующим снижением уровня -эндорфина.

3. ТЭС-терапия в острейший период инфаркта миокарда позволяет нормализовать уровень провоспалительных и одновременно повысить содержание противовоспалительных цитокинов. Это ассоциируется со значительным уменьшением структурных повреждений миокарда.

4. ТЭС-терапию можно рекомендовать в качестве немедикаментозного метода для снижения у больных с острым инфарктом миокарда структурнофункциональных нарушений в сердечной мышце при ишемическом повреждении.

Апробация работы.

Основные положения диссертационной работы представлялись и обсуждались на международной конференции «Наука и образование в современной России» (Москва, 2010); на конференции «Современные проблемы клинической медицины» (Ямайка, 2013); на конференции «Фундаментальные исследования» (Доминиканская республика, 2013); на конференции «Фундаментальные исследования» (Иордания, 2013) Внедрение результатов исследования. Результаты диссертационной работы внедрены на кафедре общей и клинической патофизиологии и ЦНИЛ Отдел клинической экспериментальной иммунологии и молекулярной биологии ГБОУ ВПО КубГМУ Минздрава России.

Личный вклад автора в исследование. Автором сформулированы цель и зaдaчи диccepтaции, cocтaвлeн плaн, oбecпeчeны opгaнизaция и peaлизaция этaпoв работы, пpoвeдeны экcпepимeнтaльныe иccлeдoвaния, выпoлнeнa cтaтиcтичecкaя oбpaбoткa peзультaтoв, иx oбcуждeниe, oпpeдeлeны ocнoвныe пoлoжeния иccлeдoвaния, coдepжaниe вывoдoв и пpaктичecкиx peкoмeндaций.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, в том числе 4 статьи – в журнале, включенном в перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертации.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 110 страницах машинописного текста, который включает 5 таблиц и 19 рисунков. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы, отражающей результаты собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, списка литературы, содержащего 127 отечественных и 57 иностранных источников, и приложения.

Все эксперименты проведены на 80 здоровых белых нелинейных крысахсамцах, возраст которых колебался от 9 месяцев до 1 года, массой 200± граммов. Содержание животных и постановка экспериментов проводилась в соответствии с требованиями приказов № 1179 МЗ СССР от 11.10.1983 года и № 267 МЗ РФ от 19.06.2003 года, а также международными правилами «Guide for the Care and Use of Laboratory Animals». Для выполнения оперативного вмешательства и забора материала (кровь из нижней полой вены, стабилизированная гепарином) животным использовали общий наркоз (0,3 мг золетила в/м, 0,8 мг ксиланита в/м, 0,01 мл - 0,1 % раствора атропина п/к на гр. веса животного).

Все эксперименты по моделированию и коррекции ОИМ были разделены на следующие 5 групп (табл. 1):

Количественная характеристика исследования Ложнооперированные животные Животные с моделью ОИМ и проведением ТЭС-терапии Животные с проведением ТЭС-терапии и моделью ОИМ I группа животных (n=10) – контрольная группа: интактные крысы, у которых производился забор крови на исследуемые показатели крови из нижней полой вены.

II группа животных (n=10) – ложнооперированные крысы: им под наркозом производили торакотомию и вскрытие перикарда, но не моделировали ОИМ, затем через 2 часа производили забор крови из нижней полой вены на исследование показателей цитокинового статуса и -эндорфина.

III группа животных (n=20) – животные с ОИМ: им под наркозом, с последующей торакотомией, вскрывали перикард и моделировали ОИМ посредством перевязки левой коронарной артерии (ЛКА). Через 2 часа брали кровь из нижней полой вены для определения показателей цитокинового статуса и -эндорфина.

IV группа животных (n=20) – животные, которым моделировали ОИМ и проводили ТЭС-терапию: им под наркозом, с последующей торакотомией, вскрывали перикард и моделировали ОИМ посредством перевязки ЛКА и далее проводили сеанс ТЭС-терапии. Показатели цитокинового статуса и эндорфины изучались через 2 часа после сеанса.

V группа животных (n=20) – животным после предварительной ТЭСтерапии моделировали ОИМ: им перед моделированием ОИМ, посредством перевязки ЛКА, за 2 часа проводили сеанс ТЭС-терапии. Показатели цитокинового статуса и уровень -эндорфина изучались через 2 часа после моделирования ОИМ.

Моделирование ОИМ проводилось в условиях острого опыта по методике Е.С. Шахбазяна (1940) в авторской модификации. У крыс после проведения трахеостомии и подключения аппарата ИВЛ «Вита-1» проводилась парастернальная торакотомия. После вскрытия перикарда и извлечения сердца из грудной полости определяли локализацию ЛКА, под которую с помощью атравматической иглы подводили полипропиленовую лигатуру и производили перевязку. Перевязку ЛКА проводили без последующей реперфузии. Таким образом, моделировали стойкое нарушение кровообращения в области снабжения кровью из ЛКА. ИВЛ животного проводилась через клапанное устройство (Шейх-Заде Ю. Р., 1987), исключающее значительное возрастание мертвого пространства.

Летальность животных фиксировалась по окончанию создания каждой экспериментальной модели. Животных умерщвляли, соблюдая правила проведения работ с использованием экспериментальных животных (приказ «О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных», утвержденный МЗ СССР г.

Москва. № 755, от 12 августа 1977).

В ходе эксперимента проводили наблюдения за крысами для оценки общего состояния и определения выживаемости.

Верификация ОИМ осуществлялась по следующим критериям:

1. Электрокардиограмма (ЭКГ). При моделировании ОИМ во всех группах животных записывали ЭКГ до операции, через 30 минут после моделирования ОИМ и через 2 часа после операции. Регистрацию ЭКГ крысам проводили на электрокардиографе ЭК 1Т-1/3-07 «АКСИОН» (Россия) в стандартных отведениях I, II, III в положении на спине, с использованием игольчатых электродов помещаемых подкожно на конечности (Западнюк И.П. и соавт, 1983; Орлов В.Н., 1983).

2. Гистологическое подтверждение острого ишемического повреждения миокарда. Макроскопическое определение зоны инфаркта в начале заболевания затруднительно, поскольку очаг некроза формируется и отчетливо проявляется только к концу 1-х суток. Для выявления патоморфологических изменений в первые часы развития ОИМ возникала необходимость в использовании дополнительных методов морфологического исследования (поляризационная, фазово-контрастная, люминесцентная, электронная микроскопия) и гистоферментохимических методов. С этой целью у животных изымались сердца и проводились гистохимические исследования на кафедре гистологии с эмбриологией ГБОУ ВПО КубГМУ Минздрава России: окрашивание гематоксилином-эозином, ШИК-реакция, окрашивание проционом 2 БС, дезаминирование - процион 2 БС (гистидин).

Сочетанное выявление нейтральных полисахаридов и белка производилось при помощи ШИК-реакции по А.Л. Шабадашу (Шабадаш А.Л., 1947) и окрашиванию проционом RS по В. В. Иванову (Иванову В.В., 1961).

модифицированным двухпрограммным электростимулятором «ТРАНСАИР-1»

Параметры электрического тока, использованного при проведении Частота, Гц Длительность импульса, мс в анальгетическом режиме. В IV группе после создания экспериментального ОИМ по выше описанной методике и в V группе за 2 часа до создания модели ОИМ. Параметры транскраниальной электростимуляции для крыс представлены в таблице 2 (Лебедев В.П. и соавт., 1988; Ковалев М.Г., 1993).

Длительность сеанса во всех случаях составляла 45 минут.

В работе были изучены показатели цитокинового профиля (уровень про- и противовоспалительных цитокинов) и уровень -эндорфинов у животных пяти исследуемых групп. Все исследования проведены на базе ЦНИЛ Отдел клинической экспериментальной иммунологии и молекулярной биологии ГБОУ ВПО КубГМУ Минздрава России.

В сыворотке крови исследуемых животных определяли уровень ИЛ-1, ИЛФНО- и РАИЛ-1, ИЛ-10 методом ИФА. Использовали специализированные тест системы «Bender MedSystems, BMS224/2 IL-1» (Германия), «Bender MedSystems, BMS213/2 IL-6» (Германия), «Bender MedSystems, BMS223 TNFи «Bender MedSystems, BMS215/2 IL-10» (Германия) на микропланшетном ридере «Multiscan Multisoft» фирмы «Thermolabsystems» (Финляндия). Для определения РАИЛ-1 использовали тест - наборов ООО «Вектор-Бест»

(Новосибирск, Россия).

Содержание -эндорфина в сыворотке крови исследуемых животных определялось с использованием стандартных реактивов «Peninsula Laboratories, LLK» (США) для иммуноферментного анализа на иммуноферментном анализаторе «Мультискан ES» производства Thermolabsystems (Финляндия).

Статистическую обработку полученных данных осуществляли методами непараметрической статистики с использованием программного обеспечения «Statistika 6.0 for Windows» фирмы «Stat Soft, Inc.» и «Micrisoft Office Excel 2003». Полученные результаты исследуемых групп после статистической обработки выражали в виде средних значений (M) и ошибки среднего (m).

Сравнение выборок проводилось по непараметрическому критерию Вилкоксона, с установлением уровня значимости *p0,05 и **p0,01.

У интактных животных ЧСС составляла 180-220 уд/мин. Через 30 минут после моделирования ОИМ отмечались характерные для ишемии миокарда изменения на ЭКГ: формировался патологический зубец Q, что убедительно свидетельствовало о возникновении зоны некроза, одновременно наблюдалось уменьшение величины зубца R и подъем сегмента S-T выше изолинии, причем этот подъем маскировал зубец Т.

При гистологическом исследовании миокарда интактных крыс в образцах сердечной мышцы ядра КМЦ были хорошо видны, имели удлиненно-овальную форму, располагались ближе к центру цитоплазмы и своей длинной осью были ориентированы параллельно сарколемме; в саркоплазме видны поперечные полосы; цитоплазма некоторых КМЦ неравномерно или очень насыщенно окрашена; сарколемма четко определялась. Обычная световая микроскопия выявляла первые изменения в зоне некроза только через 8 часов от начала ОИМ (рис. 1).

Нами было проведено гистохимическое исследование, позволяющее выявить изменения в ишемизированном миокарде уже через 3-4 часа. Острая ишемия проявлялась паралитическим расширением капилляров, возникновением стаза эритроцитов, выраженным отеком интерстициальной ткани миокарда и набуханием мышечных волокон, нечеткими границами клеток и ядра; ядра КМЦ были слабо окрашены, с нечеткими границами;

сарколемма сохранена; окраска мышечных волокон неоднородна, но сохранялась поперечная исчерченность.

При окрашивании гематоксилином-эозином на микропрепаратах сердца крыс I и II группы строение миокарда соответствовало норме. В образцах сердечной мышцы ядра КМЦ были хорошо видны, имели удлиненно-овальную форму, располагались ближе к центру цитоплазмы и своей длинной осью были ориентированы параллельно сарколемме. В саркоплазме видна поперечная исчерченность, а сарколемма КМЦ четко определялась. На микропрепаратах сердца животных III группы (после получения модели ОИМ) появлялись последствия нарушения кровоснабжения: множество участков с гиперхромированными ядрами клеток эндомизия (А), выраженный отек стромы (Б) (рис. 1).

Подобная морфологическая картина, при моделировании ОИМ, сопровождается значительным возрастанием (в 2,21 раза) уровня АсАТ, также как и коэффициента де Ритиса (3,15). Отмечено возрастание тропонина I (в 11, раз). Повышается активность MB-фракции КФК в 7,78 раза (Борисенко В.Г., 2008). Снижается общая антиоксидантная активность плазмы крови на 18,55% и в гомогенате ткани сердца на 36,41%. Интегральный показатель коэффициент окислительной модификации биомолекул (КОМБ) повышался в плазме крови в 11,0 раз, в гомогенате ткани сердца – в 10,7 раза (Губарева Е.А., 2008).

Рисунок 1. Гистологическая картина Рисунок 2. Гистологическая картина миокарда животного из III группы миокарда животного IV группы.

через 4 часа получения модели. Окрашивание гематоксилиномОкрашивание гематоксилином- эозином. Ув.х А - гиперхромия ядер клеток эндомизия, Б - отек стромы, эндомизия, Б - отек стромы. В - поперечная исчерченность.

На микропрепаратах сердца животных IV группы (рис. 2) также имелись:

гиперхромия ядер эндомизия (А) (но в большинстве случаев ядра КМЦ располагались ближе к центру цитоплазмы), отек стромы мозаичного характера (Б) (участков отека было незначительное количество), но участков с поперечной исчерченностью (В) было значительно больше по сравнению со срезами миокарда животных III группы (рис. 1). Общая антиоксидантная активность плазмы крови снижается только на 9,13%, а в гомогенате ткани сердца она не отличалась от контроля. Интегральный показатель КОМБ повышался в плазме крови только в 6,4 раза и в гомогенате ткани сердца – в 4, раза (Губарева Е.А., 2008). Таким образом, ТЭС-терапия, проведенная в острейший период ОИМ, обладает кардиопротекторным действием. На срезе миокарда животного V группы обращает на себя внимание более массивное проявление ишемии миокарда: гиперхромированных ядер несколько больше, более выражен стромальный отек, зон с поперечной исчерченностью несколько меньше. Но все-таки эти проявления ишемии по сравнению с гистологическими срезами миокарда животных III группы имеют менее массивный характер.

Коэффициент де Ритиса в этот период снижается в 1,5 раза (изменение связано преимущественно со снижением уровня АсАТ). Уровень тропонина I значительно ниже (увеличен только в 2,5 раза) (Борисенко В.Г., 2008). Это также указывало на уменьшение степени ишемического повреждения миокарда. Следовательно, ТЭС-терапия обладает возможностью осуществлять прекондиционирование миокарда, посредством включения опиоидэргического механизма (Борисенко В.Г., 2009).

Как показали гистохимические исследования применение ТЭС-терапии в острейший период уменьшает отек стромы КМЦ, снижает гиперхромию ядер, что косвенно свидетельствует о меньшей выраженности некроза. При предварительном воздействии ТЭС-терапии (до моделирования ишемии) массивность повреждения КМЦ снижается. Таким образом, проведение ТЭСтерапии в острейший период и предварительно сопровождается видимой кардиопротекцией и замедлением формирования патологических процессов, приводящих к некрозу.

При ШИК-реакции на микропрепаратах сердца животных I и II группы выявлялось окрашивание КМЦ преимущественно средней интенсивности и редко очень высокой интенсивности. На микропрепаратах сердца животных группы III наблюдалось окрашивание КМЦ слабой интенсивности, что говорит об истощении запасов гликогена в ткани миокарда. Его запас был израсходован на извлечение энергии для обеспечения течения такого процесса как ишемия. На микропрепаратах сердца животных IV и V группы выявлялось окрашивание КМЦ средней интенсивности, отсутствовали КМЦ с высокой интенсивностью, данный факт, несомненно, свидетельствует в пользу кардиопротекторного действия ТЭСтерапии, за счет стимуляции опиоидэргического звена стресс-лимитирующей системы. Опиоиды ограничивают активность симпатоадреналовой системы и повреждающее действие катехоламинов на миокард, предотвращая адреналиновый некроз миокарда (Трофименко А.И., 2013). При ишемии миокарда содержание гликогена за счет активации анаэробных процессов, в частности, гликолиза снижается (III группа животных). Проведение ТЭС-терапии до моделирования ОИМ (V группа животных) обеспечивает сохранение уровня гликогена в КМЦ почти на прежнем уровне.

Таким образом, предварительное проведение ТЭС-терапии ограничивает чрезмерную активацию анаэробных процессов, протекающих с максимальным использованием запасов гликогена, и тем самым защищает КМЦ от негативного воздействия недоокисленных продуктов молочной и пировиноградной кислоты.

При окрашивание проционом БС на микропрепаратах сердца животных I и II группы наблюдалось окрашивание КМЦ преимущественно средней интенсивности, но имелись КМЦ с высокой интенсивностью окрашивания. На микропрепаратах сердца животных III группы преобладали КМЦ, окрашенные интенсивно. Однако присутствовали единичные КМЦ со средней интенсивностью окрашивания. Это говорит об увеличении содержания гистидина и лизина в сравнении с контролем. На микропрепаратах сердца животных IV и V группы выявлялось окрашивание КМЦ преимущественно средней интенсивности, но присутствовали КМЦ с высокой интенсивностью окрашивания. При ишемическом повреждении миокарда, даже на ранних этапах, отмечалось снижение содержания гистидина и лизина в КМЦ.

Предварительное проведение ТЭС-терапии сопровождалось значительным уменьшением степени повреждения КМЦ (КМЦ с высоким содержанием вышеуказанных аминокислот встречаются единично), что делает гистологическую картину почти идентичной контролю.

При реакция дезаминирования проционом на микропрепаратах сердца животных I и II группы окрашивание КМЦ было преимущественно высокой интенсивности. На микропрепаратах сердца животных III группы выявлялось окрашивание КМЦ средней интенсивности. Снижение интенсивности окрашивания говорит о снижении содержания гистидина в сравнении с контролем. На микропрепаратах сердца животных IV и V группы окрашивание КМЦ было преимущественно высокой интенсивности и встречались клетки с очень интенсивным окрашиванием, что говорит об увеличении содержания гистидина в сравнении с группой контролем и группой ОИМ.

Таким образом, проведение ТЭС-терапии в острейший период ОИМ, а также перед получением модели указанной патологии заметно уменьшало повреждение КМЦ по сравнению с группой контроля.

Нами проведена оценка уровня ИЛ-1, ИЛ-6 и ФНО- в этот же период. Эти цитокины в острейший период ИМ активно продуцируются КМЦ и даже клетками эндотелия сосудистой стенки коронарных артерий (Ridker P.M., Silvertown J.D., 2008; Bodi V. et al., 2008; Оранский П.П., Ханферьян Р.А., 2009;

Хидирова Л.Д., Маянская Н.Н., 2012). Повышение уровня провоспалительных маркеров коррелирует со степенью тяжести дисфункции левого желудочка и обладает большой прогностической ценностью (Moller J.E., Kober K.E.L., 2003).

Уровни ИЛ-1, ИЛ-6 и ФНО- в динамике ОИМ миокарда коррелируют со степенью поражения сердечной мышцы по данным ЭКГ (Лимарева Л.В., 2009).

Результаты исследования провоспалительных цитокинов представлены в таблице 3 и рисунке 3.

Показатели провоспалительных цитокинов в исследуемых группах I группа (контроль) (ложнооперированные) III группа (с ОИМ) 17,67±4,06*+ (ОИМ+ТЭС-терапия) (ТЭС-терапия+ОИМ) Примечание: * - p0,05 по сравнению с I группой (контроль), ** - p0,05 по сравнению с III группой, + - p0,05 по сравнению со II группой, ++ - p0,05 по сравнению со IV группой.

Уровень ФНО- достоверно возрастал в группе ложнооперированных животных в 2,6 раза по сравнению с контролем (табл. 3, рис. 3). Его увеличение, в 3,5 раза, имело место и у животных III группы с ОИМ (p0,05).

Одновременно наблюдалось значительное повреждение структуры миокарда. Истощались запасы гликогена в ткани миокарда, возрастало содержания гистидина и лизина, что указывало на значительное повреждение миокарда. Это сопровождалось возрастанием уровня маркеров некроза миокарда (Борисенко В.Г., 2009) и развитием тяжелого окислительного стресса (Губарева Е.А., 2009). Известно, что ФНО- играет важнейшую роль в инициации воспалительных процессов, в том числе развивающихся после ишемического повреждения (Скворцова В.И. и соавт., 2007; Барабаш О.Л. и соавт., 2010).

Примечание: * - достоверно по отношению к I группе, ** - достоверно по Нормализация уровня ФНО- после лечения ИМ наступает только на день (Фуштей И.М. и соавт., 2007). ФНО- инициирует экспрессию на эндотелии молекул клеточной адгезии, активирует МФ, Нф, усиливает секрецию простагландинов, оказывает хемотаксическое действие на различные клетки (в частности, кардиотоксический эффект) и обусловливает синтез ряда БОФ. Обладая способностью индуцировать апоптоз, ФНО- вызывает генерализацию в клеточной мембране АФК, О2, а также NO (Шевченко А.В. и соавт., 2010). ФНО- способен подавлять сократимость КМЦ, снижать артериальное давление и способствовать развитию отека легких. Нельзя не учитывать способность ФНО- усиливать экспрессию Fas-антигена на клеткахмишенях, подготавливая их тем самым к запрограммированной клеточной гибели - апоптозу. У животных IV и V групп после проведения ТЭС-терапии содержание ФНО- был достоверно (p0,05) ниже по отношению к животным III группы. У животных IV группы, где ТЭС-терапия применялась в острейший период ОИМ (табл. 3, рис. 1), уровень ФНО- не превышал показатель контрольной группы животных (табл. 3).

У животных V группы, где ТЭС-терапия применялась до моделирования ОИМ, уровень ФНО- не возвращался к показателю контрольной группы животных и был в 1,3 раза выше, чем у животных IV группы (табл. 3). Таким образом, анализируя динамику ФНО- в разных группах животных можно сделать вывод, что применение ТЭС-терапии в острейший период ОИМ оказывает выраженный противоспалительный эффект. Проведение ТЭСтерапии с профилактической целью (животным V группы) уменьшает характер ишемических повреждений, согласно гистохимическим исследованиям. Таким образом, ТЭС-терапия обладает выраженным кардиопротективным эффектом.

ИЛ-1 - является главным медиатором развития местной воспалительной реакции при любом типе воспаления, продуцируется клетками воспаления, вызывает высвобождение и экспрессию других медиаторов воспаления как клеточного, так и плазменного происхождения (цитокинов, факторов роста, хемокинов, биоактивных липидов, металлопротеиназ и АФК, адгезивных рецепторов), пролиферацию резидентных клеток (Sheu J.N. et al., 2007;

Dimitrakova E., Kostov I., 2011). Кроме того, ИЛ-1 стимулирует выход лейкоцитов из красного костного мозга, также активирует лимфоциты и Нф.

Гиперпродукция ИЛ-1 на местном уровне приводит к разрушению ткани; на системном уровне – к катастрофическому нарушению гемодинамики и часто – к летальному исходу. Показана связь повышенных показателей ИЛ-1 в ранние сроки ИМ с увеличением встречаемости ранних осложнений инфаркта (кардиогенный шок, отк лгких) (Тращенко А. С., 2010). ИЛ-1 достоверно (p0,05) повышался во II группе ложнооперированных животных по отношению к группе контроля. У животных этой группы он увеличился в 4,0 раза по сравнению с животными I группы (табл. 3). Это повышение связано с активацией вновь синтезируемых медиаторов воспаления, к которым относятся исследуемые нами показатели, обусловлено повреждением тканей (оперативное вмешательство).

Содержание ИЛ-1 более значительно (p0,05) возрастало у крыс в III группе с моделированным ОИМ. Уровень этого цитокина увеличивался в 10,0 раз по сравнению с контрольной I группой животных и в 2,3 раза по сравнению с животными II группы (табл. 3, рис. 3). Это свидетельствует о параллельном запуске асептического воспаления (наряду с ишемией) (Митьковская Н.П. и соавт., 2008). Одновременно имело место значительное повреждение структуры миокарда. Истощались запасы гликогена в ткани миокарда, возрастало содержание гистидина и лизина, что указывает на значительное повреждение миокарда. Это сопровождается возрастанием уровня маркеров некроза миокарда (Борисенко В.Г., 2009) и развитием тяжелого окислительного стресса (Губарева Е.А., 2009). Показано, что значительное падение фракции выброса левого желудочка сопровождалось высоким содержанием ИЛ-1. Это объяснялось способностью ИЛ-1 ослаблять действие катехоламинов на КМЦ (Тращенко А.С., 2010). Из табл. 3 видно, что содержание изучаемых нами провоспалительных медиаторов имеет сходную динамику у животных IV, V групп. У животных этих групп, где применялась ТЭС-терапия, уровень ИЛ-1 в крови был достоверно (p0,05) ниже по сравнению с животными III группы (моделирование ОИМ).

Причем у животных IV группы, у которых вначале моделировали ОИМ, а затем проводили ТЭС-терапию, уровень ИЛ-1 соответствовал таковому у животных I контрольной группы. Одновременно происходило уменьшение выраженности повреждения миокарда. Уровень гликогена в КМЦ сохранялся почти на контрольном уровне. При этом отмечено значительное снижение интенсивности окислительного стресса (Губарева Е.А., 2009). Это свидетельствует о целесообразности проведения ТЭС-терапии в острейший период ИМ. Она, как видно, оказывает выраженный противовоспалительный эффект. У животных V группы уровень ИЛ-1 был также достоверно (p0,05) меньше по отношению к животным III группы (табл. 3). Однако несколько превышал таковой в контрольной группе (в 1,3 раза) и в 1,5 раза был выше, чем у животных IV группы.

При этом сохранялся более выраженное (по сравнению с IV группой) повреждение структуры КМЦ. Уровень маркеров некроза миокарда в этот период повышен (Борисенко В.Г., 2009). Следовательно, предварительная стимуляция опиоидэргического звена стресс-лимитирующей системы, до создания модели прекондиционирования миокарда.

ИЛ-6 отсутствует в сыворотке крови при нормальных физиологических условиях, но количество его в сыворотке резко повышается при многих микробных инвазиях, иммунологических реакциях, воспалении или повреждениях тканей. Влияние, которое ИЛ-6 оказывает на прогрессирование воспалительного процесса, достаточно сложное, потому что он обладает как про - так и противовоспалительным действием, а так же эффектом отрицательной обратной связи по отношению к ИЛ-1 и ФНО-. Выработка ИЛ-6 начинает при ИМ возрастать гораздо позже, чем ИЛ-1 и ФНОХидирова Л.Д., Маянская Н.Н., 2012). ИЛ-6 способствует как обострению хронических, так и хронизации острых воспалительных процессов. Для ИЛ- характерны системные эффекты. Он может опосредовать регуляторные связи между иммунной системой, костным мозгом, нейроэндокринной системой, печенью и другими тканями. Роль ИЛ-6 как противовоспалительного цитокина обусловлена его ингибирующим влиянием на продукцию ИЛ-1 и ФНО- и активацией продукции РАИЛ-1 и ИЛ-10 (Mastorakos G., 2007; Шварц В., 2009).

Максимальная концентрация ИЛ-6 и ФНО-, наблюдаемая у больных с отсутствие снижения плазменных концентраций ФНО- и в 1 сутки кардиогенного шока, свидетельствует о прогрессировании ИМ, осложнение его кардиогенным шоком, нарастании воспалительного ответа и неблагоприятном прогнозе заболевания (Матюшков Н.С., 2011). ИЛ-6 способствуют усилению продукции печенью СРБ во время острой фазы ИМ, что может приводить к угнетению синтеза NO, обладающего выраженной противовоспалительной активностью, и тем самым беспрепятственному усилению факторов «агрессии»

в постинфарктном периоде (Тращенко А.С., 2010). Выявлена прямая корреляционная зависимость между уровнем ИЛ-6 и неблагоприятным исходом ИМ (Мерай И.А., 2003; Шальнев В.И., 2011).

Содержание ИЛ-6 увеличивалось у животных II группы ложнооперированных крыс (табл. 3, рис. 3). Оно возрастало в 2,8 раза и было достоверным по отношению к животным I группы контроля (p0,05). Это связано с операционной травмой. У животных III группы уровень ИЛ-6 был таким же, как у животных II группы и оставался достоверным (p0,05) по отношению к животным I контрольной группы. Повышение уровня ИЛ-6 в 2, раза при моделировании метаболического ИМ происходило только на 3 сутки (Хидирова Л.Д., Маянская Н.Н., 2012). Возрастание у животных III группы уровня ИЛ-6 сопровождалось значительным повреждением структуры миокарда. Истощались запасы гликогена в ткани миокарда, возрастало содержания гистидина и лизина, что указывает на значительное повреждение миокарда. У животных IV группы уровень ИЛ-6 соответствовал уровню этого показателя у животных I контрольной группы. Его содержание было ниже в 2, раза по отношению к животным III группы. Таким образом, проведение ТЭСтерапии в острейший период ОИМ оказывало выраженный противоспалительный эффект. У животных V группы уровень этого маркера воспаления также был достоверно (p0,05) снижен по отношению к животным III группы. Это подтверждает эффективность проведения ТЭС-терапии, как в острейший период ОИМ, так и предварительно (табл. 3, рис. 3).

Результаты исследования противоспалительных цитокинов представлены в таблице 4 и на рисунке 4.

Показатели противоспалительных цитокинов в исследуемых группах I (контроль) (ложнооперированные) III (ОИМ) (ОИМ+ТЭС) (ТЭС+ОИМ) Примечание: * - p0,05 по сравнению с I группой контроля, ** - p0, по сравнению с III группой.

ИЛ-10 относится к числу важных противовоспалительных цитокинов.

Продуцируется Т-хелперами 2 (Th2) и может рассматриваться как антагонист ряда других цитокинов. Он подавляет продукцию всех провоспалительных цитокинов, ИФР-, пролиферативный ответ Т-клеток на АГ и митогены, а также подавляет секрецию активированными моноцитами ИЛ-1, ФНО- и ИЛВ результате он способствует развитию гуморального иммунного ответа, обусловливая резистентность организма (Vinolo M. A. et al., 2011; Jung M., 2012). Главным эффектом ИЛ-10 является угнетение секреции ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-12, ФНО-, свободных радикалов О2, реактивных азотистых посредников и ПГЕ2 (Vinolo M.A., 2011; Jung M. et al., 2012). При осложненном ИМ уровень ИЛ-10 на 1-14 сутки выше, чем при неосложненном ИМ. К 21-м суткам отмечается снижение его концентрации. В то время как группе больных с неосложненным течением ИМ продолжается бурный рост концентрации этого противовоспалительного цитокина (Спирякина Я. Г., 2008).

При моделировании ОИМ (животные III группы) содержание в сыворотке крови ИЛ-10 достоверно снижалось в 3,4 раз по сравнению с животными группы контроля (p0,05). Это свидетельствует о выраженности асептического воспалительного ответа в условиях ишемического повреждения миокарда. У животных IV группы, у которых ТЭС-терапия применялась в острейший период ОИМ, этот показатель был достоверно увеличен (в 9,8 раза) по сравнению с животными III группы. Это ассоциировалось с уменьшением выраженности морфологических последствий гипоксии миокарда. У животных V группы, где ТЭС-терапия проводилась предварительно - содержание ИЛ-10 было выше в 8, раза по сравнению с животными III группы (табл. 4, рис. 4). Продукция ИЛ- обычно ассоциируется с одновременным изменением содержания ФНОSaraiva M., O’Garra A., 2010). Однако содержание ИЛ-10 может повышаться и независимо от изменений уровня ФНО- (Chung E.Y. et al., 2007).

Соотношение ФНО-/ИЛ-10 (Хаитов Р.П. и соавт., 2010) (табл. 4) при моделировании ОИМ (III группа животных) значительно возрастало – с 0,79 (в контрольной группе животных) до 10,39 (в 13,2 раза). Это происходило за счет значительного роста уровня ФНО- при одновременном падении содержания ИЛ-10. Указанные сдвиги свидетельсвовали о тяжелом поражении миокарда с падением фракции выброса (Серик С. А., 2012). При использовании ТЭСтерапии соотношение ФНО-/ИЛ-10 было ниже контрольного уровня (0,39 по отношению к 0,79), так как содержание ФНО- возвращалось к норме, а уровень ИЛ-10 превышал контрольный в 2,9 раза. Это ассоциировалось с меньше степенью повреждения миокарда.

Антагонист рецептора ИЛ-1 (РАИЛ-1) - важный естественный противовоспалительный белок, отсутствие или низкое содержание которого играет ключевую роль в патогенезе целого ряда заболеваний. Количественное определение уровня РAИЛ-1 имеет большое значение при оценке иммунного статуса организма. В здоровой ткани РАИЛ-1 синтезируется для предотвращения воспалительных реакций, опосредованных ИЛ-1. Отсутствие РАИЛ-1 предрасполагает к усилению местного производства ИЛ-1 и его эффектов. РАИЛ-1 блокирует связывание ИЛ-1 с клетками, имеющими на поверхности рецепторы для него.

Рисунок 4. Содержание противоспалительных цитокинов Примечание: * - достоверно по отношению к I группе, ** - достоверно по Таким образом, эндогенный РАИЛ-1 может играть важную роль в предотвращении или ограничении местного повреждения органов при действии избытка ИЛ-1 (Richette P. et al., 2008). Повышение уровня РAИЛ-1 и дисбаланс между ИЛ-1 и РАИЛ-1 может предрасполагать к серьезным гемодинамическим изменениям при стенокардии и ИМ. Чем выше уровень РAИЛ-1 – тем хуже прогноз (Зорин Н.А. и соавт., 2009). Изменения концентрации РАИЛ-1 коррелируют с динамикой показателей внутрисердечной гемодинамики и физической толерантности у больных ИМ. С целью оценки выраженности воспалительного ответа нами был исследован уровень РAИЛ-1.

В I контрольной группе животных его уровень составил 45,02±2,61 пкмоль/мл (табл. 4, рис. 4). После моделирования ОИМ содержание РAИЛ-1 резко уменьшалось и было достоверным (p0,05). Его уровень у животных III группы составил 6,02±1,32 пкмоль/мл (табл. 4, рис. 4). Это совпадало с высокой активностью ИЛ-1, уровень которого в этой группе животных составил 68,37±4,56 пкмоль/мл (табл. 3, рис. 3). В группах животных с проведением ТЭС-терапии уровень РАИЛ-1 был достоверно (p0,05) выше по отношению к группе животных с ОИМ. Это ассоциировалось с достоверно более низким уровнем ИЛ-1 при применении ТЭС-терапии (табл. 3, рис. 3).

Динамика коэффициента РАИЛ-1/ИЛ-1 (Хаитов Р.П. и соавт., 2010) подкрепляет происходящие изменения. При моделировании ОИМ (животные III группы) он снижался в 73,3 раза. Это обусловлено, прежде всего, значительным ростом уровня ИЛ-1 в 10,0 раз по сравнению с контрольной группой животных. Содержание РАИЛ-1, в это время снижалось в 7,5 раз.

После применения ТЭС-терапии, в острейший период ОИМ (у животных IV группы), коэффициент РАИЛ-1/ИЛ-1 был выше в 30,0 раз за счет возвращения уровня ИЛ-1 к норме и большего содержания РАИЛ-1 - в 2,7 раза. Указанная динамика отражает положительные сдвиги в состоянии структуры миокарда.

При предварительном применении ТЭС-терапии (у животных V группы) данный коэффициент был выше только 15,6 раза, что обусловлено менее выраженным падением уровня ИЛ-1 (в 1,3 раза превышал норму).

Провоспалительный коэффициент (ПВИ - ИЛ-1/ИЛ-10) (Хаитов Р.П. и соавт., 2010) при моделировании ОИМ (животные III группы) возрастал в 8, раза. При применении ТЭС-терапии, в острейший период ОИМ (у животных IV группы), его величина была ниже в 18,7 раза, из-за возвращения уровня ИЛ- к норме (падение в 11,2 раза) при одновременном более высоком содержании ИЛ-10 (в 9,8 раза). Это указывало на значительное уменьшение провоспалительного потенциала в миокарде, обусловленного противовоспалительным влиянием ТЭС-терапии. Предварительное использование ТЭС-терапии (у животных V группы) приводило к менее выраженному снижению уровня провоспалительной активности (в 1,2 раза).

Однако она также была ниже, чем у животных контрольной группы.

Таким образом, моделирование ОИМ вызывало выраженные отрицательные провоспалительные сдвиги в миокарде крыс. Это проявлялось в падение противовоспалительного коэффициента (РАИЛ-1/ИЛ-1) в 73,3 раза, при одновременном росте провоспалительных коэффициентов (ФНО– /ИЛ-10 и ИЛ-1/ИЛ-10) в 13,1 раза и 8,8 раза соответственно. Указанные сдвиги сопровождались выраженными морфологическими нарушениями в миокарде.

Развивался оксидативный стресс (Губарева Е.А., 2009) и возрастает уровень маркеров некроза (Борисенко В.Г., 2009). Применение ТЭС-терапии оказывало значительный кардиопротективный эффект, ограничивая повреждение миокарда, и нормализовало противовоспалительный потенциал миокарда.

Происходило снижение провоспалительных коэффициентов (ФНО-/ИЛ-10 и ИЛ-1/ИЛ-10) в 32,5 раза и 18,7 раза соответственно, при одновременном росте противовоспалительного коэффициента (РАИЛ-1/ИЛ-1) в 30,0 раз.

Предварительное применение (даже однократное) ТЭС-терапии также ограничивало ишемическое поражение миокарда при моделировании ОИМ, что проявлялось меньшей степени падения противовоспалительного коэффициента (РАИЛ-1/ИЛ-1), только в 4,7 раза и отсутствии роста провоспалительных коэффициентов (ФНО-/ИЛ-10 и ИЛ-1/ИЛ-10).

В работе нами оценено влияние ТЭС-терапии на содержание -эндорфинов в сыворотке крови крыс при ОИМ (табл. 5, рис. 5).

Концентрация -эндорфина в сыворотке крови разных групп (пкг/мл) Примечание: * - p0,05 по сравнению с I группой, ** - p0,05 по сравнению с III группой, + - p0,05 по сравнению со II группой, ++ - p0,05 по сравнению с IV группой.

Рисунок 5. Содержание -эндорфина в сыворотке крови разных групп Примечание: * - достоверно по отношению к I группе, ** - достоверно по Из таблицы 5 видно, что содержание -эндорфина в I контрольной группе животных составило 55,2±3,75 пкг/мл. Обращает на себя внимание тот факт, что в группе ложнооперированных животных содержание последнего достоверно (p0,05) было снижено в 2,9 раза и составило 18,49±1,29 пкг/мл (рис. 5). Это, вероятно, свидетельствует о влиянии «операционного стресса» и гиперактивации стресс-реализующих систем организма животного с развитием адренэргически-кортикоидной фазы стресса или стадии «шока» по Г. Селье (Орел В. Е., 2001). В III группе животных с моделированным ОИМ уровень эндорфина, по отношению к I группе животных, был снижен достоверно (p0,05) в 5,1 раза и составил 10,39±2,11 пкг/мл. Он был меньше и по сравнению с содержанием во II группе животных (в 1,8 раза) (табл. 5, рис. 5).

Несомненно, что глубина падения уровня -эндорфина связана не только с «операционным стрессом», но также с мощнейшим выбросом провоспалительных цитокинов в кровоток при моделировании ОИМ (Орел В.Е., 2001).

Применение ТЭС-терапии в острейший период ОИМ (IV группа животных) возвращало содержание -эндорфина к нормальным значениям и его уровень в сыворотке становится равным данным I контрольной группы животных. Его содержание в этой группе животных составило 54,12±3, пкг/мл. Указанные данные статистически достоверны (p0,05) по отношению к показателям животных III группы.

Более высокий уровень -эндорфина (в 5,2 раза) в IV группе животных, при применении ТЭС-терапии, свидетельствует об активации стресслимитирующих систем, в частности, опиоидэргической системы, оказывающих кардиопротекторный эффект за счет стимуляции собственной опиоидергической системы сердца. В V группе животных, где применение ТЭС-терапии предваряло моделирование ОИМ, уровень -эндорфина составил 24,71±1,85 пкг/мл. Следовательно, падение содержания -эндорфина менее выражено - 2,2 раза по сравнению с 5,1 раза без использования ТЭС-терапии.

Однако, уровень -эндорфина был в 2,2 раза ниже чем у животных I контрольной группы.

Таким образом, ТЭС-терапия оказывает модулирующий эффект за счет активации эндогенных опиоидных структур. Увеличение содержания эндорфина оказывает кардиопротективный эффект за счет внутрисердечных опиоидергических структур. Таким образом, использование ТЭС-терапии в лечении больных ОИМ является патогенетически оправданным. Применение ее в острейший период ОИМ повышает эффективность воздействия, препятствуя появлению значительных нарушений структуры миокарда.

ВЫВОДЫ

1. При экспериментальном остром инфаркте миокарда наблюдается резкое увеличение содержания сывороточных провоспалительных цитокинов: ИЛ- (в 10,0 раз), ФНО- (в 3,5 раза) и ИЛ-6 (в 2,8 раза), ассоциированное с увеличением провоспалительных коэффициентов в 11,8 раза (ФНО-/ИЛ-10) и в 29,5 раза (ИЛ-1/ИЛ-10), а также со снижением уровня содержания эндорфина (в 5,1 раза) по отношению к таковым у контрольных животных.

2. О резком уменьшении активности противовоспалительного звена цитокиновой системы при экспериментальном остром инфаркте миокарда свидетельствует снижение сывороточного содержания ИЛ-10 (в 3,4 раз) и РАИЛ-1 (в 7,5 раз), а также соответствующее снижение величины противовоспалительного коэффициента - РАИЛ-1/ИЛ-1 (в 73,6 раза) относительно контрольных животных.

3. Изменения цитокинового статуса при моделировании острого инфаркта миокарда сопровождаются значительными повреждениями структуры миокарда, подтверждаемыми гистологически: на микропрепаратах сердца имеется множество участков с гиперхромированными ядрами клеток, имеет место эндомизия, выраженный отек стромы, истощение запасов гликогена в ткани миокарда, снижение содержания гистидина и лизина в кардиомиоцитах.

4. Использование ТЭС-терапии в острейший период экспериментального ОИМ выявило положительную динамику цитокинового статуса, заключающуюся в нормализации содержания провоспалительных цитокинов (ИЛ-1, ФНО-, ИЛв резком снижении величин провоспалительных коэффициентов (ФНОИЛ-10 и ИЛ-1/ИЛ-10) в 31,7 раза и 96,0 раз, соответственно, а также в достоверном возрастании содержания ИЛ-10 (в 2,9 раза), по сравнению с контрольной группой животных. Это приводило к возрастанию величины противовоспалительного коэффициента (РАИЛ-1/ИЛ-1) - в 29,4 раза.

Индуцированные ТЭС-терапией позитивные изменения в системе про- и противовоспалительных цитокинов сопровождались увеличением содержания -эндорфина в крови экспериментальных животных (в 5,2 раза) до контрольного уровня.

5. Применение ТЭС-терапии при экспериментальном ОИМ приводило к меньшей степени повреждения структуры миокарда о чем свидетельствовало гистохимически доказанное уменьшение отека стромы кардиомиоцитов, снижение гиперхромии ядер.

6. Полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности и целесообразности использования ТЭС-терапии в комплексном лечении больных острым инфарктом миокарда.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Проведенное исследование (цитокинового статуса) свидетельствует о целесообразности включения в комплекс лечебных мероприятий при остром инфаркте миокарда в острейшую стадию ТЭС-терапии, обладающей гомеостатическим эффектом в отношении только измененных показателей.

2. При остром инфаркте миокарда в острейшую стадию ТЭС-терапию рекомендовано применять дополнительно к комплексному медикаментозному лечению следующим образом: в режиме биполярного импульсного тока ежедневно, сила тока подбирается индивидуально (от 1 до 2 мА, в среднем 1, мА), положение электродов фронто-мастоидальное. Длительность 1-го сеанса составляет 15 минут, всех последующих – 40 минут. Сеансы проводят в течение 7-10 дней.

Список работ, опубликованных по теме диссертации 1.* Влияние ТЭС-терапии на морфологию и гистохимию кардиомиоцитов крыс на ранних стадиях моделированного инфаркта миокарда / В.Г. Борисенко, А.Х.Каде, С.О.Апсалямова, Е.А.Губарева, Г.М.Могильная, В.И.Дудецкий // Кубанский научный медицинский вестник. – 2008. – № 5. – С.30-33.

2. Влияние транскраниальной электростимуляции эндорфинергических механизмов мозга на биохимические показатели крови и морфологию кардиомиоцитов у крыс с экспериментальным инфарктом миокарда / В.Г.Борисенко, А.Х.Каде, В.А.Порханов, Г.М.Могильная, В.И.Дудецкий, Е.А.Губарева, С.О.Апсалямова // Транскраниальная электростимуляция:

сборник статей. – СПб., 2009. – С.223-229.

3. Коррекция изменений в работе антиоксидантной системы методом ТЭСтерапии у крыс с экспериментальным инфарктом миокарда / Е.А.Губарева, А.Х.Каде, И.И.Павлюченко, А.А.Басов, С.О.Апсалямова [и др.] // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2010. – № 12. – С. 28-29.

4. Динамика изменения морфологии и гистохимии кардиомиоцитов крыс на ранних стадиях моделированного инфаркта миокарда под влиянием ТЭС-терапии / С.О.Апсалямова, Е.А.Губарева, А.Х.Каде [и др.] // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2010. – № 12. – С. 27-28.

5. Показатели цитокинового профиля при экспериментальном инфаркте миокарда у крыс / С.О.Апсалямова, А.Х.Каде [и др.] // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2013. – № 5. – С. 95.

*6. Влияние ТЭС-терапии на показатели про- и противовоспалительных цитокинов при экспериментальном инфаркте миокарда у крыс / С.О.Апсалямова, А.Х.Каде, Н.В.Колесникова [и др.] // Фундаментальные исследования. – 2013. – № 6 (2). – С. 337-340.

*7. Влияние ТЭС-терапии на содержание провоспалительных цитокинов при экспериментальном инфаркте миокарда у крыс / С.О.Апсалямова, А.Х.Каде [и др.] // Кубанский научный медицинский вестник. – 2013. – №5 (140). – С. 25-28.

*8. Влияние ТЭС-терапии на исходы острого адреналинового повреждения сердца у крыс / А.И.Трофименко, А.Х.Каде, В.П.Лебедев, С.А.Занин, А.Ю.Туровая, С.П.Вчерашнюк, С.О.Апсалямова [и др.] // Кубанский научный медицинский вестник. – 2013. – № 5 (140). – С. 174-180.

9. ТЭС-терапия при экспериментальном инфаркте миокарда у крыс / С.О.Апсалямова, А.Х.Каде, Н.В.Колесникова [и др.] // Современные наукоемкие технологии. – 2013. – №4. – С. 104-105.

10. Гистологическая картина миокарда при адреналиновом повреждении сердца у крыс / А.И.Трофименко, А.Х.Каде, С.А.Занин, С.О.Апсалямова [и др.] // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2013. – №7. – 135-138.

* - работа, опубликована в журнале, входящем в перечень изданий, рекомендуемых ВАК при Минобрнауки России для опубликования материалов докторских и кандидатских диссертаций.

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

- аспартатаминотрансфераза АсАТ БОФ ИБС - искусственная вентиляция легких ИВЛ ИЛ- ИЛ- ИЛ- КМЦ - коэффициент окислительной модификации биомолекул КОМБ ЛКА МФнейтрофил ОИМ - антагонист рецептора интерлейкина РАИЛ- СРБ - сердечно-сосудистые заболевания ССЗ - транскраниальная электростимуляция ТЭС ФНОчастота сердечных сокращений ЧСС 5-ОТ

 


Похожие работы:

«АЛЕКСЕЕНКО СВЕТЛАНА ИОСИФОВНА Химические ожоги пищевода у детей: особенности диагностики, лечения и профилактики осложнений 14.00.14 – болезни уха, горла и носа 14.00.35 – детская хирургия Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Санкт-Петербург - 2006 Работа выполнена в ГОУ ДПО Санкт-Петербургской медицинской академии последипломного образования Росздрава Научные руководители – доктор медицинских наук, профессор Ю.К. Янов доктор...»

«АРТЕМЬЕВ СЕРГЕЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ ОНТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ МЕХАНИЗМОВ РЕГУЛЯЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ВОЗМОЖНОСТЕЙ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ОБШИРНЫХ ОЖОГАХ У ДЕТЕЙ 14.00.37 – анестезиология и реаниматология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Новосибирск – 2009 Работа выполнена на кафедре анестезиологии и реаниматологии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Красноярская государственная медицинская...»

«СТРЕЛЬНИКОВА Инна Анатольевна КОМПЛЕКСНОЕ ЛЕЧЕНИЕ ДИСФАГИИ В ОСТРОМ ПЕРИОДЕ ИШЕМИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ НАКОЖНОЙ НЕЙРОМЫШЕЧНОЙ ЭЛЕКТРОСТИМУЛЯЦИИ 14.01.11 - нервные болезни Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Саратов - 2013 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Самарский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации....»

«ЯРКОВ ВЛАДИМИР ИВАНОВИЧ ВЛИЯНИЕ НАРУШЕНИЙ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА И ТРОМБОЦИТАРНО-СОСУДИСТОГО ЗВЕНА ГЕМОСТАЗА НА ДИСФУНКЦИЮ КОРОНАРНЫХ ШУНТОВ У БОЛЬНЫХ ИБС В СОЧЕТАНИИ С ЭССЕНЦИАЛЬНОЙ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИЕЙ 14.00.44 – сердечно-сосудистая хирургия; 14.00.06 – кардиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Новосибирск – 2008 Работа выполнена в Центре хирургии аорты, коронарных и периферических артерий Федерального государственного...»

«Алексеенко Сергей Николаевич СИСТЕМА ОБУЧЕНИЯ В ОБЛАСТИ ПРОФИЛАКТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ И ФОРМИРОВАНИЯ ЗДОРОВОГО ОБРАЗА ЖИЗНИ В МЕДИЦИНСКОМ ВУЗЕ 14.02.03 – Общественное здоровье и здравоохранение АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учной степени доктора медицинских наук Москва, 2013 2 Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном учреждении Центральный научно-исследовательский институт организации и информатизации здравоохранения Министерства здравоохранения Российской...»

«АБДУЛЛАЕВ Арслан Кудратович ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-КЛИНИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ МОДИФИЦИРОВАННОГО КСЕНОПЕРИКАРДА ДЛЯ ПЛАСТИКИ СУХОЖИЛИЙ И СВЯЗОК Специальность 14.01.15 – травматология и ортопедия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук САРАТОВ 2014 Работа выполнена на кафедре травматология, ортопедия и военноэкстремальная медицина Медицинского института Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего...»

«Рознерица Юрие Викторович Современная концепция хирургической коррекции частичной формы атриовентрикулярного канала в свете изучения непосредственных и отдаленных результатов (14.01.26 – сердечно-сосудистая хирургия) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва 2010 Диссертация выполнена в Научном Центре Сердечно–сосудистой хирургии им. А.Н. Бакулева РАМН. Научный консультант : Лауреат Государственной премии СССР, В.П. Подзолков Академик...»

«МАЛЫШЕВ Николай Николаевич ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ КАРОТИДНОЙ ЭНДАРТЕРЭКТОМИИ ПРИ СТЕНОЗИРУЮЩИХ ПОРАЖЕНИЯХ СОННЫХ АРТЕРИЙ В ОТДАЛЁННОМ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОМ ПЕРИОДЕ 14.01.11 – Нервные болезни Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Иваново 2011 Работа выполнена на кафедре нервных болезней с медицинской генетикой и нейрохирургией Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Ярославская государственная...»

«ЗАВЬЯЛОВА Анжелика Витальевна МИКРОБИОЦЕНОЗ ЖЕЛУДКА И КОРРЕКЦИЯ ЕГО ОТКЛОНЕНИЙ У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА С ФУНКЦИОНАЛЬНЫМИ И ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ВЕРХНИХ ОТДЕЛОВ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОГО ТРАКТА 14.00.09 — педиатрия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Иваново 2008 Работа выполнена на кафедре детских болезней педиатрического факультета Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Ивановская...»

«Барышникова Ирина Юрьевна КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА КОНТРАКТИЛЬНОЙ И РЕЛАКСАЦИОННОЙ СПОСОБНОСТИ МИОКАРДА У ДЕТЕЙ ПЕРВЫХ ТРЕХ ЛЕТ ЖИЗНИ С ТЕТРАДОЙ ФАЛЛО ДО ОПЕРАЦИИ И В РАННЕМ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОМ ПЕРИОДЕ (14.01.13 – лучевая диагностика, лучевая терапия) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2011 г. Работа выполнена в Государственном Учреждении Научный Центр сердечно-сосудистой хирургии имени А.Н.Бакулева РАМН. Научные руководители:...»

«ХАРЛАМОВА ТАТЬЯНА ВЛАДИМИРОВНА КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ИЗМЕНЕНИЙ ЦЕНТРАЛЬНОЙ И ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ ГЕМОДИНАМИКИ У БОЛЬНЫХ С ТЯЖЕЛЫМ ТЕЧЕНИЕМ ГНОЙНЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ МЕНИНГИТОВ 14.01.09 — Инфекционные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва — 2009 2 Диссертация выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Московский государственный медико-стоматологический университет Росздрава...»

«БОРОВКОВ ВАЛЕНТИН НИКОЛАЕВИЧ МЕДИКО-СОЦИАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ПРЕДОТВРАТИМОСТИ ПОТЕРЬ ЗДОРОВЬЯ ВСЛЕДСТВИЕ ТРАНСПОРТНОГО ТРАВМАТИЗМА Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук по специальности 14.02.03 – Общественное здоровье и здравоохранение Москва – Работа выполнена в ФГУ...»

«УДК 616.61-007.1-06:613-003.7 БЕШЛИЕВ Джемал Ахмедович ОПАСНОСТИ, ОШИБКИ, ОСЛОЖНЕНИЯ ДИСТАНЦИОННОЙ ЛИТОТРИПСИИ, ИХ ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА 14.00.40 – урология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва – 2003 Работа выполнена в Научно-исследовательском институте урологии Министерства здравоохранения Российской Федерации доктор медицинских наук, Научный консультант : профессор Н.К. Дзеранов доктор медицинских наук, Официальные оппоненты...»

«РОМАНОВА МАРИЯ ВИКТОРОВНА ОСОБЕННОСТИ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ГОЛОВОКРУЖЕНИЯ, НАРУШЕНИЯ РАВНОВЕСИЯ И УСТОЙЧИВОСТИ У БОЛЬНЫХ С ИШЕМИЧЕСКИМ ИНСУЛЬТОМ 14.01.11 – Нервные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2013 г. Работа выполнена в Государственном бюджетном учреждении здравоохранения Московской области Московский областной научно–исследовательский клинический институт им. М.Ф.Владимирского Научный руководитель : доктор...»

«Уфимцева Марина Анатольевна МОДЕЛЬ УПРАВЛЕНИЯ ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬЮ СИФИЛИСОМ В СОВРЕМЕННЫХ УСЛОВИЯХ 14.01.10 Кожные и венерические болезни Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Екатеринбург 2011 Работа выполнена в научно-организационном отделе ФГУ Уральский научноисследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации Научный консультант : доктор медицинских...»

«Ахвледиани Ника Джумберович ПРЕЖДЕВРЕМЕННОЕ СЕМЯИЗВЕРЖЕНИЕ: ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, ФАКТОРЫ РИСКА, ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук (14.01.23 – урология) МОСКВА - 2011 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Первый московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Научный консультант Член-корреспондент РАМН, доктор медицинских...»

«МУСАЕВА МЕХРИБАН ГУСЕЙН КЫЗЫ ОПТИМИЗАЦИЯ ПОДГОТОВКИ ПАЦИЕНТОКС БЕСПЛОДИЕМ ПРИ НЕУДАВШИХСЯ ПОПЫТКАХ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫХ РЕПРОДУКТИВНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ 14.00.01- Акушерство и гинекология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук МОСКВА 2009 2 Работа выполнена на кафедре акушерства, гинекологии, перинатологии и репродуктологии факультета первичной переподготовки врачей ГОУ ВПО Московская Медицинская Академия им. И.М. Сеченова Научный руководитель...»

«Бахтиарова Татьяна Игоревна ЛОКАЛЬНАЯ АНТИРЕВМАТИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ ХРОНИЧЕСКИХ АРТРИТОВ КОЛЕННЫХ СУСТАВОВ 14.01.22 Ревматология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Оренбург – 2013 2 Диссертация выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Ярославская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения Российской Федерации Научный руководитель : доктор медицинских...»

«ВАСИЛЕВСКАЯ ИРИНА ВАЛЕНТИНОВНА Отдаленные результаты операций протезирования митрального клапана в раннем детском возрасте (14.01.05. - кардиология) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва - 2012 г. 2 Диссертационная работа выполнена в Научном Центре сердечнососудистой хирургии им. А. Н. Бакулева РАМН. Научный руководитель : Доктор медицинских наук, профессор Шаталов Константин Валентинович Официальные оппоненты : Доктор...»

«Бисултанов Хизар Усманович Сравнительная эффективность применения отечественных костнопластических материалов при лечении пародонтита 14.01.14 - стоматология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Саратов-2013 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Саратовский государственный медицинский университет имени В.И. Разумовского Министерства здравоохранения Российской...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.