WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

ХОМИЧЕНКО Алексей Анатольевич

МОДИФИКАЦИЯ ЭКЗОГЕННОЙ ГИББЕРЕЛЛОВОЙ КИСЛОТОЙ

ГЕНЕТИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ У TRADESCANTIA (КЛОН 02), ИНДУЦИРОВАННЫХ

ОБЛУЧЕНИЕМ В МАЛЫХ ДОЗАХ

03.00.16 – экология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Сыктывкар – 2008 2

Работа выполнена в Институте биологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук

Научный руководитель – доктор биологических наук, профессор Зайнуллин Владимир Габдуллович

Официальные оппоненты – доктор биологических наук, профессор Гераськин Станислав Алексеевич доктор биологических наук, старший научный сотрудник Загирова Светлана Витальевна

Ведущая организация – Институт экологии растений и животных УрО РАН

Защита состоится 23 апреля 2008 г. в 15.00 часов на заседании диссертационного совета Д 004.007.01 в Институте биологии Коми НЦ УрО РАН по адресу: 167982, г. Сыктывкар, ул. Коммунистическая, 28.

Факс: (8212) 24 E-mail: dissovet@ib.komisc.ru Cайт института: www.ib.komisc.ru

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке Коми научного центра УрО РАН по адресу: г. Сыктывкар, ул. Коммунистическая, 24.

Автореферат разослан _ 2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук А.Г. Кудяшева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В результате хозяйственной деятельности человека – добычи полезных ископаемых, строительства, развития атомной энергетики и т.п. – появляется значительное число территорий, загрязненных радионуклидами, что приводит к увеличению радиационного фона биосферы. Это обуславливает необходимость тщательного изучения генетических последствий повышенного радиационного фона для природных популяций растений и механизмов микроэволюционных событий в условиях хронического действия ионизирующего излучения (Шевченко, Печкуренков, Абрамов, 1992; Гераськин, 1995;





Зайнуллин, 1998). Имеющиеся данные указывают на значительную роль абиотических стрессовых факторов в формировании генетической структуры популяции. При малой изученности этой проблемы можно говорить о возрастании генетической изменчивости на популяционном уровне в условиях радиационного и других типов стресса (Имашева, 1999).

Ответы организмов на облучение в малых дозах ионизирующей радиации могут рассматриваться как реализация механизмов потенциальной устойчивости (Гродзинский, 1984). Процессы, индуцируемые малыми дозами радиации и протекающие в ходе нормального клеточного цикла, обладают определенной общностью и являются проявлением консервативных механизмов, обеспечивающих целостность генома в ходе обычной жизнедеятельности клетки и при действии неблагоприятных факторов среды (Спитковский, 2000).

Известно, что растительные объекты могут различным образом реагировать на действие стрессоров, в том числе на ионизирующее излучение, в зависимости от гормонального статуса (Гудков и др., 1974, 1985; Виленский, 1980).

Изучение механизмов гормональной регуляции генетических процессов, обеспечивающих устойчивость организмов, может приблизить нас к пониманию закономерностей адаптации и микроэволюционных процессов у растительных сообществ в неблагоприятных условиях окружающей среды. Поэтому важным является изучение реакции гормональной системы растений и величины генетических эффектов, индуцированных облучением ионизирующей радиацией в малых дозах.

Цель работы заключалась в изучении закономерностей реакции Tradescantia (клон 02) на действие -излучения в низких дозах и модификации эффектов облучения гибберелловой кислотой А3.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

изучить динамику частоты генетических и морфологических нарушений у Tradescantia (клон 02) в диапазоне доз от 0.4 до 100.0 сГр;

оценить эффективность пролонгированного облучения на формирование устойчивости растений к облучению;

выявить изменения в содержании гормонов в соцветиях Tradescantia (клон 02) после облучения в диапазоне от 1.0 до 28.0 сГр;

изучить влияние гибберелловой кислоты на изменение спонтанной частоты розовых соматических мутаций и индуцированной -излучением в диапазоне доз от 0.4 до 100. Научная новизна. Впервые исследована реакция гормональной системы и генотипа растений Tradescantia (клон 02) на хроническое облучение ионизирующей радиацией низкой интенсивности в диапазоне доз от 0.4 до 104.4 сГр. Определено содержание основных групп фитогормонов – абсцизовой кислоты, гиббереллина А3, цитокининов и индолилуксусной кислоты в соцветиях Tradescantia (клон 02) при их облучении в диапазоне доз от 1.0 до 28.0 сГр. Показано, что облучение в малых дозах приводит к достоверно значимому изменению содержания фитогормонов, что указывает на роль гормональной системы растений в формировании эффектов облучения в малых дозах ионизирующей радиации.

Показано модифицирующее действие гиббереллина А3 в концентрациях 10-4 и 10- моль/л на величину радиоиндуцированных цитогенетических эффектов у Tradescantia (клон 02) в диапазоне доз от 0.4 до 28.0 сГр.





Теоретическое и практическое значение. Полученные результаты о динамике уровня фитогормонов в соцветиях облученной в разных дозах ионизирующего излучения Tradescantia существенно дополняют знания о роли организменного контроля в становлении мутаций. Показано, что облучение в малых дозах приводит к разнонаправленному изменению содержания фитогормонов, что может объяснять нелинейный характер дозовой зависимости цитогенетических нарушений. Результаты исследований используются в лекционном курсе «Радиоэкология» в Сыктывкарском государственном университете.

международном симпозиуме: «Урал промышленный, Урал атомный» (Екатеринбург 1999);

на седьмой молодежной конференции «Актуальные проблемы биологии» (Сыктывкар, 2000);

на межрегиональной молодёжной научной конференции «СЕВЕРГЕОЭКОТЕХ», (Ухта, 2000); на IV съезде по радиационным исследованиям (Москва, 2001); на международной конференции «Биорад-2001», (Сыктывкар, 2001); на XV Коми республиканской конференции студентов и аспирантов, Сыктывкар, (2005); на международной конференции «Биорад-2006», (Сыктывкар, 2006); на всероссийском семинаре «Методы популяционной биологии» (Сыктывкар, 2006).

Публикации: автором опубликовано 12 работ по материалам диссертации, в т.ч. одна в журнале перечня ВАК.

Структура и объем работы: работа изложена на 147 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы об объектах и методах исследования, четырех глав собственных результатов и их обсуждения, заключения, выводов, списка литературы и приложения. Список литературы включает 186 источников, из них – 95 на иностранных языках. Иллюстративный материал состоит из 20 рисунков, 11 таблиц и приложений.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

МЕХАНИЗМЫ РЕАКЦИИ РАСТИТЕЛЬНЫХ ОРГАНИЗМОВ НА

ОБЛУЧЕНИЕ В МАЛЫХ ДОЗАХ

В главе проведен анализ данных литературы по реакции биологических систем на облучение в малых дозах ионизирующей радиации и генетического контроля механизмов устойчивости к облучению в малых дозах ионизирующей радиации. Отдельно показаны механизмы гормонального ответа на действие стрессирующих факторов у растений.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Объект исследования. Tradescantia (клон 02) известна как одно из наиболее радиочувствительных растений (Mericle, Mericle, 1973; Underbrink et al., 1993). Основная часть индуцированных мутаций проявляется в течение второй и третьей недели после воздействия генотоксического фактора. Цветок имеет шесть тычиночных нитей. Тычиночная нить несёт от 30 до 70 волосков тычиночных нитей. Обычно волосок состоит приблизительно из 10-30 клеток (Mericle, Mericle, 1973). В целях биоиндикации ее используют при оценке экологической опасности различных промышленных предприятий и атомных электростанций. В настоящее время Tradescantia (клон 02) успешно используется как высокочувствительная растительная тест-система для оценки действия малых доз ионизирующих излучений и биологически активных соединений нерадиационной природы и их сочетанных воздействий (Underbrink et al., 1993; Евсеева, Зайнуллин, 1998).

Схемы проводимых экспериментов. В качестве исходного материала использовали генеративные побеги Tradescantia (клон 02) с 2-3 междоузлиями. Перед облучением их срезы помещали в дистиллированную воду или водные растворы гиббереллина А3. Через 17 час растения подвергали воздействию ионизирующего облучения, источник 226Ra.

В экспериментах по изучению гормональных и цитогенетических эффектов при постоянной экспозиции время облучения составляло 20 ч, максимальная мощность облучения – 1.4 сГр/ч на уровне соцветий, максимальная поглощенная доза – 28.0 сГр. Все соцветия были получены в весенне-летний период. При определении фитогормонов, время, проходившее с момента завершения облучения до момента фиксации соцветий, составляло от 30 минут до одного часа.

При изучении совместного действия гиббереллина А3 и малых доз радиации на частоту цитогенетических нарушений в волосках тычиночных нитей (ВТН) Tradescantia (клон 02), срезы Tradescantia помещали в водные растворы гиббереллина А3 (10-4 и 10-5 моль/л) на 17 ч.

Непосредственно перед облучением срезы помещали в дистиллированную воду.

В эксперименте по оценке цитогенетических эффектов облучения в малых дозах в ВТН Tradescantia (клон 02) при постоянной мощности облучения во всех вариантах мощность облучения составляла 1.15 сГр/ч на уровне соцветий, максимальная поглощенная доза составила 104.4 сГр, используемые растения были выращены в весенне-летний период. В двух последующих экспериментах Tradescantia (клон 02) и срезы этих растений содержали в условиях круглосуточного освещения от ламп дневного света LB-40 и ламп с нитью накаливания мощностью 40 Вт при температуре 28-29 С0. Мощность облучения составляла 0.45 сГр/ч и 1.15 сГр/ч. Время проведения эксперимента – октябрь и ноябрь.

В эксперименте с провокационным облучением время предоблучения составляло 20 ч, максимальная мощность – 1.4 сГр/ч на уровне соцветий, максимальная поглощенная доза – 23.0 сГр. Через 1 ч после предоблучения соцветия облучали в острой дозе 150.0 сГр. Время облучения – 2 мин., источник – 60Со.

При оценке уровня содержания фитогормонов в каждом варианте использовали соцветий, для оценки количества нарушений в волосках тычиночных нитей просматривали от 5000 до 19000 волосков в разных вариантах экспериментов, в контроле было просмотрено свыше 40000 волосков.

Определение фитогормонов в соцветиях Tradescantia (клон 02). Содержание фитогормонов определяли в соцветиях Tradescantia (клон 02). Сразу после облучения соцветия срезали, взвешивали и фиксировали в смеси этилового спирта и воды (80:20 по объёму).

Содержание абсцизовой (АБК), гибберреловой (ГК А3), индолилуксусной (ИУК) кислот и цитокининов (ЦТК), определяли в одной навеске растительного материала (Карсункина и др., 2000). Определение биологической активности гиббереллина А проводили по методу Франкленда и Уоринга (Frankland, Wareing, 1960). Для биотестирования использовали салат сорта Берлинский (голландской селекции). Содержание гиббереллина в пробе определяли по калибровочной кривой, для построения которой использовали гибберелловую кислоту А3 (производство Курский химический завод).

Количественное определение ИУК, ЦТК, АБК проводили методом иммуноферментного анализа в модификации конкурентного связывания фитогормонов исследуемого образца с антителами. Содержание фитогормонов определяли по калибровочной кривой, для построения которой использовали стандартные АБК (Sigma), ИУК (Sigma), зеатин (Calbiochem). Ошибка методов определения содержания фитогормонов не превышала 30%.

Коньюгат белок-гормонов и сыворотки к изучаемым фитогормонам были получены из Института биологии Уфимского НЦ РАН. Определение фитогормонов проводили в лаборатории регуляторов роста и развития сельскохозяйственных растений МСХА им. К.А.Тимирязева.

Методы изучения цитогенетических эффектов у Tradescantia (клон 02). Для изучения эффектов облучения в малых дозах и действия фитогормонов использовали тестсистему «розовые соматические мутации (РСМ) в волосках тычиночных нитей (ВТН)».

Препараты готовили по стандартной методике (Ichikawa, 1971; Sparrow et al., 1973;

Underbrink et al., 1993; Евсеева, 1999). С шестого по 21 день после облучения подсчитывали цитогенетических нарушений подсчитывали как отношение учтённых событий к количеству подсчитанных волосков тычиночных нитей (Mericle, Mericle, 1973; Bewley, 1989).

Статистическая обработка материала. Результаты обработаны стандартными методами (Урбах, 1964), с использованием пакета прикладных программ «Statistika v.8».

ЧАСТОТА НАРУШЕНИЙ В ВОЛОСКАХ ТЫЧИНОЧНЫХ НИТЕЙ

TRADESCANTIA ПОСЛЕ ОБЛУЧЕНИЯ ИОНИЗИРУЮЩЕЙ

РАДИАЦИЕЙ В МАЛЫХ ДОЗАХ

Изучали генетические нарушения у Tradescantia при облучении в диапазоне доз от 0. до 28.0 сГр. Все условия данного эксперимента полностью аналогичны условиям экспериментов по изучению динамики содержания основных групп фитогормонов и модифицирующего действия гибберелловой кислоты А3 на частоту генетических нарушений при облучении в малых дозах (главы 4 и 5).

Как видно из данных, представленных в табл. 1, зависимость частоты «доза-эффект»

для генетических нарушений имела два максимума, при облучении в дозах 1.0 сГр и 4. сГр, статистически отличающихся от «ближайших» минимумов. За единственным исключением (2.3 сГр), частота РСМ возрастала относительно контроля. Данная кривая описывается уравнением второго порядка с R2 = 0.97.

Частота розовых соматических мутаций (РСМ) в волосках тычиночных нитей (ВТН) Tradescantia, индуцированных облучением в дозах от 0.4 до 28.0 сГр Учитывая, что при пошаговой оценке достоверности различий между вариантами выявляются значения, статистически отличающиеся от значений ближайших вариантов, более корректным будет отнести наблюдаемую зависимость динамики частот мутаций от величины дозы облучения к нелинейной. Для морфологических аномалий и белых клеток зависимости «доза-эффект» имели схожий характер.

Нелинейная зависимость выхода цитогенетических нарушений от дозы ионизирующей радиации может указывать, в частности, на индукцию репаративных процессов при облучении в этих дозах (Pohl-Rling et al., 1983; Гераськин, 1995, Заичкина и др., 1999). К настоящему времени установлено, что малые дозы ионизирующей радиации индуцируют, по меньшей мере, несколько различных типов репаративных процессов, в том числе у растений, что может приводить к нелинейной зависимости выхода цитогенетических нарушений от дозы облучения. К их числу можно отнести внеплановый синтез ДНК, цитогенетический АО, SOS-ответ (Зайнуллин, 1998; Спитковский и др., 2000).

В следующем эксперименте мы оценили эффективность облучения при постоянной мощности. Соцветия Tradescantia облучали при мощности 0.45 сГр/ч (первый вариант – контроль; второй вариант – 1.8 сГр; третий – 3.6 сГр; четвертый – 5.4 сГр; пятый – 7.2 сГр;

шестой – 9.0 сГр; седьмой – 10.8 сГр; восьмой – 12.6 сГр; девятый – 14.4 сГр; десятый – 16. сГр; одиннадцатый – 18.0 сГр; двенадцатый – 19.8 сГр) и 1.15 сГр/ч (первый вариант – контроль; второй вариант – 2.3 сГр; третий – 4.6 сГр; четвертый – 6.9 сГр; пятый – 9.2 сГр;

шестой – 11.5 сГр; седьмой – 13.8 сГр; восьмой – 16.1 сГр; девятый – 18.4 сГр; десятый – 20.7 сГр; одиннадцатый – 23.0 сГр) (рис. 1).

Было обнаружено, что для уровня индуцируемых цитогенетических нарушений характерен достоверный рост, независимо от мощности облучения. Регрессионный анализ показал следующие закономерности для динамики всех типов нарушений: При меньшей мощности облучения (0.45 сГр) значение R2 возрастает от линейной функции к полиному.

При большей мощности облучения (1.15 сГр/ч) значения R2 выше относительно соответствующих вариантов с меньшей мощностью облучения, при этом они близки друг другу или практически равны. Таким образом, нелинейный характер дозовой зависимости сглаживается при облучении большей мощности.

Данный эффект находит отражение в числе вариантов, которые статистически отличаются от ближайших к ним “точек”. При облучении в мощности 0.45 сГр таких вариантов было четыре (9.0, 10.8, 14.4 и 18.0 сГр), при облучении в мощности 1.15 сГр – два (2.3 и 4.6 сГр).

частота (%) Рис. 1. Динамика частоты розовых соматических мутаций (РСМ) в волосках тычиночных нитей Tradescantia (клон 02) при постоянной мощности облучения.

Был проведен эксперимент по изучению цитогенетических эффектов ионизирующего облучения в более широком диапазоне доз. Облучали соцветия Tradescantia (клон 02) в дозах от 21.0 до 104.4 сГр при одинаковой мощности облучения – 1.15 сГр/ч (рис. 2).

Рис. 2. Динамика частоты розовых соматических мутаций в клетках волосков тычиночных нитей Tradescantia при облучении в малых дозах. Ось абсцисс – доза, сГр; ось ординат – частота розовых соматических мутаций, (%).

Облучение растений в этом диапазоне доз индуцирует существенно более высокий уровень генетических нарушений, чем облучение в меньших дозах (табл. 1). Важным моментом является то, что уровни частоты розовых соматических мутаций при облучении Tradescantia в диапазоне от 21.0 сГр до 55.1 сГр статистически не отличались между собой.

При облучении в больших дозах, частота генетических нарушений увеличивается, то есть происходит переход в область «больших» доз. Для варианта с облучением в дозе 81.2 сГр t F относительно варианта с облучением в дозе 21.0 сГр составляет 4.23; для варианта с облучением в дозе 104.4 сГр – 7.63.

Полученная кривая наиболее успешно описывается уравнением второго порядка (R2 = 0.98). Таким образом, в данном эксперименте не было выявлено прямопропорциональной зависимости частоты учитываемых нарушений от дозы.

В этой же главе приведены данные об эффектах адаптирующего влияния малых доз ионизирующего излучения на Tradescantia (клон 02) к последующему действию острого провокационного ионизирующего облучения. Показано, что пролонгированное облучение соцветий Tradescantia (клон 02) в дозах от 2.3 до 4.86 сГр приводит к повышению выживаемости бутонов после провоцирующего облучения в дозе 150.0 сГр, что выражается в увеличении числа волосков относительно вариантов с облучением в меньших дозах (рис. 3).

Другим показателем, отражающим характер наблюдаемого эффекта (повышение устойчивости к острому облучению), является изменение уровня варьирования числа учтенных волосков для отдельных соцветий. Для контрольного варианта коэффициент вариации был равен 97.21 %, для вариантов с предоблучением в дозах 1.0 сГр и 7.0 сГр он достигал максимальных значений – 143.15% и – 154.28%, соответственно, минимальных значений – 56.44 % – при предоблучении в дозе 2.3 сГр, и 33.43 % – при предоблучении в дозе 4.86 сГр.

Рис. 3. Число учтенных волосков тычиночных нитей на одно соцветие после острого облучения и предоблучения в дозах от 0.4 до 23.0 сГр. Ось абсцисс – доза, сГр; ось ординат – число учтенных ВТН на одно соцветие.

Примечание: для всех вариантов относительно контроля р0.05, варианты при облучении в дозах 0.4 и 1.0 сГр, статистически отличались от вариантов с облучением в дозах 2.3 и 4.86 сГр, р0.05.

Острое облучение в вариантах с предоблучением в дозах 2.3 и 23.0 сГр приводило к незначительному повышению радиочувствительности (радиосенсибилизации). В остальных вариантах острое облучение вызывало снижение частоты розовых соматических мутаций относительно контроля. В вариантах с предоблучением в дозах 1.0 и 13.5 сГр снижение частоты розовых соматических мутаций носило статистически значимый характер. Таким образом, мы можем говорить об адаптирующем действии малых доз ионизирующего излучения на данную тест-систему.

ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ГОРМОНОВ В

СОЦВЕТИЯХ TRADESCANTIA ПОСЛЕ ОБЛУЧЕНИЯ

ИОНИЗИРУЮЩЕЙ РАДИАЦИЕЙ В МАЛЫХ ДОЗАХ

В главе представлены данные по содержанию основных групп фитогормонов в соцветиях Tradescantia при облучении в дозах от 1.0 до 28.0 сГр.

Абсцизовая кислота. Содержание абсцизовой кислоты составляло 84.0 нг/г сырого веса в контроле и достигало максимальных значений при облучении в дозах 4.86 сГр и 9. сГр - 270.0 нг/г до 380.0 нг/г, соответственно (рис. 4). На этом участке кривой «доза-эффект»

частота РСМ снижалась с ростом дозы более чем в два раза, с 0.381% до 0.182%. В варианте с облучением в дозе 2.3 сГр наблюдали снижение уровня абсцизовой кислоты относительно контрольного значения. Облучение соцветий Tradescantia в этой дозе приводило к снижению частоты цитогенетических нарушений несколько ниже контрольного уровня (см. табл. 1).

Уровень абсцизовой кислоты в соцветиях Tradescantia достоверно отличался от контроля при облучении в дозах 2.3 сГр, 4.86 сГр и 9.8 сГр.

Абсцизовая кислота является важнейшим гормоном, обеспечивающим стрессовые ответы растений (Кефели, 1974, 1984). Многие из эффектов АБК приводят к долгосрочным физиологическим изменениям, в основе которых – модификация экспрессии генов на транскрипционном уровне (Skriver et al., 1991). Ранее было показано радиопротекторное действие АБК (Гудков, 1985; Виленский, 1987). И.Н. Гудковым оно связывается с тормозящим действием АБК на скорость прохождения клетками митотического цикла.

Рис. 4. Содержание абсцизовой кислоты в контроле и при облучении в малых дозах в соцветиях Tradescantia (клон 02). Ось абсцисс – доза, сГр; ось ординат – уровень АБК (нг/г сырого веса).

Цитокинины. В контроле содержание цитокининов (ЦТК) в соцветиях Tradescantia (клон 02) составляло 548.2 мкг/г сырого веса. Во всех вариантах с облучением уровень цитокининов был достоверно ниже контрольного уровня (рис. 5). Обращает на себя внимание вариант с облучением в дозе 2.3 сГр, где уровень этого гормона снижался до значения 8.6 мкг/г сырого веса, уменьшаясь в 63.7 раза относительно контроля. На дозовой кривой для генетических нарушений (см. табл. 1) облучение в этой дозе приводит к снижению частоты розовых соматических мутаций ниже контрольного уровня.

Рис. 5. Содержание цитокининов в контроле и при облучении в малых дозах в соцветиях Tradescantia (клон 02). Ось абсцисс – доза, сГр; ось ординат – уровень ЦТК (мкг/г сырого веса).

Цитокинины являются необходимыми факторами для прохождения контрольных точек каждой из фаз клеточного цикла (Francis, Sorrell, 2001). Другим аспектом влияния ЦТК на клеточный цикл является их участие в процессах репликации. Показано, что цитокинины ответственны за вступление в процесс репликации и собственно за его протекание (Houssa et al., 1994; Suchomelova et al., 2003). Чрезвычайно низкие уровни ЦТК при облучении могут свидетельствовать о торможении деления клеток к моменту фиксации соцветий и инициации тех или иных репаративных систем.

Ауксины. Содержание ауксинов в контроле составляло 213.0 нг/г сырого веса соцветий Tradescantia. Снижение уровня ауксинов в соцветиях Tradescantia (клон 02) при облучении в дозах 1.0 и 2.3 сГр существенно не отличалось от контрольного значения (рис. 6), во всех остальных вариантах с большими дозами снижение уровня ИУК было достоверным. В варианте с облучением соцветий в дозе 4.86 сГр содержание ауксинов снижалось более чем в пять раз против контроля (36.5 нг/г сырого веса). Частота розовых мутаций при облучении в этой дозе достигала второго максимума на зависимости «доза-эффект» для этого типа нарушений (см. табл. 1). При облучении в дозе 28.0 сГр содержание ауксинов достигало минимального уровня, снижаясь в 13.9 раза (15.3 нг/г сырого веса).

Рис. 6. Содержание ауксинов в контроле и при облучении в малых дозах в соцветиях Tradescantia (клон 02). Ось абсцисс – доза, сГр; ось ординат – уровень ИУК (нг/г сырого веса).

Показано значение этого гормона для прохождения отдельных стадий клеточного цикла. Выявлен ряд факторов, ответственных за их прохождение, чья экспрессия или деградация может определяться уровнем ауксинов (Francis, Sorrell, 2001; Gray et al., 2002;

Bashir et al., 2004). Также показано значение ауксина в механизмах, ответственных за восстановление труднорепарируемых повреждений ДНК (Weei-Chin et al., 2001; Eckardt, 2002).

Гиббереллин А3. В контрольном варианте содержание гибберелловой кислоты было ниже уровня чувствительности метода. Облучение во всех вариантах, за исключением варианта с облучением в дозе 9.8 сГр, приводило к повышению содержания гиббереллина, которое достигало максимума при облучении в дозе 4.86 сГр – 228.0 нг/г (рис. 7).

Рис. 7. Содержание гибберелловой кислоты в контроле и при облучении в малых дозах в соцветиях Tradescantia (клон 02). Ось абсцисс – доза, сГр; ось ординат – уровень ГК А (нг/г сырого веса).

Примечание: - ниже уровня чувствительности метода;

Нижняя граница чувствительности метода составляла 3.5 нг/г сырого веса. Таким образом, в варианте с облучением соцветий Tradescantia в дозе 4.86 сГр уровень гиббереллина увеличивался как минимум в 65 раз относительно контроля. На кривой «дозаэффект» для розовых мутаций при облучении в этой дозе (4.86 сГр) наблюдали второй максимумом частоты генетических нарушений (см. табл. 1). При облучении в дозе 9.8 сГр содержание гибберелловой кислоты было ниже уровня чувствительности метода.

Согласно данным литературы, гиббереллин положительно регулирует экспрессию некоторых компонентов циклин/циклинзависимых протеинкиназных комплексов (Sauter, Kende, 1992; Sauter et al., 1995). Также показано, что в ответ на действие гиббереллина экспрессируется ряд генов, ответственных за поддержание структурной целостности генома (van der Knaap et al., 1997; Fabian-Marwedel T. et al., 2002).

Полученные данные свидетельствуют о том, что в изучаемом диапазоне доз происходят значительные изменения уровня всех определяемых фитогормонов. Таким образом, гормональная система данного тест-объекта активно реагирует на облучение в малых дозах.

предоблучение в дозах 2.3 и 4.86 сГр индуцирует повышенную устойчивость соцветий Tradescantia (клон 02) к острому облучению в больших дозах. Облучение в дозе 2.3 сГр приводит к наиболее значимому снижению уровня цитокининов. Данный эффект может служить своего рода «стоп-краном» для таких процессов, как прохождение отдельных стадий клеточного цикла и процесса репликации ДНК, являясь при этом отправным моментом для инициации адекватных клеточных ответов на генотоксические факторы среды. Рост содержания гиббереллина при облучении в дозе 4.86 сГр может быть связан с его ролью в восстановительных процессах (Sauter, Kende, 1992; Sauter et al., 1995; van der Knaap et al., 1997; Fabian-Marwedel T. et al., 2002).

ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ РАЗДЕЛЬНОГО И

СОВМЕСТНОГО ДЕЙСТВИЯ ОБЛУЧЕНИЯ И ГИББЕРЕЛЛИНА А

В работе изучали влияние гибберелловой кислоты А3 на частоту розовых соматических мутаций. Частота генетических нарушений в варианте с дистиллированной водой составила 0.112 %, в варианте с обработкой гиббереллином в концентрации 10-5 моль/л – 0.198 %, в варианте с концентрацией гиббереллина 10 - моль/л повышение частоты розовых мутаций было достоверным– 0.213 %.

Цитогенетические эффекты раздельного и совместного действия облучения и гиббереллина. К настоящему времени накоплен большой фактический материал по изучению радиомодифицирующего действия гормонов растений для достаточно больших доз. Высказываются предположения о связи радиопротекторных свойств фитогормонов с их влиянием на продолжительность разных стадий клеточного цикла (Гудков, 1985). Возможно, они обусловлены значением гормонов в процессах синтеза нуклеиновых кислот и белков, которые определяют регенеративный и репаративный потенциал растительных клеток (Гродзинский, 1983).

На рис. 8 графически представлены результаты экспериментов с содержанием срезов соцветий Tradescantia (клон 02) в дистиллированной воде и в водных растворах гиббереллина (10-5 и 10-4 моль/л).

Модифицирующее влияние гибберелловой кислоты А3 на характер зависимости «доза-эффект» для розовых соматических мутаций проявилось в некотором снятии эффекта нелинейности. Это относится к области доз, где в эксперименте с дистиллированной водой облучение индуцировало первый максимум и первый минимум на дозовой зависимости частоты РСМ, - при облучении в дозах 1.0 и 2.3 сГр, соответственно. В опытах с обработкой растворами гиббереллина в этом диапазоне доз (фоновый уровень – 2.3 сГр) не было вариантов, достоверно отличавшихся между собой по частоте РСМ.

Этот эффект не проявлялся на участке, где в опыте с дистиллированной водой наблюдался второй максимум частоты РСМ (4.86 сГр). В опытах с обработкой соцветий Tradescantia (клон 02) гиббереллином частота РСМ в варианте с облучением в 4.86 сГр достоверно отличалась как от вариантов с облучением в меньших дозах, так и в больших. Так, в опыте с обработкой Tradescantia (клон 02) гиббереллином в концентрации 10-4 моль/л, частота РСМ для варианта с облучением в дозе 4.86 сГр достоверно отличалась от варианта с облучением в дозе 1.0 сГр со значением t F равным 3.15. Для варианта 9.8 сГр значение t F для различия относительно варианта 4.86 сГр составляло 3.53. При концентрации гиббереллина в 10 -5 моль/л значение t F для различий между частотами РСМ для этих вариантов (4.86 сГр и 9.8 сГр) составляло 2.11(рис. 8).

Рис. 8. Динамика частоты РСМ в клетках волосков тычиночных нитей Tradescantia (клон 02) при обработке гибберелловой кислотой (10-5 и 10-4 моль/л) и облучении в малых дозах. Ось абсцисс – доза, сГр, ось ординат – частота розовых соматических мутаций, (%).

Влияние гибберелловой кислоты на частоту радиоиндуцированных мутаций практически не зависело от его концентрации при облучение Tradescantia в дозах менее 9. сГр. При облучении в дозах от 9.8 сГр и выше, проявлялась тенденция к изменению частоты РСМ в зависимости от концентрации ГК. Обработка гиббереллином в концентрации 10- моль/л приводила к снижению частоты розовых соматических мутаций относительно вариантов с обработкой гиббереллином в концентрации 10-5 моль/л. Для варианта 9.8 сГр частота РСМ снижалась в 1.86 раза, для варианта 13.5 сГр – в 1.63 раза и для варианта 28. сГр – в 2.08 раза (статистически значимо).

Как было показано в главе 3, при облучении растений в дозах, приблизительно от сГр и выше, наблюдается существенный рост частоты генетических повреждений. Именно в этом дозовом диапазоне гибберелловая кислота в концентрации 10-4 моль/л проявляет модифицирующее действие. Облучение соцветий Tradescantia (клон 02) в дозе 9.8 сГр приводит к снижению содержания гибберелловой кислоты ниже уровня чувствительности метода (рис. 7). По нашему мнению, облучение соцветий Tradescantia (клон 02) в дозах от 9.8 сГр и выше, индуцирует ответ механизмов, определяющих характер цитогенетических эффектов с дальнейшим ростом доз. Эти механизмы являются гиббереллин-зависимыми и их индукция сопровождается существенным снижением уровня эндогенной гибберелловой кислоты. Обработка экзогенным гиббереллином в концентрации 10-4 моль/л существенно модифицирует генетические ответы данной тест-системы при облучении в дозах 9.8, 13.5 и 28.0 сГр.

УЧАСТИЕ ФИТОГОРМОНОВ В ФОРМИРОВАНИИ

ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ ИНДУЦИРОВАННЫХ

ОБЛУЧЕНИЕМ В МАЛЫХ ДОЗАХ

В главе обсуждаются полученные результаты с привлечением данных литературы об участии основных групп фитогормонов в процессах, индуцированных стрессовыми факторами. Отмечается, что влияние ионизирующего облучения в малых дозах на гормональный баланс в тканях соцветий Tradescantia (клон 02) имеет некоторое сходство с влиянием других стрессовых факторов на содержание фитогормонов. Как об общей тенденции можно говорить об уменьшении с ростом дозы облучения содержания цитокининов и ауксинов и увеличении уровня абсцизовой кислоты. Динамика содержания гибберелловой кислоты имеет более сложный характер.

Согласно сформулированной в своё время М.Е. Лобашовым физиологической гипотезе мутационного процесса, в основе возникновения мутаций при действии ионизирующего излучения, лежат обратимые изменения метаболизма на уровне целой клетки (Лобашов, 1947). Поэтому можно предположить, что облучение в каждой из доз формирует в соцветиях Tradescantia определенный гормональный статус, на фоне которого возможна модификация величин цитогенетических эффектов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Влияние облучения в малых дозах на гормональный баланс в тканях соцветий традесканции указывает на роль фитогормонов в ответах растений на действие этого фактора. Если индукция радиобиологического эффекта обусловлена ответами гормональной системы, это неизбежно должно накладывать отпечаток на его характер, должна появляться специфика, свойственная для активности гормональной системы и регуляторной активности самих гормонов.

Один из аспектов такой специфики можно обозначить как проблему генетического контроля гормональных реакций, индуцированных облучением в малых дозах. В последние годы были выделены и описаны гены, кодирующие большинство энзимов, вовлечённых в синтез фитогормонов, в частности гиббереллина. Исследование их экспрессии позволит радиобиологических реакций.

Другим ее аспектом является вопрос о механизмах, индуцируемых изменениями гормонального баланса в ответ на облучение. Его можно сформулировать как проблему гормонального контроля радиобиологических реакций. Так, к настоящему времени известен ряд циклинов, циклин-зависимых киназ и их кофакторов, которые определяют ответы тех или иных контрольных точек, и экспрессия которых регулируется какой-либо группой фитогормонов. Ответы на генотоксические факторы должны сопровождаться снижением содержания стимулирующих гормонов – цитокининов, ауксинов, гиббереллина. Надо отметить, что каждый из трех стимулирующих гормонов в том или ином варианте опыта обнаруживает снижение своего содержания.

Реакция клетки на генотоксические факторы включает в себя не только остановку клеточного цикла, но и активацию различных восстановительных систем. Можно предположить, что гормоном, обеспечивающим позитивную регуляцию этих систем при облучении в малых дозах, является гибберелловая кислота.

«взаимообусловленности» и последовательности реакций, индуцируемых облучением. Так, вероятно, реакции, индуцируемые облучением в дозах, где мы наблюдаем максимальный уровень гибберелловой кислоты (4.86 сГр), не могут реализовываться при облучении ионизирующей радиацией в более высоких дозах, где содержание гиббереллина снижается ниже уровня чувствительности метода. Наблюдаемое в этом диапазоне доз снижение уровня гиббереллина, по-видимому, является условием реализации индуцированных радиобиологических процессов, и обработка Tradescantia (клон 02) экзогенным гиббереллином существенно модифицирует цитогенетические эффекты облучения данного тест-объекта. Таким образом, различия в гормональном статусе тканей соцветий Tradescantia (клон 02) при облучении в разных дозах могут служить, в определенной мере, «разграничительной линией» между различными состояниями, свойственными растительной клетке при облучении в малых дозах.

Гормональная система растений регулирует направленность всего метаболизма клетки (Полевой, 1980; Кулаева, 1982). Степень изменений в содержании определяемых фитогормонов свидетельствует, что облучение затрагивает ключевые механизмы регуляции клеточного метаболизма, что может являться одним из ведущих моментов в формировании эффектов малых доз. Изменение уровня гормонов – уменьшение уровня цитокининов в раза (2.3 сГр), ауксинов в 13.9 раза (28.0 сГр), увеличение содержания ГК А3, по меньшей мере, в 65 раз (4.86 сГр) – должно вести к изменениям в сигнальных путях, контролирующих реакцию клетки на экзогенные и эндогенные регулирующие факторы и иметь следствием нарушение регуляции ряда базовых процессов жизнедеятельности клетки; клеточного цикла, дифференциации, апоптоза, эпигенетических и некоторых других механизмов.

Нелинейный характер цитогенетических эффектов в области малых доз указывает, что пути их формирования отличны от таковых при облучении в больших дозах. Полученные данные указывают на возможность непрямого, опосредованного гормональным дисбалансом действия малых доз на стабильность генотипа. Изучение гормональных ответов растений на облучение в малых дозах может приблизить нас к решению основных задач радиоэкологии пониманию механизмов микроэволюционных процессов у растительных сообществ в условиях радиоактивного загрязнения и их отдаленных последствий для биоты.

ВЫВОДЫ

1. Облучение Tradescantia (клон 02) в дозах от 0.4 сГр до 104.4 сГр приводило к увеличению частоты розовых соматических мутаций, белых мутантных событий и морфологических аномалий в волосках тычиночных нитей. Анализ динамики нарушений от величины дозы облучения не выявил прямопропорциональной зависимости.

2. Показано, что предварительное пролонгированное облучение соцветий Tradescantia (клон 02) в дозах 2.3 и 4.86 сГр за 20 ч повышало выживаемость бутонов после провоцирующего облучения в дозе 150 сГр, предварительное облучение в дозах 0.4, 1.0, 7.0, 13.5 и 23.0 сГр не оказывало адаптирующего влияния.

3. Предварительное пролонгированное облучение Tradescantia в дозах 1.0 и 13.5 сГр снижало уровень генетических нарушений в волосках тычиночных нитей растений после дополнительного облучения в дозе 150 сГр.

4. Облучение в малых дозах приводило к изменению уровня фитогормонов в соцветиях Tradescantia (клон 02). Показано увеличение уровня абсцизовой кислоты с увеличением дозы облучения и снижение содержания ауксинов и цитокининов при всех дозах облучения.

5. Обработка гибберелловой кислотой (10-4 моль/л) вызывала повышение частоты розовых соматических мутаций в волосках тычиночных нитей Tradescantia, следовательно, в данной концентрации гиббереллин проявлял мутагенный эффект.

6. Действие гибберелловой кислоты при облучении Tradescantia (клон 02) в дозах от 1.0 до 28.0 сГр проявлялось в модификации величины радиоиндуцированных генетических эффектов. При облучении растений в дозах выше 9.8 сГр гиббереллин в концентрации 10 моль/л проявлял антимутагенный эффект.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Хомиченко А.А., Скоробогатова И.В., Карсункина Н.П., Зайнуллин В.Г. Гормональные и генетические эффекты, индуцированные облучением в малых дозах у Tradescantia (клон 02) // Радиационная биология. Радиоэкология, 2007. Т.47. №.5. С.578-583.

Хомиченко А.А. Роль гормонов в формировании генетических эффектов у растений // Тез. VII Межд. симпозиума: Урал атомный, Урал промышленный. Екатеринбург, 1999. С.73.

Хомиченко А.А. Сочетанное действие малых доз радиации и гиббереллина на частоту розовых мутаций в волосках тычиночных нитей традесканции // Тез. Межрегиональной молодежной научной конференции «СЕВЕРГЕОЭКОТЕХ-2000», Ухта. 2000. Ч. 2. С.58.

Хомиченко А.А. Влияние гибберелловой кислоты на частоту розовых соматических мутаций в волосках тычиночных нитей традесканции клон 02 при действии малых доз радиации // Тез. VII Молодежной конференции «Актуальные проблемы биологии и экологии», Сыктывкар, 2000. С.249.

Шершунова В.И., Хомиченко А.А. Прилепова Н.В, Анискина М.В., Влияние малых доз радиации на Tradescantia clon 02 и Arabidopsis thaliana (L.) heynh. // Международная конференция «БИОРАД-2001» «Биологические эффекты малых доз ионизирующей радиации и радиоактивное загрязнение среды», Сыктывкар, 2001. С.253.

Хомиченко А.А. Влияние гибберелловой кислоты на генетические эффекты в волосках тычиночных нитей традесканции клон 02 при действии малых доз радиации // Международная конференция «БИОРАД-2001» «Биологические эффекты малых доз ионизирующей радиации и радиоактивное загрязнение среды», Сыктывкар, 2001. С.250.

Хомиченко А.А. Генетические эффекты совместного и раздельного действия малых доз ионизирующей радиации и гибберелловой кислоты в волосках тычиночных нитей Tradescantia клон 02 // Тез. IV съезда по радиационным исследованиям (радиобиология, радиоэкология, радиационная безовасность), М. 2001. Т. 1 (Секции I- IV). – С.354.

Хомиченко А.А. Цитогенетические эффекты малых доз ионизирующего излучения и последующего острого провокационного облучения в волосках тычиночных нитей Tradescantia клон 02 // IV съезд по радиационным исследованиям (радиобиология, радиоэкология, радиационная безопасность), М. 2001. – Т. 1 (Секции I- IV). – С.355.

Хомиченко А.А., Багина И.А. Влияние малых доз облучения на частоту генетических нарушений в волосках тычиночных нитей традесканции клон 02 // Тез. XI Коми республиканская научная конференция студентов и аспирантов. В сб. «Человек и окружающая среда», Сыктывкар, 2005. С.70.

Хомиченко А.А. Генетические нарушения в волосках тычиночных нитей традесканции клон 02 при облучении в дозе 28 сГр // Тез. XI Коми республиканской научной конференции студентов и аспирантов. В сб. «Человек и окружающая среда». Сыктывкар, 2005. С.78.

Хомиченко А.А. Скоробогатова И.В., Зайнуллин В.Г. Генетические и гормональные эффекты у Tradescantia (клон 02) при облучении в малых дозах (гиббереллины) // Тез.

Международной конференции «БИОРАД-2006» «Биологические эффекты малых доз ионизирующей радиации и радиоактивное загрязнение среды». Сыктывкар, 2006. С.131-132.

Хомиченко А.А., Скоробогатова И.В., Зайнуллин В.Г. Гормональные и генетические эффекты у Tradescantia (клон 02) при облучении в малых дозах (цитокинины) // Тез.

Международной конференции «БИОРАД-2006» «Биологические эффекты малых доз ионизирующей радиации и радиоактивное загрязнение среды». Сыктывкар, 2006. С.132-133.



 
Похожие работы:

«ПУНИНА НАТАЛИЯ ВЛАДИМИРОВНА Оценка генетического разнообразия фитопатогенных бактерий рода Xanthomonas и разработка молекулярных маркеров для их диагностики 03.00.07 – микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва, 2009 г. Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Центре “Биоинженерия” РАН Научный руководитель доктор...»

«КАШТАНОВА Наталья Николаевна ВЛИЯНИЕ ОБРАБОТКИ РЕГУЛЯТОРАМИ РОСТА НА УСТОЙЧИВОСТЬ РАСТЕНИЙ КУКУРУЗЫ К ГИПО- И ГИПЕРТЕРМИИ Специальность 03.01.05 – физиология и биохимия растений АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2013 Работа выполнена на кафедре ботаники и физиологии растений Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования Мордовский государственный университет...»

«СУДНИК Светлана Александровна ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕПРОДУКТИВНЫХ СТРАТЕГИЙ КРЕВЕТОК 03.00.16 - Экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Калининград - 2008 Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Калининградский государственный технический университет Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Буруковский Рудольф Николаевич Официальные...»

«Сибгатуллина Гузель Валерьевна РЕДОКС-МЕТАБОЛИЗМ КАЛЛУСОВ ГРЕЧИХИ, ОТЛИЧАЮЩИХСЯ ПО МОРФОГЕННОЙ СПОСОБНОСТИ 03.01.05 – физиология и биохимия растений АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань – 2011 Работа выполнена в лаборатории физиологии и генетики культивируемых клеток Учреждения Российской академии наук Казанского института биохимии и биофизики Казанского научного центра РАН Научный руководитель : кандидат биологических наук...»

«Смирнов Иван Алексеевич Модельные ассоциации на основе базидиальных грибов и фототрофных микроорганизмов Специальность 03.00.24 – микология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва 2010 Диссертационная работа выполнена на кафедре микологии и альгологии биологического факультета Московского государственного университета имени М.В.Ломоносова Научный...»

«Шеметова Инна Сергеевна ЭКОЛОГО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ СОЗДАНИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ГАЗОНОВ В УСЛОВИЯХ ПРЕДБАЙКАЛЬЯ 03.02.08 - экология АВТОРЕФЕРАТ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Улан-Удэ – 2011 1 Работа выполнена на кафедре сельскохозяйственной экологии ФГОУ ВПО Иркутской государственной сельскохозяйственной академии Научный руководитель : Доктор сельскохозяйственных наук, профессор Хуснидинов Шарифзян Кадирович Официальные оппоненты : Доктор биологических...»

«КУЗНЕЦОВА ЛЮБОВЬ ЛЕОНИДОВНА НАСЛЕДОВАНИЕ ПРИЗНАКА РОЗОВАЯ ОКРАСКА ВЕНЧИКА У КРУПНОПЛОДНОЙ ЗЕМЛЯНИКИ FRAGARIA ANANASSA DUCH. 03.02.07 – генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Новосибирск 2012 Работа выполнена в лаборатории популяционной генетики растений Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск. Научный руководитель : кандидат биологических наук Батурин...»

«Мартемьянова Анна Анатольевна ОСОБЕННОСТИ КОНКУРЕНТНЫХ ОТНОШЕНИЙ МНОГОЛЕТНИХ РАСТЕНИЙ В АГРОФИТОЦЕНОЗАХ ПРЕДБАЙКАЛЬЯ 03.00.16 – экология АВТОРЕФЕРАТ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Улан-Удэ – 2009 Работа выполнена на кафедре сельскохозяйственной экологии в ФГОУ ВПО Иркутской государственной сельскохозяйственной академии Научный руководитель : Доктор сельскохозяйственных наук, профессор Хуснидинов Шарифзян Кадирович Официальные оппоненты : Доктор...»

«УМПЕЛЕВА Татьяна Валерьевна МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИЧЕСКИХ ИЗОЛЯТОВ MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ В УРАЛЬСКОМ ФЕДЕРАЛЬНОМ ОКРУГЕ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 03.02.03 – Микробиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Екатеринбург - 2014 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении Уральский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии Научные...»

«Потапенко Наталья Христофоровна АДАПТАЦИОННАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ШЕЛКОВИЦЫ В УСЛОВИЯХ КЛИМАТИЧЕСКОГО СТРЕССА (НА ПРИМЕРЕ НИЖЕГОРОДСКОГО ПОВОЛЖЬЯ) Специальность: 03.02.08 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Нижний Новгород 2011 Работа выполнена на базе Ботанического сада Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского Научный...»

«СИМОНОВ Евгений Петрович СТРУКТУРА И ДИНАМИКА ПЕРИФЕРИЙНОЙ ПОПУЛЯЦИИ ОБЫКНОВЕННОГО ЩИТОМОРДНИКА (GLOYDIUS HALYS (PALLAS, 1776)) 03.02.04 – зоология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Новосибирск – 2012 Работа выполнена в лаборатории экологии сообществ позвоночных животных Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института систематики и экологии животных СО РАН Научный руководитель : доктор биологических наук,...»

«ДЕМИНА Татьяна Степановна БИОЭКОЛОГИЯ РОСОМАХИ (Gulo gulo L.) И ОСОБЕННОСТИ ЕЕ РАЗВЕДЕНИЯ В НЕВОЛЕ 03.02.08 – экология, 06.02.09 – звероводство и охотоведение Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Балашиха - 2011 1 Работа выполнена на кафедре экологии и охотоведения ФГОУ ВПО Российс кий г суд арственн ы й аг ар ны й з н ы й унив рситет ао Научные руководители: доктор биологических наук Новиков Борис Владимирович, доктор биологических...»

«ДОРБАЛЮК ЕЛЕНА АЛЕКСЕЕВНА ПОЧВЕННО-МЕЛИОРАТИВНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ПЕРЕУВЛАЖНЕННЫХ НЕФТЕЗАГРЯЗНЕННЫХ ЗЕМЕЛЬ В ЧЕРНОЗЕМНОЙ ЗОНЕ ЦЕНТРАЛЬНОЙ РОССИИ Специальности: 03.02.13 - Почвоведение 06.01.02 - Мелиорация, рекультивация и охрана земель АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Москва - 2011 Работа выполнена на кафедре мелиорации и геодезии Российского государственного аграрного университета - МСХА имени К.А. Тимирязева Научный...»

«ПЕРЕВОЗОВ Александр Георгиевич ИЗМЕНЕНИЯ СООБЩЕСТВ ГНЕЗДЯЩИХСЯ ПТИЦ ВДОЛЬ ВЫСОТНОГО ГРАДИЕНТА НА ЗАПАДНОМ КАВКАЗЕ 03.02.08 – экология (биология) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Ростов-на-Дону – 2010 2 Работа выполнена на кафедре экологии и защиты окружающей среды ГОУ ВПО Майкопский государственный технологический университет доктор биологических наук, профессор Научный руководитель : Акатов Валерий Владимирович доктор...»

«Альфрайхат Махмуд Хасан УСТОЙЧИВОСТЬ ПОЧВ ВЫСОКОГО ПЛАТО ИОРДАНИИ И ЕГО ОБРАМЛЕНИЯ Специальность: 03.00.27-почвоведение Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Москва-2009 1 Работа выполнена на кафедре почвоведения и земледелия Российского университета дружбы народов Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Ларешин Вячеслав Григорьевич. Официальные оппоненты : доктор биологических наук, профессор Ганжара Николай...»

«Верещагин Владимир Александрович Молекулярное типирование клинических штаммов Neisseria gonorrhoeae 03.00.04 – Биохимия 03.00.03-Молекулярная биология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва - 2006 Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении Научноисследовательском институте физико-химической медицины Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ Научные руководители: доктор биологических...»

«Вагун Илья Владимирович Продукционный процесс и фиторемедиационный потенциал сортов рапса на загрязненных тяжелыми металлами почвах Специальность 03.01.05 – физиология и биохимия растений Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2011 Работа выполнена на кафедре физиологии растений Российского государственного аграрного университета – МСХА имени К.А. Тимирязева Научные руководители: доктор биологических наук, профессор Кошкин...»

«Семина Алиса Владимировна МОЛЕКУЛЯРНАЯ ЭВОЛЮЦИЯ И ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОТНОШЕНИЯ В ДВУХ ГРУППАХ РЫБ СЕМЕЙСТВ MUGILIDAE И CYPRINIDAE 03.00.15 – генетика Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владивосток – 2008 2 Работа выполнена в лаборатории генетики Института биологии моря им. А.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской Академии наук Научный руководитель доктор биологических наук, старший научный сотрудник Брыков Владимир...»

«Брежнева Ирина Николаевна МЕТОДИКА ОЦЕНКИ АЭРОТЕХНОГЕННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА ФИТОСТРОМУ ПРИ СТРОИТЕЛЬСТВЕ СКВАЖИН (на примере Оренбургского Предуралья) 03.02.01 – ботаника АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Оренбург – 2010 2 Работа выполнена в Волго-Уральском научно-исследовательском и проектном институте нефти и газа, г. Оренбург доктор биологических наук, профессор, Научный Рябинина Зинаида Николаевна руководитель доктор...»

«Илюшкина Любовь Николаевна БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ПОЧВ УРБОЛАНДШАФТОВ Г. РОСТОВА-НА-ДОНУ И Г. АЗОВА 03.00.27 – почвоведение 03.00.16 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Ростов-на-Дону 2008 2 Работа выполнена на кафедре биохимии и микробиологии Южного федерального университета Научныe руководители: доктор биологических наук, профессор Внуков В.В. кандидат биологических наук, доцент Полякова А.В. Официальные оппоненты :...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.