WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

КАРМАЗИН

Антон Павлович

БИОМОНИТОРИНГ НЕФТЯНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ

УСТЬЯ РЕКИ ДОН С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ

ВОДНЫХ ПОЗВОНОЧНЫХ

Специальность 03.02.08 — экология

А В Т О Р Е Ф Е РА Т

диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук

Краснодар — 2010 1

Работа выполнена на кафедре зоологии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Кубанский государственный университет»

Научный руководитель: доктор биологических наук, доцент Пескова Татьяна Юрьевна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Стрельников Виктор Владимирович;

кандидат биологических наук Замалетдинов Ренат Ирекович Ведущее учреждение: Институт экологии Волжского бассейна РАН

Защита диссертации состоится « 17 » декабря 2010 г. в 11.00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.101.14 по биологическим наукам при ГОУ ВПО «Кубанский государственный университет» по адресу: 350040, г. Краснодар, ул. Ставропольская, 149.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Кубанский государственный университет».

Автореферат диссертации размещён на сайте:

http://www.kubsu.ru.

Автореферат разослан « » 2010 г.

Учёный секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук В. В. Тюрин

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Нефтяное загрязнение в настоящее время имеет глобальное распространение и затрагивает не только акватории морей и океанов, но также участки суши, реки и пресные водоёмы [Данилова, 1990]. Нефтепродукты относятся к числу наиболее распространённых и опасных веществ, загрязняющих поверхностные воды. Нефть и продукты её переработки представляют собой смесь веществ — низко- и высокомолекулярные предельные, непредельные алифатические, нафтеновые, ароматические углеводороды, кислородные, азотистые, сернистые соединения, ненасыщенные гетероциклические соединения. Такой сложный состав обусловливает самые разнообразные эффекты влияния нефти на различных уровнях организации материи — от клеточного до популяционного.





Одним из важнейших аспектов проблемы загрязнения окружающей среды нефтью является токсикологический — выяснение влияния нефти на гидробионтов и раскрытие механизмов токсического действия растворённых углеводородов нефти. Биотестирование и биоиндикация являются основными элементами биологического мониторинга состояния окружающей среды. Биотестирование выполняет функцию оперативного контроля происходящего загрязнения, нацеленного на получение информации о токсичности того или иного загрязнителя.

Биоиндикация представляет собой выявление последствий загрязнения водного объекта по функциональным и морфологическим показателям его обитателей или по экологическим характеристикам сообщества. Изменения, зарегистрированные методами биоиндикации, являются результатом уже состоявшегося ранее загрязнения [Киреева, Кабиров, Дубовик, 2007]. Таким образом, использование комплексного (биоиндикация + биотестирование) подхода позволяет интегрально оценить реальный уровень загрязнения изучаемого водоёма нефтью.

Цели и задачи исследования. Цель исследования — определить индивидуальные и популяционные показатели широко распространённых видов водных позвоночных для биомониторинга нефтяного загрязнения водоёмов.

Для достижения цели поставлены и решены следующие задачи:

1. Определить с помощью гидрохимического анализа уровень нефтяного загрязнения устья р. Дон.

2. Оценить показатели стабильности развития озёрной лягушки и серебряного карася из различных рукавов р. Дон.

3. Дать интегральную оценку состояния биотопов в дельте р. Дон с использованием видов-биоиндикаторов.

4. Экспериментальным путём оценить динамику основных физиологических и биохимических показателей озёрной лягушки под влиянием нефтяного загрязнения.

5. Установить изменения параметров раннего онтогенеза озёрной лягушки под действием различных концентраций нефти.

6. Определить пороговые, эффективные и летальные концентрации нефти для водных позвоночных.

Научная новизна. Впервые определены особенности влияния нефти на клеточном, организменном и популяционном уровнях организации водных позвоночных животных. Установлена динамика гематологических показателей озёрной лягушки под влиянием нефти в различных концентрациях. По показателям перекисного окисления липидов определён уровень окислительного стресса органов озёрной лягушки. Впервые установлены показатели бионакопления нефти в различных органах озёрной лягушки. Выявлены особенности раннего развития водных позвоночных в растворах нефти различных концентраций. Впервые изучено состояние (уровень нефтяного загрязнения) южных рукавов дельты р. Дон. Установлены показатели флуктуирующей асимметрии серебряного карася и озёрной лягушки, обитающих в устье р. Дон, и их связь с уровнем нефтяного загрязнения данной акватории. Дифференцированы адаптивные и патологические процессы, происходящие под влиянием нефти различных концентраций на клеточном, организменном и популяционном уровнях.





Теоретическая и практическая значимость результатов. Предложена система мониторинга экологического состояния рек с использованием половозрелых особей двух фоновых видов позвоночных гидробионтов — озёрной лягушки и серебряного карася. В эксперименте установлены изменения основных цитогематологических и биохимических показателей озёрной лягушки под влиянием нефти в различных концентрациях. Рассмотрены особенности развития головастиков озёрной лягушки в растворах нефти. Выявлены адаптивные и патологические процессы, развивающиеся в организме под действием нефти.

Основные положения и выводы диссертации используются в учебном процессе кафедр зоологии, водных биоресурсов и аквакультуры ГОУ ВПО КубГУ, а также при мониторинговых исследованиях лабораториями КрасНИИРХ, АзНИИРХ и ФГУ «Ростовский референтный центр Россельхознадзора».

Личный вклад соискателя. Автор в 2008—2010 гг. провёл полевые исследования в основных притоках устья р. Дон. Работы, связанные с камеральной обработкой полевого материала, постановкой и проведением экспериментов и интерпретацией полученных данных, а также с написанием текста диссертации, выполнены автором по плану, согласованному с научным руководителем. Доля личного вклада соискателя в различных компонентах работы составляет 40—100 %.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Нефтяное загрязнение оказывает на водных позвоночных животных дозозависимое воздействие на клеточном и организменном уровнях.

2. Изменения стабильности развития озёрной лягушки и серебряного карася в устье р. Дон происходят под влиянием нефтяного загрязнения.

3. Индивидуальные характеристики озёрной лягушки такие как уровень бионакопления нефти, гематологические показатели, скорость перекисного окисления липидов могут быть использованы для биомониторинга нефтяного загрязнения водоёмов.

4. Озёрная лягушка адаптируется к концентрациям нефти 1 ПДК на всех стадиях онтогенеза, к концентрациям 1—10 ПДК адаптируются взрослые особи, в концентрациях 10 ПДК у лягушки отмечены только патологические процессы.

Апробация и публикации. Результаты исследований были представлены и обсуждались на конференциях различных уровней, в том числе: на ХХI, ХХII, XXIII Межреспубликанских научно-практических конференциях «Актуальные вопросы экологии и охраны экосистем южных регионов России и сопредельных территорий», г. Краснодар, 2008—2010 гг.; на Международной научно-практической интернет-конференции «Современные направления теоретических и прикладных исследований — 2009», г. Одесса, 2009 г.; на V Международной конференции по новым технологиям и приложениям современных физико-химических методов для изучения окружающей среды, Ростов-на-Дону, 2009 г.;

на Международной научно-практической конференции «Региональные особенности функционирования и взаимодействия предприятий рекреационной отрасли и промышленного сектора», Туапсе, 2010 г.; X Международном семинаре по магнитному резонансу (спектроскопия, томография и экология), Ростов-наДону, 2010 г.; VII Международной конференции «Спектроскопия координационных соединений в науке, технике и экологии», Туапсе, 2010 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 работ, в том числе статьи в журналах, рекомендованных ВАК.

Объём и структура диссертационной работы. Диссертация изложена на 154 страницах машинописного текста, проиллюстрирована 20 рисунками и 17 таблицами. Диссертация состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов и списка использованной литературы, в котором приведено 189 источников, в том числе 19 на иностранных языках.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Глава 1. Анализ современного состояния проблемы Глава посвящена анализу литературы по различным аспектам влияния нефтяного загрязнения на индивидуальные и популяционные показатели рыб и земноводных. Показаны особенности хронического и кратковременного влияния нефти на биоразнообразие водоёмов, определены летальные, сублетальные и эффективные концентрации нефти для различных видов водных позвоночных.

Представлены сведения о возможности использования отдельных показателей позвоночных гидробионтов для биоиндикации нефтяного загрязнения водоёмов.

2.1. Материал Исследования проводили в устье р. Дон в 2008—2010 гг. Материалом для диссертационной работы послужили головастики и взрослые особи озёрной лягушки Rana ridibunda (Pal.), а также взрослые особи серебряного карася Carassius auratus gibelio (Bloch). Статистическую обработку полученных данных проводили стандартными биометрическими методами [Лакин, 1980].

2.2. Методы биоиндикации состояния водоёмов В течение 2008—2010 гг. весной, летом и осенью осуществляли отборы проб воды на содержание нефтепродуктов в 10 точках, расположенных в узлах деления водотоков устья р. Дон. Места отбора проб указаны на рисунке 1.

Обследования акватории на участке пос. Донской — судоходное устье Старого Дона производили на арендованных судах типа КС-100 «Надежда» и «Ипомея», обследование проток, малых рек и гирл — на моторных лодках «Прогресс».

1 — р. Дон у пос. Донской; 2 — устье Нижнего Дона в районе косы Песчаной; 3 — устье Нижнего Дона в районе его впадения в Таганрогский залив; 4 — Мериново гирло в районе ответвления от Нижнего Дона; 5 — Мериново гирло в районе впадения в Таганрогский залив; 6 — проток Бирючий в районе ответвления от Нижнего Дона;

7 — проток Бирючий в районе впадения в Таганрогский залив; 8 — р. Азовка; 9 — Пробы воды отбирали с помощью батометра в водах прибрежной зоны и в центре водотока. Концентрацию нефтепродуктов в воде определяли комбинированным спектрофотометрическим методом с использованием инфракрасного Фурье спектрометра «Инфралюм ФТ-02». Под нефтепродуктами подразумевали сумму углеводородов алифатического, алициклического и ароматического рядов [Сборник методик …, 1996; Другов, Родин, 2007; Скрыпник, 2008].

Показатели флуктуирующей асимметрии анализировали у живых озёрных лягушек и серебряных карасей из рукавов устья р. Дон согласно методике В. М. Захарова [1987]. Так как формирование меристических признаков обоих видов происходит во время личиночного развития, то сеголетки рыб дают возможность оценить текущую ситуацию в водоёме, а рыбы и земноводные старших возрастов — экологическую ситуацию в предыдущие годы [Методические рекомендации …, 2003]. Оценку отклонения стабильности развития земноводных и рыб от условно нормального состояния проводили по соответствующим шкалам [Методические рекомендации …, 2003; Пескова, Жукова, 2007]. Всего было исследовано 200 особей озёрных лягушек и 270 особей серебряных карасей из 10 мест обитания в устье р. Дон.

2.3. Методы экспериментального изучения влияния нефти Озёрные лягушки для экспериментов были отловлены в Ботаническом саду ГОУ ВПО «Кубанский государственный университет». В общей сложности в эксперименте было исследовано 105 взрослых особей озёрной лягушки и 360 головастиков. Для проведения экспериментов была использована сырая нефть марки «Light».

Гематологические исследования проводили на половозрелых озёрных лягушках, помещённых на 5 суток в нефть, в концентрациях соответствующих 0,2—10 ПДК. Основные показатели красной и белой крови определяли с помощью стандартных методов фиксации, окраски мазков крови, их микроскопического исследования, а также подсчёта микроядер эритроцитов [Кост, 1973;

Давыдов и др., 2006].

Интенсивность процессов перекисного окисления липидов у половозрелых особей озёрной лягушки оценивали по перекисному числу липидов в таких органах как печень, мышцы, головной мозг и сердце. Определение содержания перекисных соединений в тканях проводили по стандартной методике [ГОСТ Р 51487-99, 2001]. Бионакопение нефти в мышцах, печени, почках, коже, лёгких, тонком кишечнике и гонадах озёрной лягушки определяли методом газовой хроматографии [Другов, Родин, 2000] на хроматомасс-спектрометре Shimadzu, 2010.

Изучение влияния нефти (концентрации 0, 0,01, 0,05, 0,1, 0,25 и 0,5 мг/л) на ранние стадии онтогенеза озёрной лягушки проводили на головастиках, полученных из икры, взятой из условно чистого водоёма. Эксперимент проводили в лабораторных условиях по стандартной методике [Пястолова, 1989] до завершения метаморфоза или наступления смерти. Фиксировали смертность личинок, темпы их роста, дни достижения основных стадий развития и метаморфоза [Дабагян, Слепцова, 1975].

Глава 3. Уровень кумуляции нефти в воде устья р. Дон 3.1. Содержание нефтепродуктов в рукавах устья р. Дон Дельта р. Дон — уникальное в своём роде природное образование, имеющее большое значение для функционирования экосистемы всего бассейна р. Дон, Таганрогского залива и в целом Азовского моря. Бассейн Нижнего Дона отличается равнинным характером рельефа со значительной расчленённостью. Каждый рукав (проток) дельты р. Дон представляет собой большую плёсовую лощину, относительно более глубокую, чем ограничивающие её с обоих концов развилочные перекаты. Эта особенность характерна и для больших рукавов, и для малых мелких зарастающих протоков. Одной из характерных деталей дельтовых перекатов Дона являются небольшие острова, тяготеющие к одному из берегов русла [Жукова и др., 2009].

Мы в течение весны, лета и осени 2008—2010 гг. ежемесячно отбирали пробы воды в 10 точках устья р. Дон (см. рисунок 1). Места отбора проб выбраны так, что 5 точек расположены в судоходной части устья по которой перемещаются крупномерные суда, остальные 5 — в сравнительно неглубоких рукавах, по которым передвигаются только маломерные суда.

Результаты токсикологического анализа воды за период с 2003 г. по 2010 г.

по основным устьевым створам р. Дон свидетельствуют об отсутствии в воде реки других токсикантов, кроме нефти. В рукавах дельты Дона нефтепродукты встречается в различных состояниях: растворённая в воде нефть, молекулярная плёнка, плёнка толщиной до нескольких миллиметров («слик»), эмульсии «вода в нефти» и «нефть в воде», донные отложения и нефтяные агрегаты. В последние 5 лет содержание нефтепродуктов в воде снижается, однако, оно всё ещё превышает ПДК как для воды, так и для грунта.

В 2008—2010 гг. мы определяли содержание нефти в основных рукавах южной части устья р. Дон. Достоверных сезонных и годовых различий в содержании нефти в воде одной и той же точки нами не обнаружено. За три года исследований средние показатели содержания нефти в исследованных водотоках составляли от 1 до 1,8 ПДК. Максимальное количество нефти было отмечено весной 2010 г. в точках 2 (5,6 ПДК), 4 (4,6 ПДК), 6 (4,2 ПДК), 7 (4,0 ПДК) и 8 (4,4 ПДК) и летом 2009 г. в точках 2 (6,2 ПДК), 7 (4,4 ПДК) и 8 (4,2 ПДК).

При этом сравнение средних величин содержания нефти в различных точках в один и тот же год и/или сезон достоверно не различается. Таким образом, хотя интенсивность движения и размеры проходящих по исследованным рукавам дельты Дона судов различаются, уровень нефтяного загрязнения исследованных водотоков одинаковый. Объяснить это можно тем, что при отсутствии крупных выбросов нефтепродуктов в воду, нефтяное загрязнение воды поддерживается за счёт вымывания тяжёлых фракций нефти из донных отложений [Кармазин, Буков, Пескова, 2010].

Компоненты нефти подразделяют на три основных псевдофракции — лёгкие, средние и тяжёлые [Дембицкий и др., 2003; Земков, Журавлева, 2004].

Нефтепродукты, загрязняющие воды устья р. Дон, относятся к первой и второй группам. Они представлены моторными бензинами, судовыми дизельными топливами и лёгкими мазутами [Кармазин, Буков, Пескова, 2010].

В лаборатории химического факультета ГОУ ВПО «Кубанский государственный университет» был проведён анализ нефти марки Light, который показал, что в исследуемой нефти преобладают указанные выше компоненты первой и второй группы. На основании хроматографического анализа состава нефти мы сочли возможным использовать её в лабораторном эксперименте с животными.

3.2. Кумуляция нефти в тканях озёрной лягушки Озёрная лягушка является аккумулирующим биомонитором, для неё характерен достаточно высокий уровень кумуляции различных токсикантов, таких как пестициды, тяжёлые металлы [Пескова, 2001; Мисюра, 2006б; Кармазин, Пескова, 2010]. В известной нам литературе нет сведений об особенностях накопления в органах озёрной лягушки нефти. Поэтому мы изучили уровень кумуляции углеводородов нефти у озёрных лягушек после 10 дней пребывания в растворах нефти концентраций 0, 0,05 и 0,5 мг/л (рисунок 2).

Рисунок 2 — Уровень кумуляции нефти (мкг/мг) в органах озёрной лягушки У контрольных особей озёрной лягушки в печени и мышцах количество углеводородов достоверно ниже, чем в других исследованных органах. На порядок выше содержание нефти в лёгких, коже, гонадах, тонком кишечнике и почках. При сравнительно низком содержании нефти в воде (0,05 мг/л) достоверно не изменяется содержание нефти в печени, мышцах, коже, почках и тонком кишечнике по сравнению с контролем, а в лёгких и гонадах оно достоверно повышается. Кроме того, при данной концентрации нефти в воде, в гонадах и лёгких количество углеводородов достоверно больше, чем в почках и тонком кишечнике. При повышении содержания нефти в воде в 10 раз увеличивается накопление нефти в печени и почках; в коже, тонком кишечнике и мышцах оно остаётся постоянным. В лёгких и гонадах уровень содержания углеводородов снижается по сравнению с их накоплением в тех же органах после пребывания в растворе нефти меньшей концентрации.

Можно говорить о том, что количество углеводородов нефти в органах озёрной лягушки изменяется в зависимости от концентрации нефти в воде.

Так, в печени и почках, являющихся основными органами детоксикации в организме, количество нефти увеличивается по мере увеличения концентрации её в воде. В почках нефти накапливается в 3,8—5,5 раз больше, чем в печени, так что основным органом, аккумулирующим углеводороды нефти, у озёрной лягушки являются почки.

В тонком кишечнике и коже отмечена обратная картина — снижение содержания нефти в органах при увеличении её количества в воде. Указанные органы служат для выведения токсикантов из организма. Видимо, их работа интенсифицируется по мере роста концентрации нефти в окружающей среде, и её концентрация в них снижается.

Обращает на себя внимание низкое и одинаковое содержание нефти в мышцах и печени, оно на порядок ниже, чем в других исследованных органах.

Если для мышц это ожидаемо, т. к. они не участвуют ни в выведении, ни в детоксикации загрязнителей, то для печени данное явление ранее в литературе не отмечалось. Видимо, в этом проявляется специфическое воздействие нефти.

Глава 4. Особенности развития водных позвоночных в условиях 4.1. Биоиндикация состояния устья р. Дон по показателям стабильности развития фоновых видов позвоночных гидробионтов Для оценки экологического состояния различных рукавов дельты р. Дон мы определяли показатели стабильности развития фоновых видов водных позвоночных, обитающих в устье реки — озёрной лягушки и серебряного карася.

В таблице 1 приведена балльная оценка состояния указанных водотоков, базирующаяся на показателях флуктуирующей асимметрии (частоты асимметричного проявления на особь) озёрной лягушки и серебряного карася.

Судя по данным таблицы 1, экологическая обстановка в исследованных рукавах устья Дона стабильно тяжёлая. Большинство рукавов характеризуется 4 (существенное отклонение от нормы) и 5 (критическое состояние) баллами по шкале оценки отклонения стабильности развития от условной нормы.

В 2010 г. мы отлавливали половозрелых особей озёрной лягушки, их индивидуальное развитие (и нарушения его стабильности, соответственно) происходили в 2008—2009 гг. Наименьший уровень нарушений у лягушек отмечен нами в Мериновом гирле, р. Кагальник и Мокрый Кагальник. Мы объясняем это сравнительно небольшими глубинами указанных рукавов, по которым курсируют только маломерные суда.

В 2010 г. в точках отбора проб мы отлавливали также разновозрастных особей серебряного карася. Его сеголетки характеризуют текущее состояние изученных рукавов Нижнего Дона, для которого отмечено увеличение показателей флуктуирующей асимметрии и, следовательно, ухудшение экологической обстановки на этих водотоках. Действительно, в 2010 г. показатели химического анализа регистрировали увеличение максимальных величин содержания нефти в воде.

Таблица 1 — Балльная оценка состояния исследованных водотоков из устья р. Дон по показателям флуктуирующей асимметрии озёрной лягушки и серебряного карася в 2004—2010 гг.

р. Дон у пос. Донской —точка Устье Нижнего Дона — точка Устье Нижнего Дона — точка Мериново гирло —точка Мериново гирло —точка Проток Бирючий — точка Проток Бирючий — точка р. Азовка — точка р. Мокрый Кагальник — точка р.  Кагальник — точка 2-х и 3-х летние караси, как и особи озёрной лягушки, характеризуют состояние рукавов Нижнего Дона в 2008—2009 гг. Сравнение данных, полученных по двум видам позвоночных гидробионтов, указывает на сравнительно меньшую чувствительность земноводных по сравнению с рыбами. «Нормальный» уровень отклонения развития у земноводных выше, чем у рыб, поэтому, несмотря на более высокие абсолютные величины показателей флуктуирующей асимметрии озёрной лягушки, ей соответствуют меньшие баллы по шкале [Методические рекомендации …, 2003; Пескова, Жукова, 2007].

Судя по величине флуктуирующей асимметрии 4—7-летних серебряных карасей экологическое состояние южной части устья р. Дон в 2004—2007 гг., можно оценить как критическое или близкое к нему состояние.

Таким образом, исходя из оценки показателей стабильности развития водных позвоночных, можно говорить о некотором улучшении экологической обстановки на Нижнем Дону. Данные химического анализа содержания нефти в воде показывают значительное снижение абсолютных максимальных величин (при сохранении средних), однако в воде обычно определяется содержание только лёгких и средних фракций нефтепродуктов. Для определения общего экологического состояния водоёма необходимо учитывать также тяжёлые фракции нефтепродуктов, которые быстро кумулируются донными илами, а затем постепенно высвобождаются, превращаясь в формы других фракций нефтепродуктов. Использование гидробионтов-биоиндикаторов даёт возможность получения комплексной оценки степени загрязнения водоёмов нефтью.

4.2. Влияние различных концентраций нефти на личиночное развитие озёрной лягушки В экспериментальных условиях было изучено влияние некоторых (0,01— 0,5 мг/л) концентраций нефти на личиночное развитие головастиков озёрной лягушки. Динамика гибели головастиков озёрной лягушки в контроле и растворах нефти различных концентраций на протяжении опыта показана на рисунке 3. Видно, что гибель головастиков возрастает в изученном нами градиенте токсической нагрузки.

Процент погибших головастиков В самых низких концентрациях нефти — 0,01 и 0,05 мг/л — кривые гибели головастиков сходны — сначала смертность нарастает постепенно, затем происходит некоторое её торможение — наблюдается плато длительностью в 6— дней, после чего гибель продолжает нарастать. Однако в обеих исследованных концентрациях 100%-ная гибель не достигнута. Данные кривые соответствуют линейной регрессии, что подтверждено теоретически вычисленными уравнениями регрессии. В более высоких исследованных концентрациях нефти (0,25 и 0,5 мг/л) гибель головастиков происходит иначе; отмеченного для более низких концентраций плато не наблюдается. Кривая гибели в концентрации 0,1 мг/л имеет промежуточную форму между кривыми, описанными выше для менее и более высоких концентраций, — до 22 дня гибнет 40 % головастиков, затем наблюдается торможение гибели, длящееся около 10 дней, после чего погибает большинство особей. Все кривые гибели головастиков озёрной лягушки в более высоких концентрациях нефти описываются с помощью нелинейной регрессии, теоретически вычисленные уравнения регрессии являются квадратичными.

По мнению Т. Ю. Песковой [2001], гибель головастиков, как правило, начинается не сразу после помещения их в раствор токсиканта, так как необходимо время для накопления этого токсиканта в организме животных. При низких концентрациях токсиканта гибнут особи с наиболее высокой индивидуальной чувствительностью к нему, а при повышении концентрации число погибших увеличивается за счёт гибели более резистентных особей.

День начала гибели головастиков в различных концентрациях нефти, по нашим данным, не изменяется. 50%-ная гибель в концентрации 1 ПДК — 0,05 мг/л наступает значительно позже, чем в более высоких концентрациях. Во всех исследованных концентрациях нефти, кроме максимальной, 100 % гибель не достигнута и часть головастиков (от 13,3 до 40 %) метаморфизирует. По нашему мнению, это свидетельствует о возможности выживания личиночных стадий земноводных в природных условиях, где мы отмечали концентрации нефти до 0,28 мг/л.

В сравнительно низких концентрациях нефти — 0,02 и 0,05 мл/л и контроле число головастиков, завершивших метаморфоз, составляет в среднем 80 % [Пескова, Жукова, Белоконь, 1998], причём сроки метаморфоза головастиков в растворах нефти сдвигаются. Более высокие концентрации нефти, исследованные нами, действуют аналогично, сдвигая эти сроки, но при этом количество головастиков, закончивших развитие, также изменяется. Метаморфоз в растворах нефти начинается на 13—31 день позднее по отношению к контролю.

Анализ сроков наступления наиболее важных стадий развития у головастиков озёрной лягушки в контроле и опытных растворах нефти показан в таблице 2.

Таблица 2 — Дни достижения основных стадий развития личинками озёрной лягушки в контроле и в присутствии нефти Примечание — * — все головастики погибли В контроле и самой низкой концентрации нефти 47-я и 51-я стадии развития происходят одновременно. Более высокие концентрации нефти отодвигают дни наступления 47-й стадии на 6—19, а 51-й — на 7—13 дней, соответственно.

Таким образом, отмечено замедление развития головастиков озёрной лягушки в присутствии нефти в концентрациях от 1 до 10 ПДК по сравнению с контролем и самой низкой из исследованных концентраций нефти. Нарастание отставания в сроках достижения 47-й и 51-й стадий развития происходит дозозависимо.

Метаморфоз у контрольных головастиков растянут более чем на 30 суток.

Видимо, это связано с большим абсолютным числом метаморфизирующих в контроле особей. В низких концентрациях нефти (0,01 и 0,05 мг/л) метаморфоза достигает 30—40 % особей, они проходят эту стадию в сжатые сроки — за 5— дней. Под действием концентрацийх нефти, увеличенных в 10 раз по сравнению с предыдущими, метаморфизирует только 6,7—13,3 % головастиков. В концентрации нефти 0,5 мг/л до стадии метаморфоза не дожил ни один головастик.

Одним из проявлений хронической интоксикации личинок амфибий является удлинение личиночного развития [Пескова, 2001]. По нашим данным, большинство исследованных концентраций нефти замедляют развитие головастиков озёрной лягушки: позднее наступают 47-я и 51-я стадии развития, позднее происходит и метаморфоз, однако головастики в большинстве вариантов опыта проходят эти стадии в более сжатые сроки.

Все головастики (контроль и опыты) были одинаковых размеров: длина тела колебалась в пределах 24—30 мм. Замедление темпов их роста наступало не сразу, а через месяц после начала опыта, когда головастики находились на 46-й стадии развития (зачатки задних конечностей). При этом различий в средних линейных размерах головастиков из вариантов опыта с различными концентрациями нефти, не обнаружено. Аналогичные данные были получены для головастиков озёрной и остромордой лягушек и дальневосточной жерлянки, развивавшихся в низких концентрациях нефти [Данилова, 1990; Пескова, Жукова, Белоконь, 1998]. У осетровых рыб, наоборот, к 2—4 месяцу от начала наблюдений в растворах нефти был отмечен скачкообразный прирост длины тела [Обухов, Крючков, 2004].

Таким образом, данные, полученные при анализе комплекса показателей личиночного развития, свидетельствуют о том, что концентрации нефти в диапазоне 0,01—0,05 мг/л не оказывают токсического действия на головастиков озёрной лягушки. Концентрации 0,1—0,25 мг/л являются эффективными, то есть делают выживание головастиков затруднительным, но возможным, снижая их численность за счёт наиболее чувствительных особей. При этом достаточно резистентные особи могут существовать и в таких условиях. Только концентрация нефти 0,5 мг/л (10 ПДК) является для личинок озёрной лягушки летальной. В ней происходит 100%-ная гибель головастиков до достижения ими метаморфоза.

Глава 5. Изменения некоторых физиологических и биохимических характеристик озёрной лягушки под действием нефти 5.1. Гематологические показатели озёрной лягушки под действием различных концентраций нефти Были рассмотрены изменения показателей красной и белой крови озёрных лягушек под действием следующих концентраций нефти — 0 (контроль), 0,05, 0,1 и 0,5 мг/л, результаты приведены на рисунке 4.

Рисунок 4 — Количество гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов в крови озёрной лягушки при экспозиции в различных концентрациях нефти (в % по По нашим данным, количество гемоглобина в крови озёрной лягушки во всех исследованных концентрациях нефти достоверно выше, чем в контроле — в 1,1, 1,3 и 1,45 раза соответственно, причём, это возрастание происходит дозозависимым образом. Аналогичная картина отмечена и для числа эритроцитов, их количество статистически достоверно возрастает в 1,1, 1,2 и 1,5 раза. Увеличение кислородной ёмкости крови у амфибий при постоянном обитании в водомах, загрязнённых поллютантами, можно считать адаптивным [Пескова, 2001].

В литературе есть сведения, что под действием нефти как у земноводных, так и у рыб отмечен достоверный эритроцитоз, а содержание гемоглобина может колебаться как в сторону его повышения, так и понижения [Абдуллаева, 2007; Габибов, Курбанова, 2008; Каниева, 2002; Пескова, Шарпан, 2007]. Существует мнение, что у водных позвоночных, уровень гемоглобина не является характерным показателем токсикоза [Житенева, Макаров, Рудницкая, 2004].

В мазках мы обнаруживали микроядра эритроцитов. В контроле и концентрации нефти 0,01 мг/л у озёрной лягушки количество эритроцитов с микроядрами одинаковое. При повышении градиента концентрации нефти процент клеток с микроядрами достоверно возрастает с 1,7/1 000 клеток в контроле до 5,3/1 000 клеток в растворе нефти самой высокой концентрации (tфакт = 5, при t05 = 1,96). В крови рыб в растворе нефти концентрации, равной 10 ПДК, было отмечено 7,3/1 000 клеток [Абдулаева, 2007].

Общее количество лейкоцитов, по нашим данным, максимально у лягушек в контроле (рисунок 4), а во всех вариантах опыта отмечена статистически достоверная лейкопения. Степень лейкопении разная: в самой низкой концентрации нефти число лейкоцитов в 1,2 раза ниже, чем в контроле, а в самой высокой концентрации нефти — ниже почти вдвое (в 1,85 раза). Трёхсуточное пребывание в нефти концентраций от 0,0005 до 0,2 мг/л вызывает у лягушек существенный и возрастающий по мере увеличения концентрации токсиканта лейкоцитоз в 1,9—8,3 раза [Пескова, Шарпан, 2007]. Можно говорить о том, что при кратковременном воздействии токсиканта проявляется лейкоцитоз, свидетельствующий о защитной функции организма. При более длительном содержании лягушек в тех же концентрациях нефти происходит снижение защитной функции крови.

Известно, что показатель содержания лейкоцитов неполноценен без анализа соотношения числа различных их типов. В целом, кровь озёрной лягушки, по нашим данным, имеет лимфоидный характер, как это отмечалось и в других исследованиях [Жукова, 1987; Чернышева, Старостин, 1994; Жукова, Пескова,1999; Романова, 2005б]. Количество лимфоцитов достоверно увеличивается во всех вариантах опытов по сравнению с контролем в 1,4 раза (рисунок 5).

Рисунок 5 — Относительное количество агранулоцитов в крови озёрных лягушек под действием нефти различных концентраций Уровень лимфоцитоза, по нашим данным, не зависит от величины исследованной концентрации нефти. При трёхсуточной экспозиции лягушек в концентрациях нефти 0,01 и 0,05 мг/л уровень числа лимфоцитов не менялся по сравнению с контрольными животными [Пескова, Шарпан, 2007]. Следовательно, лимфоцитоз появляется при увеличении продолжительности воздействия нефти.

В крови озёрной лягушки во всех исследованных концентрациях нефти достоверно и резко (в 10 раз) снижено содержание моноцитов по сравнению с контролем. Моноцитопения озёрных лягушек в присутствии нефти, по нашему мнению, является признаком патологии. У пресноводных рыб загрязнение воды нефтью вызывало увеличение количества моноцитов, сохраняющееся как в остром, так и хроническом опытах [Абдуллаева, 2007; Габибов, Курбанова, 2008], а в другом эксперименте (с морскими видами рыб) — моноцитопению [Котов, 1976].

В крови опытных лягушек под влиянием нефти различных концентраций изменяется также и количество клеток гранулоцитного ряда: нейтрофилов, базофилов и эозинофилов (рисунок 6).

— палочкоядерные нейтрофилы — сегментоядерные нейтрофилы Рисунок 6 — Относительное количество гранулоцитов в крови озёрных лягушек под действием нефти разных концентраций Базофилы — самая редкая группа гранулоцитов в периферической крови и кроветворных органах, выполняющая дезинтоксикационную функцию в организме [Житенева, Макаров, Рудницкая, 2004]. В наших исследованиях среди лейкоцитов контрольных озёрных лягушек базофилы были единичны, а у подопытных лягушек базофилы вообще не были обнаружены.

Эозинофилы проявляют ту же тенденцию, что и базофилы — в самой низкой концентрации нефти их количество снижено в 20 раз по сравнению с контролем, а в более высоких концентрациях они вообще не встречены. Отсутствие эозинофилов в крови лягушек после трёхдневного пребывания в нефти и эозинофилопения у рыб при хронических стрессах и тяжёлых токсикозах различной природы отмечено в литературе [Житенева, Макаров, Рудницкая, 2004; Пескова, Шарпан, 2007].

У лягушек из всех исследованных концентраций нефти по сравнению с контрольными особями отмечено достоверное снижение количества сегментоядерных нейтрофилов и возрастание количества палочкоядерных нейтрофилов. При этом общее число нейтрофилов также несколько снижено. Расчёт индекса сдвига ядер нейтрофилов показал, что у лягушек во всех вариантах опыта происходил сдвиг влево, увеличивающийся по мере возрастания концентрации нефти (индекс сдвига ядер 0,79, 1,02 и 2,27 против 0,10 в контроле).

Известно, что перемещение картины крови влево, т. е. увеличение числа молодых, незрелых нейтрофилов является одним из важнейших признаков наличия в организме инфекционного процесса или токсикоза [Тодоров, 1968].

В целом, лейкограмма крови озёрной лягушки под действием нефти показывает достоверное увеличение числа лимфоцитов и палочкоядерных нейтрофилов при очень сильном снижении количества моноцитов, менее существенном — сегментоядерных нейтрофилов и исчезновении эозинофилов и базофилов. Если принять во внимание, что общее количество лейкоцитов у лягушек уменьшается, то имеет место истинная нейтропения, моноцитопения, базопения и эозинопения.

Описанного комплекса изменений лейкоцитарной формулы крови земноводных не было отмечено ни в одном из предыдущих исследований, где рассматривалось влияние других токсикантов. Следовательно, в этом проявляется специфичность действия нефти как вещества, загрязняющего среду обитания амфибий.

Действие исследованных концентраций нефти на кровь озёрной лягушки проявляется в появлении морфологических изменений клеток красной и белой крови. В мазках крови озёрной лягушки из контроля наблюдается обратимая агглютинация эритроцитов. У части эритроцитов имеется вакуолизированная цитоплазма. Под действием различных концентраций нефти отмечена вакуолизация, пойкилоцитоз, инвагинация и токсическая зернистость цитоплазмы эритроцитов, увеличивающие степень своего проявления в градиенте концентраций нефти. Часто эритроциты имеют фестончатые контуры, что свидетельствует о нарушении их осмотической резистентности, наблюдается гипохромазия — посветление окраски цитоплазмы и её неравномерное окрашивание. В концентрации 0,5 мг/л нефти в белой крови земноводных наблюдается явный агранулоцитоз: подавляющее большинство лейкоцитов представлено лимфоцитами.

5.2. Интенсивность перекисного окисления липидов в тканях озёрной лягушки под действием нефти Процессы перекисного окисления липидов, играя важную роль в нормальном функционировании клетки, выступают и как ранние ключевые звенья ответной реакции организма на стрессорные состояния. Для водных позвоночных установлено, что изменения интенсивности перекисного окисления липидов, происходящие под действием токсикантов, являются надёжным индикаторным признаком загрязнения водоёма [Руднева, 2005].

Мы определяли интенсивность процессов перекисного окисления липидов в тканях озёрной лягушки в контроле и под влиянием нефти различных концентраций по содержанию одного из первичных продуктов окисления липидов — перекисей. Результаты опытов приведены в таблице 3.

Наибольшая активность перекисных процессов из исследованных нами органов характерна для почек и сердца озёрной лягушки. В литературе показано, что наибольшая интенсивность процессов перекисного окисления липидов характерна для сердца земноводных [Айвазян, 2008].

Таблица 3 — Перекисное число липидов различных тканей земноводных после экспозиции в растворах нефти (мМоль О/кг) Печень Мышцы Почки Сердце Тонкий кишечник Процессы перекисного окисления липидов в разных органах, по нашим данным, имеют различную динамику. Так, в печени и сердце лягушек, находившихся в растворе нефти концентрации 0,05 мг/л в течение 10 дней, происходит увеличение интенсивности перекисных процессов по сравнению с контролем (в 1,5 и 2,5 раза соответственно), в почках, наоборот, отмечено снижение в 2, раза, а содержание перекисей в мышечной ткани и тонком кишечнике не меняется. У лягушек, находившихся в более концентрированном растворе нефти (0,5 мг/л), количество перекисей в печени возвращается к контрольным показателям, в мышцах, почках и тонком кишечнике снижается по сравнению с контролем (в 1,8—2,0 раза), а в сердце увеличивается в 1,5 раза.

Необходимо отметить, что наиболее лабильной является система окисления липидов в органах мезодермального происхождения (сердце и почках).

В целом можно говорить о том, что концентрация нефти, равная 1 ПДК, вызывает усиление интенсивности процессов перекисного окисления липидов по сравнению с контролем, а концентрация в 10 ПДК — угнетает.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Нефть является комплексным токсикантом сложного строения. Обычно в момент поступления в водоём большая часть нефтепродуктов сосредоточена в плёнке на поверхности воды. Затем происходит перераспределение между её основными формами, направленное в сторону повышения доли растворённых, эмульгированных и сорбированных нефтепродуктов. Последние являются наиболее опасными, т. к. служат источником хронического загрязнения водома нефтью.

Определение уровня нефтяного загрязнения рукавов устья р. Дон с помощью химико-токсикологического анализа свидетельствует о сравнительно невысоком уровне содержания нефтепродуктов в воде — в пределах до 5,6 ПДК, тогда как биоиндикация по показателям флуктуирующей асимметрии позвоночных гидробионтов показала достаточно сильное влияние нефтепродуктов на гидробионтов из рукавов устья р. Дон. Однако, устойчивые виды водных позвоночных животных, такие как серебряный карась и озёрная лягушка, могут поддерживать своё существование на всех этапах онтогенеза в данных условиях.

Динамика некоторых изученных физиологических и биохимических показателей является специфичной для действия нефти. Только после пребывания в растворах нефти у озёрных лягушек была обнаружена лейкопения, а также отсутствие базофилов и эозинофилов. Также отмечено отсутствие значимого вклада печени в процессы накопления и детоксикации нефти. Основная роль в кумуляции углеводородов нефти принадлежит почкам.

Под действием нефти увеличивается смертность головастиков, однако вариабельность скорости роста и развития, отмеченная под действием других токсикантов, не меняется по сравнению с контрольными особями.

Изменения физиолого-биохимических параметров озёрной лягушки могут быть как адаптивными, так и патологическими. К первым относятся лимфоцитоз, эритроцитоз, увеличение кислородной ёмкости крови, увеличение скорости перекисного окисления липидов под действием сравнительно низких концентраций нефти, ко вторым — моноцитопения, сдвиг нейтрофилов влево, исчезновение базофилов и эозинофилов, угнетение перекисных процессов в более высоких концентрациях нефти.

Сдвиг равновесия между адаптационными и патологическими процессами, происходящий в организме водных позвоночных в ту или иную сторону, зависит от концентрации нефти в воде. При действии низких концентраций нефти (специфичных для отдельных видов позвоночных гидробионтов) на клеточном, организменном и популяционном уровнях преобладают адаптивные процессы, а при более высоких — патологические.

ВЫВОДЫ

1. Максимальный уровень нефтяного загрязнения устья р. Дон в период исследований составлял 0,31 мг/л (6,2 ПДК), а средние величины колеблись в пределах 0,03—0,09 мг/л, что соответствует 0,6—1,8 ПДК.

2. Биоиндикация тех же водотоков по показателям флуктуирующей асимметрии меристических признаков озёрной лягушки и серебряного карася свидетельствует о глубоких нарушениях стабильности развития, оцениваемых 4—5 баллами по шкале отклонений.

3. Концентрации нефти в диапазоне 0,01—0,5 мг/л вызывают смертность 60—100 % головастиков озёрной лягушки. Головастики 46-й стадии развития (хорошо развитые задние конечности) и 57-й стадии развития (хорошо развитые передние конечности) в различных вариантах опыта меньше контрольных на 10,7—11,9 мм. Наступление данных стадий происходит позже, чем в контроле на 6—19 дней и 7—13 дней соответственно.

4. Под действием концентраций нефти в диапазоне 0,01—0,5 мг/л у озёрной лягушки отмечен дозозависимый эритроцитоз и возрастание количества гемоглобина (в 1,1—1,5 раз), а также увеличение количества микроядер в эритроцитах (в 3,0 раза). На фоне общей лейкопении (в 1,2—1,8 раз) достоверно увеличивается относительное число лимфоцитов и палочкоядерных нейтрофилов при снижении количества моноцитов и сегментоядерных нейтрофилов и полном исчезновении базофилов и эозинофилов.

5. Под действием нефти в концентрации 0,05 мг/л максимальная интенсивность процессов ПОЛ отмечена в сердце озёрной лягушки (650,0 мМоль О/кг), в концентрации 0,5 мг/л — в почках (500,0 мМоль О/кг).

Минимальная интенсивность ПОЛ в обоих случаях характерна для тонкого кишечника (43,6 и 75,0 мМоль О/кг).

6. Озёрная лягушка является аккумулирующим биомонитором по отношению к нефти. При концентрации нефти в воде 0,05 мг/л наиболее интенсивно накапливают нефть лёгкие, почки и гонады (26,1—49,3 мг/кг), а при концентрации в 0,5 мг/л — только почки (38,8 мг/кг). Уровень кумуляции нефти в печени озёрной лягушки минимален во всех вариантах опыта и составляет 4,7—10,0 мг/кг.

7. Концентрация нефти в 0,01 мг/л является для водных позвоночных пороговой, концентрации в пределах 0,01—0,5 мг/л (0,2—10 ПДК) оказывают токсический эффект на взрослых особей водных позвоночных, при этом максимальная из изученных концентраций (0,5 мг/л) — летальна для личинок водных позвоночных.

Список работ, опубликованных по теме диссертации 1.* Кармазин А. П. Использование гематологических показателей озёрной лягушки Rana ridibunda (Pallas, 1771) для определения зоны токсического действия нефти / А. П. Кармазин, Т. Ю. Пескова // Современная герпетология.

2010. № 1/2. С. 3—7.

2.* Буков Н. Н. К проблеме мониторинга минорных концентраций антропогенных поллютантов в водных экосистемах / Н. Н. Буков, К. В. Ларионов, В. Т. Панюшкин, А. П. Кармазин, Л. А. Костылева, Т. Ю. Пескова // Экология и промышленность России. 2010. № 6. С. 35—37.

3.* Кармазин А. П. Обследование загрязнения нефтепродуктами прибрежной зоны Таманского полуострова / А. П. Кармазин, Н. Н. Буков, Т. Ю. Пескова // Известия высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион.

Естественные науки. 2010. № 5. С. 19—21.

4. Кармазин А. П. Загрязнения вод и придонного грунта устья Дона / А. П. Кармазин, Л. А. Костылева, Н. Н. Буков // Новые технологии и приложения современных физико-химических методов для изучения окружающей среды. Ростов н/Д, 2009. С. 179—180.

5. Костылева Л. А. Пестицидные загрязнения вод и придонного грунта восточного района Азовского моря / Л. А. Костылева, А. П. Кармазин, В. Т. Панюшкин, Н. Н. Буков // Современные направления теоретических и прикладных исследований — 2009. Одесса, 2009. С. 72—73.

* — работа опубликована в издании, рекомендованном ВАК РФ 6. Буков Н. Н. Мониторинг антропогенных поллютантов в водных экосистемах Краснодарского края / Н. Н. Буков, К. В. Ларионов, В. Т. Панюшкин, А. П. Кармазин, Л. А. Костылева, Т. Ю. Пескова // Региональные особенности функционирования и взаимодействия предприятий рекреационной отрасли и промышленного сектора. Туапсе, 2010. С. 119—120.

7. Кармазин А. П. Сравнение различных типов организмов-биомониторов антропогенного загрязнения среды / А. П. Кармазин, Т. Ю. Пескова // Региональные особенности функционирования и взаимодействия предприятий рекреационной отрасли и промышленного сектора. Туапсе, 2010. С. 129—131.

8. Кармазин А.П. Динамика перекисного окисления липидов озёрной лягушки под действием нефти / А. П. Кармазин // Молодой учёный. 2010. № 8.

С. 188—190.

БИОМОНИТОРИНГ НЕФТЯНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ

УСТЬЯ РЕКИ ДОН С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ

ВОДНЫХ ПОЗВОНОЧНЫХ

Подписано в печать 10.11.2010 г. Формат 6084 1/16.

Бумага тип 1. Гарнитура Таймс Нью Роман. Печать цифровая.

Усл. печ. л. 1,0. Заказ № 0123. Тираж 100 экз.

Кубанский государственный университет.

350040, г. Краснодар, ул. Ставропольская, 149.

Типография Кубанского государственного университета.

350040, г. Краснодар, ул. Ставропольская, 149.



 
Похожие работы:

«Позднякова Ирина Геннадьевна БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПОЛУЧЕНИЯ ШТАММОВ BACILLUS CEREUS, ПЕРСПЕКТИВНЫХ ДЛЯ РАЗРАБОТКИ ПРЕПАРАТА С ПРОБИОТИЧЕСКИМИ СВОЙСТВАМИ 03.01.06 - биотехнология (в том числе бионанотехнологии) 03.02.03 - микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Саратов 2013 2 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Саратовский...»

«МАТЫЧЕНКОВ ВЛАДИМИР ВИКТОРОВИЧ РОЛЬ ПОДВИЖНЫХ СОЕДИНЕНИЙ КРЕМНИЯ В РАСТЕНИЯХ И СИСТЕМЕ ПОЧВА-РАСТЕНИЕ 03.00.12 – физиология и биохимия растений 03.00.27 – почвоведение АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Пущино 2008 Работа выполнена в Институте фундаментальных проблем биологии Российской академии наук Научные консультанты: доктор биологических наук Биль Карл Яковлевич доктор биологических наук, профессор Ерохин Юрий Евдокимович...»

«Прокопьев Алексей Сергеевич БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ВИДОВ РОДА SEDUM В ПРИРОДЕ И В УСЛОВИЯХ ИНТРОДУКЦИИ В ЛЕСНОЙ ЗОНЕ ЗАПАДНОЙ СИБИРИ 03.00.05 – ботаника АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Томск – 2008 Работа выполнена на кафедре ботаники ГОУ ВПО Томский государственный университет Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Ревушкин Александр Сергеевич Официальные оппоненты : доктор биологических наук, ст. науч....»

«ЧЕТВЕРИКОВ СЕРГЕЙ ПАВЛОВИЧ ИДЕНТИФИКАЦИЯ НОВЫХ ЭКЗОМЕТАБОЛИТОВ НЕКОТОРЫХ ШТАММОВ Pseudomonas spp. И ТЕХНОЛОГИЯ БИОПРЕПАРАТОВ НА ИХ ОСНОВЕ 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии), 03.01.04 - биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Уфа 2012 Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институт биологии Уфимского научного центра РАН Научный консультант : доктор биологических наук, профессор Логинов Олег...»

«Косенко Юлия Владимировна ИНТЕНСИВНОСТЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ В МОЗГЕ ПРАВОИ ЛЕВОПОЛУШАРНЫХ КРЫС ПРИ ИНГИБИРОВАНИИ NO-СИНТАЗЫ В УСЛОВИЯХ НАРУШЕНИЯ МОЗГОВОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ 03.00.04 – биохимия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Ростов-на-Дону 2009 2 Работа выполнена на кафедре анатомии и физиологии детей и подростков Педагогического института Федерального государственного образовательного учреждения высшего...»

«МИГУНОВА Варвара Дмитриевна БИОЦЕНОТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ РЕГУЛЯЦИИ ПОПУЛЯЦИЙ ФИТОПАРАЗИТИЧЕСКИХ НЕМАТОД Специальность 03.02.11 – паразитология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва – 2011 Работа выполнена в лаборатории фитогельминтологии ГНУ Всероссийского научно-исследовательского института гельминтологии им. К.И. Скрябина (ВИГИС). Научный консультант : доктор биологических наук, профессор Шестеперов Александр Александрович...»

«Бедник Дарья Юрьевна ИЗМЕНЧИВОСТЬ ИЗОТОПНОГО ОТНОШЕНИЯ УГЛЕРОДА И АЗОТА В ОНТОГЕНЕЗЕ И ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СОСТОЯНИЯХ У ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ ВЫСШИХ И НИЗШИХ ПОЗВОНОЧНЫХ 03.00.30-03 – биология развития, эмбриология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2009 1 Работа выполнена на кафедре эмбриологии биологического факультета Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова Научный руководитель : доктор...»

«Ланник Наталья Ивановна ИССЛЕДОВАНИЕ ФАКТОРОВ, ОПРЕДЕЛЯЮЩИХ ИЗБИРАТЕЛЬНОЕ ВЛИЯНИЕ ПРОИЗВОДНОГО 6-МЕТИЛУРАЦИЛА НА АКТИВНОСТЬ АЦЕТИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ В ОРГАНАХ И ТКАНЯХ RATTUS NORVEGICUS 03.01.04 – биохимия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань – 2012 Работа выполнена на кафедре генетики биолого-почвенного факультета ФГАОУВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет Научный руководитель : доктор биологических наук, доцент –...»

«Хархун Екатерина Викторовна ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АНТАГОНИЗМА PSEUDOMONAS CHLORORAPHIS SUBSP. AUREOFACIENS ПРИ СОЗДАНИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО БИОПРЕПАРАТА И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА СОСТОЯНИЕ МИКРОБОЦЕНОЗА ПОЧВЫ 03.02.08 – экология (биологические наук и) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Ростов-на-Дону - 2013 2 Работа выполнена на кафедре биохимии и микробиологии ФГАОУ ВПО Южный федеральный университет доктор биологических наук, профессор, Научный...»

«ПОЛУБОТКО Евгения Анатольевна ПРЕЖДЕВРЕМЕННОЕ СТАРЕНИЕ И РАДИОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ КЛЕТОК У БОЛЬНЫХ АТАКСИЕЙ-ТЕЛЕАНГИЭКТАЗИЕЙ 03.00.25 Гистология, цитология, клеточная биология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук САНКТ-ПЕТЕРБУРГ 2009 Работа выполнена в Лаборатории радиационной цитологии Учреждения Российской академии наук Института цитологии РАН, СанктПетербург Научный руководитель : кандидат биологических наук, доцент Спивак Ирина...»

«Трубянов Алексей Борисович АНАЛИЗ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ФЛУКТУИРУЮЩЕЙ АСИММЕТРИИ Специальность 03.02.08. – Экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Нижний Новгород 2010 Работа выполнена на кафедре ботаники и микологии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Марийский государственный университет Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Глотов Николай Васильевич Официальные...»

«ПАВЛОВА Кюнна Константиновна ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К ГЕСТОЗУ В ЯКУТСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ 03.02.07 – генетика 14.01.01 – акушерство и гинекология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Томск – 2011 Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте медицинской генетики Сибирского отделения РАМН и Учреждении Российской академии медицинских наук Якутском научном центре...»

«УЛЬЯНОВА Вера Владимировна ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ ГУАНИЛСПЕЦИФИЧНЫХ РИБОНУКЛЕАЗ БАЦИЛЛ В УСЛОВИЯХ ФОСФАТНОГО ГОЛОДАНИЯ 03.00.07 – микробиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань – 2009 Работа выполнена на кафедре микробиологии Казанского государственного университета им. В. И. Ульянова-Ленина Научный руководитель : кандидат биологических наук, доцент Вершинина Валентина Ивановна Официальные оппоненты : доктор биологических наук,...»

«ЛАТОНОВА ОЛЬГА БОРИСОВНА ТЕХНОЛОГИЯ И ОБОРУДОВАНИЕ ДЛЯ РЕАБИЛИТАЦИИ ЗАГРЯЗНЕННЫХ ГРУНТОВ УРБАНИЗИРОВАННЫХ ТЕРРИТОРИЙ Специальность 03.02.08 – Экология (в химии и нефтехимии) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Москва – 2011 2 Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Московский государственный университет инженерной экологии (ФГБОУ ВПО МГУИЭ). Научный...»

«АВТУХ АЛЕКСАНДР НИКОЛАЕВИЧ СИСТЕМАТИКА АКТИНОМИЦЕТОВ РОДА KRIBBELLA 03.02.03 Микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Пущино – 2012 Работа выполнена в отделе Всероссийская коллекция микроорганизмов Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН. Научный руководитель : доктор биологических наук Евтушенко Людмила Ивановна Научный консультант :...»

«Заводовский Петр Геннадьевич АФИЛЛОФОРОИДНЫЕ ГРИБЫ В ЛЕСНЫХ ЭКОСИСТЕМАХ ВОДЛОЗЕРЬЯ 03.02.12 – микология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2010 1 Работа выполнена на кафедре зоологии и экологии эколого-биологического факультета Петрозаводского государственного университета Научный руководитель : член-корр. РАН, доктор биологических наук,...»

«Сивожелезов Виктор Семёнович Электростатические поля вокруг биологических макромолекул как факторы молекулярного узнавания 03.01.02 Биофизика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени доктора биологических наук Пущино – 2010 1 Работа выполнена в Учреждении Российской Академии Наук Институт биофизики клетки РАН Консультант: Доктор физико-математических наук Роберт Валентинович Полозов Официальные оппоненты : Доктор биологических наук, профессор Станислав Владимирович...»

«Лившиц Владимир Александрович СИСТЕМЫ КОНТРОЛИРУЕМОГО ВЫСВОБОЖДЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА ОСНОВЕ ПОЛИ(3-ГИДРОКСИБУТИРАТА) 03.00.04 - биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва 2009 Работа выполнена в лаборатории биохимии азотфиксации и метаболизма азота Учреждения Российской академии наук Института биохимии им. А.Н. Баха РАН Научный руководитель : кандидат биологических наук Г.А. Бонарцева Официальные...»

«ЗЕНИНА Мария Александровна ОСТРАКОДЫ КАК ИНДИКАТОРЫ СОСТОЯНИЯ И ДИНАМИКИ ВОДНЫХ ЭКОСИСТЕМ (на примере северной части Амурского залива и акватории порта Владивосток) 03.00.18 – гидробиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владивосток - 2009 2 Работа выполнена в Лаборатории экологии бентоса Института биологии моря им. А.В. Жирмунского ДВО РАН Научный руководитель доктор биологических наук, старший научный сотрудник Шорников...»

«Шамсувалеева Эльмира Шамилевна ОСОБЕННОСТИ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ СВЯЗЕЙ ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ (НА ПРИМЕРЕ СОБАК) С ДИКОЙ ФАУНОЙ 03.00.16 - экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук КАЗАНЬ - 2008 Работа выполнена на кафедре биоэкологии естественно-географического факультета Татарского государственного гуманитарно-педагогического университета (ТГГПУ) Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Рахимов Ильгизар Ильясович...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.