WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

Лингтхеп Мадхав

ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЭФФЕКТОВ МАКРОЛИДНЫХ

АНТИБИОТИКОВ НА ПАРАМЕТРЫ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА

(экспериментальное исследование)

14.00.16- патологическая физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва – 2008

Работа выполнена на кафедре общей патологии и патологической физиологии медицинского факультета Российского Университета дружбы народов.

Научный руководитель: доктор медицинских наук МУСТЯЦА Вадим Федорович

Официальные оппоненты: Профессор кафедры патофизиологии ММА имени И.М. Сеченова доктор медицинских наук профессор ВОЙНОВ Владимир Антипович Зав кафедрой физиологии РУДН доктор биологических наук, профессор ТОРШИН Владимир Иванович

Ведущая организация: Российский Государственный медицинкий университет.

Защита диссертации состоится «_15» октября 2008 года в «_13.00» часов на заседании специализированного диссертационного совета Д.212.203.06 в Российском Университете дружбы народов по адресу: 117198 Москва, ул. Миклухо–Маклая, д. 8, медицинский факультет.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Российского Университета дружбы народов по адресу: 117198 Москва, ул. Миклухо–Маклая, д. 6.

Автореферат разослан «_15» сентября 2008 года.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор Г.А. Дроздова

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Большое число экспериментальных данных и клинических наблюдений аргументированно свидетельствует о том, что антибиотики и химиопрепараты различных групп, наряду со специфическим противомикробным действием, характеризуются иммуномодулирующими эффектами, а также обладают выраженным регуляторным действием на функции клеток - эффекторов воспаления и различных медиаторов межклеточных взаимодействий (Белоусов Ю.Б., Шатунов С.М.,2001; Иванов Д.Д., Иванова Т.П., 2002; Giamarellos-Bourboulis EJ., 2008; Hatanaka Y et al., 2008; Kohyama T et al., 2008; Knyazhitskiy A et al., 2008;

Sanders JW et al., 2008).

Макролиды обладают высокой эффективностью и в то же время считаются одной из наиболее безопасных групп антибактериальных препаратов. Они представляют собой класс антибиотиков, основой химической структуры которых является макроциклическое лактонное кольцо, включающее от 12 до 17 атомов углерода, к которому присоединены один или несколько углеводных остатков в виде боковых цепей. В клинической практике применяются 14-, 15- и 16-членные макролиды.



Первый из макролидов - эритромицин - был получен в 1952 году из почвенного грибка Streptomyces erythreus (Gao X et al., 2007).

Возрастание интереса к макролидам и, соответственно, расширение сферы их применения произошло в последние годы после осознания клинического значения таких возбудителей, как микоплазмы, хламидии, кампилобактеры и легионеллы, а также поиска модуляторов воспалительной реакции (Gao X et al., 2007; Seithel A et al., 2007; Burrell RC, Walters JD et al., 2008; Chun-Han Chou and John D., 2008;

Giamarellos-Bourboulis EJ., 2008; Hatanaka Y et al., 2008; Kohyama T et al., 2008;

Knyazhitskiy A et al., 2008).

Все перечисленные факторы послужили стимулом, во-первых, для разработки и внедрения в клинику новых макролидных препаратов, близких по структуре к эритромицину и обладающих по сравнению с ним значительно улучшенными фармакокинетическими и микробиологическими параметрами, а также более благоприятным профилем переносимости и воздействия на параметры воспаления.

Во-вторых, последние годы характеризовались более детальным изучением некоторых новых макролидов, таких, например, как спирамицин.

Структурные особенности различных макролидов предопределяют прежде всего (1) различия в их фармакокинетических характеристиках, (2) особенности антибактериальной активности, (3) переносимости и (4) возможности взаимодействия с другими лекарствами. В то же время все макролидные антибиотики обладают одинаковым механизмом антимикробного действия и имеют в целом близкие спектры активности. Механизмы противовоспалительной активности также являются близкими, но тем не менее есть различия между 16-членными и другими макролидами.

Следует указать, что в результате исследований последних лет структура эритромицина представляется столь же потенциально неисчерпаемой для модификаций, как и структура пенициллина. Более того, производные эритромицина изучаются в настоящее время в самых неожиданных областях – при лечении ранних стадий атеросклероза и астмы, в области онкологии (вследствие влияния на рост опухолей, связанного с подавлением образования некоторых интерлейкинов), покрытия для стентов (Chun-Han Chou and John D., 2008; Giamarellos-Bourboulis EJ., 2008;

Hatanaka Y et al., 2008).

Недостаточное количество работ по изучению эффетов макролидов на компонеты воспалительной реакции, необходимость сравнительного анализа зависимости этих воздействий от химической структуры макролидов и неразработанность вопросов влияния макролидов на различных стадиях воспалительного процесса, послужили основанием для настоящего исследования. Более того, многочисленные исследования показали, что при различных стадиях и формах воспаления имеются выраженные различия нарушений функционального статуса воспалительных клеток (Merriam CV et al., 2006; Gao X et al., 2007), что определяет актуальность исследования различных звеньев эффекторной функции лейкоцитов при применении различных структурных форм макролидов как в острую, так и в хроническую стадию воспалительного процесса.





В связи с этим, а также с недостаточной разработаностью патофизиологической пробоемы “макролиды и воспаление”, целью настоящего исследования и задачами, поставленными для ее решения, явились следующие положения.

Цель исследования. Оценить эффекты макролидов различных химических модификаций на функциональное состояние фагоцитов (макрофагов и полиморфонуклеарных лейкоцитов), выраженность апоптоза нейтрофилов в динамике воспаления (воспроизведение III типа иммунопатологических процессов по Кумбсу и Джеллу - феномен Артюса-Сахарова).

Задачи исследования.

В соответствии с поставленной целью, в работе были поставлены и реализованы следующие задачи исследования:

- изучить влияние 14-, 15- и 16-членных макролидов на захват перитонеальными макрофагами тестового бактериального антигена и интенсивность хемотаксиса;

- иследовать влияние эритромицина, азитромицина и спирамицина на продукцию активных форм кислорода перитониальными макрофагами и нейтрофилами;

- исследовать влияние различных макролидных антибиотиков на интенсивность апоптоза полиморфонуклеаров;

- изучить особенности эффектов 14-, 15- и 16-членных макролидов в зависимости от стадии воспалительного процесса.

Решение данных задач проводили на разных стадиях развития воспалительной реакции: в острую стадию (2 недели) и стадию хронизации воспаления ( недели).

Научная новизна исследования. Впервые проведен комплексный сравнительный анализ эффектов 14-, 15- и 16-членных макролидов на параметры фагоцитоза макрофагов, хемотаксисическую активность перитонеальных макрофагов и продукцию активных форм кислорода макрофагов и нейтрофилов при терапевтическом использовании эритромицина, азитромицина и спирамицина в течение развития экспериментального воспаления (воспроизведение III типа иммунопатологических процессов по Кумбсу и Джеллу - феномен Артюса-Сахарова). Впервые в динамике воспалительного процесса продемонстрирован нормализующий эффект 14- и 15-членных макролидов (эритромицина и азитромицина) на показатели фагоцитоза и хемотаксической активности. Впервые в сравнительном исследовании проанализированы эффекты 14-, 15- и 16-членных макролидов на апоптоз полиморфонуклеаров и продукцию активных форм кислорода при иммунокомплексном воспалении. Проведен комплексный анализ исследуемых параметров реактивности фагоцитирующих клеток (гранулоцитов и перитонеальных макрофагов) в генезе воспалительного процесса, модулируемого 14-, 15- и 16-членными макролидами, что позволило выявить параметрические особенности иммуномодулирующих эффектов макролидов различной химической структуры.

Теоретическое и практическое значение работы.

Теоретическое значение полученных результатов состоит в характеристике патофизиологических закономерностей и механизмов реализации антивоспалительных и провоспалительных свойств 14-, 15- и 16-членных макролидов при инициации и хронизации воспалительного (иммунокомплексного) процесса. Модификация параметров захвата бактериального антигена макрофагами и изменение хемотаксиса, активность в продукции активных форм кислорода фагоцитарными клетками (макрофагами и нейтрофилами), а также показатели апоптоза нейтрофилов были теми параметрами, которые оказались модулируемые воздействиями 14-, 15- и 16-членных макролидов.

Существенная модификация 14-, 15- и 16-членными макролидами параметров захвата бактериального антигена макрофагами и хемотаксиса, продукции активных форм кислорода макрофагами и нейтрофилами, а также статистически достоверное влияние макролидов на апоптоз нейтрофилов позволяют установить характер и механизмы модуляции макролидами воспалительной реакциии, что является основой для разработки патофизиологически обоснованных лечебных мероприятий с учетом выявленных нарушений параметров реактивности фагоцитарных клеток и эффектов макролидных антибиотиков различных химических модификаций.

Положения, выносимые на защиту.

1. Вызываемые развивающимся иммунокомплексным локальным воспалением изменения фагоцитарной функции макрофагов (захват бактериального антигена) нормализуются при терапевтическом применении 14- и 15 -членных макролидов в оба исследуемых периода (острое воспаление и хронизация воспалительной реакции).

2. Эффекты эритромицина и азитромицина на кислородзависимые механизмы биоцидности фагоцитарных клеток (определяемые по измененным параметрам хемилюминисценции полиморфонуклеаров и НСТ-тесту у макрофагов) в острый период и период хронизации воспалительного процеса (4 недели) характеризуются однонаправленностью: достоверное снижение прооксидантной активности. Отличительным эффектом 15 -членных макролидов на образование активных форм кислорода макрофагами и нейтрофилов было усиление прооксидантной активности.

3. Терапевтическое применение 14- и 15 -членных макролидов в течение развития экспериментального воспаления (воспроизведение III типа иммунопатологических процессов по Кумбсу и Джеллу) позволяет восстановить нарушенные параметры апоптоза лейкоцитов как в остром периоде, так и в период хронизации воспалительного процесса.

4. Спирамицин (16-членный макролид) не оказывает влияние на параметры фагоцитоза тестируемого антигена макрофагами. В период хронизации воспалительного процесса происходит достоверное увеличение хемотаксической активности при применении 16-членного макролида.

Апробация работы. Результаты работы доложены на Международном симпозиуме «Эколого-физиологические проблемы адаптации», Москва, январь, г., Всероссийской научно-практической конференции «Современные проблемы артериальной гипертонии», Москва, апрель 2003г., на VIII Международном конгрессе «Здоровье и образование в XXI веке; концепция болезней цивилизации», Москва, 2007, на на заседании кафедры общей патологии и патологической физиологии Российского университета дружбы народов, Москва, 2008 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 работ.

Структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, методической главы, 3-х глав, в которых описаны результаты собственных исследований и проведено их обсуждение, заключения, выводов и списка литературы. Диссертация изложена на страницах машинописи, содержит рисунков и таблиц; библиография состоит из 304 отечественных и зарубежных источников.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты были поставлены на 57 самцах кроликов породы «шиншилла», массой 2.5 - 3 кг, из них 45 животным моделировался воспалительный процесс (феномен Артюса-Сахарова). Эритромицин, азитромицин и спирамицин в дозе 30 мг/кг веса давались per os в течение 2-х дней в острую стадию воспалительной реакции (2 дня в конце острого периода (2 недели) моделирования патологического процесса) и в стадию хронизации воспаления (4 недели). 10 кроликов составили контрольную группу. Интактным животным вместо антигена вводили физиологический раствор и затем в течение 2-х дней давали сответствующий макролид. Все перечисленные ниже исследования проводили до введения препарата и после введения 14-, 15- и 16-членных макролидов.

Методика моделирования феномена Артюса-Сахарова Воспалительный процесс вызывали путем моделирования в коже в области спины феномена Артюса – Сахарова, который широко используется для изучения патогенетических механизмов при развитии иммунокомплексного воспаления (Моисеева Е.Г., 2001; J.Saks,J.E.Messner, 2002,2003; V.Rodderman et al., 2000). Для моделирования феномена Артюса - Сахарова в кожу спины пятикратно с 4-х дневными интервалами между инъекциями вводилась нормальная лошадиная сыворотка в дозе 0.2 мл/кг. При такой методике происходило развитие некротического воспалительного процесса в коже: первоначальная гиперемия и отек сменялись некрозом и отторжением ткани.

В контрольной группе проводили введение физиологического раствора в те же анатомические области и временные промежутки.

Методы исследования функциональной активности макрофагов и нейтрофилов Фагоцитарную активность макрофагов оценивали по их способности к захвату и выведению меченной 14С- брюшнотифозной вакцины. Исследования проводили в суспензии культуры жизнеспособных перитониальных макрофагов, полученных путем промывания брюшной полости. Уровень радиоактивности измеряли на спектрометре (Beckman, США). Результаты выражали в импульсах/ мин./ мг белка.

Активность хемотаксиса исследовали в суспензии макрофагов в изотоническом растворе хлорида натрия с измерением оптической плотности на фотоэлектрокалориметре (=670 нм). Рассчитывали количество клеток в брюшной полости (по белку) на каждый данный момент исследования. Содержание белка выражали в мг в 1 мл клеточной суспензии.

Определение интенсивности продукции активных форм кислорода в макрофагах проводили методом, основанным на способности нитросинего тетразолия восстанавливаться кислородными радикалами до диформазана. Окислительную активность макрофагов выражали в единицах оптической плотности на мг белка.

Респираторный взрыв нейтрофилов исследовали методом хемилюминесценци (Luminometer, 1250, LKB, Швеция) после предварительной активации взрыва с применением формилметионил-лейцил-фенилаланина.

Для исследования апоптоза проводили выделение лейкоцитов с последующим их культивированием в среде RPMI-1640. Далее определяли концентрацию клеток и их жизнеспособность. Методом проточной цитометрии определяли долю клеток, проницаемых для суправитального красителя пропидиум иодида (процент погибших клеток). После экстракции ДНК и специфичного к ДНК флуоресцентного окрашивания идентифицировали апоптозные клетки как клетки с деградированным хроматином, расположенные в "субдиплоидном" пике ДНКгистограммы.

Статистическая обработка результатов исследования проводилась на персональном компьютере Pentium 200 по методу Стьюдента с помощью разработанной на кафедре патологической физиологии РУДН статистической программы. За достоверную принималась разность средних при p 0.05.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Важным достоинством большинства макролидов является то, что макролидные антибиотики способны проникать внутрь фагоцитарных клеток, таких как макрофаги, фибробласты, нейтрофилы, и с ними транспортироваться в воспалительный очаг. При этом, как это стало известно сравнительно недавно, макролиды могут модифицировать функцию “профессиональных” фагоцитов. Способностью аккумулироваться в фагоцитах обладают также некоторые другие антибиотики (фторхинолоны, клиндамицин, рифампицин), однако для макролидов характерны наиболее высокие соотношения концентраций между внутриклеточной средой и внеклеточным пространством (Bosnar M et al., 2005; Mascarenhas P et al., 2005;

Merriam CV et al., 2006). Поскольку азитромицин выделяется по своей эффективности среди других типов макролидов, анализ эффектов макролидов на фагоцитарную функцию макрофагов мы начинаем с 15- членных макролидов.

Представленные в таблице 1 данные показывают, что в динамике развития воспаления интенсивность фагоцитоза значительно повышается, особенно в первый период исследования (2 недели).

Показатели функциональной активности макрофагов при применении азитромицина в динамике воспалительной реакции Показатели Интенсивность (имп/мин/мг белка) Интенсивность хемотаксиса (мг белка/мл) Продукция активных форм кислорода (отн.ед) Примечание: здесь и далее жирным шрифтом выделены результаты, достоверно отличающиеся от контроля; подчеркнуты результаты лечения, достоверно отличающиеся при сравнении с результатами лечения.

Фагоцитарная активность макрофагов является достоверно повышенной и во втором периоде исследования (4 недели), хотя абсолютные цифры фагоцитоза тестирующего антигена снижаются в динамике хронизации, демонстрируя десенситизацию рецепторов фагоцитоза. Благодаря своим аккумулирующим макролиды свойствам, перитонеальные макрофаги модифицируют свою провоспалительную активность. Этот эффект мы наблюдали как в период острого воспаления, так и в период хронизации воспалительной реакции. После введения макролидного антибиотика азитромицина в первый период исследования (2 недели) отмечается достоверное снижение параметров фагоцитоза (происходило нарушений функции захвата бактериального антигена перитонеальными макрофагами). В следующий период исследования (4 недели) эффект макролида сопровождался достоверной стимуляцией функции фагоцитоза. Этот эффект можно объяснить, по-видимому, модуляцией рецепторной активности фагоцитов.

Эффекты 14-членного макролида эритромицина (таблица 2) на захват антигена макрофагами были менее выраженнымии, но с теми же различиями в тенденциях в острый и хронический периоды исследования (2 и 4 недели воспалительного процеса).

ПОКАЗАТЕЛИ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ МАКРОФАГОВ ПРИ

ВОСПАЛЕНИИ И ВВЕДЕНИИ ЭРИТРОМИЦИНА

Интенсивность (имп/мин/мг белка) Интенсивность хемотаксиса (мг белка/мл) «Кислородный взрыв» (отн.ед.) Результаты исседования 16-членного макролида (спирамицин) на параметры захвата антигена не выявили достоверных изменений параметров фагоцитоза.

Таким образом, на уровне захвата макрофагами тестируемого антигена, выявляются различия в действии различных химических модификаций макролидов (таблица 3).

ПОКАЗАТЕЛИ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ МАКРОФАГОВ ПРИ

ВОСПАЛЕНИИ И ВВЕДЕНИИ СПИРАМИЦИНА

(имп/мин/мг белка) хемотаксиса (мг белка/мл) взрыв» (отн.ед.) Снижение интенсивности хемотаксиса в первый период исследования при применении азитромицина сопровождается достоверным снижением процессов хемотаксиса и в период 4 недели и может рассматриваться как противовоспалительный феномен в условиях разнонаправленного изменения фагоцитарной функции макрофагов при введении азитромицина. Те же тенденции отмечаются и при использовании эритромицина, но эффект значительно слабее. Что касается спирамицина, то ситуация здесь другая: в 2-х недельный период терапия спирамицином не повлияла на параметры хемотаксиса, а в период 4 недели отмечалась достоверная активация хемотаксической активности макрофагов, что мжет усилить провоспалительный потенциал фагоцитарных клеток.

Важнейшей функцией макрофагов следует считать образование кислородных радикалов, мишенью которых являются как микрогорганизмы (кислородзависимый уровень микробоцидности), так и нормальные тканевые структуры. Полученные нами данные показывают, что в динамике воспалительного процесса пик образования активных форм кислорода в перитониальных макрофагах приходится на первый период исследования. Затем, по мере развития и хронизации патологического процесса, наблюдалось достоверное снижение радикальной (кислородные радикалы) активности фагоцитирущих клеток. Как и при исследовании эффектов различных модификаций макролидных антибиотиков на параметры хемотаксиса, эффетивность 14-членного макролида превосходила эффекты макролидов других химических модификаций (эритромицина и спирамицина). Воздействие азитромицина в первый период исследования привело к нормализации оксидантных характеристик фагоцитирующих клеток. Применение препарата в хроническую стадию процесса также выявило достоверное нормализующее воздействие азитромицина на параметры кислородного взрыва, однако степень выраженности эффекта была меньше. Эффективность 14-членного макролида эритромицина на прдукцию активных форм кислорода перитонеальными макрофагами была значительно ниже, а использование для лечения 16-членного макролида (спирамицин) вызывало достоверный рост продукции активных форм кислорода макрофагами в оба периода исследования.

Исследования последних лет демонстрируют, что изменения в процессах апоптоза иммунокомпетентных клеток могут быть значимым элементом локальных повреждений в тканях. Именно эти обстоятельства и побудили нас исследовать в качестве одного из показателей воспаления - апоптоз нейтрофилов. Значимость этого показателя (генетически детерминируемая гибель клеток) весьма велика. Активированные воспалением нейтрофилы с замедленным апоптозом дольше циркулируют в кровотоке и,следовательно, длительно переживают в тканях, повреждая нормальные тканевые структуры, поддерживая хронизацию воспалительного процесса.

Полученные нами данные свидетельствуют, что интенсивность апоптоза нейтрофилов снижена как в острую стадию воспалительной реакции, так и в период 4 недели. Введение азитромицина оказывает нормализующее влияние на апоптоз нейтрофилов, интенсивность которого повышается в оба исследуемых периода воспалительной реакции. Эффекты 14-членного макролида эритромицина и 16членного (спирамицин) характеризуются различными тенденциями: эритромицин действует по типу азитромицина, но с меньшей выраженностью, а спирамицин достоверно не влиял на пераметры генетически детерминируемой элиминации лейкоцитов (апоптоз).

АПОПТОЗ НЕЙТРОФИЛОВ И ПРОДУКЦИЯ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА

ПРИ ВОСПАЛЕНИИ И ВЛИЯНИИ АЗИТРОМИЦИНА

Интенсивность апоптоза ПМН (%) Продукция активных форм кислорода (отн.ед) Что касается продукции активных форм кислорода нейтрофилами (респираторный взрыв), то здесь мы отмечаем те же тенденции, которые были выявлены при исследовании перитонеальных макофагов: снижение прооксидантной активности при использовании азитромицина и эритромицина; важным результатом явилась также выявленная прооксидантная активность 16-членного макролида спирамицина.

АПОПТОЗ НЕЙТРОФИЛОВ И ПРОДУКЦИЯ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА

ПРИ ВОСПАЛЕНИИ И ВЛИЯНИИ ЭРИТРОМИЦИНА

апоптоза ПМН (%) Продукция активных форм кислорода (отн.ед) Таким образом, нами в настоящей работе был проведен анализ эффектов макролидных антибиотиков на различные стадии и компоненты воспалительного процесса исходя из различий их химической структуры, физико-химических параметров и фармакокинетических свойств. Оказалось, что новые генерации макролидов, более устойчивые к гидролизу в кислой среде желудка, а также обладающие различиями при связывании с белками плазмы крови и внутриклеточной аккумуляции в фагоцитирующих клетках, обладают различиями в противовоспалительной активности.

В настоящее время активно проводятся работы по новой химической модификации макролидов. Ведутся исследования по разработке новых препаратов, обладающих более широким спектром противовопалительного и антибактериального действия, эффективных против штаммов, устойчивых к “классическим” макролидам, ведется поиск менее токсичных соединений, обладающих более пролонгированным действием, большей биодоступностью, меньшим латентным периодом, что требует их дополнительного исследования в аспекте модуляции воспалительных маркеров. В ходе настоящего исследования выявлены определенные различия в эффектах на параметры воспалительной реакции различных химических модификаций макролидных атибиотиков, что представляет интерес в плане их дальнейшей структурной модификации.

В настоящем исследовании мы провели исследование модулирующих эффектов макролидов на базисные патофизиологические компоненты воспалительной реакции, а также выявили некоторые ограничения, связанные с применением 16членных макролидов, усиливающих прооксидантную активность макрофагов и полиморфонуклеаров.

В целом, представленный сравнительный анализ эффектов макролидов различной химической структуры с выраженной способностью накапливаться в тканях ретикулогистиоцитарной системы организма, оказывающих отчетливое воздействие на функции микро- и макрофагов, и специфика реакции клеток эффекторов воспалительной реакции (макрофагов и нейтрофилов) на 14-,15- и 16членные макролиды, отражают особенности противовоспалительных свойств макролидов, что должно учитываться в медицинской практике.

ВЫВОДЫ

1. При длительном и повторном (5-ти кратном) локальном введении антигена (моделирование иммунокомплексного типа воспалительной реакции) развивается воспалительный процесс, характеризующийся стадийностью, активацией кислородного метаболизма нейтрофилов и макрофагов, усилением хемотаксической функции и фагоцитарной активности макрофагов, достоверным снижением апоптоза полиморфонуклеаров; параметры воспалительной активации модулируются макролидами.

2. 14- и 15-членные макролиды, применяемые на различных стадиях развития воспалительной реакции (экспериментальное воспроизведение III типа иммунопатологических процессов по Кумбсу и Джеллу) оказывают модулирующий эффект на индуцируемые иммунными комплесами изменения фагоцитарной функции макрофагов (захват тестирующего бактериального антигена). Снижения фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов в острый период сменяется достоверной активацией фагоцитоза в отдаленный период (4 недели).

3. Терапевтическое использование 14- и 15-членных макролидов, применяемых на различных стадиях развития воспалительной реакции позволяет восстановить нарушенные параметры апоптоза нейтрофилов как в остром периоде, так и в период хронизации воспалительного процесса, что может способствовать уменьшению альтерации тканевых структур. При использоваии 16-членных макролидов (спирамицин), являющихся производными эритромицина, проявлятся только тенденция к снижению активности апоптозного процесса.

4. Под влиянием 14- и 15-членных макролидов происходит ингибирование окислительного "взрыва" и образования кислородных радикалов перитонеальными макрофагами и полиморфонуклеарными лейкоцитами как в острый так и хронический период развития воспалительного процесса. Спирамицин активирует прооксидантную активность фагоцитарных клеток.

5. Усиление процесов хемотаксиса перитонеальных макрофагов (локальные условия способности индуцировать хемотаксис фагоцитов), выявляемые на всех этапах исследования, нормализуются под влиянием 14- и 15-членных макролидов.

Результаты применения 16- членого макролида спирамицина характеризуются достоверным повышением хемотакической активности фагоцитов в период четыре недели (в острый период отмечена только тенденция к активации хемотаксиса).

6. Сравнительный анализ антивоспалительных эффетов 14- и 15-членных макролидов (модифицированная структура азитромицина по сравнению с эритромицином) демонстрирует большую активность 15-членных макролидных антибиотиков (фагоцитоз, образование кислородных радикалов, хемотаксис, апоптоз).

7. Патофизиологический анализ выявленной модификации 14-, 15-и 16- членными макролидами параметров захвата бактериального антигена макрофагами и хемотаксиса, продукции активных форм кислорода макрофагами и нейтрофилами, а также эффектов влияния макролидов на апоптоз нейтрофилов позволяют установить характер и механизмы модуляции воспалительной реакциии иммунокомплексного генеза, что является основой для уточнения терапевтических подходов с учетом выявленных изменений параметров резистентности и эффектов макролидных антибиотиков различных химических модификаций.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Анализ воспаления как причины развития метаболических нарушений и инсулинорезистентности // Вестник РУДН. - Сер. Медицина. – 2002. - № 3. – С. 6 – 10 (соавт. Пасечник А.В.,Фролов В.А., Кузовников А.Е., Моисеева Е.Г., Хоменко А.А., Гвоздь Н.Г., Мангасаров А.Г., Фатхи Н.Ф.).

2. Сравнительный анализ эффектов макролидов, статинов и нестероидных противовоспалительных препаратов при гипертензии, воспалении и холодовом стрессе. // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Современные проблемы артериальной гипертонии». – Москва, 2003. – с.156-158 (соавт. А.В. Пасечник, Н.Г. Гвоздь, Д.К.Льянова, Ф.Ю. Даурова, А.А.Пасечник, Е.Г.Моисеева).

3. Патогенез метаболических нарушений при патологии различного генеза // Мат. Всероссийской науч.–практ. конф. «Современные проблемы артериальной гипертонии». – М., 2003. – с.158–160. (соавт. А.В. Пасечник, А.Е. Кузовников, Н.Г. Гвоздь, Д.К.Льянова, Ф.Ю. Даурова, А.А.Пасечник, Е.Г.Моисеева).

4. Патогенетический анализ противовоспалительных и иммунорегуляторных свойств макролидов и(соавт. А.В. Пасечник, Н.Г. Гвоздь, Д.К.Льянова, Ф.Ю. Даурова, А.А.Пасечник, Е.Г.Моисеева). статинов при воспалении и холодовом стрессе. // Материалы ХI Международного симпозиума «Эколого-физиологические проблемы адаптации». – Москва, 2003. – с.408-409 (соавт. А.В.Пасечник, Н.Г.Гвоздь, А.А.Пасечник).


5. Патофизиологический анализ эффектов модуляторов воспаления (катехоламинов, статинов и нестероидных противовоспалительных препаратов) при моделировании современной патологии. // Мат. третьей международной конференции «Болезни цивилизации в аспекте учения В.И. Вернадского». – М., 2005. – С. 276–278. (соавт. Пасечник А.В., Гвоздь Н.Г., Илларионова Т.С., Льянова Д.К., Моисеева Е.Г., Бакулин А.А., 6. Функциональные параметры лейкоцитов в условиях измененного углеводного метаболизма. // Научные труды VIII Международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке; концепция болезней цивилизации». – Москва, 2007. – с.444-445 (соавт.

А.В.Пасечник, Г.А. Дроздова, Е.Г. Моисеева).

ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЭФФЕКТОВ МАКРОЛИДНЫХ

АНТИБИОТИКОВ НА ПАРАМЕТРЫ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА

В работе на модели иммунокомплексного воспаления исследованы функциональные параметры фагоцитоза макрофагов, апоптоз нейтрофилов и образование активных форм кислорода, а также хемотаксическую активность при применении 14-, 15- и 16-членных макролидных антибиотиков. Был проведен анализ патофизиологических закономерностей и механизмов реализации антивоспалительных и провоспалительных свойств 14-, 15- и 16-членных макролидов при инициации и хронизации воспалительного (иммунокомплексного) процесса. Модификация параметров захвата бактериального антигена макрофагами и изменение хемотаксиса, активность в продукции активных форм кислорода фагоцитарными клетками (макрофагами и нейтрофилами), а также показатели апоптоза нейтрофилов были теми параметрами, которые оказались модулируемые воздействиями 14-, 15и 16-членных макролидов. Существенная модификация 14-, 15- и 16-членными макролидами параметров захвата бактериального антигена макрофагами и хемотаксиса, продукции активных форм кислорода макрофагами и нейтрофилами, а также статистически достоверное влияние макролидов на апоптоз нейтрофилов позволяют установить характер и механизмы модуляции макролидами воспалительной реакциии, что является основой для разработки патофизиологически обоснованных лечебных мероприятий с учетом выявленных нарушений параметров реактивности фагоцитарных клеток и эффектов макролидных антибиотиков различных химических модификаций.

PATHOPHYSIOLOGICAL ANALYSIS OF EFFECTS MACROLIDE ANTIBIOTICS

ON PARAMETERS OF INFLAMMATORY PROCESS

LINGTHEP MADHAV

The influence of macrolide antibiotics on the indices of phagocytes was studied at the dynamic of IgG immune complex (IgG-ICx)-induced inflammation. The macrolide antibiotics have a variety of biological actions in addition to their antimicrobial properties.

Macrolides have been shown to effect several pathways of the inflammatory process, such as the different effect on the phagocytes, chemotaxis, oxidative burst in phagocytes and the apoptosis of leukocytes. 15-membered ring macrolide (azithromycin) has the most impressive effect: the decrease of prounflammatory properties of macrophages and leukocytes.

The action of 14-membered macrolide erythromycin is a little less. The 16-membered ring macrolide(spiramycin) caused the increase of oxidative burst in phagocytes in the chronic stage of inflammation.

There is increasing evidence that macrolide antibiotics have a variety of biological actions in addition to their antimicrobial properties. Macrolides have been shown to affect several pathways of the inflammatory process, such as the migration of neutrophils, the oxidative burst in phagocytes, and the production of proinflammatory cytokines. Although the precise mechanisms of these effects are not clear, it has been suggested that the interaction between macrolides and leukocytes may be important. In fact, macrolide antibiotics are able to accumulate into polymorphonuclear leukocytes, reaching intracellular concentrations far higher than those attained in the extracellular fluids. The results showed that the interacaction between macrolides and phagocytes may be important.



 


Похожие работы:

«КУРУМЧИНА ОЛЬГА БОРИСОВНА ОСОБЕННОСТИ КЛИНИЧЕСКОГО ТЕЧЕНИЯ И ДИАГНОСТИКИ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ ПОЛИНЕЙРОПАТИИ У БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА 14.01.04 – внутренние болезни 14.01.11 – нервные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Красноярск - 2010 Работа выполнена на кафедрах поликлинической терапии и семейной медицины с курсом ПО и медицинской генетики и клинической нейрофизиологии ИПО ГОУ ВПО Красноярский государственный...»

«Потапов Дмитрий Юрьевич Клинико-экспериментальное обоснование лигатурных методов гемостаза при резекции почки 14.01.23 - урология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Саратов - 2014 2 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования „Саратовский государственный медицинский университет имени В. И. Разумовского“ Министерства здравоохранения Российской Федерации. Научный...»

«ТОКАРЕВ Алексей Сергеевич Хирургическое лечение аневризм внутренней сонной артерии в остром периоде кровоизлияния 14.01.18 – Нейрохирургия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва, 2013 г. Работа выполнена в ГБУЗ научно-исследовательском институте скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента Здравоохранения г. Москвы Научный руководитель : Академик РАМН, доктор медицинских наук, профессор Владимир Викторович Крылов...»

«МАТРОСОВА МАРИНА ИГОРЕВНА ДИНАМИКА УРОВНЕЙ ПРОЛАКТИНА, ЭСТРАДИОЛА И ТЕСТОСТЕРОНА В ПРОЦЕССЕ АНТИПСИХОТИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ У БОЛЬНЫХ С ПЕРВЫМ ПСИХОТИЧЕСКИМ ЭПИЗОДОМ 14.01.06 – психиатрия (медицинские наук и) Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Москва – 2012 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении Московский научно-исследовательский институт психиатрии Министерства здравоохранения и социального развития...»

«НЕЧУШКИНА ВАЛЕНТИНА МИХАЙЛОВНА РАК ТЕЛА МАТКИ (ФАКТОРЫ ПРОГНОЗА И ТАКТИКА ЛЕЧЕНИЯ) 14.01.12 — онкология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва — 2014 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении Российский онкологический научный центр имени Н.Н.Блохина Российской академии медицинских наук (директор — академик РАН и РАМН, профессор Давыдов М. И.) Научный консультант : доктор медицинских наук, профессор...»

«Каменева Евгения Александровна ДИАГНОСТИКА И ИНТЕНСИВНОЕ ЛЕЧЕНИЕ ОСТРОГО РЕСПИРАТОРНОГО ДИСТРЕСС-СИНДРОМА У БОЛЬНЫХ С ТЯЖЕЛОЙ СОЧЕТАННОЙ ТРАВМОЙ 14.01.20 – Анестезиология и реаниматология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук МОСКВА - 2010 Работа выполнена в ГОУ ВПО Кемеровская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию, Учреждении РАМН НИИ общей реаниматологии им. В.А....»

«Кузнецова Юлия Николаевна МЕДИКО-СОЦИАЛЬНЫЕ АСПЕКТЫ ИНФЕКЦИЙ, ПЕРЕДАВАЕМЫХ ПОЛОВЫМ ПУТЕМ, В ПЕРИОД ФОРМИРОВАНИЯ РЕПРОДУКТИВНОГО ЗДОРОВЬЯ: АЛГОРИТМЫ ДИАГНОСТИКИ, ДИФФЕРЕНЦИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ И ПРОФИЛАКТИКИ 14.01.10 - кожные и венерические болезни Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Екатеринбург, 2013 Работа выполнена в научном клиническом отделе сифилидологии и инфекций, передаваемых половым путем, Федерального государственного бюджетного...»

«. На Бокучава Татьяна Анатольевна Длительная вентиляция барабанной полости при хирургическом лечении больных с хроническим гнойным средним отитом 14.01.03 – болезни уха, горла и носа АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Санкт-Петербург - 2010 Работа выполнена в Государственном учреждении здравоохранения Мурманская областная клиническая больница им. П.А.Баяндина и ФГУ Санкт-Петербургский НИИ уха, горла, носа и речи Росмедтехнологий Научный...»

«КНЯЗЬКИН Игорь Владимирович ЭКСТРАПИНЕАЛЬНЫЙ МЕЛАТОНИН В ПРОЦЕССЕ СТАРЕНИЯ 14.00.53 – геронтология и гериатрия Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Санкт-Петербург – 2008 Работа выполнена в отделе клеточной биологии и патологии Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии Северо-Западного отделения РАМН Научный консультант : доктор медицинских наук, профессор Кветной Игорь Моисеевич Официальные оппоненты : академик РАМН,...»

«Шутикова Анна Леонидовна ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЕ И АНТИОКСИДАНТНЫЕ СВОЙСТВА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ИЗ МОРСКИХ ГИДРОБИОНТОВ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ГЕРИАТРИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ 14.00.36 – Аллергология и иммунология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Владивосток – 2009 Работа выполнена в Государственном учреждении научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии Сибирского отделения Российской академии медицинских наук...»

«ЛЕВИТ Рита Моисеевна КЛИНИКО-ЭНДОСКОПИЧЕСКАЯ И МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ХРОНИЧЕСКОГО ГАСТРОДУОДЕНИТА, АССОЦИИРОВАННОГО С ИНФЕКЦИЕЙ ЭПШТЕЙНА – БАРР, В ДЕТСКОМ ВОЗРАСТЕ 14.01.08 – Педиатрия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Иваново 2011 Работа выполнена на кафедре факультетской педиатрии с пропедевтикой детских болезней Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования Ярославская...»

«ЦЫРЕНЖАПОВА Наталья Александровна ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА УСЛОВИЙ ПРЕБЫВАНИЯ И ВОСПИТАНИЯ ДЕТЕЙ В ДОШКОЛЬНЫХ ОБРАЗОВАТЕЛЬНЫХ УЧРЕЖДЕНИЯХ 14.02.01 – гигиена АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Иркутск – 2013 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Иркутский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации Научный руководитель :...»

«ЛЫСЕНКОВ ИВАН ИВАНОВИЧ НАУЧНОЕ ОБОСНОВАНИЕ СОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ ПО ВЫЯВЛЕНИЮ И УСТРАНЕНИЮ ФАКТОРОВ РИСКА ОСНОВНЫХ НЕИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ (на примере Республики Коми) 14.02.03 – общественное здоровье и здравоохранение АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Москва – 2014 Работа выполнена в Институте последипломного образования ГБОУ ВПО Кировская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения Российской...»

«ТЮРИН Александр Валерьевич РОЛЬ СОЦИАЛЬНО-ЭКОНОМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ В ФОРМИРОВАНИИ ЗДОРОВЬЯ НАСЕЛЕНИЯ ОРЕНБУРГСКОЙ ОБЛАСТИ 14.02.03 – Общественное здоровье и здравоохранение Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Оренбург – 2013 Работа выполнена на кафедре общественного здоровья и здравоохранения №2 государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования Оренбургская государственная медицинская...»

«ИВАНОВ Павел Анатольевич ЛЕЧЕНИЕ ОТКРЫТЫХ ПЕРЕЛОМОВ ДЛИННЫХ КОСТЕЙ КОНЕЧНОСТЕЙ У ПОСТРАДАВШИХ С МНОЖЕСТВЕННОЙ И СОЧЕТАННОЙ ТРАВМОЙ 14.00.22 – травматология и ортопедия Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва2009 Работа выполнена в Научно-исследовательском институте скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Москвы. Научный...»

«УДК 616.314 089.23: 617.521 ПОЛЬМА ЛЮДМИЛА ВЛАДИМИРОВНА Диагностика эстетических нарушений и планирование комплексной реабилитации пациентов с сагиттальными аномалиями окклюзии 14.00.21 – Стоматология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва, 2009 г. 2 Работа выполнена в ГОУ ВПО Московский государственный медикостоматологический университет Росздрава Научный консультант : Заслуженный деятель науки РФ, член-корреспондент РАМН, доктор...»

«САЛАСЮК Алла Сергеевна ОСОБЕННОСТИ ТЕЧЕНИЯ И МЕДИКАМЕНТОЗНОЙ ТЕРАПИИ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО СИНДРОМА У МУЖЧИН 14.01.04 Внутренние болезни Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Волгоград 2013 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Волгоградский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации доктор медицинских наук, профессор...»

«Супрунович Андрей Александрович ОТДАЛЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОЙ ИШЕМИИ ПОЧЕК, ВЫЗВАННОЙ ОККЛЮЗИОННО-СТЕНОТИЧЕСКИМ ПОРАЖЕНИЕМ ПОЧЕЧНЫХ АРТЕРИЙ 14.01.26 – сердечно-сосудистая хирургия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Санкт-Петербург 2012 Работа выполнена на кафедре госпитальной хирургии №1 Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования Санкт-Петербургский...»

«УЛУПОВ Михаил Юрьевич ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ НОВООБРАЗОВАНИЙ ЛОР-ОРГАНОВ (КЛИНИКО-ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ) 14.01.03 – болезни уха, горла и носа АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Санкт-Петербург 2012 Работа выполнена на кафедре оториноларингологии с клиникой Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени...»

«ЛУЗАНОВА Ирина Сергеевна Разработка и оптимизация методик определения s-, p-, dэлементов в биоматериалах при химикотоксикологических и медико-криминалистических исследованиях 15.00.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия 14.00.20 – токсикология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва 2008 1 Работа выполнена на кафедре фармацевтической и токсикологической химии медицинского факультета ГОУ ВПО Российский Университет дружбы...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.