WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

АХМАДИШИНА ЛЕЙСАН ЗИНУРОВНА

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ФЕРМЕНТОВ

МОНООКСИГЕНАЗНОЙ СИСТЕМЫ И АНТИОКСИДАНТНОЙ

ЗАЩИТЫ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ

ДЫХАТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ В РЕСПУБЛИКЕ БАШКОРТОСТАН

03.00.15- генетика

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

УФА-2007 2

Работа выполнена в Институте биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук доктор медицинских наук, профессор

Научный руководитель:

Викторова Татьяна Викторовна доктор биологических наук, профессор

Официальные оппоненты:

Мустафина Ольга Евгеньевна доктор медицинских наук, профессор Сивочалова Ольга Витальевна Институт общей генетики РАН

Ведущая организация:

им. Н.И.Вавилова

Защита диссертации состоится 19 апреля 2007 г. вчасов на заседании Регионального диссертационного совета КМ 002.133.01 при Институте биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН по адресу:

450054, Уфа, просп. Октября, 71.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Уфимского научного центра РАН, по адресу: 450054, Уфа, просп. Октября, 71 и на сайте Института биохимии и генетики: http://www.anrb.ru/molgen/dissov.html

Автореферат разослан « » марта 2007 г.

Ученый секретарь Регионального диссертационного совета Бикбулатова С.М.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Хронические заболевания органов дыхания Актуальность проблемы.

являются серьёзной проблемой современной медицины, что обусловлено широким распространением данной патологии, высокими показателями инвалидности и смертности населения. Многочисленные эпидемиологические исследования указывают на то, что рост заболеваемости болезнями дыхательной системы преимущественно характерен для населения крупных городов и территорий с неблагоприятной экологической обстановкой [Гичев Ю.П., 2002; Чучалин А. Г., 2003].





По данным «Белой Книги Пульмонологии» в структуре болезней органов дыхания первое место занимает хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) на долю которой приходится свыше 55% всех легочных заболеваний в Российской Федерации [Чучалин А. Г., 2003]. ХОБЛ - это хроническое, прогрессирующее, многофакторное заболевание дыхательной системы, вызванное обструкцией периферических дыхательных путей (хроническим бронхитом) и деструкцией легочной паренхимы (эмфиземой) [GOLD Workshop Report, 2003; Celli B.R.et MacNee W., 2004].

Традиционно основными факторами риска развития хронических заболеваний органов дыхания считаются воздействие производственной пыли, токсических веществ и курение. Хронический обструктивный бронхит формируется примерно у 4-25% лиц, работающих во вредных и неблагоприятных производственных условиях [Лещенко И. В. и соавт., 2004].

ХОБЛ чаще развивается у злостных курильщиков Несмотря на огромное внимание, уделяемое хроническому обструктивному бронхиту, меры эффективной профилактики данной патологии разработаны недостаточно, что затрудняет прогнозирование индивидуальной предрасположенности, тяжести течения и исхода заболевания. Поэтому поиск информативных генетических маркеров, контролирующих ключевые звенья патогенеза хронического обструктивного бронхита, несомненно, является одной из актуальных и перспективных задач медицинской генетики.

Исследования последних лет показывают, что ключевую роль в патогенезе многих заболеваний легких играет свободнорадикальное окисление [Зенков Н.К. с соавт, 2001; Kinnula V.L., 2005]. Легкие наиболее уязвимы в отношении оксидативного повреждения, так как непосредственно подвергаются действию кислорода, а также оксидантов, содержащихся в загрязненном воздухе. На ткань легких прямо воздействуют оксиданты, образующиеся при курении. При этом большое значение имеет образование активных форм кислорода в результате дисбаланса в системе оксиданты-антиоксиданты. Дисбаланс может быть обусловлен нарушением равновесия между монооксигеназной системой и системой антиоксидантной защиты организма, что является пусковым механизмом повреждения бронхов и развития хронического обструктивного бронхита [MacNee W.,1999, 2000; Kinnula V.L., 2005].

В этой связи, несомненно, что изучение генов, контролирующих активность ферментов микросомальной монооксигеназной системы и антиоксидантной защиты является важной задачей при исследовании механизмов биотрансформации химических веществ и выявлении предрасположенности к заболеваниям дыхательной системы, вызванных действием ряда производственных факторов и сигаретного дыма.

Цель исследования заключалась в поиске молекулярно-генетических маркеров развития хронической патологии органов дыхания, вызванной воздействием производственных факторов и сигаретного дыма, на основе изучения полиморфизма генов ферментов микросомальной монооксигеназной системы и антиоксидантной защиты.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить полиморфизмы генов ферментов микросомальной монооксигеназной системы (CYP1А1, CYP1A2, CYP2A6, CYP2E1, EPHX1) и антиоксидантой защиты (CAT, NQO1, GSTT1, GSTM1, GSTP1, GPХ1) в этнических группах населения Республики Башкортостан (русские, татары, башкиры).





2. Провести анализ ассоциации полиморфных вариантов генов ферментов микросомальной монооксигеназной системы и антиоксидантной защиты с развитием профессионального хронического бронхита.

3. Провести анализ ассоциации полиморфных вариантов генов ферментов микросомальной монооксигеназной системы и антиоксидантной защиты с развитием хронической обструктивной болезни легких.

4. Дать сравнительную оценку генетических факторов риска развития профессионального хронического бронхита, вызванного воздействием производственной среды, и хронической обструктивной болезни легких, вызванной курением.

Научная новизна Впервые в трёх этнических группах жителей Республики Башкортостан (русские, татары, башкиры) проведен сравнительный анализ полиморфизмов генов ферментов микросомальной монооксигеназной системы (CYP1А1, CYP1A2, CYP2A6, CYP2E1, EPHX1) и антиоксидантной защиты (CAT, NQO1, GSTT1, GSTP1, GPХ1).

Впервые показана роль полиморфных вариантов генов CYP1А1, CYP1A1, EPHX1, CAT в развитии предрасположенности к профессиональному бронхиту с учётом этнической гетерогенности изучаемых групп.

Впервые дана оценка роли полиморфизмов генов CYP1A2, CYP2A6, CAT, NQO1 в развитии предрасположенности к хронической обструктивной болезни легких с учётом этнической гетерогенности изучаемых выборок.

Показано, что гаплотип CAT*(-262)C/(1167)T гена каталазы вносит вклад в формирование подверженности к хроническому обструктивному бронхиту, вызванного воздействием как факторов производственной среды, так и сигаретного дыма, в изученных этнических группах.

Научно-практическая значимость На основании полученных результатов показана целесообразность определения полиморфных вариантов генов CYP1A2, CYP2A6, EPHX1, CAT, GSTP1, NQO1 с целью профилактики развития хронического обструктивного бронхита в группах риска (рабочие вредных производств, злостные курильщики).

Материалы работы могут быть использованы в учебном процессе на биологических и медицинских факультетах ВУЗов, а также на курсах последипломного образования врачей.

Положения, выносимые на защиту:

1. Выявлены существенные межэтнические различия по распределению частот аллелей и гаплотипов полиморфных маркеров генов CYP1A1, CYP1A2, CYP2A6, GSTM1, GPX1.

2. Генетическими маркерами развития профессионального хронического бронхита являются полиморфные варианты генов CYP1A1 и CYP1A2.

Фактором риска развития профессионального хронического бронхита являются полиморфные варианты гена CYP1A1 в этнической группе башкир, гена EPHX1 в этнической группе русских, гена CAT в этнической группе татар.

3. Генетическими маркерами риска развития хронической обструктивной болезни легких у жителей Республики Башкортостан являются полиморфные варианты генов CYP1A2, EPHX1, GSTP1, CAT; в этнической группе татар - CYP1A2, CYP2A6, EPHX1, GSTP1, CAT; в этнической группе русских - EPHX1, GSTP1, CAT и NQO1.

4. Показано, что полиморфные варианты гена CAT вносят вклад в формирование подверженности к развитию хронического обструктивного бронхита, вызванного воздействием, как факторов производственной среды, так и сигаретного дыма, в изученных этнических группах.

Апробация работы Основные положения диссертации были представлены на European Human Genetics Conference (ESHG, Prague, 2005, Amsterdam, 2006); 3rd Lung Science Conference (Taormina, 2005); European Respiratory Society Annual Congress (Copenhagen, 2005, Munich, 2006); The 72nd annual international scientific assembly of the American College of Chest Physicians (CHEST, Salt Lake City, Utah, 2006); V Российском съезде медицинских генетиков (Уфа, 2005);

Всероссийской научно-практической конференции с международным участием "Современные проблемы медицины труда" (Уфа, 2005); 15 и 16 Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (Москва, 2005, Санкт - Петербург, 2006); I конкурсе молодых учёных Института биохимии и генетики УНЦ РАН (Уфа, 2006); XIII международной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных «Ломоносов-2006» (Москва, 2006), Научном семинаре лаборатории экологической генетики человека Института биохимии и генетики УНЦ РАН (Уфа, 2007).

Публикации По материалам диссертации опубликовано 20 печатных работ, в том числе 4 статьи.

Структура и объем диссертации Диссертационная работа изложена на 222 страницах машинописного текста и состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты и их обсуждение, заключение, выводы, список литературы. Работа иллюстрирована 2 рисунками и таблицами. Список литературы включает 272 источников, из них 40 – на русском языке и 232 – на иностранном.

Благодарности Автор выражает глубокую признательность заведующим пульмонологическими отделениями больницы скорой медицинской помощи, ГКБ № 13, №18, №21 г.Уфы, клиническому ординатору Байнак О.В. и лично главному пульмонологу Республики Башкортостан профессору Загидуллину Ш.З. за содействие в организации подбора и клинического обследования больных ХОБЛ.

Также автор выражает искреннюю признательность директору ФГУН УфНИИ медицины труда и экологии человека Роспотребнадзора г. Уфы проф.

Бакирову А.Б. и врачу - профпатологу отделения профессиональной аллергологии и иммунореабилитации этого же института Мингазовой С.Р. за содействие в организации подбора и клинического обследования больных профессиональным хроническим бронхитом.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Генетический анализ проведен у 1069 неродственных индивидов, проживающих на территории Республики Башкортостан. По этнической принадлежности все обследованные принадлежали к трём исторически распространённым на данной территории этническим группам: русские (N=502), татары (N=433) и башкиры (N=134).

Группу рабочих с профессиональным хроническим бронхитом составили 122 человека со стажем работы во вредных условиях труда 22.20±8.31 лет.

Средний возраст больных составил 55.69±9.46 лет. Диагностика профессионального заболевания проводилась сотрудниками ФГУН УфНИИ Медицины труда и экологии человека Роспотребнадзора г. Уфы в соответствии с нормативами, изложенными в сборнике нормативно-методической документации по профпатологии и гигиене труда от 1998 и 2005 гг.

Обязательное клиническое обследование рабочих включало спирометрическое исследование функций внешнего дыхания, рентгенографию органов грудной клетки, электрокардиографию, фибробронхоскопию, бронхографию.

Кроме того, проводилось изучение характера действующего этиологического фактора и выполняемой работы, особенностей клинической формы заболевания, конкретных санитарно-гигиенических условий производственной среды и трудового процесса, стажа работы во вредных условиях труда, профессионального маршрута.

В качестве группы сравнения были обследованы 166 здоровых рабочих со стажем работы во вредных условиях труда 16.57±6.77 лет (средний возраст составил 46.01±6.99 лет).

В группу больных с ХОБЛ вошли 319 человек (средний возраст 61.98±11.65 лет), находившихся на стационарном лечении в пульмонологических отделениях клинических больниц г. Уфы (№21, №13, №18, БСМП) в период с 2001 по 2006 год. Диагноз ХОБЛ был выставлен врачами в соответствии с международной классификацией GOLD пересмотра 2003 года (Global Initiative for Chronic Obstructive Pulmonary Disease Workshop Report, 2003). Клиническое обследование включало в себя сбор жалоб и анамнеза, физикальные, лабораторные и инструментальные методы. Всем больным было проведено спирометрическое исследование функций внешнего дыхания и рентгенография органов грудной клетки. Наличие симптомов атопии или онкологических заболеваний являлось критерием исключения больных из исследования.

Контрольную группу составили 462 практически здоровых жителя Республики Башкортостан, отобранных по возрасту, полу и этнической принадлежности, без хронических заболеваний органов дыхания и отсутствием профессионального контакта с вредными химическими веществами. Средний возраст индивидов контрольной группы составил 56.12±8.57лет.

Молекулярно-генетический анализ полиморфизма генов монооксигеназной системы и антиоксидантной защиты проводили на образцах ДНК, выделенных из лейкоцитов периферической крови стандартным методом фенольно-хлорофомной экстракции [Mathew C., 1984]. Делеционный полиморфизм генов GSTM1 и GSTT1 изучали методом полимеразной цепной реакции. Методом рестрикционного анализа исследовались полиморфизмы локусов 2455AG и 3801TC гена CYP1A1, -2467ТdelT и -163CA гена CYP1A2, делеция 8 экзона гена CYP2A6, -1053CT гена CYP2E1, 337TC и 415AG гена EPHX1, 313AG и 341CT гена GSTP1, -262CT и 1167CT гена CAT, 609CT гена NQO1, 593CT гена GPX. Амплифицированные фрагменты ДНК разделяли электрофоретически в 7-8%-ном полиакриламидном геле.

После окончания электрофореза гель окрашивали раствором бромистого этидия трансиллюминаторе.

Во всех обследованных группах проведён сравнительный анализ распределения частот аллелей и генотипов с использованием пакетов статистических программ STATISTICA v.6.0, BIOSYS-2, Microsoft Access, BIOSTAT (Primer of Biostatistics version 4.03). Частоты гаплотипов сцепленных локусов генов (CYP1A1, CYP1A2, EPXH1, GSTP1 и CAT) рассчитывали в программе “The EH software program” (Rockefeller University; New York, NY).

Разницу в распределении частот генотипов между группами рассчитывали с использованием критерия 2 с поправкой Йетса. При попарном сравнении частот аллелей и генотипов применяли точный критерий Фишера (Животовский Л., 1991). Ассоциацию генотипов, аллелей и гаплотипов c развитием заболевания выявляли, сравнивая выборки больных и здоровых индивидов по частоте одного признака с использованием критерия 2. Статистически значимыми считали различия при P 0.05. Для исключения ошибки первого типа вводили поправку на множественность сравнений (Рcor).

Силу ассоциаций гено- и фенотипических характеристик изученных генов с риском развития профессионального хронического бронхита и ХОБЛ оценивали по значениям показателя отношения шансов (odds ratio, OR) (Schlesselman J., 1982).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ

Полиморфизм генов ферментов монооксигеназной системы и антиоксидантной защиты в этнических группах Республики Исследованиями ряда авторов было показано, что в распределении частот полиморфных вариантов генов битрансформации ксенобиотиков, в том числе цитохромов P450, а также генов ферментов антиоксидантной защиты имеются межэтнические различия [Викторова Т.В., Хуснутдинова Э.К., 2003; Сибиряк С.В. с соавт., 2003]. Принимая во внимание неоднородную этническую структуру населения Республики Башкортостан, нами проведен анализ частот генотипов, аллелей и гаплотипов полиморфных маркеров генов ферментов микросомальной монооксигеназной системы (цитохрома Р450 1А1, 1А2, 2А6, 2Е1, микросомальной эпоксидгидролазы) и антиоксидантной защиты (глутатион-S-трансфераз, каталазы, НАДФ(Н)-хинон оксидоредуктазы, глутатионпероксидазы) в трёх этнических группах (русских, татар и башкир), проживающих в Республике Башкортостан.

Проведенный анализ полиморфизма генов монооксигензаной системы (CYP1A1, CYP1A2, CYP2A6, CYP2E1, EPHX1) и антиоксидантов (GSTM1, GSTT1, GSTP1, CAT, GPX1, NQO1) показал наличие генетического своеобразия этнических групп русских, татар и башкир.

Изучение частот гаплотипов гена CYP1A1 среди жителей Республики Башкортостан выявил значительные межэтнические различия (2=15.42, р=0.004). Попарное сравнение групп, показало, что этническая группа башкир статистически достоверно отличается по распределению частот гаплотипов гена CYP1A1 как от русских (2=12.33, р=0.008), так и от татар (2=9.23, р=0.034). Данные различия обусловлены довольно высокой частотой гаплотипа CYP1A1*2B, представляющего собой сочетание мутантных аллелей полиморфных вариантов 2455AG и 3801ТС гена CYP1A1 у башкир (10.17% против 2.94% у русских и 3.05% у татар).

Распределение частот гаплотипов гена CYP1A2 обнаружило достоверные различия между этническими группами здоровых жителей Республики Башкортостан (2=25.75, р=0.0001). Этническая группа башкир статистически достоверно отличалась как от русских (2=18.78, р=0.0001), так и от татар (2=14.33, р=0.003). Необходимо отметить, что в группе башкир частота гаплотипа CYP1A2*1D достигала 11.02%, в то время как у татар - только 2.36%, а в этнической группе русских он был выявлен у 1.61% обследованных (Рис.1).

Рис.1. Распределение частот гаплотипов гена CYP1A2 в трёх этнических группах Республики Башкортостан Сравнение распределения частот аллелей гена CYP2A6 выявил статистически достоверные различия между этническими группами татар и русских (2=8.65, р=0.003), что обусловлено высокой частотой делеционного аллеля CYP2A6*4B в группе татар - 29.55%, тогда как у русских частота данного генотипа составила 16.81% (Рис.2).

При анализе распределения частот генотипов гена GSTM1 выявлены существенные отличия этнической группы башкир и от татар (2=4.63, р=0.03), и от русских (2=4.19, р=0.04). Нулевой генотип гена GSTM1 в группе башкир встречался с частотой 57.89%, тогда как у татар и русских частота его составляла 40.54% и 41.30%, соответственно.

Рис.2. Распределение частот аллелей гена CYP2A6 в этнических группах русских и татар При изучении распределения частот генотипов локуса Ile105Val гена GSTP1 в этнических группах здоровых жителей Республики Башкортостан было показано, что этническая группа башкир достоверно отличалась от группы татар (2=8.20, р=0.02). Это было связано с высокой долей гетерозигот по данному локусу в группе башкир (53.97%).

Анализ распределения частот аллелей полиморфного локуса Pro197Leu гена GPX1 в группе здоровых жителей Республики Башкортостан выявил достоверные различия между изученными группами (2=6.04, р=0.05). Что было обусловлено увеличением доли аллеля Leu в этнической группе татар (30.22%), тогда как у русских и башкир частота его составила 21.15%, и 23.81%, соответственно.

Таким образом, при сравнении трех этнических групп жителей Республики Башкортостан нами были установлены существенные межэтнические различия по распределению частот гаплотипов гена CYP1A1 (2=15.42, р=0.004) и CYP1A2 (2=25.75, р=0.0001); частот аллелей делеционного полиморфизма гена CYP2A6 (2=8.65, р=0.003); а также частот аллелей полиморфизма Pro197Leu гена GPX1 (2=6.04, р=0.05). Результаты данного анализа будут положены в основу выделения генетических факторов риска предрасположенности к многофакторным заболеваниям в Республике Башкортостан.

Полиморфизм генов ферментов монооксигеназной системы у больных профессиональным хроническим бронхитом и ХОБЛ Проанализирована роль полиморфных вариантов генов ферментов монооксигеназной системы в развитии хронического обструктивного бронхита, вызванного воздействием как факторов производственной среды, так и сигаретного дыма.

При изучении особенностей распределения гаплотипов гена CYP1A1 в общей группе больных профессиональным хроническим бронхитом и здоровых рабочих показал, что гаплотип CYP1A1*1A является наиболее частым в обеих группах, однако его частота была достоверно выше в группе больных (85.40% против 76.49%, в группе здоровых рабочих, соответственно; 2=5.93, р=0.0155, pcor=0.0465; OR=1.80, 95%CI 1.11-2.91). Анализ частот гаплотипов с учетом этнической принадлежности больных выявил ассоциацию гаплотипа CYP1A1*1A с риском развития профессионального бронхита у башкир (2=5.94, р=0.0155, pcor=0.0465; OR=3.27, 95%CI 1.23-9.02).

Анализ распределения частот генотипов полиморфного локуса -2467ТdelT гена CYP1A2 выявил статистически значимые различия между общей выборкой больных профессиональным хроническим бронхитом и здоровыми рабочими (2=6.80, р=0.03). Это обусловлено преобладанием по частоте гомозиготного генотипа *1A*1A среди здоровых рабочих (75.90%), в сравнении с 65.64% у больных профессиональным бронхитом (2=4.51, р=0.03, рcor =0.06).

Генотип *1A*1D гена CYP1A1, напротив, чаще встречался у больных с профессиональным хроническим бронхитом. Показана рисковая значимость данного генотипа: OR=2.08, 95%CI 1.15–3.77 (2=6.07, р=0.01, рcor =0.02) (Рис.3, а).

Аллель CYP1A2*1D гена CYP1A2 в группе больных ХОБЛ маркирует риск развития заболевания как в общей группе больных (OR=1.38, 95%CI 1.07– 1.80), так и в этнической группе татар (OR=1.83, 95%CI 1.24-2.71, 2=9.48, р=0.003).

При исследовании частот гаплотипов по полиморфным локусам -163СА и -2467ТdelT гена CYP1A2 установлено, что гаплотип CYP1A2*1D маркирует риск развития ХОБЛ как в общей группе больных (2=5.26, р=0.0223, рcor =0.0669, OR=2.01 95% CI 1.16-3.50), так и в группе больных, татар по этнической принадлежности (2=9.73, р=0.0027, рcor=0.008, OR=3.91, 95%CI 1.56-10.19). В тоже время гаплотип CYP1A2*1A, встречался достоверно реже как в общей группе больных (22.02% против 29.01%, в контрольной группе;

2=8.757, р=0.004, рcor =0.012), так и среди больных татар по этнической принадлежности (2=6.32, р=0.0127, рcor=0.038) (Рис.3, б).

Рис.3. Распределение частот генотипов и гаплотипов гена CYP1A2 в группах больных профессиональным хроническим бронхитом (а) и ХОБЛ (б) Изучение ассоциации маркеров гена CYP1A2 с развитием профессионального хронического бронхита и ХОБЛ ранее не проводилось.

Между тем, Sachse et al. (1999), было установлено, что вариант CYP1A2*1F полиморфизма-163СA приводит к изменению каталитической активности фермента и увеличению его индуцибельности. Что же касается других вариантов этого гена, в частности CYP1A2*1D, то их функциональная значимость была не достаточно ясна. Pavanello S. et al. (2005) на большой группе курильщиков (N=95) была выявлена связь между активностью фермента и присутствием аллеля CYP1A2*D (Т-2467delT). Активность фермента у индивидов с вариантом CYP1A2*D была достоверно выше. Известно, что субстратами для CYP1А2 являются гетероциклические амины, ариламины и нитрозоамины, входящие состав сигаретного дыма, а курение модифицирует активность фермента CYP1А2. Полиароматические амины, присутствующие в сигаретном дыме выступают в качестве лигандов для Ah-рецептора, запускающих каскад реакций и приводящих к активации транскрипции гена.

Вероятно, полиморфизмы, локализованные в промоторе гена CYP1А2, могут модифицировать сайт связывания гетеродимера Ah-рецептора с транслокатором (комплекс AhR/Arnt), локализованного между участками - и -2000 промотора, что, возможно, приводит к увеличению индукции CYP1А компонентами табачного дыма [Pavanello S. et al. 2005].

В группе больных ХОБЛ и соответствующей группе сравнения, нами изучен делеционный полиморфизм 8-го экзона гена CYP2A6, белковый продукт которого катализирует процесс окисления никотина - основного соединения, который вызывает и поддерживает табачную зависимость, в котинин [Messina E.S. et al, 1997; Malaiyandi V. Et al, 2005]. Было показано, что аллель CYP2A6*1A достоверно чаще встречался в группе больных ХОБЛ (2=13.09, р=0.001, OR=2.43, 95%CI 1.47-4.00), тогда как делеционный аллель CYP2A6*4В достоверно чаще выявлялся среди здоровых жителей РБ, татар по этнической принадлежности (Рис.4).

Рис.4. Распределение частот аллелей делеционного полиморфизма гена CYP2A6 в группе больных ХОБЛ и здоровых индивидов Исследования ряда авторов показали, что присутствие делеционного аллеля гена CYP2A6 продлевает период полураспада никотина от двух до одиннадцати часов [Yamanaka H. et al, 2004]. Поэтому, предполагается, что носители этого аллеля курят реже и меньше и, возможно, именно это играет протективную роль в развитии ХОБЛ [Miyamoto M. et al, 1999; Minematsu N et al, 2003].

Нами изучены полиморфизмы 337ТС в 3-м экзоне и 415АG в 4-м экзоне гена EPHX1. Исследованные полиморфизмы 3 и 4 экзонов гена EPHX1 четко коррелируют с уровнем ферментативной активности микросомальной эпоксидгидролазы in vitro [Hassett C. et al., 1994]. Различные комбинации генотипов по двум локусам формируют разный уровень активности фермента.

Описано 4 фенотипа фермента: быстрый (F, fast), нормальный (N, normal), медленный (S, slow) и очень медленный (SS, very slow) [Hassett C. et al., 1994].

Анализ распределения частот фенотипов микросомальной эпоксидгидролазы показал, что в случае профессионального бронхита фактором риска развития заболевания в этнической группе русских является фенотип нормального метаболайзера (N) (2=7.34, р=0.008, рcor=0.024; OR=3.30, 95%CI 1.35-8.23) (Рис.5а).

частота, %

N F S N F S SS

Рис.5. Распределение частот фенотипов гена EPHX1 в группах больных профессиональным хроническим бронхитом (этническая группа русских) (а) и ХОБЛ (общая группа) (б) Риск развития ХОБЛ ассоциировал с присутствием медленного фенотипа (OR=1.57, 95%CI 1.13-2.18). В тоже время нормальный фенотип микросомальной эпоксидгидролазы чаще встречался среди здоровых индивидов, что позволяет рассматривать его как фактор устойчивости к развитию заболевания (52.84% против 45.54% в контрольной группе, 2=7.71, р=0.006, рcor=0.018; OR=0.66, 95%CI 0.48-0.89) (Рис.5б).

По полиморфному локусу -1091CT гена CYP2E1 достоверных ассоциаций с развитием профессионального бронхита или ХОБЛ получено не было.

Таким образом, в результате анализа выявлены ассоциации полиморфных вариантов генов цитохрома Р450 (CYP1A1, CYP1A2, CYP2A6), и микросомальной эпоксидгидролазы (EPHX1) с предрасположенностью к развитию профессионального хронического бронхита и ХОБЛ.

Полиморфизм генов ферментов антиоксидантной защиты у больных профессиональным хроническим бронхитом и ХОБЛ Окислительный стресс, развивающийся в результате избыточного накопления активированных форм кислорода (АФК) – важнейший этиологический и патогенетический фактор развития хронического обструктивного бронхита. Контроль за интенсивностью и продолжительностью свободнорадикальной реакции осуществляет система антиоксидантной защиты, характеризующаяся высокой специфичностью, к которой относятся супероксиддисмутаза, каталаза, глутатион-зависимые пероксидазы и трансферазы [Зенков Н.К. и соавт, 2001; Rahman I., 2006].

В нашем исследовании проанализирована роль полиморфных вариантов генов ферментов антиоксидантной защиты (глутатион-S-трансфераз М1, Т1, Р1, каталазы, глутатионпероксидазы, НАДФ(Н)-хинон оксидоредуктазы) в развитии профессионального хронического бронхита и ХОБЛ.

Изучение частот гаплотипов по полиморфным локусам Ile105Val и Ala114Val гена GSTP1 показал, что гаплотип GSTP1*D, является маркером риска развития ХОБЛ как в общей группе больных (2=10.84, р=0.0018, pcor=0.0054; OR=2.16 95%CI 1.34-3.48), так и в этнической группе татар (2=6.77, р=0.01; pcor=0.03; OR=2.80 95%CI 1.25-6.38).

В респираторном тракте ген GSTP1 экспрессируется в эпителиальных клетках, альвеолярных макрофагах и бронхиолах и составляет 83% от всего пула легочных глутатион-S-трансфераз [Watson M.A. et al, 1998]. Поэтому снижение активности фермента, связанное с присутствием гаплотипа GSTP1*D, возможно, приводит к развитию цепных свободнорадикальных процессов и сдвигу окислительно-восстановительного баланса в сторону окислительного стресса.

Нами также изучено 2 полиморфизма гена каталазы:

-262СТ, приводящий к увеличению экспрессии фермента и 1167СТ, функциональная значимость которого не известна [Forsberg L. et al., 2001; Зотова Е.В. с соавт, 2004; Chistiakov D.A. et al., 2006]. Анализ частоты гаплотипов гена САТ показал, что гаплотип CAT*(-262)C/(1167)T встречался с высокой частотой как у больных профессиональным бронхитом (23.86%), так и у больных ХОБЛ (21.57%), тогда как в группах сравнения его частота не превышала 10.29% и 14.73%, соответственно (Рис.7,6). Риск развития ХОБЛ у индивидов с данным гаплотипом увеличен в 1.6 раза (OR=1.59, 95%CI1.18-2.154). Подобная тенденция сохранялась при отдельном анализе русских (2=5.187, р=0.0232, pcor=0.0696; OR=1.74, 95%CI 1.08-2.81) и татар (2=5.243 р=0.0225, pcor=0.0675;

OR=1.698, 95%CI 1.075-2.688).

Рис.6. Распределение частот гаплотипов гена каталазы в группе больных профессиональным хроническим бронхитом и здоровых рабочих, татар по этнической принадлежности Предполагается, что выявленный гаплотип CAT*(-262)C/(1167)T приводит к снижению экспрессии каталазы, а следовательно и накоплению Н2О2, оказывающей повреждающее действие на клеточные компоненты. Этим можно объяснить его вклад в формирование генетической структуры подверженности к изученным формам патологии органов дыхания, независимо от этнической принадлежности Рис.7. Распределение частот гаплотипов гена каталазы в группе больных ХОБЛ и здоровых индивидов Нами также проанализирован полиморфизм 609СТ гена НАД(Ф)Нхинон оксидоредуктазы 1, приводящий к полной утрате ферментативной активности [Zhang J. et al.,2003]. Анализ распределения частот аллелей полиморфного локуса C609T гена (NQO1) выявил, что мутантный аллель Т достоверно чаще встречался в группе больных ХОБЛ, русских по этнической принадлежности, тогда как аллель С доминировал в выборке здоровых индивидов. Таким образом, риск развития ХОБЛ у русских связан с аллелем Т локуса C609T гена NQO1 (OR=1.54, 95%CI 1.02-2.31).

По полиморфизмам гена GSTM1, GSTT1, GPX1 достоверных ассоциаций с развитием профессионального бронхита и ХОБЛ получено не было.

Сравнение профессионального хронического бронхита с ХОБЛ на основе анализа полиморфных вариантов генов микросомальной монооксигеназной системы и антиоксидантной защиты продемонстрировало принципиальное сходство патогенеза бронхита при вдыхании пылевых частиц и курении табака, в основе которого лежит развитие окислительного стресса. В результате анализа был выявлен единый гаплотип CAT*(-262)C/(1167)T, ассоциирующий с риском развития и профессионального хронического бронхита, и ХОБЛ в этнической группе татар. Важно отметить, что данный гаплотип сохраняет свою рисковую значимость, как для русских, так и для татар в группе больных ХОБЛ.

Несомненно, что изучение генов ферментов микросомальной монооксигеназной системы и антиоксидантной защиты является важной задачей при исследовании механизмов биотрансформации химических веществ и выявлении предрасположенности к многофакторным и профессиональным заболеваниям органов дыхания. Цитохромы Р450, эпоксидгидролаза, супероксиддисмутазы, каталаза и глутатиозависимые ферменты играют важную роль в формировании оксидативного поврежедния и антиоксидантной защиты тканей легких и дыхательных путей. Учитывая то, что повышенный риск развития оксидативного стресса связан с наличием определенных аллельных вариантов генов ферментов прооксидантов и антиоксидантов, можно предположить, что изученные гены могут быть важной составной частью генетической структуры подверженности к развитию хронического обструктивного бронхита, вызванного действием ряда производственных факторов и сигаретного дыма.

Полученные результаты не претендуют на исчерпывающую характеристику молекулярно-генетических основ развития хронических патологий органов дыхания, но являются важным шагом на пути понимания механизмов, лежащих в основе патогенеза хронического обструктивного бронхита, различной этиологии.

1. При сравнительном анализе трех этнических групп жителей Республики Башкортостан выявлены существенные межэтнические различия по распределению частот гаплотипов гена CYP1A1 (2=15.42, р=0.004);частот гаплотипов гена CYP1A2 (2=25.75, р=0.0001); частот аллелей делеционного полиморфизма гена CYP2A6 (2=8.65, р=0.003); частот аллелей полиморфизма Pro197Leu гена GPX1 (2=6.04, р=0.05). Выявлено сходство этнических групп татар и русских по полиморфным вариантам 2455AG и 3801TC гена CYP1A1, -2467ТdelT и -163CA гена CYP1A2, -1053CT гена CYP2E1, 337TC и 415AG гена EPHX1, делеции генов GSTТ1и GSTМ1, 313AG и 341CT гена GSTP1, -262CT и 1167CT гена CAT, 609CT гена NQO1.

2. Молекулярно-генетическими маркерами развития профессионального хронического бронхита у рабочих, подверженных действию производственных факторов, является гаплотип *1A гена CYP1A1 (OR=1.84) и генотип *1A*1D локуса -2467ТdelT гена CYP1A2 (OR=2.08). Маркером риска развития профессионального хронического бронхита в этнической группе башкир является гаплотип *1A гена CYP1A1 (OR=3.27), в группе русских - нормальный фенотип EPHX1 (OR=3.30), в этнической группе татар - аллель 1167T (OR=2.73) и гаплотип (-262)C/(1167)T гена CAT (OR=2.82).

3. Молекулярно- генетическими маркерами риска развития хронической обструктивной болезни легких у жителей Республики Башкортостан являются гаплотип *1D гена CYP1A2 (OR=2.013), фенотип медленного метаболайзера по EPHX1 (OR=1.57), гаплотип *D гена GSTP1 (OR=2.16) и гаплотип (-262)C/(1167)T гена CAT (OR=1.59).

Маркерами риска хронической обструктивной болезни легких в этнической группе татар являются гаплотип *1D гена CYP1A2 (OR=3.91), аллель *1A гена CYP2A6 (OR=2.54), фенотип медленного метаболайзера EPHX (OR=1.84), гаплотип *D гена GSTP1 (OR=2.80) и гаплотип (-262)C/(1167)T гена CAT (OR=1.69); в этнической группе русских - аллель 337С гена EPHX (OR=1.71), генотип Val/Val маркера Ile105Val гена GSTP1 (OR=5.91), гаплотип (-262)C/(1167)T гена CAT (OR=1.74) и аллель T гена NQO1 (OR=1.54).

4. Показано, что гаплотип (-262)C/(1167)T гена CAT вносит важный вклад в формирование подверженности к хроническому обструктивному бронхиту, вызванному как воздействием факторов производственной среды, так и сигаретного дыма.

Список работ, опубликованных по теме диссертации 1. Ахмадишина Л.З., Корытина Г.Ф., Мингазова С.Р., Янбаева Д. Г., Бакиров А.Б., Викторова Т.В. Роль полиморфизма генов CYP1A1, EPHX1, GSTM1, GSTT1 и GSTP1 в развитии хронических бронхитов профессионального генеза // Экологическая генетика. -2005. - Том 3. №1.

2. Akhmadishina L., Mingazova S., Korytina G., Yanbaeva D., Bakirov A., Victorova T. Role of polymorphism in the CYP1A1, EPHX1, GSTM1, GSTT and GSTP1 genes in the development of chronic occupation bronchitis // European Journal of Human Genetics.- 2005.-Vol.13.Supl.1.-P. 217.

3. Akhmadishina L., Yanbaeva D.G., Korytyna G.F., Victorova T.V. Role CYP2A6 gene deletion polymorphism in development of COPD in patients from Russian Federation // European Respiratory Journal.- 2005.-Vol. 26. Supl.

4. Янбаева Д.Г., Корытина Г.Ф., Ахмадишина Л.З., Данилко К.В., Викторова Т.В. Полиморфизм генов про- и противовоспалительных цитокинов у больных хроническими заболеваниями дыхательной системы / Медицинская генетика.- 2005.- Приложение 1. -С. 12.

5. Корытина Г.Ф., Янбаева Д. Г., Ахмадишина Л.З., Данилко К.В., Викторова Т.В. Ассоциация полиморфизмов генов про- и противовоспалительных цитокинов (TNFA, LTA, IL1B, IL8, IL6, IL1RN, IL10) с развитием хронических заболеваний дыхательной системы // Медицинская Иммунология.- 2005.- Спец. выпуск 1.С.15.

6. Корытина Г.Ф., Янбаева Д. Г., Данилко К.В., Ахмадишина Л.З., Викторова Т.В.Полиморфизмов генов цитокинов и риск развития хронических бронхолегочных заболеваний у детей // Цитокины и воспаление. - 2005.Спец. выпуск 1.- С.27.

7. Ахмадишина Л.З., Корытина Г.Ф., Мингазова С.Р., Янбаева Д.Г., Бакиров А.Б., Викторова Т.В. Роль генов детоксикации ксенобиотиков в развитии хронических бронхитов профессионального генеза // Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием "Современные проблемы медицины труда", посвящённой 50-летию образования Уфимского научно-исследовательского института медицины труда и экологии человека.-Уфа. 2005.-С.139-142.

8. Ахмадишина Л.З., Корытина Г.Ф., Янбаева Д.Г., Загидуллин Ш.З., Викторова Т.В. Делеционный полиморфизм гена цитохрома Р (CYP2A6) и его роль в развитии хронической обструктивной болезни лёгких // Пульмонология. -2005.- Спец. выпуск 1.- С.223.

9. Ахмадишина Л.З., Корытина Г.Ф., Янбаева Д.Г., Загидуллин Ш.З., Викторова Т.В. Делеционный полиморфизм гена цитохрома P (CYP2A6) и его роль в развитии хронической обструктивной болезни легких // Медицинская генетика.-2005.- № 12. - С. 22-29.

10. Корытина Г.,Ф., Ахмадишина Л.З., Янбаева Д.Г., Викторова Т.В.

Генотипы гена витамин D связывающего белка (DBP) у больных хронической обструктивной болезнью легких и здоровых жителей Республики Башкортостан // Молекулярная биология.- 2006. - Tом 40. № 2. -С.231-238.

11. Akhmadishina L., Korytina G., Mingazova S., Bakirov A., Victorova T.

Polymorphisms of the catalase gene in the development of occupational chronic bronchitis// European Journal of Human Genetics.- 2006.- Vol.14, Supl.5.- P. 145.- European Human Genetics Conference 2006 (ESHG).

Amsterdam. The Nitherlands.

12. Korytina G.F., Yanbaeva D.G., Akhmadishina L.Z., Victorova T.V. Analysis of the group-specific component (GC) gene haplotypes in patients with chronic obstructive pulmonary disease// European Journal of Human Genetics.-2006.V13.Supl.1-.Р.293.- European Human Genetics Conference 2006 (ESHG).

Amsterdam. The Nitherlands.

13. Ахмадишина Л.З., Корытина Г.Ф., Мингазова С.Р., Янбаева Д.Г., Бакиров А.Б., Викторова Т.В. Полиморфизм генов ферментов антиоксидантной защиты и их роль в развитии профессионального хронического бронхита // Тезисы докладов XIII международной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных «Ломоносов-2006». - С.17- 14. Akhmadishina L.Z., Mingazova S., Korytina G., Yanbaeva D., Bakirov A., Victorova T. Genetic polymorphisms of the antioxidant enzymes and its role in the development of occupational chronic bronchitis // European Respiratory Society 16 annual congress, Munich, 2006: European Respiratory Journal.

Book of abstracts. - 2006. Vol. 28. Supl. 50.- Р. 585s.

15. Korytyna G.F., Yanbaeva D.G., Akhmadishina L.Z., Zagidulin Sh. Z.

Victorova T.V. Analysis the variation of antioxidant-related genes:

Glutathione Transferases (M1, T1, P1), Catalase, Glutathione Peroxidase 1 and NAD(P)H: quinone oxidoreductase-1 and their relationship to chronic obstructive pulmonary disease // European Respiratory Society 16 annual congress, Munich, 2006: European Respiratory Journal. Book of abstracts.Vol. 28. Supl. 50.- Р. 765s.

16. Корытина Г.Ф., Ахмадишина Л.З., Данилко К.В., Целоусова О.В., Викторова Т.В. Анализ полиморфного локуса Asp299Gly гена Toll-like рецептора 4 типа (TLR4) у больных с заболеваниями дыхательной системы и у здоровых индивидов // Медицинская Иммунология.- 2006.Том 8. № 2-3.- С.243.

17. Akhmadishina L.Z., Mingazova S., Korytina G.,Bakirov A., Victorova T.

GENETIC SUSCEPTIBILITY TO OCCUPATIONAL CHRONIC

BRONCHITIS // CHEST.- 2006.-Vol.130.№ 4.- Р. 154S.

18. Korytyna G.F., Yanbaeva D.G., Akhmadishina L.Z., Zagidulin Sh. Z.

Victorova T.V. Antioxidant Genes Polymorphisms In Patients With Chronic Obstructive Pulmonary Disease And In The Healthy Population Of The Republic Bashkortostan//CHEST.- 2006.-Vol.130.№ 4. - Р.184S.

19. Ахмадишина Л.З., Корытина Г.Ф., Мингазова С.Р., Янбаева Д.Г., Бакиров А.Б., Викторова Т.В. Полиморфизм генов ферментов антиоксидантной защиты и их роль в развитии профессионального хронического бронхита // Сборник материалов 16 национального конгресса по болезням органов дыхания, Санкт-Петербург, 2006: Пульмонология. Спец. выпуск 1. С.177.

20. Данилко К.В., Корытина Г.Ф., Ахмадишина Л. З., Янбаева Д. Г., Загидуллин Ш.З., Викторова Т. В. Полиморфизм генов цитокинов (IL1B, IL1RN, TNFA, LTA IL6, IL8, IL10) и их связь с развитием хронической обструктивной болезни легких // Молекулярная биология.- 2007.-Т.41.№1.- С.26-36.

АХМАДИШИНА ЛЕЙСАН ЗИНУРОВНА

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ФЕРМЕНТОВ

МОНООКСИГЕНАЗНОЙ СИСТЕМЫ И АНТИОКСИДАНТНОЙ

ЗАЩИТЫ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ

ДЫХАТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ В РЕСПУБЛИКЕ БАШКОРТОСТАН

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

 
Похожие работы:

«Скибо Юлия Валерьевна РЕГУЛЯЦИЯ I И II ТИПОВ ПРОГРАММИРОВАННОЙ КЛЕТОЧНОЙ ГИБЕЛИ Т-ЛИМФОЦИТОВ ПРИ АТОПИЧЕСКОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЕ 03.01.04 – биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань – 2013 Работа выполнена в НИЛ биохимии нуклеиновых кислот кафедры биохимии ФГАОУВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет, г. Казань. Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Абрамова Зинаида Ивановна Научный...»

«ЛУНИНА ОЛЬГА НИКОЛАЕВНА БИОРАЗНООБРАЗИЕ АНОКСИГЕННЫХ ФОТОТРОФНЫХ БАКТЕРИЙ И ИХ РОЛЬ В ПРОДУКЦИИ ОРГАНИЧЕСКОГО ВЕЩЕСТВА В МЕРОМИКТИЧЕСКИХ ВОДОЕМАХ Специальность 03.00.07 – микробиология автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва - 2008 Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте микробиологии им. С.Н. Виноградского РАН. доктор биологических наук Научный руководитель : Н.В. Пименов доктор биологических наук...»

«Рущук Александр Дмитриевич РАСТИТЕЛЬНЫЙ ПОКРОВ СТЕПЕЙ ЛЕВОБЕРЕЖЬЯ ДНЕСТРА: АНАЛИЗ ФЛОРЫ И КЛАССИФИКАЦИЯ РАСТИТЕЛЬНОСТИ Специальность 03.00.05 – Ботаника Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Тирасполь 2007 Работа выполнена на кафедре ботаники и экологии естественно-географического факультета ПГУ имени Т.Г. Шевченко Научные доктор сельскохозяйственных наук, руководители...»

«ЗАЙНУТДИНОВА ЭЛЬМИРА ФАРИТОВНА АНАЛИЗ ДЕЙСТВИЯ ЭНДОНУКЛЕАЗЫ В КОМБИНАЦИИ С БЕТАДИНОМ НА КЛЕТКИ ОРГАНИЗМОВ РАЗЛИЧНЫХ ТАКСОНОМИЧЕСКИХ ГРУПП 03.02.03 – микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань – 2013 Работа выполнена на кафедре микробиологии Института фундаментальной медицины и биологии ФГАОУВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет Научный руководитель : доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник...»

«Манаева Елизавета Сергеевна Влияние полевок (Microtus rossiaemeridionalis и Clethrionomys glareolus) на биологическую активность почв 03.02.08 – экология (биологические наук и) 03.02.13 – почвоведение (биологические науки) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва - 2013 Работа выполнена в Лаборатории экологии и функциональной морфологии высших позвоночных Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института проблем...»

«КУРАНОВ Борис Дмитриевич ГНЕЗДОВАЯ БИОЛОГИЯ ПТИЦ В УРБАНИЗИРОВАННОМ И ТЕХНОГЕННО ЗАГРЯЗНЕННОМ ЛАНДШАФТЕ 03.00.08 – зоология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Томск-2009 2 Работа выполнена в Научно-исследовательском институте биологии и биофизики Томского государственного университета, Томском государственном университете систем управления и радиоэлектроники Научный консультант : доктор биологических наук, профессор Карташев...»

«ЛИНЬКОВА ЮЛИЯ ВАЛЕРЬЕВНА ДЕСТРУКЦИЯ АМИНОАРОМАТИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ АНАЭРОБНЫМИ МИКРОБНЫМИ СООБЩЕСТВАМИ 03.02.03 – микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва, 2011 г. Работа выполнена на кафедре микробиологии биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова Научные руководители: доктор биологических наук, профессор Нетрусов Александр...»

«ЮНУСОВ Руслан Рауфович Математическое моделирование процесса фототрансдукции в палочках сетчатки (Специальность: 03.00.02. – биофизика) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Москва – 2006 2 Работа выполнена в Институте биохимической физики им. Н.М.Эмануэля РАН Научный руководитель : Доктор биологических наук Каламкаров Григорий Рафаэльевич Официальные оппоненты Доктор химических наук, профессор Комиссаров Геннадий Германович...»

«ШИРМАНОВА Марина Вадимовна ПРИЖИЗНЕННОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЭКЗОГЕННОЙ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ ТКАНЕЙ ЖИВОТНЫХ МЕТОДОМ ДИФФУЗИОННОЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ТОМОГРАФИИ 03.00.13 – физиология 03.00.02 - биофизика Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Нижний Новгород-2009 Работа выполнена на кафедре биофизики Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского Научные руководители: Кандидат биологических наук Балалаева Ирина Владимировна Доктор...»

«Чирков Сергей Николаевич Иммунохимическая и молекулярная диагностика вирусных инфекций растений 03.00.06 – Вирусология 03.00.23 – Биотехнология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва 2009 Работа выполнена на кафедре вирусологии биологического факультета Московского государственного университета имени М.В.Ломоноcова и в лаборатории вирусологии Института микробиологии имени С.Н.Виноградского РАН. Научный консультант : доктор...»

«Шлеева Маргарита Олеговна ПОКОЯЩИЕСЯ ФОРМЫ БАКТЕРИЙ РОДА MYCOBACTERIUM: ПОЛУЧЕНИЕ, БИОХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ РЕАКТИВАЦИИ. Специальность 03.00.04 – биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва-2004 1 Работа выполнена в лаборатории биохимии стрессов микроорганизмов Института биохимии им. А.Н. Баха РАН Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Капрельянц Арсений Сумбатович Официальные оппоненты : доктор...»

«МЯЗИН Владимир Александрович РАЗРАБОТКА СПОСОБОВ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ БИОРЕМЕДИАЦИИ ПОЧВ КОЛЬСКОГО СЕВЕРА ПРИ ЗАГРЯЗНЕНИИ НЕФТЕПРОДУКТАМИ (В УСЛОВИЯХ МОДЕЛЬНОГО ЭКСПЕРИМЕНТА) 03.02.08 – экология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Петрозаводск – 2014 2 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институте проблем промышленной экологии Севера Кольского научного центра Российской академии наук Научный...»

«УДК 595.787 ДУБАТОЛОВ Владимир Викторович ЧЕШУЕКРЫЛЫЕ ПОДСЕМЕЙСТВА ARCTIINAE (LEPIDOPTERA, ARCTIIDAE) ПАЛЕАРКТИКИ 03.00.09 – энтомология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Новосибирск – 2007 Работа выполнена в Институте систематики и экологии животных Сибир ского отделения Российской академии наук. Официальные оппоненты : доктор биологических наук...»

«ТЛЕХАС ЗАРА РАМАЗАНОВНА ИЗМЕНЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПОЧВ РЕСПУБЛИКИ АДЫГЕЯ ПРИ ХИМИЧЕСКОМ ЗАГРЯЗНЕНИИ 03.00.27 – почвоведение 03.00.16 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Ростов-на-Дону - 2008 2 Работа выполнена на кафедре землеустройства Майкопского государственного технологического университета Научные руководители: доктор сельскохозяйственных наук, профессор Колесников Сергей Ильич доктор биологических наук,...»

«Попова Анна Михайловна ЛУГОВАЯ РАСТИТЕЛЬНОСТЬ ПОЙМЫ СРЕДНЕГО ТЕЧЕНИЯ РЕКИ ВЫЧЕГДА 03.00.05 – ботаника АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Сыктывкар 2008 Работа выполнена на кафедре ботаники ГОУ ВПО Сыктывкарский государственный университет. Научный руководитель : кандидат биологических наук, доцент ШУШПАННИКОВА Галина Сергеевна Официальные оппоненты : доктор биологических наук, старший научный сотрудник МАРТЫНЕНКО Вера Антоновна...»

«Савинова Татьяна Александровна Генетическое разнообразие и молекулярные основы резистентности Streptococcus pneumoniae к -лактамным антибиотикам 03.02.03 – Микробиология, 03.01.03 – Молекулярная биология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2011 2 Работа выполнена в государственном образовательном учреждении дополнительного профессионального образования Российская Медицинская Академия Последипломного Образования...»

«ГРИГОРЬЕВ Олег Александрович РАДИОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ВОЗДЕЙСТВИЯ ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ПОЛЯ ПОДВИЖНОЙ СОТОВОЙ СВЯЗИ НА ЗДОРОВЬЕ НАСЕЛЕНИЯ И УПРАВЛЕНИЕ РИСКАМИ 03.01.01 – радиобиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва – 2012 Работа выполнена в Государственном научном центре Российской Федерации Федеральном государственном бюджетном учреждении Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И. Бурназяна Федерального...»

«УДК 612.017.1:616-097 КОЛИКОВА ЮЛИЯ ОЛЕГОВНА АУТОАНТИТЕЛА К ДНК В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ 03.00.04 - биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань 2003 Работа выполнена на кафедре биохимии Казанского государственного университета Научный руководитель : Доктор биологических наук, профессор Ишмухаметова Д.Г. Официальные оппоненты : Доктор ветеринарных наук, профессор Алимов A.M. Доктор биологических наук, старший...»

«ФИЛИППОВ Дмитрий Андреевич СТРУКТУРА И ДИНАМИКА ЭКОСИСТЕМ ПОЙМЕННЫХ БОЛОТ БАССЕЙНА ОНЕЖСКОГО ОЗЕРА (ВОЛОГОДСКАЯ ОБЛАСТЬ) 03.00.16 – экология 03.00.05 – ботаника Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Сыктывкар – 2008 Работа выполнена на кафедре зоологии и экологии ГОУ ВПО Вологодский государственный педагогический университет Научные руководители: доктор биологических наук, профессор БОЛОТОВА Наталья Львовна доктор биологических наук,...»

«БОЧКАРЕВА Татьяна Николаевна ОПОСРЕДОВАННОЕ ДЕЙСТВИЕ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА ПРОЦЕСС МЕТАСТАЗИРОВАНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ ОПУХОЛИ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОКЛИНИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ) 03.01.01 – радиобиология, биологические наук и Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Москва 2010 2 Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении Российский научный центр радиологии и хирургических технологий Федерального агентства по высокотехнологичной...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.