WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

УДК 615.32: 577. 161. 036.8: 591.148

На правах рукописи

КАЗБЕКОВА АЙНАГУЛЬ ТАЛГАТОВНА

Исследование антиоксидантной и гепатопротекторной активности масла

тополя бальзамического и экстрактов березы повислой

14.00.25 – фармакология, клиническая фармакология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Республика Казахстан Астана, 2009

Работа выполнена на кафедре биохимии АО «Медицинский университет Астана» и лаборатории химии фенольных и стероидных соединений АО «Научно–производственный центр «Фитохимия».

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Мухамбетов Д.Д.

Научный консультант: доктор химических наук, профессор Поляков В.В.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Мусин М.Н.

кандидат медицинских наук, доцент Кусаинова Д.Д.

Ведущая организация: Карагандинский государственный медицинский университет

Защита диссертации состоится «17» октября 2009 года в «1200» часов на заседании диссертационного совета Д 53.47.05 при Национальном центре биотехнологии Республики Казахстан по адресу: 010000, г. Астана, ул. Валиханова, 43.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Национального центра биотехнологии РК по адресу: 010000, г. Астана, ул. Валиханова, 43.

Автореферат разослан « » сентября 2009 года Учёный секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор Б.А. Ермекбаева

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы Казахстан обладает богатыми запасами растительных ресурсов, а в практической медицине используется лишь только малая их часть. В связи с этим весьма актуальна задача разработки и внедрения в производство фитопрепаратов. Лекарственные растения используются для профилактики и лечения многих заболеваний. Известно, что лечебные свойства растения зависят от наличия в них алкалоидов, глюкозидов, сапонинов, кумаринов, жиров, белков, углеводов, ферментов и других классов органических веществ.

Для изучения биологической активности особый интерес представляют полифенольные соединения, широко распространенные в растительном мире. В ряду таких соединений важное место занимают флавоноиды, среди которых установлены вещества с противоопухолевым, антивирусным, противомикробным действиями, что позволяет их рассматривать как потенциальный источник в поиске фитопрепаратов (Поляков В.В., 2007).

В этом плане тополь бальзамический и береза повислая, широко распространенные на территории Казахстана, привлекают особое внимание исследователей в качестве источника флавоноидов (Рахимов К.Д., 2004;

Адекенов С.М., 2005). Флавоноиды являются биологически активными соединениями, проявляющими Р-витаминную активность и способность восстанавливать нарушенную проницаемость капилляров. Они находят широкое применение при лечении сердечно-сосудистых заболеваний, а также могут использоваться как противоязвенные и спазмолитические средства.

Следует отметить их гепатотропные свойства, используемые при лечении гепатитов и цирроза печени (Шайдаров М.З., 2006). Широкий спектр биологической активности и малая токсичность флавоноидов, отсутствие аллергизирующих и кумулятивных свойств позволяет рассматривать их как перспективный источник для практического использования в медицине.

Многие патологические состояния организма связаны с процессами перекисного окисления липидов (ПОЛ) (Владимиров Ю.А., 1972). В частности, усиление ПОЛ приводит к нарушению структурных и фундаментальных свойств биомембран, повреждению белков, нуклеиновых кислот, а продукты ПОЛ могут оказывать негативное влияние на организм.

При патологических состояниях организма дисбаланс может регулироваться природными и синтетическими антиоксидантами (Ricе-Evans C.A., Diplock A.T., 1993; Aruoma O.I., 1998). Доказано, что флавоноиды обладают способностью нейтрализовать активные формы кислорода и обрывать цепные реакции, образовывая комплексные соединения с ионами железа (Schneider I., Bucar F., 2005). Для защиты от избыточной интенсивности ПОЛ в организме существует система антиоксидантов (АО), к которым относятся токоферол, глютатион, внутриклеточные ферменты супероксиддисмутаза, каталаза, внеклеточный фермент церулоплазмин. Актуальна проблема методологии определения эффекта экзогенного АО. Для этого необходим комплекс систем моделирования перекисных процессов in vitro с целью унифицирования процесса скрининга новых АО. Понимание взаимосвязи между природой АО и проявлением эффекта ингибирования, а также знание трансформации антиоксидантной активности (АОА) в прооксидантную (Зайцев В.Г., 2001) имеют важное значение при изучении процессов ПОЛ и выборе эффективных АО.

В связи с выше указанным исследование АОА веществ растительного происхождения приобретает важное значение для медицины.

Цель работы: разработка новых эффективных антиоксидантов и гепатопротекторов в ряду полифенольных соединений, содержащихся в масле тополя бальзамического и экстрактах березы повислой.

Задачи исследования:

1 Провести сравнительный анализ влияния флавоноидов на уровень перекисного окисления липидов и антиоксидантную защиту при острой гипоксии in vivo, а также с применением модельных реакции in vitro.

2 Выявить антиоксидантную активность масла тополя бальзамического и экстрактов вегетативных органов березы повислой in vitro и in vivo, и наиболее перспективные составы с выраженным антиоксидантным эффектом.

3 Исследовать гепатопротекторную активность масла тополя бальзамического и экстрактов вегетативных органов березы повислой.

4 Изучить динамику содержания фосфолипидов ткани органов лабораторных крыс при ишемии под действием масла тополя бальзамического и экстрактов березы повислой.

Научная новизна Впервые в эксперименте острой гипоксии in vivo установлено, что определение уровня малонового диальдегида неадекватно отражает степень антиоксидантной защиты в присутствии экзогенных веществ.

Впервые изучено изменение спектра фосфолипидов ткани органов в эксперименте ишемии под действием масла тополя бальзамического и экстрактов вегетативных органов березы повислой.

Установлена выраженная АОА масла тополя бальзамического и экстрактов березы.

Впервые выполнено сравнительное изучение АОА масла тополя бальзамического и экстрактов березы различными современными спектральными и физико-химическими методами.

Практическая значимость Разработана доступная методика оценки АОА масла тополя, содержащего полифенольные соединения, а также спиртовых экстрактов вегетативных органов березы повислой, которая может применяться при скрининге АОА фитопрепаратов. Установлена применимость метода острой гипоксии в эксперименте для оценки АОА экзогенных веществ, что может быть показателем для определения АОА in vivo. Знание изменения спектра фосфолипидов ткани органов в эксперименте ишемии под действием различных фитопрепаратов и индивидуальных веществ может служить тестом на АОА.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1 Спектрофотометрическими методами изучена АОА флавоноидов, выделенных из масла тополя бальзамического, а также спиртовых экстрактов вегетативных органов (кора, листья, сережки, побеги, чага) березы повислой и выявлены наиболее эффективные АО в ряду этих соединений.

2 Исследована АОА масла тополя бальзамического и березы повислой in vitro и in vivo, определены наиболее перспективные составы с выраженным антиоксидантным эффектом.

3 Изучена гепатопротекторная активность масла тополя бальзамического и березы повислой.

4 Проведен сравнительный анализ влияния флавоноидов на уровень ПОЛ и антиоксидантную защиту при острой гипоксии in vivo, а также с помощью модельных реакции in vitro различными спектральными и физико-химическими методами.

5 Выявлена динамика спектра фосфолипидов ткани органов лабораторных крыс при ишемии под действием масла тополя бальзамического и экстрактов березы повислой.

Апробация работы. Результаты работы докладывались и обсуждались на международных, республиканских и региональных конференциях: «Научные исследования и их практическое применение. Современное состояние и пути развития» (Одесса, 2005); II-я международная конференция «Химия, технология и медицинские аспекты природных соединений» (Алматы, 10- октября 2007); Республиканская научно-практическая конференция «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане» (Алматы, 2007); Материалы 4-й Всероссийской конференции «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья»

(Барнаул, 2009); Материалы 3-й международной научно-практической конференции «Жас галым» (Тараз, 16-18 апреля 2009); Материалы 8-го Международного симпозиума по химии природных соединений (15-17 июня 2009, Eскишехир, Tурция).

Связь темы диссертации с планом государственных научных программ. Диссертационная работа выполнена в рамках Республиканской научно-технической программы «Разработка и внедрение в производство оригинальных фитопрепаратов для развития фармацевтической промышленности Республики Казахстан» (РНТП Ц. 0253) на 2002-2006 гг. по теме: «Новые фитопрепараты на основе фенольных соединений растений и химическая модификация флавоноидов» (№ гос. регистрации 0102РК00187); по теме: «Новые натуральные ароматизаторы, красители, подсластители и антиоксиданты на основе растительного сырья Республики Казахстан для пищевой промышленности» (№ гос. регистрации 0102РК00157), входящей в Научно-техническую программу «Научно-технологическое обеспечение развития промышленности Республики Казахстан» на 2002-2006 гг.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 статей, а также тезисы 6 докладов. Всего 15 печатных работ.

Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 107 страницах компьютерного текста, включает 21 рисунок, 15 таблиц; состоит из введения, глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка использованных источников, содержащих наименований.

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

Материалы и методы исследования Объектом экспериментального исследования явились масло почек тополя бальзамического и спиртовые экстракты вегетативных органов березы повислой, распространенных на территории Казахстана. Растворы приготовлены на кафедре химии СКГУ им. М. Козыбаева и в АО «Научнопроизводственный центр «Фитохимия» (г. Караганда).

Исследования проведены на белых беспородных крысах обоего пола массой 160-220 г. Опытную и контрольную группу составляют животные одного возраста, пола, массы, полученные одновременно из одного питомника и содержащиеся в одинаковых условиях (таблица 1). Введение препарата осуществлялось в одно и то же время суток. Действие масла тополя бальзамического и спиртовых экстрактов березы повислой было изучено на модели острой гипоксии. При экспериментальной ишемии в качестве препарата сравнения был взят витамин Е, а синтетический антиоксидант ионол в экспериментах in vitro.

Приведены физико-химические параметры исследованных полифенольных соединений и экстрактов растений. Описаны методики оценки АОА индивидуальных соединений, масла тополя бальзамического и экстрактов вегетативных органов березы повислой in vitro и in vivo. Описаны методики изучения спектра фосфолипидов (ФЛ) лабораторных животных, перенесших острую гипоксию.

Таблица 1 – Характеристика экспериментального материала Животные, перенесшие 5-минутную ишемию, получавшие витамин Е (контрольная группа) Животные, перенесшие 5-минутную ишемию, получавшие экстракт почек березы Животные, перенесшие 5-минутную ишемию, получавшие экстракт сережек березы Животные, перенесшие 5-минутную ишемию, получавшие рутин Продолжение таблицы Животные, перенесшие 5-минутную ишемию, получавшие кверцетин Животные, перенесшие 5-минутную ишемию, получавшие масло почек тополя Животные, перенесшие 5-минутную ишемию, получавшие бетулин, выделенный из коры березы (контрольная группа) Животные, перенесшие острый гепатит, получавшие масло тополя Животные, перенесшие острый гепатит, получавшие экстракт березы Статистическую обработку данных производили определяя среднюю арифметическую величину (М), среднее квадратическое отклонение (сигма), ошибку средней арифметической (m). Степень достоверности определяли с помощью t-критерия Стьюдента.

Результаты исследований и их обсуждение 1 Биологическая активность флавоноидов и экстрактов растений, содержащих полифенольные соединения Береза является ценным источником для получения биологически активных веществ, часть которых широко применяется в медицинской практике. В лекарственных целях используются почки, молодые листья, березовый сок, кора, чага, березовый деготь. Причем по биологической активности разновидности березы различаются незначительно, поэтому можно использовать любые виды. Также интересен тополь бальзамический, широко изучаемый химиками и фармакологами, так как в масле присутствует целый спектр активных соединений, в частности, флавоноиды. Обширный спектр биологически активных веществ объясняет фармакологическое применение почек березы. Так, экстракт почек используется как желчегонное, потогонное, мочегонное, бактерицидное, антисептическое, дезинфицирующее и противовоспалительное средство, применяется при ларингитах, трахеитах, бронхитах как антисептическое и отхаркивающее средство.

Влияние природы флавоноидов на антиоксидантную активность in vitro.

При изучении АОА экзогенных веществ необходимо иметь в виду не только многообразие механизмов эффекта ингибирования перекисных процессов, но и природу индивидуальных соединений, входящих в состав экстрактов. Механизм, который является определяющим в конкретной ситуации, зависит от условий модельной реакции и обуславливает АОА.

Оценка АОА фармакологических веществ включает следующие обязательные этапы: во-первых, скрининг вещества in vitro и in vivo на моделях с генерацией определенного инициатора; во-вторых, оценка АОА веществ в различных тканях, сыворотке крови и эритроцитах при индукции свободно радикальной патологии, выступающей критерием АОА.

В результате проведённых нами экспериментов in vitro получены следующие данные. Так, при перекисном окислении желточных липопротеидов на 10, 15, 20 и 30 минутах реакции уровень малонового диальдегида (МДА) находится в интервале 12-14 мкмоль/л, а в присутствии флавоноидов понижается до 2 мкмоль/л, в частности, кверцетина (рисунок 1).

МДА, мкмоль/л Рисунок 1 – Динамика перекисного окисления желточных липопротеидов Как видно изменение уровня МДА в реакционной среде имеет одинаковую тенденцию как в контроле, так и в опытах, что указывает на аналогичный механизм антиоксидантного действия исследованных флавоноидов. Если сравнить ряд флавоноидов, отличающихся количеством гидроксильных групп, то имеет место выраженная зависимость антиоксидантной активности от их числа.

Установлено наиболее эффективное действие кверцетина и уменьшение у рутина. Анализ полученных данных показал ингибирование перекисного окисления фосфатидилхолина яичного желтка, сравнимого с эффектом ионола.

Так, на 10-й минуте окисления реакционной смеси в присутствии экстракта АОА составила 53,2±0,44%, а для ионола 41,0±0,34%. Дальнейшее инкубирование показало сохранение АОА экстракта, а активность ионола снижалась, что можно объяснить различием механизмов ингибирования ПОЛ.

Если в случае с экстрактами возможно ингибирование не только по радикальному механизму, благодаря наличию флавоноидов, являющихся аналогами витамина С, а также цепному механизму, т.е. на уровне клеточных мембран, синтетический антиоксидант ионол выступает в роли только «ловушки» свободных радикалов.

2 Исследование in vitro динамики ингибирования перекисных процессов экстрактами вегетативных органов березы Нами выполнено исследование ингибирования перекисных процессов экстрактами вегетативных органов березы и возможности применения системы Fe(III)/Fe(II)–о-фенантролин для определения АОА индивидуальных веществ и суммарных экстрактов. Действие свободных радикалов может быть локализовано восстановительным эффектом АО, нейтрализующих радикалы.

Ионы железа способствуют образованию свободных радикалов внутри живого организма, поэтому связывание этих ионов путем ингибирования металлкатализируемого окисления лежит в основе АОА. Ингибирование эфирами галловой кислоты в отношении железоиндуцированного окисления липопротеинов обусловлено их антирадикальным эффектом и способностью нейтрализовывать ионы металла.

На рисунке 2 представлены концентрационные зависимости оптической плотности исследованных экстрактов и веществ – стандартов кверцетина и галловой кислоты, проявивших наибольшую АОА. Увеличение оптической плотности раствора указывает на рост восстановительного потенциала, что адекватно отражает повышение ингибирующего эффекта, поэтому может быть показателем при скрининге на АОА. Как видно из полученных графических зависимостей, наибольшие значения восстановительного потенциала Fe(III)/Fe(II) наблюдаются у коры и стеблей березы. Линейность уравнения регрессии для экстракта почек указывает на постоянство антиоксидантной активности для всех исследуемых концентраций. Исследование этого показателя позволяет сделать вывод, что различие АОА вегетативных органов связано с содержанием полифенольных соединений в растительных экстрактах.

Рисунок 2 – Восстановительный потенциал веществ и экстрактов Нами выполнена оценка АОА вегетативных органов березы с использованием системы Fe(III)/Fe(II)–о-фенантролин, применяемой для исследования биологической активности как растительных экстрактов, так и индивидуальных соединений. Комплекс Fe(II)–о-фенантролин может быть разрушен действием хелатирующих агентов растительных экстрактов.

АОА была определена по калибровочному графику и выражена в эквивалентных единицах аскорбиновой кислоты (АК) (мгАК/мг растительного сырья). Полученные данные представлены в таблице 2.

Таблица 2 – Величины АОА (мгАК/мг растительного сырья) мг/мл 0,041±0,0006* 0,037±0,004 0,039±0,0006 0,016±0,0006 0,032±0, 0, 1,0 0,688±0,005 0,45±0,02 0,36±0,003 0,519±0,001 0,137±0, 2,0 1,34±0,011 0,86±0,05 0,68±0,007 1,025±0,002 0,24±0, 4,0 2,62±0,024 1,67±0,11 1,31±0,027 2,027±0,009 0,42±0, 5,0 5,224±0,04 3,34±0,2 2,61±0,031 4,035±0,008 0,987±0, Примечание –* –данные представлены с учетом стандартного отклонения.

АОА обусловлена наличием в составе экстрактов фенолкарбоновых кислот и флавоноидов, проявляющих антиоксидантные свойства. Полученные данные позволяют считать, что различия антиоксидантных характеристик исследуемых вегетативных органов связаны с содержанием полифенолов в составе растительных экстрактов. Фотоколориметрически было определено суммарное количество флавоноидов в экстрактах с концентрацией 1 мг/мл. Установлено, что содержание флавоноидов в почках составляет 35,4 мг эквивалентности стандартного вещества кверцетина (К).

К одной из распространенных активных форм кислорода, продуцируемых в живых организмах, относят пероксид водорода, который легко окисляет различные виды ферментов в организме, активирует процессы ПОЛ и является источником радикалов. Ввиду кумулятивной способности пероксида водорода надо контролировать его содержание, используя при этом антиоксиданты в качестве ингибиторов перекисных процессов.

Как следует из данных таблицы 3, имеется зависимость между концентрацией экстрактов и их АОА. Так, наиболее выраженная АОА выявлена для масла почек тополя (10,31±0,8), что выше по сравнению с экстрактом почек березы (4,35±1,9) в 2 раза и обусловлено повышенным содержанием флавоноидов в тополиных почках по сравнению с экстрактом березы, в котором преобладают терпеноиды, в частности, бетулин.

Таблица 3 – Динамика АОА экстрактов различных растений Эстракт концентрация введенного экстракта, мг/мл Fungus betulinus Crataegus sauguinea pall.

Gemmae 0,45±0,02 1,67±0,11 3,34±0,2 6,63±0,41 8,28±0, Betulae Populus balzamifera L.

Представленные на рисунке 3 результаты выражены в единицах эквивалентности стандартного вещества кверцетина (К).

Рисунок 3 – Содержание флавоноидов (мгК/100 мл растительного экстракта) Полученные результаты позволяют сделать вывод о высоком восстановительном потенциале экстрактов вегетативных органов березы по отношению к ионам железа, что указывает на АОА. При изучении нейтрализующей способности гидроксильных радикалов, образующихся из пероксида водорода, водно-спиртовыми экстрактами вегетативных органов березы рассчитаны значения коэффициентов ингибирования. Как показано на рисунке 4, нейтрализация пероксида водорода представляет собой прямую концентрационную зависимость для всех исследованных объектов, что указывает на высокую степень достоверности оценки АОА данным методом.

Рисунок 4 – Динамика ингибирования пероксида водорода.

IC50 (коэффициент ингибирования) отражает количество экстракта, необходимого для ингибирования концентрации активных форм кислорода на 50%, было определено графически. Уменьшение значений IC50 указывает на более высокий антиоксидантный потенциал исследуемого образца (рисунок 5).

Согласно результатам биоскрининга in vitro различными методами, суммарные экстракты вегетативных органов березы проявляют АОА.

Не менее важен вопрос выбора определенного вегетативного органа, перспективного в плане выбора потенциального антиоксиданта. Поэтому нами выполнено определение относительной АОА некоторых вегетативных органов березы.

3 Изучение антиоксидантного действия флавоноидов, экстрактов тополя и березы в эксперименте in vivo В результате проведенных исследований установлено, что кверцетин и экстракты березы проявляют ярко выраженную антиоксидантную активность, а рутин и масло почек тополя менее выраженную по сравнению с ними. Так, содержание МДА в тканях мозга и печени крыс, превентивно получавших рутин и кверцетин, ниже, чем в группе контрольных животных и приближается к показателям интактной группы. Более выраженное антиоксидантное действие имеет место в случае экстракта березы (рисунок 6).

Объяснение такому высокому антиоксидантному эффекту может быть в составе экстракта. Одной из особенностей состава экстракта березы является дифильность структуры молекул, что позволяет им участвовать как в регулировании биохимических реакций, так и в восстановлении биологических мембран, которые наиболее чувствительны к перекисным процессам.

МДА, мкмоль/л То есть экстракт является более универсальным препаратом в плане ингибирования ПОЛ, реализуя свою активность по свободнорадикальному и мембранному механизмам. По-видимому, такое сочетание свойств в составе экстракта обусловило синергизм действия в целом и соответственно повышенную АОА в эксперименте ишемии (рисунок 7).

* – р0,05 – по отношению к контрольным животным Рисунок 7 – Динамика активности каталазы различных органов 4 Динамика фосфолипидов органов крыс, перенесших острую гипоксию Данные о фосфолипидах (ФЛ), являющихся структурными компонентами мембран, указывают на их роль в обеспечении метаболизма и функций живого организма. Установлено, что наиболее богатой ФЛ тканью является головной мозг. В мембранах преобладают фосфатидилхолин (ФХ), фосфатидилэтаноламин (ФЭА), фосфатидилсерин (ФС), ПГФ и сфингомиелин (СФМ), а для нервной ткани характерны все фракций ФЛ, среди них наибольшее содержание этаноламин- и инозитолсодержащих ФЛ.

При определении ФЛ коры головного мозга крыс установлено, что наибольшей фракцией являются ФХ. У интактных крыс наибольшее содержание ФЛ и соответствующих фракций, которыми явились СФМ (24,03±1,65%), ФХ (31,26±1,43%) и ФЭА (30,13±1,87%). Таким образом, спектр фракций ФЛ в коре головного мозга интактных крыс был на одном уровне и самыми большими фракциями являются СФМ, ФХ и ФЭА.

Одной из причин нарушения молекулярной организации мембран является пероксидация жирных кислот. Так как ишемия приводит к различным нарушениям во всем организме, то постреанимационный период является состоянием, при котором необходимо знать состояние биомембран клеток. При определении состава ФЛ коры головного мозга крыс, перенесших ишемию с последующим оживлением, был выявлен ряд изменений (таблица 4). Содержание ПГФ возросло, что обусловлено их относительно высокой активностью в окислительных процессах, протекающих в ткани. Повышение ПГФ является следствием их выхода из мембран митохондрий и может служить показателем повреждения клеточных структур. Увеличение этой фракции при ишемии является компенсаторной реакцией и направлено на усиление энергообеспечения и упорядочение организации биомембран в условиях ишемии. Ишемия привела к изменениям состава ФЛ. Так, в коре головного мозга крыс сумма нейтральных ФЛ снизилась с 87,16 до 82,16%. Наряду с этим, уровень кислых ФЛ повысился после оживления до 15,18%, что выше в 1,5 раза.

Таблица 4 – Состав ФЛ фракций печени исследуемых групп животных ЛФХ СФМ ФЭА ПГФ Примечание – * – р 0,05 – по сравнению с интактными животными Как видно на рисунке 8, в группе крыс, перенесших ишемию, содержание СФМ и ФХ уменьшается, так как происходит их распад, а продукты их катаболизма ГФ, ЛФХ, ФС, ПГФ и ФК увеличиваются. Вместе с тем, ФЭА увеличивается в опытной группе, что может быть обусловлено тем, что они являются структурными компонентами внутренних слоев мембран.

Одновременно превентивный прием животными витамина Е в дозе 5 мг/кг приводит к достоверному росту СФМ и ФХ, что указывает на протективные свойства витамина. Аналогичный эффект проявил бетулин, который аналогичен витамину Е.

50, 40, 30, 20, 10,

ГФ ЛФХ ФС СФМ ФХ ФЭА ПГФ ФК

Интактная группа Контрольная группа Витамин Е Почки березы На основании полученных результатов установлено, что у животных изменялось соотношение нейтральных и кислых ФЛ, сопровождающееся уменьшением нейтральных и ростом кислых ФЛ при ишемии. Данные указывают на то, что ФЛ мозга играют определенную роль в развитии постреанимационной патологии, поэтому развитие и метаболизм АО после оживления организма имеет значение в последующей регенерации. Суммарное количество нейтральных ФЛ у крыс постепенно снижалось. В отличие от этого при применении АО отмечается рост кислых ФЛ (рисунок 9).

При определении общего липидного фосфора установлено, что у интактных животных количество общего фосфора составило 98,93% моль/л.

40, 30, 20, 10, 0,

ГФ ЛФХ ФС СФМ ФХ ФЭА ПГФ ФК

Интактная группа Контрольная группа Витамин Е Почки березы Сережки березы Тополь Бетулин Так как постреанимационный период характеризуется повышением проницаемости биологических мембран органов и тканей под влиянием лизосомальных ферментов в период ишемии и после оживления, то восстановление характеризуется повышением степени гидратации мозговых структур с последующим изменением функционирования мембран клеток мозга. После перенесенной ишемии у крыс отмечается постепенное возрастание количества общего фосфора до 107,05±4,90 ммоль/л.

5 Исследование гепатопротекторных свойств экстрактов тополя и березы Хронический гепатит относится к числу заболеваний, лечение которых представляет большие трудности, поэтому большое внимание уделяется исследованию гепатопротекторных свойств фитопрепаратов. Саратиков А.С.

(2003) отмечает, что эффект гепатопротектора лохеина на основе солянки холмовой обусловлен флавоноидами. При гистологическом исследовании срезов печени группы мышей, получавших фитопрепараты установлено, что в случае применения «Тополина» рисунок строения ткани печени сохранялся.

Таким образом, можно отметить адаптационную реакцию на применение препарата с сохранением структуры печеночной ткани. При применении экстракта березы наблюдаются резко расширенные и полнокровные междолевые вены, полнокровие синусоидных кровеносных капилляров.

Рисунок строения печени сохраняется, отмечается дистрофия гепатоцитов, но нет их гипертрофии, что также можно охарактеризовать как реакцию организма на прием препарата (рисунок 10).

1 – увеличение х100; 2 – увеличение х Рисунок 10 – Срезы печени мышей, принимавших экстракт березы Электронное микроскопическое исследование печени животных, получавших фитопрепараты, выявило некоторые восстановительные внутриклеточные реакции при сохраняющемся гликогенозе печени. На срезах печени четвертой группы животных (рисунки 10, 11) наблюдались положительные сдвиги в восстановлении структуры печеночной паренхимы, а также существенное сокращение зон, занимаемых разрастающейся соединительной тканью. В значительной части долек паренхима была относительно сохраненной. Крупные ядра гепатоцитов обладали высоким содержанием эухроматина, также наблюдались двуядерные клетки.

1 – увеличение х100; 2 – увеличение х Рисунок 11 – Морфология печени животных, принимавших масло тополя, При интоксикации четыреххлористым углеродом изменилась картина крови.

Естественные детоксикационные механизмы были нарушены, синтез альбумина снижен, поэтому эффективность защиты организма по обезвреживанию, дезактивации и элиминации токсинов существенно ограничена. Характерным признаком заболевания считается повышение активности аминотрансфераз с преимущественным ростом активности АлАТ в отличие от АсАТ, что является признаком токсического поражения печени, изменение данных тимоловой пробы. Биохимические показатели крови контрольной группы свидетельствуют о деструкции мембранных структур гепатоцитов. Доказательством этому является гиперферментация АлАТ и АсАТ в плазме крови мышей. Обращает на себя внимание преимущественный рост активности АлАТ в отличие от АсАТ, что подтверждает токсическое поражение печени. Показатели крови животных, получавших фитопрепараты, практически остаются в норме. Применение препаратов на фоне острого токсического гепатита несколько сглаживает картину острого токсического воздействия, что наглядно проявляется при использовании препарата «Тополин». Так, ферментация АлАТ снижена на 60%, а рост активности АсАТ выше АлАТ, что указывает на развитие регенерационных процессов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате исследований влияния масла тополя бальзамического и экстрактов вегетативных органов березы на антиоксидантную систему организма при острой гипоксии установлен положительный эффект указанных растворов. Анализ спектра фосфолипидов ткани органов при ишемии и превентивном введении фитопрепаратов показал на положительную динамику процесса восстановления антиоксидантной системы организма.

Выполненные исследования дают основание говорить о выраженном антиоксидантном свойстве полифенольных соединений растительного происхождения.

Полученные результаты позволяют сделать следующие выводы:

1 Установлена выраженная антиоксидантная активность полифенольных соединений, содержащихся в масле тополя бальзамического и экстрактах вегетативных органов березы повислой. Сравнительный анализ антиоксидантной активности масла тополя бальзамического и экстрактов вегетативных органов березы повислой различными методами in vitro показал наличие корреляционной зависимости между показателями АОА и содержанием определенных флавоноидов.

2 Превентивное введение масла тополя бальзамического и экстрактов березы повислой в дозе 5 мг/кг массы животным в течение 21 суток, перенесшим 5-минутную ишемию, показало выраженный антиоксидантный эффект этих растворов. В печени крыс, принимавших масло тополя, содержание МДА уменьшается по сравнениию с животными, перенесшими ишемию, с 1,75+0,32 мкмоль/л до 1,23+ 0,17 мкмоль/л.

3 Исследована гепатопротекторная активность масла тополя бальзамического и экстракта березы повислой. Показатели крови животных при остром гепатите, получавших фитопрепараты, практически остаются в норме.

Ферментация АлАТ снижена на 60%, а рост активности АсАТ выше АлАТ, что указывает на развитие регенерационных процессов.

4 Острая гипоксия лабораторных крыс сопровождалась снижением уровня общего липидного фосфора и нарушением фракционного состава в печени, почках и мозге. Также установлено изменение соотношения между кислыми и нейтральными фосфолипидами, легкоокисляемыми и медленноокисляемыми фосфолипидами. Если после ишемии фракция ФС уменьшается на 72,45%, то экстракты почек сережек березы корректирует до 45,71% и 41,7% соответственно.

Практические рекомендации:

1 Результаты диссертационной работы могут быть использованы при исследованиях для выявления перспективных источников технологически доступных флавоноидов на основе растительного сырья Казахстана.

2 Данные биологической активности дают возможность получения новых фитопрепаратов, а также позволяют предложить пути синтеза новых соединений с АОА. Метод экспериментальной ишемии применим на практике для определения АОА веществ природного и синтетического происхождения.

3 Оценка динамики обмена фосфолипидов может быть тестом при определении АОА экзогенных веществ растительного происхождения. В настоящее время метод внедрён в учебный процесс кафедры биохимии с курсом общей химии АО «Медицинский университет Астана», кафедры химии ЕНУ им. Л.Н. Гумилева.

Список работ, опубликованных по теме дисертации:

1 Казбекова А.Т., Мухамбетов Д.Д., Поляков В.В. К вопросу изучения антиоксидантной активности эфирного масла тополя бальзамического // Сборник научных трудов по материалам научно-практической конференции «Научные исследования и их практическое применение. Современное состояние и пути развития». - Одесса, 2005. - С. 24-27.

2 Поляков В.В., Казбекова А.Т., Лежнева М.Ю., Айтуллина А.А., Крапова Н.В., Кулешова Н.А., Козленко А.Н., Степура Г.Ф., Сейтембетова А.Ж..

Исследование гепатопротекторных свойств фитопрепаратов тополя и березы // Астана медициналы журналы. - 2006. - №1. - С. 96-100.

3 Сейтембетова А.Ж., Зейнульдина А.С., Назарова А.Ж., Казбекова А.Т., Тулеуов Б.И. Антиоксидантная активность экстракта серпухи венценосной Serratula coronatа L. // II-я Международная конференция «Химия, технология и медицинские аспекты природных соединений». – Алматы, 2007. – С. 145.

4 Лепесова М.К., Кульмагамбетова А.Т., Казбекова А.Т., Сейтембетов Т.С.

Изучение антиоксидантной активности полифенольных соединений в модельной системе in vivo и in vitro // Материалы Республиканской научнопрактической конференции «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане». - Алматы, 2007. - С. 127-128.

5 Зейнульдина А.С., Назарова А.Ж., Казбекова А.Т., Сейтембетов Т.С., Сейтембетова А.Ж., Сорокин Р.Н., Тулеуов Б.И., Адекенов С.М. Взаимосвязь «структура–антиоксидантная активность» в ряду флавоноидов солянки холмовой // Вестник КарГУ. – 2008. - № 2(50). – С. 65-71.

6 Зейнульдина А.С., Назарова А.Ж., Казбекова А.Т., Сейтембетов Т.С., Сейтембетова А.Ж., Сорокин Р.Н., Тулеуов Б.И., Адекенов С.М. Изучение зависимости антиоксидантного действия экстрактов некоторых видов растений от их химического состава // Вестник КарГУ. – 2008. - №2(50). – С. 71-74.

7 Казбекова А.Т. Биологическая активность эфирного масла тополя // Астана медициналы журналы. - 2008. - №7(52). – С. 189-190.

8 Мусабекова А.С., Машенцева А.А., Казбекова А.Т., Сейтембетов Т.С.

Сравнительное исследование антиоксидантной активности полифенольных соединений и суммарных фитопрепаратов in vitro и in vivo // Материалы 3-й международной научно-практической конференции «Жас галым». - Тараз, 16апреля 2009. - С. 249-250.

9 Машенцева А.А., Казбекова А.Т., Сейтембетов Т.С. Оптические методы исследования антиоксидантной активности полифенольных соединений и экстрактов на основе растительного сырья in vitro и in vivo // Вестник КарГУ. – 2009. - № 1(51). – С. 26-34.

10 Назарова А.Ж., Зейнульдина А.С., Казбекова А.Т., Тулеуов Б.И., Адекенов С.М., Сейтембетов Т.С. Антиоксидантная активность флавоноидов из растительного сырья // Материалы 4-й Всероссийской конференции «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья». Барнаул, 2009. - С. 25-26.

11 Сейтембетова А.Ж., Зейнульдина А.С., Казбекова А.Т., Назарова А.Ж., Сейтембетов Т.С. Методологические аспекты исследования антиоксидантной активности фитопрепаратов in vitro и in vivo // Астана медициналы журналы. С. 151-153.

12 Mashentseva A.A., Yushina L.V., Kazbekova A.T., Tuleuov B.I., Lezhneva M.U., Adekenov S.M., Seitembetov T.S. Investigation of the birch extracts effect on the phospholipids level in oxidation stress // 8 International Symposium on the Chemistry of Natural Compounds, 15-17 June 2009, Eskisehir (Turkey). - P-146.

13 Mashentseva A.A., Seitembetov T.S., Kazbekova A.T., Kulmagambetova A.T., Tuleyov B.I., Lezhneva M.U., Polyakov V.V. Comparative studies the antioxidant activity of polyphenols and endemic Kazakhstan plants throught in vitro and in vivo methods // Journal of the Technical University at Plovdiv «Fundamental Sciences and Applications». - 2009. - Vol. 14(2). - Р. 485-491.

14 Казбекова А.Т., Мухамбетов Д.Д., Сейтембетова А.Ж., Юшина Л.В.

Влияние экзогенных антиоксидантов растительного происхождения на динамику фосфолипидов в печени крыс // Астана медициналы журналы. С. 189-192.

15 Сейтембетова А.Ж., Зейнульдина А.С., Казбекова А.Т., Назарова А.Ж., Сейтембетов Т.С., Машенцева А.А., Тулеуов Б.И., Сорокин Р.Н., Адекенов С.М. Сравнительное исследование антиоксидантной активности полифенольных соединений и суммарных фитопрепаратов in vitro и in vivo (обзор) // Фармацевтический бюллетень. - 2009. - №5-6. - С. 28-32.

КАЗБЕКОВА АЙНАГУЛЬ ТАЛАТЫЗЫ

Бальзамды терек майлары мен айы сыындыларыны антиоксидантты жне гепатопротекторлы белсенділігін зерттеу 14.00.25 – фармакология, клиникалы фармакология мамандыы бойынша медицина ылымдарыны кандидаты ылыми дрежесін алу шін дайындалан азіргі заманы медицинаны келелі мселелеріні бірі жеткілікті сімдік шикізаттары негізінде тиімділігі жоары антиоксидантты жне гепатопротекторлы заттарды іздестіру. Сондытан, бл жмыс азастан территориясында ке тараан бальзамды терек майларында жне айы сыындыларыны рамында болатын полифенолды осылыстарды атарынан жаа, тиімділігі жоары антиоксидантты жне гепатопротекторлы асиеті бар заттарды зерттеуге баытталан.

Крсетілген масата жету шін, жмыста тмендегідей міндеттер арастырылды - in vivo жедел гипоксия жадайында жне in vitro модельді реакцияларды олдана отырып антиоксидантты ораныша жне липидтерді асын тотыу дегейіне флавоноидтарды серіне салыстырмалы анализ жасау, in vitro жне in vivo айыны вегетативті органдарыны сыындылары мен бальзамды терек майларыны антиоксидантты белсенділігін зерттеу, айын антиоксидантты белсенділігі бар осылыстарды іздестіру, бальзамды терек майлары мен айыны вегетативті органдарыны сыындыларыны гепатопротекторлы белсенділігін зерттеу; бальзамды терек майлары мен айы сыындылары серінен зертханалы егеуйрытарды органдары мен тіндеріні ишемия кезіндегі фосфолипидтік рамын зерттеу.

Зерттеу жмыстары а, тексіз, салмаы 160-220 г егеуйрытара жргізілді. Тжірибелік жне баылау жануарлары жасы, жынысы, салмаы, бірдей етіп топтастырылды. Препараттарды енгізілуі тулікті белгілі бір уаытында жргізілді. Бальзамды терек майлары мен айы вегетативті органдарыны спирттегі сыындыларыны сері тжірибелік жануарлара жедел гипоксия туызу моделін олдана отырып зерттелді. Тжірибелік ишемия кезінде салыстыру препараты есебінде Е витамині мен in vitro антиоксидант ионол олданылды. Полифенолды осылыстарды жне сімдіктер сыындыларыны физико-химиялы асиеттері, in vitro жне in vivo жеке осылыстарды, бальзамды терек майлары мен айыны вегетативті органдарыны сыындыларыны антиоксидантты белсенділігін баалау дістері, сонымен атар зертханалы жануарлар органдары, тідеріні гипоксиядан кейінгі фосфолипидтік рамыныы згерісі зерттелді.

Зерттеулер нтижесінде жедел гипоксия кезінде, организмні антиоксидантты жйесіне айыны вегетативті органдары сыындылары мен бальзамды терек майлары о сер ететіндігі крсетілді. Орындалан зерттеулер зерттелген сімдіктерді рамындаы полифенолды осылыстар мен вегетативті органдарыны сыындыларыны айын антиоксидантты жне гепатопротекторлы асиет крсетеді деп ортындыа келуге ммкіндік береді.

Сонымен, айы вегетативті органдарыны сыындылары мен бальзамды терек майлары рамында болатын полифенолды осылыстар айын антиоксидантты белсенділік крсетеді. Бальзамды терек майлары мен айы вегетативті органдарыны сыындыларыны ртрлі дістермен in vitro аныталан антиоксидантты белсенділігіні салыстырмалы анализі АОБ крсеткіштері мен белгілі бір флавоноидтарды болуы арасында корреляциялы туелділігі бар екендігін крсетті.

Бальзамды терек майлары мен айы вегетативті органдарыны спирттегі сыындыларыны 5мг/кг млшерінде жануарлара 21 тулік бойында алдын ала енгізу оларды айын антиоксидантты серін крсетті.

Бальзамды терек майлары мен айы вегетативті органдарыны спирттегі сыындыларыны гепатопротекторлы белсенділігі зерттелді. Бальзамды терек майларын абылдаан тышандар тобыны бауыр кесінділеріне гистологиялы зерттеулер крсеткіші бауыр тканьдеріні алыпты саталандыын крсетеді.

Жедел гепатит кезінде бальзамды терек майларын абылдаан жануарлар аныны крсеткіштері алыпты жадайда алады, АлАТ ферментациясы 60% тмендеді, АсАТ белсенділігіні АлАТтан жоары болуы регенерация процестеріні дамуын крсетеді. зертханалы жануарларды жедел гипоксиясы кезінде жалпы липидтік фосфор дегейіні тмендеуі мен бауырда, бйректе, мида фракциялы ауытулар байалды. Органдарды фосфолипидтік спектріні анализі ишемия кезінде жне сыындыларды алдын ала енгізу организммні антиоксидантты жйесін алпына келтіру барысына о сер ететіндігін крсетеді.

Бальзамды терек майларын жне айы вегетативті органдарыны сыындысын олдану барысында ышыл жне нейтралды, тез жне баяу тотыатын фосфолипидтерді атынасыны згерісі алыпты жадайдаы корсеткіштерге сйкес згереді.

KAZBEKOVA AINAGUL TALGATOVNA

The study of antioxidant and hepatoprotectoral activity of rough-bark poplar oil Thesis for a degree of the candidate of medical science on speciality 14.00.25 – pharmacology, clinical pharmacology

SUMMARY

One of the topical issues of modern medicine is search for high-performance antioxidants and hepatoprotectors based on relatively available herbal raw materials.

The work is dedicated to the development of new effective antioxidants and hepatoprotectors among polyphenol compounds contained in the rough-bark poplar oil and the drooping birch extracts widely spread in the territory of Kazakhstan.

To achieve this goal the following topics were studied:

- comparative analysis of influence of flavonoids on the level of lipid peroxygenation and antioxidant protection in case of acute hypoxia in vivo, and also with use of in vitro model reactions ; - study of antioxidant activity of the rough-bark poplar oil and the drooping birch vegetative organs’ extracts in vivo and in vitro, search for perspective compositions with pronounced antioxidant activity; - study of hepatoprotectoral activity of rough-bark poplar oil and birch vegetative organs’ extracts; - study of the content of phospholipids in test rats organs in case of ischemia under the influence of rough-bark poplar oil and drooping birch extracts.

The research was carried out on white outbred rats, both male and female, weighting 160-220 g. The experimental and control groups consist of the animals of the same age, sex and weight, taken from the same nursery and kept in the same conditions. The agent was injected at the same time of the day. The effect of the rough-bark poplar oil and drooping birch ethanolic extracts was studied on the acute hypoxia model. In case of experimental ischemia the E vitamin and ionol antioxidant were taken as comparative agents in vitro. Physicochemical parameters of the polyphenol compounds and the plant extracts, the AOA evaluation methods of individual compounds, of the rough-bark poplar oil and drooping birch extracts in vitro and in vivo, and also the study of phospholipids of test animals after hypoxia are presented.

The study of the rough-bark poplar oil and drooping birch extracts impact on the antioxidant system of the organism in case of acute hypoxia revealed positive effect of these solutions. The undertaken research suggests the pronounced antioxidant and hepatoprotectoral properties of natural polyphenol compounds and also of the extracts of some vegetative organs of the studied plants.

Thus, the pronounced antioxidant activity of polyphenol compounds contained in the rough-bark poplar oil and drooping birch extracts. The comparative analysis of antioxidant activity of rough-bark poplar oil and drooping birch extracts using different methods in vitro showed the existence of correlation dependence between the AOA indicators and content of certain flavonoids. The preventive injection of oil to the animals that had a 5-minute ischemia during 21 days showed the obvious antioxidant effect of these solutions.

The hepatoprotectoral activity of rough-bark poplar oil and drooping birch extracts was studied. The histological examination of the liver sections of the mice group that were injected the rough-bark poplar oil showed that the liver tissue pattern remained the same. The blood parameters of the animals that got phytoagents in case of acute hepatitis remained normal. Thus, the AlAT fermentation reduced by 60% and the AsAT’a activity growth is higher than the AlAT’s, which is the evidence of the regeneration processes development.

The acute hypoxia of test rats was attended by the reduced level of the total lipid phosphor and disruption of fractional composition in liver, kidneys and brains. The analysis of the spectrum of the organs tissue phospholipids in case of ischemia and preventive injection of extracts showed the positive dynamics of the process of antioxidant system recovery. In case of the use of rough -bark poplar oil and drooping birch extracts the change of balance between the acid and neutral, easy-oxidable and slow-oxidable phospholipids was identified.

Подписано к печати 04.09.2009 г.

Формат 60х84/16 Бумага типогр. № П.л. 1,5 Усл.п.л. 1,3 Уч.-изд. л. 1, Отпечатано в ТОО «ЦСЭП Консалтинг»:

010010, г. Астана, ул. Куйши Дина,

 


Похожие работы:

«ЛЕДНЕВ Олег Андреевич ОЦЕНКА ХРОНОФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ФОЗИНОПРИЛА И ЕГО КОМБИНАЦИИ С МЕЛАТОНИНОМ У ПОЖИЛЫХ БОЛЬНЫХ ПРИ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ И ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА 14.03.06 – Фармакология, клиническая фармакология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Старая Купавна-2014 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении Научный центр экспертизы средств медицинского применения Министерства...»

«ЯРКОВ ВЛАДИМИР ИВАНОВИЧ ВЛИЯНИЕ НАРУШЕНИЙ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА И ТРОМБОЦИТАРНО-СОСУДИСТОГО ЗВЕНА ГЕМОСТАЗА НА ДИСФУНКЦИЮ КОРОНАРНЫХ ШУНТОВ У БОЛЬНЫХ ИБС В СОЧЕТАНИИ С ЭССЕНЦИАЛЬНОЙ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИЕЙ 14.00.44 – сердечно-сосудистая хирургия; 14.00.06 – кардиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Новосибирск – 2008 Работа выполнена в Центре хирургии аорты, коронарных и периферических артерий Федерального государственного...»

«КУРУМЧИНА ОЛЬГА БОРИСОВНА ОСОБЕННОСТИ КЛИНИЧЕСКОГО ТЕЧЕНИЯ И ДИАГНОСТИКИ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ ПОЛИНЕЙРОПАТИИ У БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА 14.01.04 – внутренние болезни 14.01.11 – нервные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Красноярск - 2010 Работа выполнена на кафедрах поликлинической терапии и семейной медицины с курсом ПО и медицинской генетики и клинической нейрофизиологии ИПО ГОУ ВПО Красноярский государственный...»

«Джулакян Унан Левонович ЛИМФОЦИТОМА СЕЛЕЗЕНКИ (ЛИМФОМА ИЗ КЛЕТОК МАРГИНАЛЬНОЙ ЗОНЫ СЕЛЕЗЕНКИ): ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ 14.01.21 – гематология и переливание крови Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук МОСКВА – 2011 2 Работа выполнена в Федеральном Государственном бюджетном учреждении Гематологический научный центр Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации Научный руководитель : академик, доктор медицинских...»

«ДЖАВАДОВ ЭМИН АГАДЖАВАД ОГЛЫ ХИРУРГИЧЕСКОЕ ЛЕЧЕНИЕ БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМ КОЛОСТАЗОМ НА ФОНЕ ДОЛИХОКОЛОН 14.01.17- хирургия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук МОСКВА - 2011 1 Работа выполнена в Российском университете дружбы народов НАУЧНЫЙ КОНСУЛЬТАНТ: доктор медицинских наук, профессор Курбанов Фазиль Самедович ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ: доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАМН Ефименко Николай Алексеевич доктор...»

«ВОЕВОДИН Сергей Михайлович ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА ЗАБОЛЕВАНИЙ И ПОРОКОВ РАЗВИТИЯ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ И ЛИЦА У ПЛОДА 14.01.01 – акушерство и гинекология 14.01.13 – лучевая диагностика, лучевая терапия Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва – 2012 1 Работа выполнена в отделении функциональной диагностики ФГУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздравсоцразвития России....»

«Гришанова Татьяна Григорьевна КЛИНИКО-ПАТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ И ПРОГНОСТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ НЕЙРОНСПЕЦИФИЧЕСКИХ БЕЛКОВ ПРИ ТЯЖЕЛЫХ ТРАВМАХ 14.03.03 – патологическая физиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Кемерово – 2011 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Кемеровская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения и социального развития...»

«Белов Вадим Владимирович ВЛИЯНИЕ ВАКУУМНОЙ ТЕРАПИИ И ОДНОКРАТНОГО ВВЕДЕНИЯ АНТИМЕТАБОЛИТА 5-ФТОРУРАЦИЛА НА ПРИЖИВЛЕНИЕ СВОБОДНОГО КОЖНОГО ТРАНСПЛАНТАТА ПРИ СИНДРОМЕ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ СТОПЫ 14.00.27 – хирургия 14.00.15 – патологическая анатомия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Челябинск 2007 2 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении Высшего профессионального образования Челябинская государственная медицинская...»

«БАЛАЯН МАРИНА МУРАДОВНА ВЛИЯНИЕ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ У БОЛЬНЫХ ГАСТРОЭЗОФАГЕАЛЬНОЙ РЕФЛЮКСНОЙ БОЛЕЗНЬЮ 14.01.04 – внутренние болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Владикавказ – 2013 1 Работа выполнена в государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Северо-Осетинская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения...»

«ДУГЛАС НАТАЛЬЯ ИВАНОВНА РЕЗЕРВЫ ОПТИМИЗАЦИИ РЕПРОДУКТИВНОГО ЗДОРОВЬЯ ЖЕНЩИН РЕСПУБЛИКИ САХА (ЯКУТИЯ) 14.01.01 - Акушерство и гинекология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук МОСКВА 2011 2 Работа выполнена на клинической базе кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии ГОУ ВПО РУДН, в отделении клинической и экспериментальной иммунологии перинатального центра ГКБ№29 им Н.Э. Баумана (г.Москва). Научный консультант - доктор...»

«ХАМИДУЛЛИНА АЛЛА РИВГАТОВНА ВЛИЯНИЕ АНТИГИПЕРТЕНЗИВНЫХ СРЕДСТВ НА ПОКАЗАТЕЛИ ОБМЕНА ОКСИДА АЗОТА У БОЛЬНЫХ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИЕЙ 14.01.05 – кардиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Казань – 2010 2 Работа выполнена в ГОУ ВПО Казанский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию доктор медицинских наук, профессор Научный руководитель : Галявич Альберт Сарварович...»

«КУЛИКОВА СОФЬЯ НИКОЛАЕВНА ПАРЕЗ КИСТИ ПРИ РЕМИТТИРУЮЩЕМ РАССЕЯННОМ СКЛЕРОЗЕ (ДИНАМИЧЕСКОЕ КЛИНИКО НЕЙРОВИЗУАЛИЗАЦИОННОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ) Специальность 14.01.11 – нервные болезни 14.01.13 – лучевая диагностика, лучевая терапия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении Научный центр неврологии Российской академии медицинских наук Научные руководители: доктор...»

«Букия Илона Ревазиевна Турбулентность ритма сердца и альтернация зубца Т у больных с гипертрофией миокарда различного генеза 14.01.05 – кардиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук МОСКВА – 2014 Работа выполнена в ГБОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Минздрава России Научный руководитель : доктор медицинских наук, профессор Сулимов Виталий Андреевич Официальные оппоненты : доктор...»

«Ус т ю ж а н и н о в В а л е р и й Н и к о л а е в и ч КЛИНИКО-ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МИКСТ-ГЕПАТИТА А+В 14.00.10 – Инфекционные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2006 -2 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Кировская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Научный руководитель :...»

«). Автор: Зароднюк Ирина Владимировна Научный консультант : Академик РАМН, профессор Воробьв Г.И. Официальные оппоненты : Доктор медицинских наук, профессор Котляров П.М. Доктор медицинских наук, профессор Нуднов Н.В. Доктор медицинских наук, профессор Лабецкий И.И. Ведущее...»

«ПОГУДИНА Анна Сергеевна КЛИНИКО-МЕТАБОЛИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГИПОКСИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ У НОВОРОЖДЕННЫХ С ВРОЖДЕННЫМИ ПОРОКАМИ СЕРДЦА 14.01.08 – педиатрия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Томск 2014 2 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Сибирский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской...»

«Барышникова Ирина Юрьевна КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА КОНТРАКТИЛЬНОЙ И РЕЛАКСАЦИОННОЙ СПОСОБНОСТИ МИОКАРДА У ДЕТЕЙ ПЕРВЫХ ТРЕХ ЛЕТ ЖИЗНИ С ТЕТРАДОЙ ФАЛЛО ДО ОПЕРАЦИИ И В РАННЕМ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОМ ПЕРИОДЕ (14.01.13 – лучевая диагностика, лучевая терапия) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2011 г. Работа выполнена в Государственном Учреждении Научный Центр сердечно-сосудистой хирургии имени А.Н.Бакулева РАМН. Научные руководители:...»

«Воробушкова Вероника Владимировна ФИЗИЧЕСКОЕ И ПСИХОМОТОРНОЕ РАЗВИТИЕ ДЕТЕЙ-ИНВАЛИДОВ, ОБУЧАЮЩИХСЯ В ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЙ ШКОЛЕ, ПРОФИЛАКТИКА И КОРРЕКЦИЯ ИХ НАРУШЕНИЙ 14.00.09 – педиатрия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Иваново 2008 Работа выполнена на кафедре поликлинической педиатрии с курсом здорового ребенка и общего ухода за детьми в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Ивановская...»

«МАТВЕЕВА НАТАЛЬЯ ЕВГЕНЬЕВНА ТЕЧЕНИЕ КЛИМАКТЕРИЧЕСКОГО СИНДРОМА У ЖЕНЩИН С АДЕНОМИОЗОМ 14.01.01-акушерство и гинекология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук МОСКВА 2010 2 Работа выполнена на кафедре акушерства и гинекологии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Оренбургская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Научный...»

«Саламадина Галина Евгеньевна Органосберегающее лечение миомы матки с использованием метода дистанционной неинвазивной деструкции магнитнорезонансно-контролируемым сфокусированным ультразвуком 14.01.01 – Акушерство и гинекология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва - 2011 Работа выполнена в отделении рентгенорадиологической диагностики, рентгенохирургии и малоинвазивных методов лечения ФГУ Научный центр акушерства, гинекологии и...»














 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.