WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального образования

«Санкт-Петербургский государственный университет»

На правах рукописи

Волков Иван Леонидович

СОЗДАНИЕ И ИЗУЧЕНИЕ ДНК-СТАБИЛИЗИРОВАННЫХ

ЛЮМИНЕСЦИРУЮЩИХ КЛАСТЕРОВ СЕРЕБРА

02.00.06 - высокомолекулярные соединения

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук

Санкт-Петербург – 2014

Работа выполнена в Санкт-Петербургском государственном университете.

Научный руководитель: профессор кафедры молекулярной биофизики Санкт-Петербургского государственного университета, доктор физико-математических наук, профессор Касьяненко Нина Анатольевна

Официальные оппоненты: заведующий лабораторией № Института высокомолекулярных соединений РАН, доктор физикоматематических наук, старший научный сотрудник Паутов Владимир Дмитриевич профессор кафедры «Биофизика»

Института физики, нанотехнологий и телекоммуникаций СПбГПУ, доктор биологических наук, доцент Скворцов Алексей Николаевич

Ведущая организация: Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт", ФГБУ Петербургский институт ядерной физики им.

Б. П. Константинова РАН, г. Гатчина, Ленинградская область.

Защита диссертации состоится 2014 г. в _ часов на заседании диссертационного совета Д212.232.33 по защите докторских и кандидатских диссертаций при Санкт-Петербургском государственном университете по адресу: 198504, г. Санкт-Петербург, Петродворец, Ульяновская 1, физический факультет СПбГУ, малый конференц-зал.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке им. М. Горького СПбГУ и сайте Санкт-Петербургского государственного университета spbu.ru

Автореферат диссертации разослан _ 2014 г.

Ученый секретарь диссертационного совета Д 212.232.33, к. ф.-м. н.: Поляничко А. М.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы исследования. Нанокластеры металлов, содержащие до нескольких десятков атомов, представляют особый класс нанообъектов, в электронные свойства которых существенный вклад вносят квантово-размерные эффекты, благодаря чему их электронно-энергетическая структура становится подобна молекулярной. Особенный интерес представляют кластеры благородных металлов (золота, серебра), которые показывают хорошую способность к люминесценции. Использование таких структур в качестве люминесцирующих биометок требует создания устойчивых в водных растворах систем. Для этого были разработаны методики получения полимер-стабилизированных кластеров с использованием синтетических и биологических полимеров. Особый интерес представляют ДНК-стабилизированные люминесцирующие кластеры серебра. Благодаря высокому сечению поглощения и значительному квантовому выходу, а также хорошей биосовместимости и фотостабильности, такие кластеры считаются перспективными для использования в качестве молекулярных сенсоров и зондов для биомиджинга. Согласно литературным данным, уникальным свойством ДНК-стабилизированных кластеров является влияние последовательности ДНК-матрицы, стабилизирующей кластер, на его спектральные свойства. Наличие долгоживущего возбужденного темнового состояния и возможность модулирования его заселенности дополнительной длинноволновой засветкой делает кластеры перспективными объектами для микроскопии сверхвысокого разрешения и методик синхронного детектирования. Однако данные о фотофизических параметрах возбужденных состояний были получены ранее только для кластеров одной спектральной группы, излучающих в красном диапазоне спектра, хотя люминесценция подобных структур наблюдалась при разных длинах волн.

Поэтому более подробное изучение люминесцентных свойств кластеров, синтезированных на различных матрицах, представляется актуальным.

Использование кластеров в качестве флуоресцентных меток для цитологических исследований подразумевает наличие способов их эффективной транспортировки через клеточную мембрану, разработка которых также является актуальной задачей. Известно, что комплексы высокомолекулярной ДНК с синтетическими поликатионами являются широко изученными системами для создания генных векторов. Включение в такую ДНК-полимерную наночастицу флуоресцирующих структур представляется перспективным способом упаковки кластеров для транспортировки внутрь клетки. Решению этих вопросов и посвящена диссертационная работа. Сказанное выше показывает, что выполненные в работе исследования представляют практический интерес и могут быть использованы в био- и нанотехнологических разработках.

Целью работы является создание и изучение свойств люминесцирующих ДНК-стабилизированных нанокластеров серебра и создание на их основе ДНК-полимерных наночастиц.

В связи с этим в диссертации решаются следующие задачи:

1. Подбор оптимальных условий для синтеза люминесцирующих кластеров серебра, стабилизированных высокомолекулярной ДНК, и изучение их спектральных свойств.

2. Получение ДНК-полимерных наночастиц, включающих кластеры серебра, и изучение их спектральных свойств в растворе и на поверхности графита.

Научная новизна работы заключается в следующем. Впервые продемонстрирована возможность синтеза кластеров на высокомолекулярной природной ДНК. Впервые была предложена и экспериментально проверена возможность включения кластеров в ДНК-полимерные наночастицы.

Получены новые данные о фотофизических параметрах возбужденных состояний кластеров, показывающие высокую эффективность перехода ДНК-стабилизированных кластеров в темновое состояние. Метод зондовоусиленной флуоресцентной сканирующей микроскопии был впервые применен для исследования ДНК-полимерных наночастиц, включающих флуоресцирующие кластеры серебра.

Положения, выносимые на защиту:

1. Разработана методика, позволяющая синтезировать люминесцирующие кластеры серебра на тимусной ДНК.

2. Проведена оценка значений сечения поглощения, квантового выхода и времени жизни темнового состояния для кластеров с максимумом возбуждения 532 нм.

3. Показана возможность формирования ДНК-полимерных флуоресцирующих наночастиц, содержащих кластеры серебра.

4. Показано, сформированные в растворе флуоресцирующие наночастицы ДНК-кластер-полимер сохраняют свои флуоресцентные свойства при высаживании на поверхность графита.

5. Методом зондово-усиленной флуоресцентной микроскопии получены спектры высаженных на поверхность графита флуоресцирующих ДНКполимерных наночастиц с пространственным разрешением, превышающим дифракционный предел.

свидетельствуют о возможности создания люминесцирующих биосовместимых ДНК-полимерных наночастиц. Высокий квантовый выход темнового состояния ДНК-стабилизированных кластеров, оценка величины которого выполнена в работе, обеспечивает преимущество при использовании кластеров для микроскопии сверхразрешения и для их флуоресцентного изображения по сравнению с другими флуорофорами.

Достоверность полученных результатов подтверждается согласованностью данных, полученных различными методами.

Результаты работы докладывались и обсуждались на международных конференциях:

1. Ivan Volkov, Fluorescence Properties of Silver Nanoclusters in DNA solution / Ivan Volkov, Alexey Kononov, Ruslan Ramazanov, Nina Kasyanenko // Quantitative Imaging and Spectroscopy in Neuroscience (QISIN), September 16-19, 2012, SaintPetersburg, Russia, P. 55–56.

2. Ivan Volkov, Study of the interaction of silver nanoparticles and Ag+ ions with DNA / Ivan Volkov, Mikhail Varshavskii, Alexey Kononov, Valeriy Rolich, Nina Kasyanenko // Biophysical Society 56th Annual Meeting, Can-Diego, California, USA, February 25 – 29, 2012.

По результатам данной работы опубликовано 2 статьи в рецензируемых научных журналах и 2 тезисов докладов.

Личный вклад автора заключается в непосредственном проведении всех экспериментов (кроме исследований образцов методами электронной микроскопии и измерения кинетики люминесценции, которые были выполнены на оборудовании ресурсных центров СПбГУ), в обработке и анализе полученных данных, участии в обсуждении результатов, подготовке публикаций по теме диссертации и написании работы.

Структура диссертации. Диссертация состоит из введения, четырех глав, заключения и содержит 134 страницы, 76 рисунков и 4 таблицы, список использованных источников включает 131 наименование.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Во введении обоснована актуальность темы исследования, сформулированы цели и задачи работы, раскрыты научная новизна, практическая значимость полученных результатов, приведены основные положения, выносимые на защиту.

В главе 1 диссертации рассматриваются основные представления о структуре и свойствах наночастиц и нанокластеров металлов, имеющиеся в литературе на сегодняшний день. Проведен анализ данных о синтезе, структуре и фотофизических свойствах люминесцирующих ДНКстабилизированных кластеров серебра, синтезируемых на коротких олигонуклеотидах с заданными последовательностями оснований.

В главе 2 кратко изложены физические основы методов исследования, использованных в работе, а также описаны протоколы приготовления люминесцирующих структур с использованием тимусной ДНК. В работе были использованы следующие методы: стационарная флуоресцентная спектроскопия (Hitachi 850 и Fluorolog-3) спектроскопия поглощения (СФнелинейная флуоресцентная спектроскопия насыщения с использованием импульсных и непрерывного лазеров, =532 нм, электронная микроскопия (Carl Zeiss Merlin, Carl Zeiss Libra 200FE), конфокальная и зондово-усиленная флуоресцентная микроскопия (ИНТЕГРА Спектра), динамическое рассеяние света (Photocor Complex), гель-электрофорез, вискозиметрия, круговой дихроизм (Mark IV). Исследования частично выполнены с использованием оборудования ресурсных центров СПбГУ («Нанотехнологии», «Оптические и лазерные методы исследования вещества» и «Диагностика функциональных материалов для медицины, фармакологии и наноэлектроники»).

Для приготовления образцов использовали коммерческий препарат тимусной ДНК («Sigma», молекулярная масса М = 8·10 6 определена вискозиметрически); реактивы (AgNO3, NaNO3, KMnO4, NaBH4) квалификации х.ч. полиаллиламин (M= 1,5·10 3), предоставленный к. х. н О. В. Назаровой (ИВС РАН). Анализ показал, что при используемых концентрациях компонентов (CДНК от 0 до 6·10-4 Мосн. и СAgNO3 от 0 до 1,2·10-4 М) оптимальным с точки зрения интенсивности люминесценции является значение r = C[Ag+]/[ДНК] = 0,2 – 0,3 (рис. 1) и CNaBH4 10-5 М.

В главе 3 рассмотрены спектральные свойства кластеров серебра, синтезированных на высокомолекулярной природной ДНК. Показано, что в растворе ДНК в 0,005 M NaNO3 с использованием разработанной в работе методики формируются кластеры, излучающие различных длинах волн в зависимости от длины волны возбуждения (рис. 2). Однако при возбуждении люминесценции на полосе поглощения ДНК отчетливо видно, что в спектре испускания присутствуют две неразрешенных полосы, относительная интенсивность которых меняется с течением времени (рис. 3а). В таком Рис. 3. Временные изменения после добавления восстановителя спектров испускания кластеров (ex = 280 нм), приготовленных в обычных условиях (а), при барботировании раствора азотом (б) и при добавлении различных концентраций KMnO4 (в) через 90 мин. после добавления NaBH4.

случае можно выделить кластеры двух основных типов, излучающие в красной области спектра (максимум около 690 нм), преобразующиеся с течением времени в кластеры, излучающие в желтом диапазоне (максимум около 580 нм). Наблюдаемые изменения спектра могут быть замедлены при барботировании раствора азотом (рис. 3б) или ускорены добавлением в раствор окислителя – перманганата калия (рис. 3в), что указывает на окислительную природу трансформации кластеров. Для этих двух групп кластеров получены близкие значения времен жизни люминесценции 2,4±0,1 нс, что согласуется с имеющимися в литературе данными для подобных кластеров, синтезированных на синтетических олигонуклеотидах.

Спектры возбуждения и поляризации люминесценции кластеров (рис. 4а) имеют три электронных перехода. Степень поляризации на полосе самого длинноволнового перехода P = 0,45±0,03 (рис. 4б) близка к максимальному значению 0,5.

Следовательно, кластеры действительно жестко связаны с вращательной диффузии которой Рис. 4. Спектры возбуждения флуоресценции, много больше времени жизни кластеров серебра. Спектры скорректированы на возбужденного состояния флуорофора, что, согласно уравнению Перрена, приводит к предельной поляризации. Самая коротковолновая интенсивная полоса в спектре возбуждения кластеров имеет максимум на 260 нм и форму, совпадающую со спектром поглощения ДНК (рис. 4а). Возбуждение в этой области приводит к испусканию всего ансамбля кластеров, а поляризация P = 0,08±0, соответствует углу между направлением дипольных моментов осцилляторов поглощения (оснований ДНК) и испускания (кластеров) приблизительно 60°.

При восстановлении серебра без ДНК при тех же концентрациях остальных компонентов в спектре поглощения раствора фиксируется пик плазмонного резонанса (рис. 5), который проявляется существенно слабее для Рис. 5. Спектры поглощения растворов, приготовленных восстановлением серебра в подложки и увеличения контраста изображения.

присутствии или отсутствии ДНК, через сутки после приготовления. CAgNO3 = 2,410-5 M, CNaBH4 = 1·10-5 М во всех растворах. сферической формы, содержат несколько десятков атомов, что близко к теоретической оценке размеров исследуемых люминесцирующих кластеров. К сожалению, мы не можем достоверно утверждать, что они являются искомыми люминесцирующими кластерами, так как методика приготовления образца не позволяет исключить наличие нелюминесцирующих структур. Для понимания того, связаны ли наблюдаемые частицы с ДНК, был приготовлен образец: на углеродную подложку наносили каплю исследуемого раствора и через минуту подложку промывали направленной струей воды и высушивали на воздухе.

Рис. 6. ПЭМ изображения структур, высаженных на углеродную подложку из раствора, содержащего кластеры серебра (а, б), и соответсвующие профили интенсивности (в), отражающие размер различимых частиц.

Сформированные таким образом «жгуты» ориентированных молекул ДНК практически не содержат наночастиц, большинство которых, по-видимому, находится в растворе и не взаимодействует с ДНК (рис. 7).

Для исследования фотофизических параметров флуорофоров методом спектроскопии насыщения были выбраны кластеры, излучающие в желтом диапазоне спектра. Апробация методики проводилась с использованием красителя родамина 6Ж (Rhod 6G). В работе получено аналитическое выражение для зависимости интенсивности люминесценции от энергии пикосекундного импульса E:

где s – площадь пучка, h – постоянная Планка, – частота света, A – коэффициент, включающий инструментальный фактор, оптическую плотность и квантовый выход люминесценции. Из аппроксимации экспериментальной данных формулой (2) (рис. 8а), было получено значение сечения поглощения кластеров (1 = (4.2±0,2)10-16 см2). Корректность используемой методики подтверждает аналогичная оценка, выполненная для родамина (1 = (4.2±0,2)10-16 см2), что в пределах погрешности совпадает с данными, приведенными в литературе. В наносекундном режиме возбуждения (рис. 8б) выполненный расчет константы перехода кластеров в темновое состояние с использованием трехуровневой модели дал значение kDS = (1.0±0.1)108 с-1, что свидетельствует о чрезвычайно высоком значении квантового выхода в темновое состояние (24±3 %.). Для стационарного процесса (возбуждение непрерывным лазером) получено выражение:

где а – коэффициент, включающий инструментальный фактор, концентрацию молекул и константу скорости испускания, – интенсивность возбуждающего света, – время жизни люминесценции. Из аппроксимации полученной в эксперименте зависимости интенсивности люминесценции кластеров от интенсивности возбуждения (рис. 8в) выражением (3) было получено время жизни темнового состояния off = 15±5 мкс, что близко к значению, имеющемуся в литературе для кластеров, излучающих в красном диапазоне. Столь высокая эффективность образования и сравнительно долгое время жизни темнового состояния приводят к тому, что при достаточно Рис. 8. Зависимость интенсивности флуоресценции родамина 6Ж и кластеров серебра при = 553 нм и 600 нм соответственно при возбуждении пикосекундными (а), и наносекундными (б) импульсами; зависимость интенсивности интегральной люминесценции и заселенности темнового состояния для кластеров и родамина при непрерывным возбуждении (в). Кривые отмасштабированы так, что их начальный наклон, определенный как, совпадает.

слабых интенсивностях возбуждения ~50 Вт/см2 в темновом состоянии находятся около 20 % кластеров (рис. 8в).

Структурные изменения ДНК, индуцируемые ионами серебра и кластерами, исследовались методами спектроскопии поглощения, кругового дихроизма, вискозиметрии и гель-электрофореза. Спектр КД ДНК в комплексе с ионами Ag+ существенно отличается от спектра свободной ДНК (рис. 9), что согласуется с данными из литературы. Добавление восстановителя сопровождается изменениями в спектре, который становится близким к спектру КД свободной ДНК. Через сутки после приготовления систем спектры КД ДНК меняются, особенно существенно в области положительной полосы. Добавление KMnO4 в раствор ДНК-Ag0, индуцирует быстрое образование люминесцирующих структур и вызывает такое же изменение спектра КД, которое наблюдается для люминесцирующего раствора через сутки после добавления восстановителя. Формирование комплекса ДНК-Ag+ в условиях эксперимента не приводит к существенному изменению приведенной вязкости раствора (рис. 10), что согласуется с данными, имеющимися в литературе. Через 30 минут после начала реакции восстановления также не наблюдается изменения вязкости растворов в пределах погрешности. Добавление KMnO4 в раствор ДНК-Ag0 через минут также практически не влияет на вязкость растворов. Таким образом, люминесцирующие структуры не приводят к существенному изменению объема молекулярного клубка сразу после приготовления систем. Этот результат подтверждается и методом гель-электрофореза. Однако через сутки после добавления восстановителя приведенная вязкость растворов комплексов ДНК-Ag падает приблизительно на 40 %. Для таких систем наблюдается и изменение электрофоретической подвижности образца:

комплекс ДНК-Ag0 движется быстрее, чем нативная ДНК, и полоса размывается. Эти данные указывают на уменьшение размеров макромолекулы. Естественно предположить уменьшение термодинамической жесткости ДНК, скорее всего, ввиду частичной дестабилизации двойной спирали.

Рис. 9. Спектры КД ДНК в свободном состоянии, в Рис. 10. Приведенная вязкость растворов комплексе с ионами серебра, после их ДНК в комплексе с Ag+ и с кластерами восстановления NaBH4 и при добавлении KMnO4. через 30 мин и через 1 сутки после Концентрации реагентов: CДНК = 1,2•10-4 Мосн., CAgNO3 добавления восстановителя, а также после = 2,4•10-5 М, CNaBH4 = 110-5 M, СKMnO4 = 1•10-6 М. добавления KMnO4. CДНК = 2,4·10-4 Мосн В главе 4 рассматривается получение компактных ДНК-полимерных наночастиц, включающих кластеры серебра, и изучаются их спектральные свойства. Соответствующие наночастицы были получены сливанием растворов ДНК с кластерами серебра и полиаллиламина в 0,005 M NaNO3 при отношении концентраций их ионогенных групп N/P=1,5, что обеспечивало формирование достаточно однородных компактных структур, как это видно из данных динамического светорассеяния (рис. 11б). Их размер согласуется с результатом метода электронной микроскопии (рис. 11а). Как и для обычных генных векторов, использование ДНК с кластерами в комплексе с поликатионом приводит к потере ее электрофоретической подвижности (рис. 11в). Кластеры, находящихся в ДНК-полимерной наночастице, не теряют люминесцентных свойств, причем степень поляризации люминесценции P 0,45 говорит о том, что кластеры по-прежнему связаны с ДНК. Таким образом, кластеры образуют с ДНК достаточно устойчивый комплекс, который практически не разрушается при конденсации ДНК, хотя последняя Рис. 11. ПРЭМ-изображение компактных ДНК глобул, содержащих кластеры серебра. Врезка:

распределение частиц по размерам (a); Функция распределения по размерам компактных глобул ДНК и ДНК-Ag0 (б); Изображение геля с комплексами ДНК: 1- ДНК-Ag0, 2 – конд. ДНК-Ag0, 3 – свободная ДНК, 4 – конд. ДНК (в). CДНК = 1,2·10-4 Мосн., СAgNO3 = 2,4·10-5 М, CNaBH4 = 110-5 М, СKMnO4 = 1·10-6 М.

Люминесцирующие глобулы, сформированные на основе ДНК-полимерного комплекса, и содержащие кластеры серебра, сохраняют свои спектральные свойства при высаживании на поверхность графита, как это было показано методом зондово-усиленной флуоресцентной спектроскопии (TEFS).

Сканирование топографии производилось в режиме туннельной микроскопии, усиление сигнала вблизи зонда составило 3 – 4 раза. На рис. показана топография образца, на которой различимы отдельные ДНКРис. 12. СТМ изображение полимерные частицы размером около 100 нм и зондово-усиленный люминесцентный сигнал от этих же частиц. Данный метод дает пространственное разрешение несколько десятков нанометров, что на порядок превышает возможности конфокальной микроскопии.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ И ВЫВОДЫ

Определены оптимальные условия синтеза люминесцирующих кластеров серебра, стабилизированных высокомолекулярной ДНК в растворе, изучены их временные изменения и спектральные свойства.

Установлено, что возбуждение люминесценции кластеров может производиться как на полосе поглощения кластеров, так и на полосе поглощения ДНК, что указывает на локализацию кластеров вблизи азотистых оснований ДНК.

Установлена гетерогенность образующихся кластеров, которая проявляется в зависимости положения максимума полосы испускания от длины волны возбуждающего света.

Показано, что при возбуждении люминесценции на полосе поглощения ДНК в спектре испускания присутствуют две неразрешенных полосы для кластеров, излучающих в красной области спектра, преобразующихся с течением времени в кластеры, излучающие в желтом диапазоне.

Для этих двух групп кластеров получены близкие значения времен жизни люминесценции 2,4±0,1 нс.

Показано, что угол между направлением дипольных моментов осцилляторов поглощения (оснований ДНК) и испускания (кластеров) равен приблизительно 60°.

Методом нелинейной флуоресцентной спектроскопии насыщения для одного типа кластеров с максимумом полосы испускания около 600 нм получено значение сечения поглощения = (3,8±0,2)·10-16 см2, квантовый выход темнового состояния (24±3)% и время жизни темнового состояния (15±5) мкс.

ДНК-полимерные-наночастицы, имеющие размер (100±50) нм и образующиеся в результате конденсации ДНК, содержащей люминесцирующие кластеры серебра, сохраняют люминесцентные свойства при высаживании на поверхность графита.

Отдельные ДНК-полимерные-наночастицы были визуализированы методом зондово-усиленной люминесцентной спектроскопии.

10. Получены спектральные изображения ДНК-полимерных наночастиц с люминесцирующими кластерами с пространственным разрешением, превышающим дифракционный предел.

Основное содержание диссертации изложено в следующих публикациях:

1. Volkov, I. L., Fluorescent silver nanoclusters in condenced DNA / Volkov, I.

L.; Ramazanov, R. R.; Ubyvovk, E. V.; Rolich, V. I.; Kononov, A. I.;

Kasyanenko, N. A. // ChemPhysChem. – 2013. –15. P. 3543-3550.

2. Volkov I. L., DNA-stabilized silver nanoclusters with high yield of dark state / Volkov I. L., Serdobintsev P. Yu., Kononov A. I. // J. Phys. Chem. C. – 2013. –117. P. 24079-24083.

Подписано в печать ….. 2014. Формат 60х84/ Усл. печ. л. … Тираж 100 экз. Заказ №…

 


Похожие работы:

«Юрьева Елена Александровна СОЛИ СПИРОПИРАНОВ: ГАЛОГЕНИДЫ И МЕТАЛЛООКСАЛАТЫ. СИНТЕЗ, СТРОЕНИЕ И СВОЙСТВА 02.00.04 - физическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Черноголовка – 2009 Работа выполнена в Институте проблем химической физики Российской Академии Наук д.х.н., профессор, академик Научный руководитель : Алдошин Сергей Михайлович доктор физико-математических наук Официальные оппоненты : Шибаева Римма Павловна Институт...»

«. Нестеренко Алексей Михайлович ВЛИЯНИЕ КАТИОНОВ НА СТРУКТУРНЫЕ И ЭЛЕКТРИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЛИПИДНОГО БИСЛОЯ. МОЛЕКУЛЯРНО-ДИНАМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ. Специальность: 02.00.05 — Электрохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Москва - 2014 -2Диссертация выполнена в лаборатории биоэлектрохимии ФГБУН Института Физической Химии и Электрохимии им. А.Н. Фрумкина РАН и на кафедре биофизики Биологического факультета ФГБОУ ВПО МГУ им....»

«КУРОЧКИН СЕРГЕЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ КИНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СИНТЕЗА СВЕРХРАЗВЕТВЛЕННЫХ ПОЛИМЕРОВ МЕТОДОМ ТРЕХМЕРНОЙ РАДИКАЛЬНОЙ ПОЛИМЕРИЗАЦИИ 02.00.06 – Высокомолекулярные соединения АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Черноголовка – 2008 www.sp-department.ru Работа выполнена в Институте проблем химической физики РАН Научный руководитель : кандидат химических наук Грачев Вячеслав Петрович Официальные оппоненты : доктор химических наук,...»

«СУСЛОВ ЕВГЕНИЙ ВЛАДИМИРОВИЧ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ НЕКОТОРЫХ,-НЕНАСЫЩЕННЫХ КАРБОНИЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ С НУКЛЕОФИЛАМИ В ПРИСУТСТВИИ ОСНВНОГО ЦЕОЛИТА Cs (02.00.03 - органическая химия) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Новосибирск – 2009 Работа выполнена в Новосибирском институте органической химии им. Н. Н. Ворожцова СО РАН Научный руководитель : доктор химических наук, с.н.с. Салахутдинов Нариман Фаридович Официальные оппоненты : доктор...»

«Скворцов Александр Владимирович Электрокинетический потенциал глиняных масс и его влияние на технологические свойства керамических материалов 02.00.11 – коллоидная химия и физикохимическая механика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Казань – 2009 Работа выполнена в ГОУ ВПО государственный Казанский технологический университет Научный руководитель : доктор технических наук, профессор Хацринов Алексей Ильич Официальные оппоненты :...»

«РУБИН МИХАИЛ АЛЕКСАНДРОВИЧ КАТАЛИТИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ ПРИСОЕДИНЕНИЯ ЦИКЛОПРОПЕНОВ 02.00.03 - органическая химия Автореферат Диссертации на соискание ученой степени доктора химических наук Астрахань 2014 1 Работа выполнена в ФГАОУ ВПО Северо-Кавказский федеральный университет на кафедре химии доктор химических наук, Научный профессор консультант: Аксенов Александр Викторович доктор химических наук, Официальные профессор оппоненты: Ненайденко Валентин Георгиевич (ФГБОУ ВПО...»

«Путилов Лев Петрович ДЕФЕКТООБРАЗОВАНИЕ И РАСТВОРЕНИЕ ВОДОРОДА В АКЦЕПТОРНО-ДОПИРОВАННЫХ ПРОТОНПРОВОДЯЩИХ ОКСИДАХ Специальность: 02.00.04 – Физическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Екатеринбург – 2014 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институте высокотемпературной электрохимии Уральского отделения РАН (ИВТЭ УрО РАН), г. Екатеринбург. Научный руководитель : Цидильковский Владислав...»

«ПОДЛИПСКАЯ Татьяна Юрьевна СТРУКТУРА МИЦЕЛЛЯРНЫХ НАНОРЕАКТОРОВ TRITON N-42 ПО ДАННЫМ ИК-ФУРЬЕ И ФОТОН-КОРРЕЛЯЦИОННОЙ СПЕКТРОСКОПИИ 02.00.04 физическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Новосибирск 2011 Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте неорганической химии им. А.В. Николаева СО РАН Научный руководитель : доктор химических наук Булавченко Александр Иванович Официальные оппоненты : доктор...»

«Мурадова Айтан Галандар кызы ПОЛУЧЕНИЕ НАНОЧАСТИЦ ОКСИДОВ ЖЕЛЕЗА C ЗАДАННЫМ РАЗМЕРОМ ДЛЯ ТЕРМОРЕГУЛИРУЮЩИХ ПОКРЫТИЙ И МАГНИТНЫХ ЖИДКОСТЕЙ 02.00.11 – Коллоидная химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата химических наук Москва 2013 Работа выполнена на кафедре нанотехнологии и наноматериалов Российского химико-технологического университета имени Д.И. Менделеева член-корреспондент РАН Научный руководитель : доктор химических наук, профессор Юртов Евгений...»

«Старков Илья Андреевич КИСЛОРОДНАЯ НЕСТЕХИОМЕТРИЯ И ТРАНСПОРТНЫЕ СВОЙСТВА ПЕРОВСКИТОПОДОБНОГО ОКСИДА SrCo0,8Fe0,2O3химия твердого тела АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Новосибирск – 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институте химии твердого тела и механохимии Сибирского отделения Российской академии наук, г. Новосибирск. Научный руководитель : доктор химических наук старший научный...»

«КАРЛИНСКИЙ ДАВИД МИХАЙЛОВИЧ ИЗУЧЕНИЕ СВЯЗЫВАНИЯ ПЕРВОГО КОМПОНЕНТА СИСТЕМЫ КОМПЛЕМЕНТА С НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫМИ СОЕДИНЕНИЯМИ МЕТОДАМИ КОМПЬЮТЕРНОГО МОДЕЛИРОВАНИЯ 02.00.10. – Биоорганическая химия 03.00.04. – Биохимия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Москва – 2009 1 Работа выполнена на кафедре биотехнологии и бионанотехнологии Московской государственной академии тонкой химической технологии им. М.В. Ломоносова и лаборатории химии...»

«Пелагеев Дмитрий Николаевич ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛИМЕТОКСИЛИРОВАННЫХ НАФТАЗАРИНОВ В СИНТЕЗЕ ПРИРОДНЫХ ХИНОИДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ И ИХ АНАЛОГОВ 02.00.03 – Органическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Владивосток – 2010 -2Диссертация выполнена в Учреждении Российской академии наук Тихоокеанском институте биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН (ТИБОХ ДВО РАН), г. Владивосток. Научный руководитель : Ануфриев В.Ф., доктор...»

«ВОЛОДИН Алексей Александрович УГЛЕРОДНЫЕ НАНОВОЛОКНА И НАНОТРУБКИ: КАТАЛИТИЧЕСКИЙ СИНТЕЗ, СТРОЕНИЕ, СВОЙСТВА 02.00.04 – физическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Черноголовка – 2006 Работа выполнена в Институте проблем химической физики РАН. кандидат химических наук, Научный руководитель : старший научный сотрудник Тарасов Борис Петрович доктор химических наук, Официальные оппоненты : профессор Клюев Михаил Васильевич...»

«АБХАЛИМОВ ЕВГЕНИЙ ВЛАДИЛЕНОВИЧ МЕХАНИЗМ ФОРМИРОВАНИЯ КЛАСТЕРОВ И НАНОЧАСТИЦ СЕРЕБРА ПРИ ВОССТАНОВЛЕНИИ ЕГО ИОНОВ В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ В ПРИСУТСТВИИ ПОЛИЭЛЕКТРОЛИТОВ Специальность 02.00.04 - физическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Москва 2008 Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте физической химии и электрохимии имени А.Н. Фрумкина РАН Научный руководитель : член-корреспондент РАН, доктор химических...»

«КОШЕЛЕВА Екатерина Валентиновна ТВЕРДЫЕ ЭЛЕКТРОЛИТЫ В СИСТЕМАХ CaY2S4-Yb2S3 и CaYb2S4-Y2S3 Специальность: 02.00.05 – Электрохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Екатеринбург - 2014 2 Работа выполнена на кафедре неорганической и физической химии ФГБОУ ВПО Вятский государственный университет, г. Киров Калинина Людмила Алексеевна, Научный руководитель : кандидат химических наук, доцент ФГБОУ ВПО Вятский государственный университет,...»

«Харисов Борис Ильдусович ПРЯМОЙ НИЗКОТЕМПЕРАТУРНЫЙ СИНТЕЗ КООРДИНАЦИОННЫХ СОЕДИНЕНИЙ ФТАЛОЦИАНИНОВ И АЗОМЕТИНОВ Специальность 02.00.04 - Физическая химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора химических наук Ростов-на-Дону - 2006 2 Диссертационная работа выполнена в Институте физической химии и электрохимии им. А.Н.Фрумкина Российской Академии Наук (г. Москва) и НИИ физической и органической химии Ростовского государственного университета (г....»

«Ковальчук Антон Алексеевич НОВЫЕ КОМПОЗИЦИОННЫЕ МАТЕРИАЛЫ НА ОСНОВЕ СТЕРЕОИЗОМЕРОВ ПОЛИПРОПИЛЕНА И УГЛЕРОДНЫХ НАНОТРУБ, ПОЛУЧЕННЫЕ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРИЗАЦИИ IN SITU 02.00.06 – Высокомолекулярные соединения АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Москва – 2008 Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте химической физики им. Н.Н. Семенова РАН Научный руководитель : кандидат химических наук Аладышев Александр Михайлович...»

«Агафонцев Александр Михайлович КИСЛОТНО-КАТАЛИЗИРУЕМЫЕ ПЕРЕГРУППИРОВКИ -АМИНО- И -АЦИЛАМИНО- ОКСИМОВ ТЕРПЕНОВОГО РЯДА /02.00.03 – органическая химия/ Автореферат диссертации на соискание ученой стпени кандидата химических наук Новосибирск 2005 Работа выполнена в Новосибирском институте органической химии им. Н. Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук Новосибирском государственном университете Научный руководитель : доктор химических наук Ткачев Алексей...»

«Дергунова Елена Сергеевна НОВЫЕ МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ, ОСНОВАННЫЕ НА ИММУНОХИМИЧЕCКИХ РЕАКЦИЯХ НА ПОВЕРХНОСТИ ПЬЕЗОКВАРЦЕВЫХ СЕНСОРОВ 02.00.02 – аналитическая химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Воронеж – 2007 2 Работа выполнена на кафедре химии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Липецкий государственный технический университет Научный руководитель :...»

«Гречищева Наталья Юрьевна Взаимодействие гумусовых кислот с полиядерными ароматическими углеводородами: химические и токсикологические аспекты 02.00.03 –Органическая химия 11.00.11 –Охрана окружающей среды и рациональное использование природных ресурсов Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Москва-2000 4 Работа выполнена в лаборатории физической органической химии кафедры органической химии Химического факультета МГУ им. М.В....»














 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.