WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

СОЛОМОНОВ Алексей Владимирович

СВОБОДНО-РАДИКАЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ И

СУПРАМОЛЕКУЛЯРНОЕ КОМПЛЕКСООБРАЗОВАНИЕ

БИЛИРУБИНА И ДРУГИХ БИОМОЛЕКУЛ

02.00.04 – физическая химия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Иваново – 2013

Работа выполнена на кафедре неорганической химии федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Ивановский государственный химико-технологический университет»

Научный руководитель:

кандидат химических наук Румянцев Евгений Владимирович

Официальные оппоненты:

доктор химических наук, профессор Вацадзе Сергей Зурабович (ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова», профессор кафедры органической химии) доктор химических наук, профессор Лефёдова Ольга Валентиновна (ФГБОУ ВПО «Ивановский государственный химико-технологический университет», профессор кафедры физической и коллоидной химии)

Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Казанский национальный исследовательский технологический университет», г. Казань

Защита состоится «16» декабря 2013 г. в _ часов на заседании диссертационного совета Д 212.063.06 при ФГБОУ ВПО «Ивановский государственный химикотехнологический университет» по адресу:

153000, г. Иваново, пр. Фридриха Энгельса, 7.

Тел.: (4932) 32-54-33 Факс: (4932) 32-54-33 e-mail: dissovet@isuct.ru

С диссертацией можно ознакомиться в Информационном центре ФГБОУ ВПО «ИГХТУ» по адресу:

153000, г. Иваново, пр. Фридриха Энгельса, 10.

Автореферат разослан «_» ноября 2013 г.

Ученый секретарь диссертационного совета Д 212.063.06 Егорова Елена Владимировна e-mail: Egorova-D6@yandex.ru





ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Желчные пигменты, их производные и синтетические аналоги составляют интересное семейство соединений, мультифункциональных по физико-химическим свойствам, что определяет их биохимические функции и практически полезные характеристики. Среди всех желчных пигментов наиболее ярким представителем является билирубин (BR). Ранее рассматривавшийся исключительно как балластный и токсический продукт метаболизма, в настоящее время он считается одним из важнейших биологически активных соединений.

Усиление интереса к исследованию свойств желчных пигментов обусловлено способностью BR к подавлению окисления липидов клеточных мембран. Клинически доказано, что нормальные физиологические концентрации этого пигмента являются жизненно необходимыми. Однако вследствие наличия в молекуле BR нескольких реакционных центров для взаимодействия с активными частицами и значительного влияния природы окислителей и растворителей на процессы, в которых он принимает участие, детальный механизм антирадикального действия BR в настоящее время остается во многом неизвестным. В связи с этим, исследование превращений BR и, в особенности, кинетики его окисления в различных условиях является важной и актуальной задачей современной физической химии.

Основная транспортная форма билирубина в организме – макромолекулярные комплексы с альбуминами. Недавно обнаруженная способность BR выступать в качестве хромофора в лиганд-активируемых флуоресцентных белках UnaG, является значимым открытием в химии желчных пигментов. В этой связи актуальным является исследование влияния его присутствия в составе транспортного белка-носителя на физико-химические параметры процессов супрамолекулярного комплексообразования различных биомолекул и лекарственных препаратов. Такой подход является основой для разработки современных тест-систем по определению типа и способности низкомолекулярных соединений к взаимодействию с белками, что, в свою очередь, будет полезным для дизайна новых лекарственных препаратов и развития теории молекулярного распознавания.

Таким образом, обозначенный круг проблем актуален для современной химии билирубина и его аналогов в аспекте исследований слабых межчастичных взаимодействий, установления механизмов сложных химических процессов во взаимосвязи с реакционной способностью и строением исследуемых соединений.

Работа выполнена при поддержке ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы (ГК № 14.740.11.0617), грантов РФФИ (проекты № 12-03-31309 и 13-03-90743) и стипендии Президента РФ молодым ученым и аспирантам по приоритетным направлениям модернизации российской экономики (2013-2015 гг.) № СП-6898.2013.4. Доклады, сделанные по результатам работы, были отмечены грамотами, дипломами и премиями на Всероссийской конференции молодых ученых и III школы «Окисление, окислительный стресс и антиоксиданты»

им. Академика Н.М. Эмануэля (Москва, 2008), XII Всероссийской конференция по химии органических и элементоорганических пероксидов «Пероксиды» (Уфа, 2009), на конкурсе работ молодых ученых в рамках XVI Международной специализированной выставки «Химия» (Москва, 2011).





Цель работы заключалась в установлении закономерностей окислительных реакций BR, а также выяснении его роли в процессах нековалентного взаимодействия биомолекул с белковыми носителями. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Исследование процессов окисления BR и его комплекса с альбумином (BRBSA) в различных модельных системах, инициирующих свободные радикалы.

2. Выявление закономерностей в реакциях окисления тетрапиррольного пигмента, а также сравнение кинетических параметров реакций окисления в зависимости от природы и концентрации хромофоров и окислителей, белкового окружения, природы растворителя.

3. Квантово-химическое моделирование реакций окисления BR в газовой и жидкой фазах, определение энергетически предпочтительных маршрутов реакций.

4. Изучение влияния присутствия BR в молекуле альбумина на кинетические и термодинамические параметры связывания низкомолекулярных лигандов – аскорбиновой кислоты (АA), гидрохинона (H2Q), урацила (U), 5-гидрокси-6-метилурацила (5U), мезо-тетракис-п-сульфофенилпорфина (TSPP), борфторидного комплекса мезометил-3,3',5,5'-тетраметил-4,4'-дисульфо-2,2'-дипирролилметена (BODIPY) с белками.

Научная новизна. Впервые получены кинетические характеристики окислительных реакций билирубина в водных и неводных растворах под действием инициаторов неорганической и органической природы. Совокупность спектральных и кинетических данных, а также результатов квантово-химических расчетов, позволила установить, что в водных растворах образование биливердина и дипирролилметенов, как продуктов окислительной деструкции, энергетически менее предпочтительно, чем образование монопиррольных производных. Установлено влияние макромолекулярного комплексообразования билирубина с альбумином на кинетику реакций окисления – обнаруживается эффект «белковой защиты». Показано, что в реакциях совместного окисления билирубин ингибирует окисление аскорбиновой кислоты, в то время как замена витамина С на гидрохинон приводит к обратному эффекту.

Впервые установлена роль билирубина в составе альбуминового конъюгата в процессах нековалентного взаимодействия биомолекул с белковыми носителями. Показано его влияние на кинетические и термодинамические параметры образования макромолекулярных комплексов биологически активных молекул (антиоксидантов, оснований РНК, олигопирролов) и белков. Установлено, что взаимодействие белков с низкомолекулярными лигандами носит неспецифический характер.

Практическая значимость. Полученные результаты вносят вклад в развитие химии олигопирролов в целом и химии билирубина и его аналогов. Понимание механизмов антиоксидантного и антирадикального действия билирубина позволит развить существующие и создать новые представления о биохимических функциях соединений на основе тетрапиррольной структуры. Полученные данные по окислению билирубина активными формами кислорода в водных и неводных растворах смогут найти применение при моделировании мембранных структур клетки, в особенности при условиях окислительного стресса, позволяя глубже понять процессы старения. Практическая значимость работы также во многом связана с необходимостью поиска новых технологий удаления избыточных количеств билирубина из биологических сред при гипербилирубинемиях. Конкурирующие реакции окисления билирубина и других фоточувствительных пигментов во многом позволяют понять молекулярные механизмы фотодинамической терапии опухолевых заболеваний и лечения желтух. Выявленные закономерности в области влияния билирубина на физико-химические параметры связывания низкомолекулярных веществ с белками вносят вклад в формирование базы, необходимой для медицинской и супрамолекулярной химии. Полученные результаты используются в образовательном процессе при преподавании дисциплин «Основы координационной и супрамолекулярной химии», «Основы молекулярной биологии», «Химические основы жизни» студентам Ивановского отделения ВХК РАН.

Основные положения, выносимые на защиту. Кинетика индивидуального окисления билирубина и его альбуминового комплекса в водных растворах пероксида водорода, 2,2-азобис(2-амидинопропан)а, системе Фентона. Кинетика совместного окисления BR с АА и H2Q. Кинетика окисления BR пероксидом бензоила в органических растворителях. Квантовохимические моделирование процессов окисления BR в части описания энергетики реакций. Результаты исследования влияния присутствия BR в молекуле альбумина на кинетические и термодинамические параметры связывания низкомолекулярных лигандов – АA, H2Q, U, 5U, TSPP и BODIPY с белками.

Вклад автора. Подбор и анализ научной литературы по теме диссертации, экспериментальная часть работы, проведение компьютерного моделирования и обработка полученных результатов и их обсуждение выполнены лично автором. Стратегическое планирование исследований и методологии выполнения эксперимента, обсуждение результатов выполнены под руководством к.х.н., доцента Румянцева Е.В.

Апробация работы. Основные результаты работы представлены на V Международной конференции по порфиринам и фталоцианинам «ICPP-5» (Москва, 2008); X Международной конференции по физической химии порфиринов и их аналогов «ICPC-10» (Иваново, 2009); XII Молодежной конференции по органической химии (Суздаль, 2009); VIII Всероссийской конференции с международным участием «Химия и медицина, ОРХИМЕД» (Уфа, 2010); VIII Школе-конференции молодых ученых стран СНГ по химии порфиринов и родственных соединений (Абхазия, Гагра, 2009);

VIII Международной конференции «Биоантиоксидант» (Москва, 2010); II Международной научной конференции «Новые направления в химии гетероциклических соединений» (Железноводск, 2011); XIX Международном Менделеевском съезде по общей и прикладной химии (Волгоград, 2011); XVI Международной выставке химической промышленности и науки «Химия» (Москва, 2011); Международной молодёжной научной школе «Химия порфиринов и родственных соединений» в рамках фестиваля науки (Иваново, 2012); XIX Международном научном форуме студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов» (Москва, 2012), XXX Всероссийском симпозиуме по химической кинетике (Москва, 2012), II Всероссийской молодежной конференции «Успехи химической физики» (Черноголовка, 2013), XVth Conference on Heterocycles in Bioorganic Chemistry (Рига, 2013).

Публикации. Основное содержание диссертации опубликовано в 9 статьях ( статей в журналах из Перечня ВАК), а также в тезисах 14 докладов, опубликованных в трудах научных конференций различного уровня.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на страницах, содержит 24 таблицы, 60 рисунков, 3 схемы и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, основных результатов и выводов, списка цитируемой литературы, включающего 220 наименований цитируемых литературных источников.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Во Введении обоснована актуальность работы, выбор объектов исследования, определена научная новизна и практическая значимость, а также сформулированы цель и задачи исследования.

Глава 1 (Литературный обзор) состоит из 3 разделов. Первый раздел посвящен классификации, номенклатуре и структурным типам линейных олигопирролов, желчных пигментов и их производным. Рассматривается строение, биосинтез, биологические функции и физико-химические свойства желчных пигментов, их природных и синтетических аналогов. Рассмотрены новые аспекты химии BR и его производных, выявлены важнейшие вопросы, решаемые на сегодняшний день в этом направлении.

Во втором разделе обсуждаются вопросы, посвященные окислительным реакциям, антиоксидантной и антирадикальной активности желчных пигментов и, в особенности, билирубина. В третьем разделе обсуждаются проблемы, связанные с физикохимическими аспектами макромолекулярного комплексообразования биологически активных низкомолекулярных веществ, в том числе, и желчных пигментов с макромолекулами. Обсуждаются методы хемоинформатики и компьютерного прогноза межлекарственного взаимодействия и биотрансформации лекарств.

Глава 2 (Экспериментальная часть) включает описание методов очистки используемых соединений и растворителей. Приводится методология проведения спектрофотометрического, спектрофлуориметрического и кинетического экспериментов, а также характеристик аппаратуры и оборудования, методов проведения квантовохимических расчетов.

Рис. 1. Структура BR в «ridge-tile» В ходе реакции окисления BR во всех случаях 5Z, 15Z-конформации. Стрелками отмечены потенциальные центры атаки свободными радикалами.

моль/л и BR от 5.2·10 до 3.1·10–5 моль/л, соответственно, в спектрах поглощения не фиксируется появление полос, характерных для биливердина (BV) – пигмента, образующегося при окислении метиленового спейсера в положении 10 (–СН2–) до метинового (–СН=). Полученные данные свидетельствуют о разрушении тетрапиррольного хромофора до монопиррольных продуктов без стадии образования билатриена. Реакция окисления описывается формальным кинетическим уравнением псевдопервого порядка по пигменту. Учитывая, что применение хинонов, FeCl3, билирубиноксидазы, а также электрохимического окисления приводит к образованию BV, использование пероксида водорода изменяет механизм превращений BR.

Результаты кинетического эксперимента, а также данные литературы свидетельствуют о возможности взаимодействия протонов NH-групп молекул BR с пероксильными радикалами, образующимися в результате распада пероксида водорода в лимитирующей стадии с образованием радикального интермедиата с высокой реакционной способностью: BR–NH + HOO BR–N + H2O2.

Замена Н2О2 на систему Фентона (металлоин- Таблица 1. Эффективные (kobs) констандуцированный распад H2O2) – систему генерации ра- ты скорости (с0 = 1.05окисления систереакции BR и Fe2+ + H2O2 = Fe3+ + OH– + OH, сопровождается рН = 7.4 и Т = 298.2 К.

аналогичными изменениями в ЭСП растворов с образом взаимодействующих с NH-центрами молекулами BR:

BR–NH + HO BR–N + H2O. Тем не менее, учитывая более высокую реакционную способность HO-радикалов, этот путь не является единственно возможным, что и обусловливает рост константы скорости окислительных процессов для данной системы. Таким образом, из имеющихся в литературе сведений о трех возможных механизмах окислительных превращений BR лишь один из них находит экспериментальное подтверждение (подробнее см. диссертацию, рис. 2.22 с. 38).

(BRBSA) приводит к заметному понижению реакционной способности 0. Сравнительный анализ наблю- 0. окисления BR и BRBSA указывает сти комплекса по сравнению со сво- Рис. 2. Кинетические кривые окисления водных растворов бодным пигментом как в случае BR (1,3) (с0 = 1.92·10–5 М) и BRBSA (2,4) (с0 = 2.13·10–5 М) окислителя H2O2 3.0, 298.2 К в полулогарифмических координатах.

ет наличие этого эффекта (см. табл. 1).

Наибольший вклад в стабилизацию белкового комплекса BR вносят донорноакцепторные взаимодействия между NH-группами пиррольных колец и электронодонорными группами радикалов аминокислотной последовательности альбумина. Таким образом, предложенная схема обменного взаимодействия NH-групп BR с HOOрадикалами позволяет объяснить резкое понижение реакционной способности тетрапиррольного пигмента в связанном с белком состоянии.

Увеличение pH растворов приводит к усложнению характера окислительных превращений BR. Даже в отсутствие окислителя – H2O2, происходит постепенное уменьшение концентрации BR в растворе с появлением промежуточного продукта – BV (рис. 3). Реакция окисления, как и в предыдущих случаях, описывается формальным кинетическим уравнением псевдопервого порядка по пигменту.

Резкое возрастание наблюдаемых констант скорости окисления BR с 3.8·10–5 до 9.2·10–3 с–1 при увеличении рН с 7.7 до 12.7 связано со смещением кислотноосновного равновесия: H2BR = H+ + HBR– = 2H+ + BR2– в сторону образования моноанионной и неустойчивой дианионной форм BR с дальнейшим распадом молекулы.

рН среды происходит разрушение «ridgetile»-конформации пигмента и, соответственно, увеличивается число реакционных центров – NH-групп пиррольных конм – 0; 2 – 3600. Стрелками показано направление эволюции спектра совместного окисления BR с АA и H2Q в водных растворах. Окислительные реакции характеризуются теми же спектральными изменениями, наблюдаемыми для растворов индивидуальных соединений. Маршрут реакции окисления BR не отличается от окисления его в свободном состоянии в данных условиях: в ЭСП не фиксируется полос поглощения BV. Присутствие AA не оказывает влияния на механизм окисления BR, конечными продуктами которого, как и в случае пероксида водорода, являются монопиррольные продукты. Анализ кинетических параметров приводит к выводу о весьма существенном влиянии присутствия AA на скорость окисления BR. Значения kobs для реакции окисления AA кислородом воздуха в присутствии BR уменьшается в 2 раза, а окисление BR в присутствии AA несколько ускоряется (табл. 2). Аналогичная зависимость наблюдается при окислении соединений пероксидом водорода.

Формальное кинетическое уравнение реакций окисления BR и AA пероксидом рость реакции.

окисления АА понижается более чем в 80 раз, в то время как скорость окисления BR увеличивается в 2.5 раза (эффект активации). Наблюдаемый эффект ингибирования окисления АА и активации окисления BR связан со взаимной конкуренцией субстратов за активные формы кислорода. Увеличение скорости окисления BR с учетом обменного механизма взаимодействия протонов NH-групп со свободными радикалами в лимитирующей стадии связано также с разрушением «ridge-tile»-конформации пигмента.

При совместном окислении BR и H2Q в условиях окисления кислородом воздуха, а также в присутствии пероксида водорода в спектрах реакционной смеси наблюдается появление хинона (Q, 245 нм) и уменьшение максимумов поглощения соответствующих H2Q (290 нм) и BR. Однако в присутствии пероксида водорода в спектрах появляется максимум, соответствующий поглощению BV (650 нм). Применение H2O как источника радикалов приводит к существенному уменьшению константы скорости окисления BR и незначительному росту таковой для H2Q по сравнению с окислением их в свободном состоянии (табл. 3).

Таким образом, в отличие от АА, Таблица 3. Наблюдаемые (kobs) константы скоростей реполученные данные свидетельствуют акции окисления BR (НH2Q вкислородом воздуха при2)рН об ингибировании окисления BR и ак- 7.4 и Т = 298.15 К* скорость взаимодействия H2Q с гид- H2Q (245) 21.0 BR + H2Q (650) ропероксидом на промежуточных ста- * Прим. Указана «рабочая» длина волны, на которой была диях, а также образование активных определена скорость реакции. Погрешность в определении kobs составила не более 10 %.

антирадикалов – семихинонов, объясняет ранее отсутствие в спектрах полос, соответствующих монопиррольным продуктам.

Образование BV происходит в процессе последовательной цепи сопряжения:

H2Q + H2O2 Q + 2H2O; Q + BR BV + H2Q; BV + Q продукты окисления.

В разделе 3 представлены результаты экспериментов по выявлению закономерностей в реакциях окисления билирубина и его альбуминового комплекса инициирующими агентами органической природы в водных и неводных растворах. В качестве водорастворимого инициатора был использован 2,2-азобис-2-амидинопропан (ABAP), в качестве органорастворимого – пероксид бензоила (BP).

В хлороформе основным продуктом окисления является пурпурин, который в сиде (ДМСО) и диметилформамиде (ДМФА) 0. пурпурина и затем до холетелина. Превраще- 0. Рис. 4. Изменения в электронных спектрах порадикалами, образованными в результате гоглощения растворов BR (c0 = 2.9·10–5 М ) перокмолитического распада пероксида бензоила. сидом бензоила (c0 = 0.013 М) при 298.2 К,, с: Предполагается обменное взаимодей- – 0; 2 – 3600. Стрелкой показано направление ствие радикала по метиленовому мостику эволюции спектра.

пигмента с последующей локализацией электрона на ближайшем атоме азота одного из пиррольных колец. Второй радикал, образованный пероксидом, аналогичным образом вступает в реакцию по метиленовому спейсеру с образованием BV. Образование пурпурина и холетелина происходит схожим образом, за исключением присоединений атома кислорода по метиновым мостикам фрагментов дипирролилметенов (положения 5 и 15). Образование биливердина, пурпурина и холетелина подтверждается данными спектрофотометрии и хроматографического анализа.

Скорость реакции в ДМСО превышает таковую по сравнению с водными растворами в случае применения неорганических пероксидов за счет стабилизации иного переходного состояния (табл. 4).

Таблица 4. Эффективные (kobs) и бимолекулярные (k) константы скорости реакции окисления BR пенаблюдаются аналогичные изменения в роксидом бензоила в ДМСО.

эффект «белковой защиты» с одновременным понижением энергии активации процесса окисления. Таким образом, кинетическое проявление данного эффекта заключается в стабилизации переходного состояния белком и большой роли энтропийного вклада, однако процесс лимитирован диссоциацией комплекса: BRBSA = BR + BSA.

Одной из интересных особенностей протекания данного процесса является также и то, что образование BV из BR в связанном состоянии кинетически контролируемо:

образующийся BV связывается с белком и оказывается менее подвержен действию активных частиц, в отличие от окисления свободного BR.

В разделе 4 представлены результаты квантово-химических расчетов исследуемых свободно-радикальных процессов с участием BR. Полуэмпирическими методами АМ-1, РМ-3 и с помощью методов функционала плотности DFT/B3LYP/6-31G (d,p), а также с применением теории 3D-RISM, проведено моделирование и сравнительный анализ реакций окисления BR пероксильными и гидроксильными радикалами. Отправной точкой при построении схем явились многоцентровая модель антирадикального действия BR (см. рис. 1), экспериментальные данные по окислению BR H2O2, а также ранние исследования окисления пигмента в подобных условиях и анализ соответствующих продуктов окисления.

Схема 1. Схема окисления BR пероксидом водорода с отщеплением термитерминального пирнальных пиррольных групп.

метилвинилмалеимида (схема 1), как следует из данных табл. 5., является энергетически выгодным. На следующих стадиях обсуждаемого маршрута возможно окисление дипиррола до монопроизводных, среди которых фигурирует диформилпиррол или через производные дипирролилметена (с преобладанием первого процесса). Трипирреновые соединения также могут подвергаться окислению по метиленовому и/или метиновому спейсеру с образованием многих продуктов, среди которых можно обнаружить дипиррольные и нерадикальные монопиррольные соединения, в том числе и гематиновую кислоту, как это было показано в работах по электрохимическому окислению BR.

образованием дипирроO произ- Схема 2. Схема окисления BR пероксидом водорода до дипирролилметенолилметеновых водных, которые затем окисляются по метиновому спейсеру до монопиррольных продуктов, в частности, диформилпиррола.

Другие варианты этого процесса аналогичны рассматриваемому и отличаются только тем, что продукты окисления имеют иные периферийные заместители. Этот процесс, в отличие от предыдущего, энергетически менее выгоден.

ным способом окислеO ется образование BV – гося в ходе окисления Схема 3. Схема реакцийиокисления(2) конформаций. BR до BV пероксидом водорода c образованием «ridge-tile» (1) «helical»

билирубина по метиленовому спейсеру. Расчет энергетики путей образования двух конформаций BV («ridge-tile» и «helical») показывает, что наиболее предпочтительным является процесс с образованием «helical»-конформации: для образования BV необходим разрыв сетки внутримолекулярных водородных связей.

Перенос исследуемых ре- Таблица 5. Энергетический эффект реакций в каждой из схем акций из газовой фазы в водный окисления, рассчитанныхAM-1 B3LYP/6-31G (d,p) 3D-RISM годным, по сравнению с остальными процессами (см. табл. 5). Таким образом, квантовохимические расчеты подтверждают экспериментальные данные, а также предположения относительно маршрута реакции и окисления BR до монопиррольных соединений. Фактически, варьируя тип растворителя и природу окисляющего агента, возможно увеличить или уменьшить как дифференциальную, так и интегральную селективность реакции окисления BR в BV и, соответственно, замедлить или ускорить остальные реакции.

В разделе 5 представлен анализ исследования взаимодействия различных биологически значимых соединений со свободным альбумином, и будучи связанным в макромолекулярный комплекс с билирубином. В качестве лигандов были использованы АA, H2Q, U, 5U, TSPP и BODIPY.

Полученные с помощью флуоресцентной спектроскопии результаты свидетельствуют о том, что связывание лигандов с активными центрами белков носит неспецифический характер и осуществляется за счет различного рода универсальных взаимодействий: образующиеся макромолекулярные комплексы являются легкодиссоциирующими.

АA H 2Q TSPP BODIPY

Тем не менее, в каждом из случаев можно выделить некоторые особенности протекания данных процессов. Общим для всех исследуемых систем является то, что интенсивность флуоресценции BSA и BRBSA при увеличении концентрации лигандов в растворе закономерно уменьшается (рис. 5).

от 1 до 7: 0; 2.33; 3.89; 5.83; 8.03; 11.7; 16.1) и график ствием триплетной молекулы с тушитеуравнения Штерна-Фольмера для системы BSA + U теризующее динамическое тушение (кинетический аспект), сохраняется только на небольшом участке концентраций тушителя (сmax) после чего наблюдается положительное отклонение графика, свидетельствующее об образовании макромолекулярных комплексов. Тем не менее, отмечается, что присутствие BR в составе белка способствует росту константы скорости тушения в случае азотистых оснований, в отличие от других соединений (табл. 6).

Таблица 6. Константы динамического тушения для различных взаимодействующих систем в среде фосфатного буфера при pH 7.4 и T = 298.2 K.

Лиганд Увеличение скорости тушения связано с увеличением скорости (коэффициента) диффузии урацилов к фотоактивным центрам молекул билирубин-связанного протеина. Таким образом, комплекс BRBSA оказывается более проницаем для молекул U и 5U, по сравнению с другими исследуемыми соединениями. Согласно приведенным данным, все константы скоростей тушения в 5–500 превышают диффузионный предел тушения (1·1010 М–1·c–1) при максимальном разбросе столкновений тушителей и биополимеров. То есть, динамическая составляющая не является доминирующей, а тушение флуоресценции белков лигандами вызвано образованием в основном состоянии нефлуоресцирующих молекулярных комплексов белков и биомолекул. В образовании комплексов, наряду с универсальными, в том числе гидрофобными взаимодействиями, могут принимать участие донорно-акцепторные и водородные связи между аминокислотными остатками белка и функциональными группами лигандов.

Определение параметров взаимодействия в рамках теории статического тушения было сделано по уравнению, являющемуся модификацией уравнения ШтернаФольмера с поправкой на число сайтов связывания молекул лигандов на белке (табл.

7).

Показано, что да- Таблица 7. Термодинамические параметры, характеризующие статическое же с учетом параметра тушение белков лигандами. – BSA вания с динамическим АA 20.1 ± 1.2 –24.1 ± 1.4 1.63 15.2 ± 1.4 –23.5 ± 1.3 1. тушением. Наиболее 0.59 ± 0.04 –15.6 ± 0.8 2.80 0.49 ± 0.05 –15.1 ± 0.7 4. термодинамически ста- 1.77 ± 0.10 –18.2 ± 0.8 1.62 1.84 ± 0.10 –18.3 ± 0.8 1.

BODIPY

BODIPY, наименее стабильными – системы белок-U, 5U.

Эффективность взаимодействия BSA и BRBSA с лигандами была описана в рамках модели безызлучательного переноса энергии Фёрстера (флуоресцентный резонансный перенос энергии).

Все полученные Таблица 8. Характеристики флуоресцентного резонансного переноса энерзначения r лежат в пре- гии, рассчитанные поБелок – BSAФёрстера для разных систем.

делах 0.5R0 r 2R0, Эффективнее всего это происходит в случае TSPP и BODIPY, причем замена BSA на комплекс с BR существенно влияет на эффективность переноса энергии, чего не происходит в случае АА и 5U. Корреляция ферстеровского радиуса и констант тушения свидетельствует о высокой степени эффективности тушения в случае пиррол-содержащих соединений.

Структурные изменения в белках при взаимодействии с лигандами были изучены с помощью синхронной флуоресценции. Полученные результаты позволяют предположить, что все соединения способны связываться с белками в областях, где расположены остатки тирозина и триптофана (рис. 6, а и б) соответственно.

Практически во всех исследуемых системах происходит изменение формы и положения максимумов флуоресценции каждого из аминокислотных остатков. Батохромные смещения спектров в случае АА, U, 5U связаны с перемещением остатков тирозина и триптофана в гидрофильную область.

Рис. 6. Спектры синхронной флуоресценции BSA при = нм и = 60 нм (вставка) в присутствии урацила (c(U)·10, М от 1 до 6: 0; 2.33; 3.89; 5.83; 11.7; 16.1) при T = 298.2 К.

проявляющейся в отсутствии изменений в спектрах синхронной флуоресценции.

Таким образом, учитывая широкий спектр используемых систем «флуорофортушитель», можно легко подобрать эти комбинации для решения различного рода практических задач, в частности, для селективного тушения определенного флуорофора и выяснения влияния факторов связывания биолигандов с протеинами на антиоксидантную активность протеин-связанных молекул.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ

1. По данным электронной и флуоресцентной спектроскопии с привлечением квантово-химических расчетов изучена формальная кинетика реакций окисления билирубина в водных и неводных растворах (ДМФА, ДМСО, хлороформ) с использованием пероксида водорода, системы Фентона, 2,2-азобис-2-амидинопропана, а также пероксида бензоила в качестве окислителей. Определены константы скоростей исследуемых реакций и активационные параметры.

2. Установлено, что в водных растворах конечными продуктами окисления билирубина являются монопиррольные производные. Показано, что увеличение рН водных растворов приводит к распаду билирубина с образованием на промежуточной стадии биливердина. Применение органических растворителей и окислителей аналогичным образом приводит к увеличению констант скоростей окисления BR, изменению механизма его деструкции и появлению в продуктах реакции различных билатриенов, в то время как связывание билирубина альбумином приводит к уменьшению констант скоростей реакций окисления пигмента вне зависимости от природы используемых окислителей, что связано с кинетическим проявлением эффекта «белковой защиты».

3. В реакциях совместного окисления билирубина, аскорбиновой кислоты и гидрохинона показано ингибирование окисления аскорбата, в случае гидрохинона наблюдается обратный эффект.

4. Исследовано влияние присутствия билирубина в макромолекулярном комплексе с альбумином на характер макромолекулярных взаимодействий с биомолекулами (TSPP, BODIPY, AА, 5U, U, H2Q). Установлено, что тушение флуоресценции белков является результатом комплексообразования флуорофор-лиганд. Показано, что степень взаимодействия биомолекул с белками, как в случае BSA, так и BRBSA изменяется в ряду TSPP BODIPY AА 5U U H2Q. Образующиеся комплексы являются среднепрочными (константы образования составляют ~103105 л/моль). Влияние билирубина в составе комплекса отрицательно сказывается на параметрах взаимодействия белков и лигандов, за исключением U и 5U.

5. Согласно данным синхронной флуоресценции, при взаимодействии TSPP и BODIPY происходит частичная денатурация белка и его конъюгата, причем порфирин способен вытеснять билирубин из его комплекса с протеином. Во всех остальных случаях происходит перемещение остатков тирозина и триптофана в гидрофильные и гидрофобные области. Доминирующий вклад в стабилизацию комплексов вносит статический механизм тушения флуоресценции посредством неспецифических взаимодействий.

Основное содержание работы

изложено в следующих публикациях:

1. Solomonov, A.V. Serum albumin and its bilirubin complex as drug-carrier proteins for water-soluble porphyrin: a spectroscopic study / A.V. Solomonov, E.V. Rumyantsev, E.V. Antina // Monatshefte fr Chemie / Chemical Monthly – 2013. – V. 144. No. 11. – P. 1743–1749.

2. Solomonov, A.V. The study of molecular mechanisms of antioxidant action of bile pigments and investigating their role during the interaction of biomolecules with a drug carrier protein / A.V. Solomonov, E.V. Rumyantsev, B.A. Kochergin, M.K. Serebryakova, P.V. Uckhov, E.V. Antina // FEBS Journal. – 2013. – V. 280. Suppl. 1 – P. 611.

3. Solomonov, A.V. Spectroscopic Studies of the Supramolecular Interactions Between Uracil and 5Hydroxy-6-Methyluracil with Bovine Serum Albumin and its Bilirubin Complex / A.V. Solomonov, E.V. Rumyantsev, S.P. Ivanov, B.A. Kochergin, E.V. Antina // The Protein Journal. – 2013. – V. 32. No 5. – P. 343–355.

4. Соломонов, А.В. Молекулярное комплексообразование урацила с бычьим сывороточным альбумином и его билирубиновым комплексом по данным спектральных исследований / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, С.П. Иванов, Б.А. Кочергин, Е.В. Антина // Известия Академии наук. Серия химическая. – 2012. – № 10. – С. 1974–1979.

5. Соломонов, А.В. Кинетика окисления билирубина и аскорбиновой кислоты при совместном присутствии / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Б.А. Кочергин, Е.В. Антина // Журнал физической химии. – 2012. – Т. 85. № 7. – С. 1162–1167.

6. Соломонов, А.В. Формальная кинетика окисления билирубина и его комплекса с альбумином пероксидом водорода / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Е.В. Антина // Журнал физической химии. – 2010. – Т. 84. – № 12. – С. 2255–2259.

7. Marfin, J.S. Linear tetrapyrroles: relation physical-chemistry properties and biochemical functions / J.S.

Marfin, E.V. Rumyantsev, E.V. Antina, G.B. Guseva, S.P. Makarova, A.V. Solomonov // J. Porphyrins and phthalocyanines. – 2008. – Vol. 12. No 3–6. – P. 631.

8. Соломонов, А.В. Спектральное исследование взаимодействия аскорбиновой кислоты с бычьим сывороточным альбумином и его комплексом с билирубином / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Б.А. Кочергин, Е.В. Антина // Известия ВУЗов. Серия Химия и химическая технология. – 2013. – Т. 56. № 3. – С. 51–55.

9. Соломонов, А.В. Теоретическое и экспериментальное исследование окислительных превращений билирубина в различных модельных системах / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, А.С. Тимин, М.К. Серебрякова // VI Всероссийская молодежная школа-конференция «Квантово-химические расчеты»: мат. конф. (сб. стат.) – Иваново, 2013. – С. 351–355.

10. Kochergin, B.A Interaction of bodipy with albumin and its bilirubin complex / B.A. Kochergin, A.V.

Solomonov, E.V. Rumyantsev // XVth Conference on Heterocycles in Bio-organic Chemistry: abst.

book. – Riga, 2013. – P. 197.

11. Ухов, П.В. Антирадикальные свойства билирубина и его комплекса с альбумином в модельной реакции инициированного окисления / П.В. Ухов, А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Е.В. Антина // Успехи химической физики: II Всероссийская молодежная конференция: тез. докл. – Черноголовка, 2013. – С. 72.

12. Серебрякова, М.К. Кинетика окисления билирубина в неводных растворителях / М.К. Серебрякова, А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Е.В. Антина // XXX Всероссийский симпозиум по химической кинетике: тез. докл. – Москва, 2012. – С. 30.

13. Серебрякова, М.К. Формальная кинетика инициированного окисления билирубина в модельных растворителях / М.К. Серебрякова, А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев Е.В., А.В. Антина // Химия порфиринов и родственных соединений: Международная молодёжная научная школа в рамках фестиваля науки: тез. докл. – Иваново, 2012. – С. 119–120.

14. Соломонов, А.В. Молекулярный докинг биомолекул и антирадикалов на биополимерах и реакции их сопряженного окисления по данным спектральных исследований [Электронный ресурс] / А.В. Соломонов // Ломоносов-2012: XIX Международный научный форум (конференция): тез.

докл. – Москва, 2012.

15. Соломонов, А.В. Билирубин и другие биомолекулы как антиоксиданты и носители в реакциях индивидуального и сопряженного окисления / А.В. Соломонов // Химия-2011: XVI Международная выставка химической промышленности и науки: тез. докл. – Москва, 2011 – С. 11–12.

16. Соломонов, А.В. Спектральные исследования супрамолекулярных взаимодействий антирадикалов и биополимеров и реакции их сопряженного окисления / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Б.А. Кочергин, Е.В. Антина // XIX Международный Менделеевский съезд по общей и прикладной химии: тез. докл. – Волгоград, 2011. – Т. 1. – С. 288.

17. Соломонов, А.В. Окислительные реакции билирубина и его макромолекулярных комплексов в водных растворах / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Б.А. Кочергин, Е.В. Антина // Новые направления в химии гетероциклических соединений: II Международная научная конференция:

тез. докл. – Железноводск, 2011. – С. 90.

18. Соломонов, А.В. Исследование антирадикальной активности билирубина в модельных системах / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Е.В. Антина // Биоантиоксидант: VIII Международная конференция: тез. докл. – Москва, 2010. – С. 442–444.

19. Соломонов, А.В. Окислительные реакции билирубина и аскорбиновой кислоты в водных растворах / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Е.В. Антина. / Химия и медицина: VIII Всероссийская конференция с международным участием: тез. докл. – Уфа, 2010. – С. 312-313.

20. Соломонов, А.В. Квантово-химический анализ реакций окисления билирубина / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Е.В. Антина // XII Молодежная конференция по органической химии: тез.

докл. – Суздаль, 2009. – С. 377–380.

21. Соломонов, А.В. Квантово-химическое моделирование реакций свободно-радикального окисления билирубина / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Е.В. Антина // VIII Школа-конференция молодых ученых стран СНГ по химии порфиринов и родственных соединений: тез. докл. – Гагра, Абхазия, 2009. – С. 50–51.

22. Соломонов, А.В. Особенности окислительных реакций билирубина / А.В. Соломонов, Е.В. Румянцев, Е.В. Антина // ICPC-10: X Международная конференция по физической химии порфиринов и их аналогов: тез. докл. – Иваново, 2009. – С. 164.

23. Marfin, J.S., Linear Tetrapyrroles: Relation Phisical-chemistry Properties and Biological Functions / J.S. Marfin, E.V. Rumyantsev, E.V. Antina, G.B. Guseva, S.P. Makarova, A.V. Solomonov // ICPP-5:

International Conference on Porphyrins and Phthalocyanines: abst. book. – Moscow, 2008. – P. 469.

Автор выражает свою признательность научному руководителю к.х.н., доц. Румянцеву Е.В. за неоценимую помощь и при подготовке диссертации, а также всему коллективу кафедры неорганической химии за всестороннюю поддержку.

Подписано в печать. Формат 6084 1/16. Бумага писчая.

Усл. печ. л. 1,00. Уч.-изд. л. 1,03. Тираж 90 экз. Заказ _.

ФГБОУ ВПО «Ивановский государственный химико-технологический университет»

Отпечатано на полиграфическом оборудовании кафедры экономики и финансов ФГБОУ ВПО «ИГХТУ» 153000, г. Иваново, пр. Фридриха Энгельса,

 
Похожие работы:

«Контарева Татьяна Александровна Особенности деформационного поведения и разрушения высоконаполненных композиционных материалов на основе полиэтилена и частиц резины (резинопластов) Специальность: 02.00.06 – высокомолекулярные соединения АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Москва – 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институте синтетических полимерных материалов им. Н.С. Ениколопова Российской...»

«Сидорова Ольга Ивановна КАТАЛИТИЧЕСКИЙ СИНТЕЗ АЦЕТОНИТРИЛА АММОНОЛИЗОМ УКСУСНОЙ КИСЛОТЫ Специальность 02.00.04 – физическая химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Томск 2003 2 Работа выполнена в Томском государственном университете и Институте химии нефти СО РАН Научные руководители: доктор химических наук, профессор Курина Лариса Николаевна доктор химических наук Головко Анатолий Кузьмич Официальные оппоненты : доктор химических...»

«АФОНИН Михаил Юрьевич ИССЛЕДОВАНИЯ РЕАКЦИОННОЙ СПОСОБНОСТИ КЛАСТЕРОВ (-H)Os3(-О=СR)(CO)10 И (-H)2Os3(CO)10 В ПРОЦЕССАХ АКТИВАЦИИ ГАЛОИДУГЛЕВОДОРОДОВ, АМИНОВ И СИНТЕЗЕ ГЕТЕРОМЕТАЛЛИЧЕСКИХ КОМПЛЕКСОВ 02.00.01 – неорганическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Новосибирск – 2011 Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте неорганической химии им. А. В. Николаева Сибирского отделения РАН Научный руководитель...»

«ЗАЙЦЕВ ИЛЬЯ СЕРГЕЕВИЧ ПОЛИМЕРНЫЕ ПЛЕНКИ И МОНОСЛОИ С ФОТОЧУВСТВИТЕЛЬНЫМ ПРОИЗВОДНЫМ ДИТИАКРАУНЭФИРА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАТИОНОВ РТУТИ(II) 02.00.06 –высокомолекулярные соединения 02.00.11- коллоидная химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук МОСКВА 2012 www.sp-department.ru Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Московская государственная академия...»

«РУДОВ Андрей Андреевич ИЗУЧЕНИЕ ДОМЕННЫХ СТРУКТУР В ТОНКИХ И СВЕРХТОНКИХ ПЛЕНКАХ БЛОК-СОПОЛИМЕРОВ Специальности 02.00.06 высокомолекулярные соединения, Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Москва – 2014 Работа выполнена на кафедре физики полимеров и кристаллов физического факультета Московского Государственного Университета имени М. В. Ломоносова. Научный руководитель : Доктор физико-математических наук, профессор Потемкин...»

«РУДЕНКО АНДРЕЙ ОЛЕГОВИЧ Лигандообменное сорбционное концентрирование на сверхсшитых полистиролах при ВЭЖХ определении антибиотиков, аминокислот и витаминов Специальность 02.00.02 – аналитическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата химических наук Санкт-Петербург 2011 Работа выполнена на кафедре органической химии химического факультета СанктПетербургского государственного университета. Научный руководитель : Доктор химических наук, профессор...»

«Савчук Сергей Александрович Новые методические подходы к контролю качества алкогольной продукции и к выявлению наркотических веществ в биологических средах хроматографическими и хромато-масс-спектрометрическими методами Специальность 02.00.02 – Аналитическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора химических наук Санкт-Петербург 2012 г. Работа выполнена в лаборатории токсикологии Национального научного...»

«Пучина Гульфия Рашитовна СИНТЕЗ И ПРЕВРАЩЕНИЯ 6- И 6,8-ЗАМЕЩЕННЫХ 3-БЕНЗИЛ-3АЗАБИЦИКЛО[3.3.1]НОНАН-9-ОНОВ 02.00.03 - Органическая химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Уфа – 2007 2 Работа выполнена в Институте органической химии Уфимского научного центра Российской Академии наук и Уфимской государственной академии экономики и сервиса. Научный руководитель : кандидат химических наук, доцент Вафина Гузэль Фагимовна Официальные...»

«Бейрахова Ксения Андреевна Рекомбинантные полипептиды для терапии глазных заболеваний, сопровождающихся патологическим ангиогенезом специальность - 02.00.10 - биоорганическая химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Москва 2012 Работа выполнена в лаборатории биотехнологии Федерального...»

«УДК 577.175.8'17 КОРОЛЬКОВ Валерий Игоревич СИНТЕЗ И ИЗУЧЕНИЕ КОНФОРМАЦИОН НО-ОГРАН ИЧЕННЬIХ АНАЛОГОВ ЭНКЕФАЛИНА СПЕЦИАЛЬНОСТЬ 02.00.06ХИМИЯ ВЬIСОКОМОЛЕКУЛЯРНЬIХ СОЕДИНЕНИй АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук ЛЕНИНГРАД www.sp-department.ru Работа выполнена в институте высокомолеку.~ярных соединений АН СССР. Научный руководительдоктор...»

«Борисова Ксения Леонидовна Гидроксилированные нафтазарины в синтезе природных хиноидных соединений и их аналогов 02.00.03 – Органическая химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Владивосток – 2012 -2 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Тихоокеанском институте биоорганической химии им. Г.Б. Елякова ДВО РАН доктор химических наук, старший научный Научный руководитель : сотрудник Ануфриев Виктор...»

«ГЕРАСЬКИН АНДРЕЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ СИНТЕЗ И СВОЙСТВА ПЛЕНОК Mg(Fe0,8Ga0,2)2O4– НА ПОДЛОЖКАХ Si С ТЕРМОСТАБИЛЬНЫМИ МЕЖФАЗНЫМИ ГРАНИЦАМИ 02.00.21 – Химия твердого тела АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Москва 2014 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институте общей и неорганической химии им. Н.С. Курнакова РАН и Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального...»

«ПЕТУХОВ ИВАН АЛЕКСЕЕВИЧ СИНТЕЗ И ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ ПОЛИКАТИОННЫХ ЛИПОФИЛЬНЫХ АГЕНТОВ ТРАНСФЕКЦИИ 02.00.10 — Биоорганическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук МОСКВА — 2010 Работа выполнена на кафедре химии и технологии биологически активных соединений им. Н.А. Преображенского Московской государственной академии тонкой химической технологии им. М. В. Ломоносова Научный руководитель : доктор химических наук, профессор Г.А....»

«Галяутдинова Алсу Фердинандовна ПОЛИМЕРЫ НА ОСНОВЕ ПРОСТОГО ПОЛИЭФИРА, АРОМАТИЧЕСКИХ ИЗОЦИАНАТОВ И ОКТАМЕТИЛЦИКЛОТЕТРАСИЛОКСАНА Специальность 02.00.06 –Высокомолекулярные соединения АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук МОСКВА-2010 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Казанский государственный технологический университет (ГОУ ВПО КГТУ) Научный руководитель : кандидат...»

«КРАСИКОВА Инна Николаевна ЛИПИДЫ НЕКОТОРЫХ НАЗЕМНЫХ И МОРСКИХ ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫХ БАКТЕРИЙ КАК ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ И ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ АНТАГОНИСТЫ ЭНДОТОКСИНОВ 02.00.10 — биоорганическая химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора химических наук Владивосток 2009 Работа выполнена в Тихоокеанском институте биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН Официальные оппоненты : член-корреспондент РАН, доктор биологических наук, профессор Васьковский Виктор...»

«Володько Александра Викторовна Полиэлектролитные комплексы хитозан-каррагинан 02.00.10 Биоорганическая химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Владивосток – 2014 Работа выполнена в Тихоокеанском институте биоорганической химии им. Г.Б. Елякова ДВО РАН доктор химических наук, старший научный сотрудник Научный руководитель : Ермак Ирина Михайловна Официальные Варламов Валерий Петрович доктор химических наук, профессор, оппоненты: зав....»

«КАРЛИНСКИЙ ДАВИД МИХАЙЛОВИЧ ИЗУЧЕНИЕ СВЯЗЫВАНИЯ ПЕРВОГО КОМПОНЕНТА СИСТЕМЫ КОМПЛЕМЕНТА С НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫМИ СОЕДИНЕНИЯМИ МЕТОДАМИ КОМПЬЮТЕРНОГО МОДЕЛИРОВАНИЯ 02.00.10. – Биоорганическая химия 03.00.04. – Биохимия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Москва – 2009 1 Работа выполнена на кафедре биотехнологии и бионанотехнологии Московской государственной академии тонкой химической технологии им. М.В. Ломоносова и лаборатории химии...»

«БИРЮКОВ АЛЕКСАНДР АЛЕКСАНДРОВИЧ ОДНОСТАДИЙНЫЙ СИНТЕЗ ДИСПЕРСИЙ И НАНОКОМПОЗИТОВ CdS/ПОЛИАКРИЛАТ С УЧАСТИЕМ ОПТИЧЕСКОГО ОБЛУЧЕНИЯ 02.00.04 – физическая химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Томск – 2010 Работа выполнена на кафедре аналитической химии Томского государственного университета Научные руководители: Кандидат химических наук, доцент Изаак Татьяна Ивановна Кандидат физико-математических наук, с.н.с. Светличный Валерий...»

«Гресь Ирина Михайловна РАЗРАБОТКА И ИССЛЕДОВАНИЕ СВОЙСТВ НОВЫХ МАТЕРИАЛОВ, ПОЛУЧАЕМЫХ ПОЛИМЕРИЗАЦИЕЙ АКРИЛАТОВ, СОДЕРЖАЩИХ РАСТВОРЕННЫЕ ПОЛИУРЕТАНОВЫЕ И ФТОРКАУЧУКИ 02.00.06 – Высокомолекулярные соединения АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Волгоград – 2009 2 Работа выполнена на кафедрах Аналитическая, физическая химия и физикохимия полимеров и Химия и технология переработки эластомеров в ГОУ ВПО Волгоградский государственный...»

«ОЛУДИНА ЮЛИЯ НИКОЛАЕВНА Синтез и свойства новых гибридных структур на основе азот- и фосфорсодержащих пространственно затрудненных фенолов 02.00.03 – органическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Казань-2014 Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Казанский национальный исследовательский технологический университет Научный руководитель : доктор...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.