WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

ШУРЫШЕВА

ЖАННА НИКОЛАЕВНА

ОЦЕНКА РИСКА ЗАГРЯЗНЕННОСТИ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ

БАКТЕРИЯМИ РОДА CAMPYLOBACTER

14.00.07. - Гигиена

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва – 2007

Работа выполнена в Государственном учреждении Научно-исследовательский институт питания Российской академии медицинских наук Научные руководители:

Доктор биологических наук, профессор, Заслуженный деятель науки и техники РФ Куваева Инна Борисовна Кандидат медицинских наук Шевелева Светлана Анатольевна

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор, Заслуженный деятель науки РФ Трухина Галина Михайловна Доктор медицинских наук, профессор Королев Алексей Анатольевич

Ведущая организация:

Государственное учреждение научно – исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи РАМН.

Защита состоится 16 апреля 2007г. В 1400 на заседании Диссертационного совета Д 001.002.01 в ГУ НИИ питания РАМН по адресу: 109240, г. Москва, Устьинский проезд, д.2/

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ НИИ питания РАМН

Автореферат разослан 16 марта 2007г.

Ученый секретарь Диссертационного совета Доктор биологических наук, профессор В.М. Коденцова

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ

Обеспечение микробиологической безопасности пищевых продуктов в отношении новых и вновь возникших возбудителей кишечных инфекций, таких как бактерии рода Сampylobacter, является актуальной проблемой гигиены питания. Это обусловлено значительным ростом заболеваемости кампилобактериозом, показатели которой в последние годы, в большинстве развитых стран, превысили таковые при сальмонеллезе [Kist M., 1985;

Altekruse S.F. et al., 1999; Oberhelman R.A. et al., 2000; Coker A.O. et al., 2002; Rautelin H. et По оценкам некоторых исследователей, al., 2000; Friedman J. et al., 2000].



кампилобактериозом ежегодно поражается 1% населения разных стран [Altekruse S.F. et al., 1999; On S.L.W. et al., 1998; Ketley J.M. et al., 1997; Wheeler J.G. et al., 1999], а предполагаемый экономический ущерб от него только в США составляет до 1,3 до 6, млрд.$ ежегодно [Fosthythe S.J., 2000].

В нашей стране, официально регистрируется незначительное число заболеваний кампилобактериозом однако, наблюдается рост кишечных инфекций с неустановленным возбудителем, число которых в 2005 г. достигло 66% [Роспотребнадзор, 1996-2006].

Значительную часть этих инфекций формируют термотолерантные, микроаэрофильные бактерии рода Campylobacter.

По данным зарубежных исследователей до 70% случаев кампилобактериоза связано с употреблением контаминированных пищевых продуктов и воды [Hunt Jan M. et al., 2001;

Многочисленные эпидемиологические исследования Vellinga A. et al., 2002].

идентифицировали употребление мяса птицы в качестве основного фактора риска при кампилобактериозе [Deming M.S. et al., 1987; Effler P. et al., 2001; Friedman C. et al., 2000;

Neal K.R. et al., 1995; Rodrigues L.C., et al., 2001; Neal K.R., et al., 1997; Eberhart-Phillips J. et al., 1997]. К потенциально опасным продуктам относят также сырое молоко, овощи, салаты [Rohrbach B.W. et al., 1992, Hudson P.J. et al., 1984; Evans M.R., 2003; Wanyenya I. et al., 2004].

Однако, точный вклад, который вносит употребление вышеуказанных продуктов, в заболеваемость кампилобактериозом не определен.

Недостаточно изученным остается влияние новых технологий упаковки (полимерная упаковка, модифицированная газовая среда) и различных факторов, оказывающих воздействие на продукт (охлаждение, замораживание) в процессе продвижения его к потребителю, на сохранность и биологические свойства возбудителя кампилобактериоза.

Недостаточно изучена взаимосвязь отдельных видов Campylobacter spp. с различными видами пищевых продуктов, значительно варьируются данные об уровнях инфицирующих доз [Evans M.R., 2003; Eberhart-Phillips J. et al., 1997; Friedman C.R. et al., 2004; Blaser M.J. et al., 1986; Black R.E. et al., 1988; Butzler J.P. et al., 1984].

Работ, посвященных изучению загрязненности пищевых продуктов Campylobacter spp., в нашей стране крайне мало. [Минаева Н.З., 1992; Порин А.А., 1990; Алабугина Т.В.,1998]. Имеющиеся данные не пригодны для оценки микробиологического риска, по причине использования авторами разных методических подходов к культивированию Campylobacter spp., не учитывающих специфику выделения их из пищевых продуктов, к тому же, они не предусматривают количественного определения кампилобактерий, что является обязательным для современной оценки микробиологического риска.

Вместе с тем, модель оценки микробиологического риска (ОМР) на современном этапе, признана наиболее эффективным подходом к управлению рисками и разработке мер направленной профилактики. Для ОМР необходимо иметь данные о загрязненности пищевых продуктов конкретными видами микроорганизмов, особенности биологических свойств возбудителей, наличии у них факторов патогенности, характере их взаимодействия с макроорганизмом, что позволяет оценить степень наносимого ими вреда для здоровья человека [Buchanan R.L., 2000; Lammerding A.M., 2000; Tirado K., 2005].





Работ, посвященных оценке риска загрязненности пищевых продуктов бактериями рода Campylobacter, в нашей стране до сих пор не выполнялось.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Цель исследования: оценить риск загрязненности пищевых продуктов бактериями рода Campylobacter.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи:

1. Адаптировать имеющиеся в международной практике культуральные методы обнаружения бактерий рода Сampylobacter в пищевых продуктах и разработать доступный для практических исследований метод выявления и количественного определения бактерий рода Сampylobacter в пищевых продуктах.

2. Изучить распространенность и количественное содержание бактерий рода Сampylobacter в мясе птицы и птицепродуктах (сырых и готовых у употреблению), сыром коровьем молоке.

3. Изучить видовые характеристики выделенных из пищевых продуктов штаммов Campylobacter spp., наличие у них маркеров антибиотикорезистентности и факторов патогенности.

4. В экспериментах на животных с пероральным введением бактерий рода Campylobacter изучить степень их вредного воздействия на макроорганизм в зависимости от дозы и биологических свойств возбудителя.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯ

Впервые в нашей стране получены данные по частоте загрязнения и количественному содержанию бактерий рода Сampylobacter в пищевых продуктах массового потребления.

Установлено широкое распространение Campylobacter spp. в птицепродуктах куриных сырых (37%) при невысоком количественном содержании (от 4 до 1100 КОЕ/100г, медиана – КОЕ/100г, 90% - 240 КОЕ/100г). Показано отсутствие кампилобактерий в пищевых продуктах, готовых к употреблению, в том числе, упакованных в пленочные оболочки и модифицированную газовую атмосферу, а также изготовленных в мелкорозничных предприятиях сети общественного питания быстрого обслуживания (салаты многокомпонентные с добавлением мяса птицы, куры – гриль, шаурма).

птицепродуктах куриных сырых.

Впервые охарактеризованы биологические особенности Campylobacter jejuni, выделенных из пищевых продуктов. Установлено, что все штаммы обладали устойчивостью к антимикробному препарату группы фторхинолонов (ципрофлоксацину). Сочетанной устойчивостью к двум и более антибактериальным препаратам обладали 90% штаммов.

Впервые обнаружена способность штаммов Саmpylobacter jejuni, выделенных из замороженных птицепродуктов, чаще (в 74%) формировать при культивировании морфологически измененные формы колоний (R-формы).

Обнаружено существенное (в 10 раз) снижение количества жизнеспособных клеток Саmpylobacter spp. в процессе морозильного хранения в течение 3 недель и более.

Установлено, что в пробах мяса и полуфабрикатов птицы, полученных из торговой сети и после манипуляций в быту (оттаивание, нарезка и повторное замораживание), частота обнаружения Сampylobacter spp. была в 2-4 раза ниже, чем в пробах, отобранных после окончания технологического процесса.

Установлено, что штаммы Саmpylobacter jejuni, выделенные из пищевых продуктов, находящихся в обороте, способны при пероральном введении обусловливать развитие кишечной инфекции у здоровых взрослых лабораторных животных (белых мышей).

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ И ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Разработаны методические указания «Методы выявления и определения бактерий рода Сampylobacter в пищевых продуктах». М: Роспотребнадзор, 2007 (в печати) Методические указания могут использоваться для исследования пищевых продуктов на соответствие требованиям безопасности, при расследовании вспышек пищевых отравлений и инфекций с пищевым путем передачи, а также при производственном контроле.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Результаты работы доложены на Восьмом всероссийском конгрессе «Оптимальное питание – здоровье нации» (Москва, 2005) и I Всероссийском съезде диетологов и нутрициологов «Диетология: проблемы и горизонты» (Москва, 2006), межлабораторной конференции ГУ НИИ питания РАМН (Москва, 2006).

ПУБЛИКАЦИИ

По результатам работы опубликовано 8 научных работ, в т.ч. 2 статьи в научном журнале, определенном ВАК Минобрнауки РФ.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ

Диссертационная работа изложена на 145 страницах машинописного текста, содержит 17 таблиц, 6 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 2-х глав собственных исследований, заключения, выводов и списка литературы, последний включает 291 источник, из них 247 иностранных авторов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалами для исследования служили образцы сырых и готовых к употреблению пищевых продуктов, выбор которых был обоснован их ролью в заболеваемости кампилобактериозом по данным научной литературы.

Всего было исследовано 189 проб пищевых продуктов массового потребления, в том числе птицепродуктов куриных сырых, охлажденных и замороженных – 113, молока коровьего сырого сборного – 25, готовых к употреблению мясо - и птицепродуктов промышленного изготовления – 11 и блюд общественного питания из (или с добавлением) мяса птицы – 40. Образцы птицепродуктов сырых были получены из птицефабрик Центрального региона РФ, СНГ (Белоруссия) и из торговой сети г. Москвы. Образцы молока получены из фермерских хозяйств Московской, Тверской и Ярославской областей. Образцы готовых к употреблению мясо - и птицепродуктов промышленного изготовления получены из торговой сети г. Москвы. Блюда общественного питания были отобраны в мелкорозничных предприятиях сети общественного питания быстрого обслуживания г.

Москвы ФГУЗ «Центром гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора.

Отбор проб осуществляли после окончания технологического процесса и на разных сроках хранения (в пределах сроков годности) в соответствии с установленными требованиями на отбор и подготовку проб для микробиологических исследований. Доставку образцов в лабораторию осуществляли в сумке-холодильнике. Время доставки не превышало Исследование проб на наличие бактерий рода Сampylobacter проводили культуральным методом посева, основанном высеве определенных количеств продукта в жидкие среды, содержащие антибиотики, аэротолерантные добавки и баранью кровь, предварительной инкубации их при 32°С или 37°С в течение 4 или 5 ч в зависимости от физического состояния проб (замороженные, охлажденные) - (предварительное обогащение), с последующей инкубацией при 42°С в течение 24 ч - (обогащение), пересевом на поверхность твердых селективных сред с инкубацией при 42°С в течение 24–48 ч.

Инкубацию осуществляли в микроаэробных условиях, которые создавали при помощи газогенераторных пакетов для кампилобактерий, которые после вскрытия помещали в микроанаэростат с посевами.

При росте типичных колоний проводили микроскопию мазков окрашенных по Граму и 5% карболовым фуксином Циля.

Чистую культуру идентифицировали по способности к росту при 25°С, продукции каталазы, оксидазы, гидролизу гиппурата, способности утилизировать углеводы и продуцировать сероводород и чувствительности к налидиксовой кислоте и цефалотину. Для идентификации также использовали тест – систему API CAMPY (ф. Биомерье), включающую 24 биохимических теста.

Определение количества Сampylobacter spp. проводили по методу определения наиболее вероятного числа (НВЧ), описанному в ГОСТ Р 51446-99 (ИСО 7218-96) «Продукты пищевые. Общие правила микробиологических исследований».

В работе использованы готовые основы питательных сред, селективные добавки антибиотиков для кампилобактерий, ростовая (аэротолерантная) добавка промышленного производства и стерильная баранья дефибринированная кровь.

При выполнении работы были использованы эталонные штаммы Campylobacter jejuni № 9 (получен в ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора) и Campylobacter jejuni № 11168NCTC (получен в ГНУ ВНИИВСГЭ Россельхозакадемии).

Для экспериментального заражения использовали суспензии C. jejuni шт.№9, стандартизованные по оптическому стандарту мутности на 10 ед. Контроль разведений осуществляли методом прямого посева: по 0,1 мл на поверхность агара Престон с добавлением 7% крови барана.

В качестве объекта заражения использовали стерильное мясное пюре, в которое вносили суспензии с расчетными концентрациями кампилобактерий, после чего пюре тщательно перемешивали с помощью стеклянной палочки, выдерживали в течение 0,5 ч при комнатной температуре и подвергали исследованию.

Гемолитические свойства культур Campylobacter spp. изучали на поверхности Колумбийского кровяного агара (с содержанием крови 7% по объему). Присутствие вокруг колоний зон полного и (или) неполного просветления среды с зеленоватым оттенком учитывалось как альфа-гемолиз.

Чувствительность к антибиотикам определяли диско – диффузионным методом с учетом рекомендаций по определению чувствительности кампилобактеров к антибактериальным препаратам [Пособие ЦНИИ эпидемиологии, 2001]. В работе использовали стандартные диски с антибиотиками 12 наименований (налидиксовая кислота, цефалотин, ципрофлоксацин, хлорамфеникол, тетрациклин, ампициллин, эритромицин, линкомицин, стрептомицин, гентамицин, имипинем), промышленного производства.

Способность Campylobacter spp. обуславливать кишечную инфекцию изучали на белых мышах линии BALB(C), массой 16-18 г. для заражения которых использовали двухсуточные агаровые культуры двух штаммов C. jejuni на физиологическом растворе.

Взвесь, содержащую определенную дозу микробных клеток, в количестве 0,1 мл однократно вводили в пищевод мышей при помощи автоматической пипетки с длинным мягким наконечником (tip,s).

За мышами осуществлялось ежесуточное наблюдение в течение 8 суток с ежедневным посевом фекалий на наличие Сampylobacter spp. На 14-й день у мышей была взята сыворотка, в которой определяли титр противокампилобактериозных антител в реакции объемной агломерации при помощи Диагностикума кампилобактерного антигенного полимерного сухого, производства ФГУЗ «Ростовский-на-Дону государственный научно исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора.

Полученные результаты обрабатывали методами вариационной и описательной статистики (среднее значение, стандартное отклонение, максимум, минимум, медиана, 90-й процентиль).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

1. Разработка метода выявления и количественного определения бактерий рода Сampylobacter в пищевых продуктах.

Разработка метода проведена в 3 этапа.

На 1 этапе проводили сравнительную оценку эффективности двух культуральных методов, используемых в международной практике для выделения Сampylobacter spp.: ИСO 10272 «Горизонтальный метод обнаружения термотолерантных кампилобактерий в пищевых продуктах и кормах для животных» и FDA* 2001 г. «Выделение бактерий рода Campylobacter из продовольствия и воды», при исследовании проб натурально контаминированных сырых замороженных.

В целях адаптации методов были проведены следующие модификации в составе питательных сред: лошадиную кровь, рекомендуемую ИСO и FDA, заменили бараньей дефибринированной, которая также обладает ростовыми и редуцирующими свойствами, кровь добавляли в среды в количестве 7% (по объему). Питательные среды по FDA (бульон Болтона, Abeyta-Hunt-Bark агар) заменили средами, содержащими равноценные количества пептона, мясного экстракта, но приготовленными из коммерчески доступных или легко воспроизводимых из отдельных компонентов основ питательных сред по стандарту ИСО (бульон Престона, агар Престона). В состав сред также были введены аэротолерантные добавки по составу аналогичные рекомендованным FDA (пируват Na, метабисульфит Na, железо (II) сульфат).

Результаты посевов птицепродуктов сырых, охлажденных и замороженных, методами ИСО и FDA с вышеуказанными модификациями питательных сред представлены в табл. 1.

*Управление по контролю за качеством пищевых продуктов и лекарственных препаратов (США) Как видно из табл. 1, частота обнаружения Campylobacter spp. при исследовании проб натурально контаминированных пищевых продуктов по методу FDA (23%) была в 1,8 раза выше, чем по методу ИСО (13%) за счет замороженных проб.

На 2-м этапе проведена оценка эффективности проведенных модификаций питательных сред и установление пределов чувствительности для каждого из таким образом минимальных доз контаминации) представлены в табл. 2.

Результаты выявления низких уровней кампилобактерий двумя методами из экспериментально зараженных продуктов.

FDA FDA

исследовании проб экспериментально контаминированных пищевых продуктов и позволяли обнаруживать менее 1 КОЕ/г кампилобактерий в продукте. В то же время, метод FDA обладал преимуществом в скорости роста колоний при наименьших дозах заражения и позволял получать результаты в более короткие сроки.

Результаты обоих этапов позволили обосновать преимущества метода FDA и целесообразность использования его схемы, как основы для воспроизведения метода определения количества кампилобактерий.

На 3-м этапе проведена оценка эффективности методов количественного определения Сampylobacter spp. в пищевых продуктах.

микроорганизмов: метода серийных разведений и НВЧ предпочтение отдали последнему, кампилобактерий. Так, он предусматривает обязательное предварительное обогащение исследуемых проб в жидких средах, кроме того, данные, полученные отдельными исследователями [Scherer K., 2006] подтверждают целесообразность использования метода НВЧ при низких уровнях обсеменения продукта Campylobacter spp. [Сакимбаева С.Д., 1985].

Это подтвердилось при исследовании проб экспериментально контаминированных различными дозами Campylobacter jejuni пищевых продуктов (табл. 3).

Результаты исследования модифицированным методом экспериментально Образцов количество (КОЕ/г) количество (КОЕ/г) открываемости Уровень открываемости проб при внесении Campylobacter jeiuni в концентрациях от 1,5х10 и до 0,98х101 КОЕ/г составлял более 100%.

Таким образом, проведенная работа по адаптации методов с заменой отдельных компонентов питательных сред на основе тождественности состава и их сравнительному анализу, позволила нам предложить метод выявления и количественного определения Campylobacter spp. в пищевых продуктах, представленный на рис. 1.

Рис. 1. Схема посева выявления и количественого определения Саmpylobacter spp в пищевых продуктах (FDA 2001 г, в нашей модификации).

(для замороженных и хранившихся 10дн. продуктов) из 25 г Метод основан на селективном обогащении в жидких питательных средах с последующим пересевом на поверхность твердых селективных сред, тождественных по составу питательным средам, используемым в международной практике (ИСО 10272), микроаэрофильном инкубировании посевов и определении количества по методу наиболее вероятного числа. Чувствительность метода составляет 0,04 КОЕ/1г продукта (отсутствие в 25 г).

Изучение видовой принадлежности и факторов патогенности штаммов Сampylobacter spp., выделенных из пищевых продуктов Видовая принадлежность Campylobacter spp.

Из изученных пищевых продуктов, всего было выделено 42 штамма Campylobacter spp., расширенная идентификация которых показала, что все они принадлежат к термофильному виду jejuni.

Источником всех выделенных штаммов являлись птицепродукты куриные, сырые.

Это подтвердило данные различных исследователей о преимущественной распространенности в птицепродуктах кампилобактерий именно этого вида [Geraldine D., 1997; Алабугина Т.В., 1998; Жакипбаева Б.Т., 1992].

У всех культур изучены характеристики, определяющие их устойчивость в пищевых продуктах и неблагоприятное поведение в организме.

Гемолитические свойства.

Исследования показали, что 37 из 42 (88%) штаммов, выделенных из продуктов обладали способностью к альфа - гемолизу, который, как известно, обусловливает вирулентность в макроорганизме. По частоте встречаемости вышеуказанный признак у исследованных нами «пищевых» штаммов совпадал с таковым у «клинических» изолятов [Пособие ЦНИИ эпидемиологии, 2001].

Способность к полиморфизму.

У 74% (14 из 19) штаммов, выделенных из замороженных птицепродуктов обнаружена способность формировать морфологически измененные формы колоний: Rформы (средние, до 2 мм в диаметре, неправильной формы, серые, полупрозрачные).

Большая часть штаммов, выделенных из охлажденных проб - 83% (19 из 23) формировали колонии, характерные для S-форм (мелкие - до 1,5 мм в диаметре, округлые, полупрозрачные с сероватым оттенком, гладкие, влажные).

технологического стресса.

Антибиотикорезистентность.

Установлено, что все штаммы С. jejuni, выделенные из пищевых продуктов, были устойчивы к антимикробному препарату фторхинолонового ряда – ципрофлоксацину: 95% (40 из 42) устойчивых и 5% (2 из 42) промежуточно-устойчивых. 90% (38 из 42) штаммов обладали устойчивостью к налидиксовой кислоте, 31% (13 из 42) к ампициллину и 5% (2 из 42) к тетрациклину. Сочетанной устойчивостью к двум и более антибактериальным препаратам обладали 90% (38 из 42) изученных штаммов, наиболее часто встречалась сочетанная устойчивость к налидиксовой кислоте и ципрофлоксацину – у 53% штаммов ( из 42); налидиксовой кислоте, ципрофлоксацину и ампициллину - 33% (14 из 42).

3. Изучение распространенности и количественного содержания Сampylobacter jejuni в пищевых продуктах.

Показатели контаминации кампилобактериями изученных пищевых продуктов отражены в табл. 4.

Частота обнаружения Саmpylobacter jejuni в пищевых продуктах.

Вид сырые Продукция промышленного изготовления употреблению Готовые к Продукция сети общепита (куры-гриль, Распространенность и количество Сampylobacter jejuni в пищевых продуктах варьировалось в зависимости от вида продуктов (сырые, готовые к употреблению), (птицеперерабатывающие предприятия, торговая сеть, быт).

Все штаммы Campylobacter jejuni были выделены из образцов птицепродуктов куриных, сырых, обсемененность которых в целом, составила 37% (42 из 113). Наиболее часто кампилобактерии обнаруживались в мясе, натуральных полуфабрикатах и субпродуктах птицы - 40% (35 из 87) и 35% (7 из 20) соответственно. Выявленная нами частота загрязненности птицепродуктов, в целом, согласуется с показателями, которые характеризуют аналогичную продукцию в США, странах Западной Европы, где частота обнаружения Сampylobacter spp. варьируется от 17,5% до 96% [Nannapaneni R. et al.,2005;

Geraldine D.,1997; Denis M. et al., 2001; Annuale Report, 2002].

Кампилобактерии не были выделены из проб рубленых полуфабрикатов и фарша из мяса птицы. Campylobacter spp. также не обнаружены ни в одной из исследованных проб сырого коровьего молока (25 проб). При этом, необходимо отметить, что все образцы исследованы в зимний период года, когда для термофильных кампилобактерий температурные условия окружающей среды неблагоприятны. Кроме того, в последние годы редко сообщается о положительных находках указанных бактерий в молоке [Демченко А.Г., 1995, Goak M., 2001].

В результате исследований кампилобактерии не были выделены из проб готовой продукции промышленного изготовления, в том числе упакованных в модифицированную газовую атмосферу, которая может способствовать сохранению микроаэрофильных бактерий. Готовые продукты и блюда общественного питания, в том числе салаты, в состав которых входило мясо птицы, также были свободны от вышеуказанных бактерий.

Полученные данные, подтверждают высокую чувствительность бактерий рода Campylobacter к технологическим приемам, используемым при промышленной и кулинарной обработке мяса птицы и соответственно их эффективность в отношении возбудителя кампилобактериоза [Moore J.E. et al., 2002; Elson R. et al., 2004; Evans M.R., 2003]. В то же время, учитывая сведения об обнаружении кампилобактерий в так называемых продуктах «фаст - фуда» и их роли как факторов передачи пищевых токсикоинфекций [QuinonesRamirez E.I. et al., 2000; Cardinale E. et al, 2003], контроль продуктов и блюд, подверженных высокому риску перекрестного загрязнения следует признать целесообразным.

Таким образом, полученные данные, показавшие отсутствие Campylobacter spp. в пищевых продуктах, готовых к употреблению, оставляют открытым вопрос о том, какова же реальная нагрузка указанными микроорганизмами на организм человека, что требует дальнейшего изучения показателей контаминации кампилобактериями таких продуктов.

Анализ частоты обнаружения кампилобактерий в птицепродуктах в различном охлажденных проб составила 41% (23 из 56), замороженных была ниже - 33% (19 из 57), что соотносится с данными зарубежных исследователей о снижении распространенности кампилобактерий в продуктах под влиянием замораживания [Annual Report, 2003].

Частота обнаружения Саmpylobacter jejuni в птицепродуктах охлажденных и вид охлажденные замороженные На рис. 2 представлены результаты анализа загрязненности птицепродуктов Сampylobacter jejuni, в зависимости от источника происхождения.

Наиболее высокий процент обнаружения данных бактерий был в мясе и натуральных Обсемененность кампилобактериями аналогичных продуктов, производимых в Центральном регионе России была почти в 2 раза ниже - 46% (11/24). Данный факт может быть обусловлен различиями в технологиях послеубойной обработки птицы, применяемых на разных перерабатывающих предприятиях. В целом же, частота обнаружения Campylobacter jejuni в птицепродуктах (мясе, полуфабрикатах и субпродуктах) на птицефабриках СНГ и Центрального региона России, была примерно одинакова – 54% (13 из 24) и 58% (18 из 31) соответственно. В пробах мяса и полуфабрикатов птицы, полученных из торговой сети и после манипуляций в быту, таких как оттаивание, нарезка и повторное замораживание, частота обнаружения Сampylobacter jejuni была в 2 - 4 раза ниже, чем в пробах отобранных после окончания технологического процесса, и составляла уже 23% (11 из 49), а в пробах мяса, полуфабрикатов и субпродуктов птицы - 19% (11 из 58). Снижению обсемененности указанных проб могли способствовать колебания температур в процессе хранения, а также дополнительный контакт возбудителя с кислородом, к которому он чрезвычайно чувствителен.

частота обнаружения (%) Количественные характеристики загрязненности исследованных проб отображены в табл. 6.

Количественное содержание Саmpylobacter jejuni в образцах птицепродуктов, Обнаруженные количества Сampylobacter jejuni в целом, были невысоки и в охлажденных пробах находились в пределах 15-1100 КОЕ/100г (медиана 43 КОЕ/100г, 90% КОЕ/100г), в замороженных пробах были еще ниже и находились в пределах 4- КОЕ/100г (медиана 9 КОЕ/100г и 90%-460 КОЕ/100г. Кампилобактерии не были обнаружены ни в одной из проб замороженных субпродуктов. Невысокое количественное содержание Campylobacter spp. в доброкачественных сырых птицепродуктах (от 20 до КОЕ/100г) отмечено в работах многих зарубежных авторов [Stern N.J. et al., 2003; Northcut J.K. et al., 2003; Keener K.M. et al., 2004].

Изучена динамика количественного содержания кампилобактерий в замороженных образцах на разных сроках хранения (табл. 7).

Влияние фактора хранения на количество Саmpylobacter jejuni в мясе и Срок от даты выработки Как видно, количество жизнеспособных клеток кампилобактерий, уменьшалось в раз при увеличении сроков хранения от 1 до 4 недель.

Таким образом, полученные количественные данные о низких уровнях содержания Саmpylobacter jejuni, которые являются представителями постоянных и многочисленных популяций кишечной микрофлоры домашней птицы, свидетельствуют о достаточно высокой эффективности технологий производства и переработки птицы на птицеперерабатывающих предприятиях. Но в то же время, широкая распространенность кампилобактерий (до 93% исследованных проб), говорит о высокой степени частоты перекрестного обсеменения, которое, как правило, является следствием нарушения технологических и санитарных режимов при переработке птицы и характеризуется низкими уровнями микробной загрязненности [Lammerding A.M., 2000].

4. Воспроизведение кишечной инфекции, вызванной бактериями рода Сampylobacter в эксперименте на белых мышах.

Степень вредного воздействия на организм Campylobacter jejuni изучена в эксперименте in vivo на белых мышах при пероральном введении штаммов, не проявлявших признаков полиморфизма, имеющих различные характеристики антибиотикоустойчивости и гемолитической активности (C. jejuni № 53к из охлажденной печени птицы, устойчивый к налидиксовой кислоте, ципрофлоксацину и ампициллину, гемолитический; C. jejuni № 11168-1/NCTC из организма птицы, чувствительный к антибиотикам, негемолитический).

Показана способность штаммов Campylobacter jejuni, переживших технологическую обработку при забое птицы (обработка острым паром, охлаждение), обусловливать кишечную инфекцию у здоровых, взрослых животных при пероральном поступлении.

Также выявлены достоверные различия в патогенности антибиотикоустойчивого и антибиотикочувствительного штамма, которые свидетельствовали о большей опасности в антибиотикорезистентностью. Повышенная патогенность проявлялась в большем количестве заболевших животных и животных с выраженной клиническими признаками (диареей), увеличении продолжительности диареи и кишечной колонизации, что отражено на рис. 3, 4, 5. Минимальная инфицирующая доза для взятых в опыт здоровых взрослых мышей, обусловившая развитие диареи, у антибиотикоустойчивого штамма была на порядок ниже, чем у антибиотикочувствительного и составила 1х106 КОЕ. Эти результаты подтвердились результатами иммунологических исследований, которые показали нарастание титра противокампилобактериозных антител в сыворотке крови зараженных мышей.

Рис. 3. Частота возникновения заболеваний среди животных в зависимости от штамма и вводимой дозы.

Рис. 4. Частота возникновения диареи среди животных в зависимости от штамма и вводимой дозы.

Рис. 5. Продолжительность диареи у животных в зависимости от штамма и вводимой дозы.

Таким образом, высокая частота контаминации птицепродуктов, реализуемых населению, бактериями рода Campylobacter, наличие у них выраженных патогенных свойств, а также не до конца изученные механизмы инфицирования готовых к употреблению продуктов, обусловливающих пищевые токсикоинфекции кампилобактерной природы, подтверждает необходимость усовершенствования мер ветеринарного и гигиенического характера, направленных на предотвращение перекрестной контаминации кампилобактериями и снижение их распространенности в продуктах, а также на организацию контроля за их выполнением.

ВЫВОДЫ

1. Разработан метод выявления и количественного определения Campylobacter spp. в пищевых продуктах, основанный на селективном обогащении в жидких питательных средах с последующим пересевом на поверхность твердых селективных сред, гармонизированных по составу питательным средам, используемым в международной практике (ИСО 10272), микроаэрофильном инкубировании посевов и определении количества по методу наиболее вероятного числа. Чувствительность метода составляет 0,04 КОЕ/г продукта (отсутствие в 25 г).

2. Впервые проведен анализ частоты обнаружения и количественного содержания бактерий рода Campylobacter в пищевых продуктах массового потребления (птицепродукты куриные сырые; молоко коровье, сырое; готовые к употреблению мясо- и птицепродукты промышленного производства; блюда общественного питания). Кампилобактерии обнаружены в 37% проб птицепродуктов сырых с уровнем обсемененности от 4 КОЕ/100г до 1100 КОЕ/100г (медиана – 15 КОЕ/100г, 90% - 240 КОЕ/100г). В готовых к употреблению пищевых продуктах из (или с добавлением) мяса птицы, прошедших кулинарную или промышленную обработку, в том числе упакованных в модифицированную газовую атмосферу, бактерии рода Campylobacter не обнаружены.


3. Установлена высокая частота контаминации бактериями рода Сampylobacter мяса и полуфабрикатов птицы, поступающих по импорту из стран СНГ (93% проб); обсемененность аналогичной продукции отечественного производства не превышала 46%.

Распространенность Саmpylobacter spp. в птицепродуктах снижалась в 2 - 4 раза в процессе оборота в торговой сети и после манипуляций в быту (размораживание, нарезка).

Кампилобактерии чаще (в 41%) выделялись из птицепродуктов охлажденных, с уровнем обсемененности от 15 до 1100 КОЕ/100г (медиана 43 КОЕ/100г, 90% - 160 КОЕ/г), чем из замороженных (в 33%) с уровнем обсемененности от 4 до 1100 КОЕ/100г (медиана КОЕ/100г, 90% - 460 КОЕ/г). Обнаружено существенное (в 10 раз) снижение количества жизнеспособных клеток Саmpylobacter spp. в процессе морозильного хранения в течение недель.

4. Обнаружено, что все штаммы бактерий рода Саmpylobacter, выделенные из изученных птицепродуктов, принадлежали к термофильному виду Саmpylobacter jejuni.

5. Впервые изучены биологические особенности Campylobacter jejuni, выделенных из пищевых продуктов. Установлено, что 95% штаммов обладали устойчивостью к антимикробному препарату группы фторхинолонов (ципрофлоксацину). Сочетанной устойчивостью к двум и более антибактериальным препаратам обладали 90% штаммов.

птицепродуктов, чаще (в 74%) формировали при культивировании морфологически изменчивости кампилобактерий.

6. Саmpylobacter jejuni, выделенные из пищевых продуктов, способны обусловливать развитие кишечной инфекции у лабораторных животных (белых мышей). Более выраженной антибиотикорезистентный штамм. Минимальные концентрации, обусловливающие развитие диарейного синдрома, для антибиотикоустойчивого штамма составляли 1х106 КОЕ (у 60% животных), для антибиотикочувствительного 1х107 КОЕ (у 20% животных) при наличии достоверных различий в интенсивности иммуного ответа, продолжительности интоксикации, диареи и кишечной колонизации.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Разработанные методические указания «Методы выявления и определения бактерий рода Campylobacter в пищевых продуктах» М: Роспотребнадзор, 2007 (в печати) рекомендуются для использования в системе Роспотребнадзора, а также при проведении производственного контроля.

Список опубликованных работ по теме диссертации 1. Шевелева С.А., Ефимочкина Н.Р., Шурышева Ж.Н. Проблемы и задачи изучения пищевого кампилобактериоза в Российской Федерации.// Материалы Международной научно-практической конференции «Национальная политика здорового питания Республики Казахстан».- Алматы, 2004.- с.259-260.

2. Шурышева Ж.Н. Методические проблемы изучения загрязненности пищевых продуктов бактериями рода Campylobacter.// Материалы Пленума научного совета по экологии человека и гигиене окружающей среды РАМН и Минздрава и соцразвития Российской Федерации.- М., 2004.- с.54-55.

3. Шурышева Ж.Н., Шевелева С.А. Мониторинг загрязненности пищевых продуктов бактериями рода Campylobacter.// Материалы конференции «Питание здорового и больного человека».- Санкт-Петербург, 2005.- с.220-221.

4. Шурышева Ж.Н. Методические вопросы изучения загрязненности пищевых продуктов бактериями рода Campylobacter.// Материалы Всероссийской научнопрактической конференции молодых ученых и специалистов «Окружающая среда и здоровье».- Суздаль, 2005.- с 309-310.

5. Шурышева Ж.Н. Оценка распространенности и количественного содержания бактерий рода Campylobacter в пищевых продуктах.// Материалы VII Всероссийского конгресса «Оптимальное питание-здоровье нации».- М., 2005.- с. 297.

6. Шевелева С.А., Шурышева Ж.Н., Пискарева И.И. Загрязненность пищевых продуктов бактериями рода Campylobacter.// Вопросы питания.-2006.- №6.- с.38–44.

распространенности и количественного содержания бактерий рода Campylobacter в пищевых продуктах.// Вопросы питания.-2006.- №6.- с.44–51.

8. Шурышева Ж.Н. Антибиотикорезистентность Campylobacter jejuni, выделенных из пищевых продуктов.// Материалы Всероссийского съезда диетологов и нутрициологов «Диетология – проблемы и горизонты».- М., 2006.- с. 132.



 


Похожие работы:

«Питиримова Ольга Александровна ПРИНЦИПЫ ВЕДЕНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ И РОДОВ У ЖЕНЩИН СО СЛОЖНЫМИ ФОРМАМИ НАРУШЕНИЯ СЕРДЕЧНОГО РИТМА Акушерство и гинекология - 14.00.01 Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва 2008 2 Работа выполнена в Перинатальном кардиологическом центре Научного Центра сердечно-сосудистой хирургии им. А.Н. Бакулева РАМН, родильном отделении ГКБ № 67 г. Москвы Научные руководители: Доктор медицинских наук, профессор, В....»

«Воробьева Ольга Алексеевна МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НЕАМИЛОИДНОЙ ФОРМЫ ОТЛОЖЕНИЯ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ В ПОЧКАХ 14.00.15 – патологическая анатомия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Санкт-Петербург 2006 2 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении дополнительного профессионального образования Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования Федерального агентства по...»

«Ус т ю ж а н и н о в В а л е р и й Н и к о л а е в и ч КЛИНИКО-ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МИКСТ-ГЕПАТИТА А+В 14.00.10 – Инфекционные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2006 -2 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Кировская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Научный руководитель :...»

«МИРЗОЕВ НАТИГ МАЛИК-ОГЛЫ МИНИИНВАЗИВНОЕ ШУНТИРОВАНИЕ КОРОНАРНЫХ АРТЕРИЙ НА РАБОТАЮЩЕМ СЕРДЦЕ С ТОРАКОСКОПИЧЕСКОЙ УЛЬТРАЗВУКОВОЙ МОБИЛИЗАЦИЕЙ ВНУТРЕННИХ ГРУДНЫХ АРТЕРИЙ (экспериментальное исследование) /14.01.26 – сердечно-сосудистая хирургия/ АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2010 2 Работа выполнена в Научном Центре сердечно-сосудистой хирургии им. А.Н. Бакулева РАМН. Научные руководители: Бокерия Лео Антонович Академик...»

«Нагорный Андрей Владимирович КОМПЛЕКСНЫЙ ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ИЗМЕНЕНИЙ ПОСЛЕДА ПРИ ГИПОТИРЕОЗЕ И ЛАТЕНТНЫХ ИНФЕКЦИЯХ 14.00.15 – патологическая анатомия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Волгоград - 2006 Работа выполнена в ГОУ ВПО Белгородский государственный университет Федерального агентства по образованию РФ Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор Павлова Татьяна Васильевна доктор медицинских наук,...»

«Давидян Юлия Рубеновна “Детекция и мониторинг специфической реаранжировки генов иммуноглобулинов в процессе лечения острых лимфобластных лейкозов”. 14.00.29 - Гематология и переливание крови АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва, 2007 2 Работа выполнена в Государственном учреждении Гематологический Научный центр Российской Академии Медицинских Наук Научный руководитель : доктор медицинских наук Е.Н. Паровичникова Официальные...»

«МАРЕНИНА ТАТЬЯНА ВАЛЕРЬЕВНА ОСОБЕННОСТИ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ И ВАЗОРЕАКТИВНОСТИ У БОЛЬНЫХ ПОЖИЛОГО ВОЗРАСТА С СОЧЕТАНИЕМ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА И СА ХАР Н О Г О ДИ АБ Е ТА 2 ТИ П А. В О ЗМ О ЖН О С ТИ КО Р РЕ КЦ И И 14.00.06 – кардиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Томск - 2009 1 Работа выполнена в ГОУ ВПО Сургутский государственный университет ХМАО-Югры Научный руководитель : доктор медицинских наук, профессор...»

«ТУТАЕВА ВИКТОРИЯ ВЛАДИМИРОВНА ЗНАЧЕНИЕ НОВЫХ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МАРКЕРОВ В ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГОНСТИКЕ ЭРИТРЕМИИ И ВТОРИЧНОГО ЭРИТРОЦИТОЗА. Специальность 14.00.29. – гематология и переливание крови Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва 2006 год 2 Работа выполнена в государственном некоммерческом учреждении Гематологический научный центр Российской академии медицинских наук Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор Н.Д....»

«ХОЛОДОВИЧ Ольга Владимировна ПРИМЕНЕНИЕ ЭНДОГЕРМЕТИКОВ НА ОСНОВЕ ПОЛИДИМЕТИЛСИЛОКСАНА В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМИ ФОРМАМИ ПУЛЬПИТА 14.01.14 – Cтоматология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Воронеж – 2011 2 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко Министерства здравоохранения и...»

«ЧУЛАНОВ Владимир Петрович ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ И КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ГЕТЕРОГЕННОСТИ ВИРУСОВ ГЕПАТИТА А И В 14.02.02 – эпидемиология 14.01.09 – инфекционные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва – 2013 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки Центральный научноисследовательский институт эпидемиологии Роспотребнадзора НАУЧНЫЙ КОНСУЛЬТАНТ: доктор медицинских наук, академик РАМН, профессор...»

«Островский Леонид Рафаилович ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СВЕТОПРОВОДЯЩИХ НАСАДОК (СН-1, СН-2) К УСТРОЙСТВУ ЛОКАЛЬНОГО ОБЛУЧЕНИЯ КРАСНЫМ СВЕТОМ В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ПРОТЕЗНОГО ЛОЖА В КЛИНИКЕ ОРТОПЕДИЧЕСКОЙ СТОМАТОЛОГИИ Специальность: 14.01.14 – Стоматология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Воронеж – 2011 1 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего...»

«ТОКМАКОВА Ольга Геннадьевна ИЗМЕНЕНИЯ СОСТОЯНИЯИММУННОЙСИСТЕМЫ ДЕТЕЙ ПОД ВЛИЯНИЕМ НЕБЛАГОПРИЯТНЫХ ФАКТОРОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ И ВОЗМОЖНЫЕ ПУТИ ИХ КОРРЕКЦИИ 14.00.36 Аллергология и иммунология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Пермь-2003 Работа выполнена в лаборатории экологической иммунологии Института экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН, Пермь Научный руководитель : кандидат медицинских наук, доцент Бахметьев Б.А....»

«Покровская Ольга Станиславовна КРОВЕТВОРНАЯ ТКАНЬ И СТРОМАЛЬНОЕ МИКРООКРУЖЕНИЕ В ПРОЦЕССЕ ИНТЕНСИВНОЙ ТЕРАПИИ И МОБИЛИЗАЦИИ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК У БОЛЬНЫХ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМОЙ 14.01.21 – Гематология и переливание крови АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва-2011 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении Гематологический научный центр Министерства здравоохранения и социального развития...»

«ВАРТАНЯН ЭММА ВРАМОВНА ПРЕОДОЛЕНИЕ ПОВТОРНЫХ НЕУДАЧ ВРТ 14.01.01- акушерство и гинекология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва 2011 1 Работа выполнена на кафедре акушерства и гинекологии с курсом перинатологии ГбОУ ВПО Российский университет дружбы народов и Клиники вспомогательных репродуктивных технологий Дети из пробирки. Научный консультант заведующий кафедрой акушерства и гинекологии с курсом перинатологии ГБОУ ВПО РУДН...»

«Барашков Никита Сергеевич Клинико-экономические аспекты острых нарушений мозгового кровообращения у больных с артериальной гипертензией 14.01.11 – нервные болезни Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Ульяновск–2010 2 Работа выполнена на кафедре неврологии, нейрохирургии, физиотерапии и ЛФК Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Ульяновского государственного университета Федерального...»

«Шавырин Дмитрий Александрович ДИАГНОСТИКА И ХИРУРГИЧЕСКОЕ ЛЕЧЕНИЕ ОПУХОЛЕЙ И ОПУХОЛЕПОДОБНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ КОСТЕЙ, ОБРАЗУЮЩИХ КОЛЕННЫЙ СУСТАВ, У ВЗРОСЛЫХ 14.01.15 – травматология и ортопедия Автореферат на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва – 2014 Работа выполнена в ФГБУ Центральный научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии имени Н.Н. Приорова Минздрава России. Научный консультант : Доктор медицинских наук, профессор Балберкин Александр...»

«КАШИНЦЕВ Алексей Ариевич ЗНАЧЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНО – ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ В ДИАГНОСТИКЕ И ЛЕЧЕНИИ РАКА ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 14.01.12 – онкология 14.01.17 – хирургия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Санкт-Петербург – 2014 Работа выполнена в государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Санкт-Петербургский Государственный педиатрический медицинский университет Министерства здравоохранения...»

«Ворона Юрий Сергеевич ПРИМЕНЕНИЕ МЕМБРАН АУТОПЛАЗМЫ, ОБОГАЩЕННОЙ ТРОМБОЦИТАМИ, С ЦЕЛЬ Ю НАПРАВЛЕННОЙ РЕГЕНЕРАЦИИ ТКАНЕЙ В ОБЛАСТИ ГЛОТОЧНЫХ ШВОВ ПОСЛЕ ОПЕРАЦИЙ НА ГОРТАНИ, ГЛОТКЕ И ПОЛОСТИ РТА 14.01.17 – хирургия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Курск – 2014 1 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Курский государственный медицинский университет Министерства...»

«Майская Марина Юрьевна Патоморфогенез экспериментального криптококкоза головного мозга 14.00.15 – патологическая анатомия 03.00. 24 – микология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Санкт – Петербург 2007 2 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении дополнительного профессионального образования Санкт- Петербургская медицинская академия последипломного образования Федерального агентства по здравоохранению и...»

«Саламадина Галина Евгеньевна Органосберегающее лечение миомы матки с использованием метода дистанционной неинвазивной деструкции магнитнорезонансно-контролируемым сфокусированным ультразвуком 14.01.01 – Акушерство и гинекология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва - 2011 Работа выполнена в отделении рентгенорадиологической диагностики, рентгенохирургии и малоинвазивных методов лечения ФГУ Научный центр акушерства, гинекологии и...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.