WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

Дедков Андрей Анатольевич

СТРУКТУРНЫЙ ПОЛИМОРФИЗМ КАНДИДАТНЫХ ГЕНОВ

ПРИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

(БРОНХИАЛЬНАЯ АСТМА, АЛЛЕРГИЧЕСКИЙ РИНИТ,

АТОПИЧЕСКИЙ ДЕРМАТИТ) У ДЕТЕЙ

03.02.07 – генетика

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва – 2012

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор, академик РАЕН, заслуженный деятель науки РФ Иванов Владимир Петрович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Щипков Валерий Петрович доктор медицинских наук, профессор Петрин Александр Николаевич

Ведущая организация: Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Защита диссертации состоится «29» февраля 2012 г. в 15 часов на заседании диссертационного совета Д 212.203.05 в ФГБОУ ВПО Российский университет дружбы народов по адресу: 117198, г. Москва, ул. МиклухоМаклая, дом 8.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке ФГБОУ ВПО «Российский университет дружбы народов» по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, дом 6.

Автореферат размещен на сайте www.vak.ed.gov.ru Автореферат разослан «_» 20_г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент О.Б. Гигани

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В изучении патогенеза аллергических заболеваний многие вопросы остаются открытыми. Однако тот факт, что в основе формирования заболеваний лежит комплекс генетических и иммунных факторов, является неоспоримым.




В то время как детальному описанию иммунологических реакций уделено уже достаточно много внимания, вопросы генетической предрасположенности остаются малоизученными. Выявить конкретную причину, вызывающую развитие бронхиальной астмы (БА), атопического дерматита (АД), аллергического ринита (АР), зачастую не представляется возможным. Большинство авторов относят их к мультифакториальным заболеваниям (МФЗ). В изучении генетической природы МФЗ в настоящее время все большее значение приобретает выявление в различных популяциях специфичных генов и средовых факторов, взаимодействие которых формирует устойчивость организма к изменяющимся условиям окружающей среды. В связи с этим наиболее интересными ДНК-маркерами для изучения токсикогенетической компоненты МФЗ являются полиморфные варианты генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков. Данная группа генов относится к «кандидатным» ввиду их участия в метаболизме медиаторов воспаления, оксидативном стрессе, детоксикации химических соединений. На сегодняшний день метаболические механизмы участия ФБК в аллергических реакциях изучены недостаточно. Основные научные исследования ведутся для атопической БА, и полученные результаты весьма противоречивы. Причиной этому может служить этнический фактор, эволюционно сложившийся именно в данной популяционной группе. В Курской области уже были проведены исследования на взрослой выборке больных БА, полученные результаты однозначно указывали на влияние данной группы генов на реализацию заболевания. В связи с чем изучение полиморфизма генов детоксикации у детей той же популяции, представляется актуальной темой. Полученные результаты могут помочь понять первопричину возникновения атопии и помочь в превентивной диагностике, не допуская клинически развернутой картины заболевания.

Цель исследования: провести комплексный анализ вовлеченности полиморфных вариантов генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков в формирование предрасположенности к аллергическим заболеваниям (бронхиальная астма, аллергический ринит, атопический дерматит) у детей.

Задачи исследования:

1. Провести анализ ассоциации аллелей и генотипов полиморфных вариантов генов ФБК: I462V гена CYP1A1, H139R гена EPHX1, I105V гена GSTP1, +/del гена GSTT1, +/del гена GSTM1 с предрасположенностью к аллергическим заболеваниям у детей.

2. Изучить проявления полового диморфизма и возрастной манифестации в ассоциациях полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков при аллергических заболеваниях у детей.

3. Исследовать взаимодействия между различными классами генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков и дать оценку их комплексного влияния на риск возникновения заболеваний.

4. Изучить вклад средовых факторов на реализацию наследственной предрасположенности к аллергическим заболеваниям у детей в зависимости от носительства генотипов ФБК.

5. Разработать регрессионные статистические модели индивидуального прогнозирования риска развития бронхиальной астмы, аллергического ринита, атопического дерматита у детей с учетом полового диморфизма на основании исследованных молекулярно-генетических маркеров и средовых факторов.





Научная новизна. Впервые проведен комплексный молекулярногенетический анализ вовлеченности генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков при различных нозологических формах детских аллергических заболеваний: бронхиальной астме, аллергическом рините и атопическом дерматите.

Установлены гены, полиморфные варианты которых ассоциировались с повышенным риском развития БА (GSTP1, GSTM1), а также АД (GSTP1, GSTT1).

Выявлен выраженный половой диморфизм генотипов генов ФБК, ассоциировавшихся с предрасположенностью к БА у мальчиков (del/del GSTT1, del/del GSTM1, 105IV GSTP1), АД у мальчиков (del/del GSTT1) и у девочек (462IV CYP1A1), а также установлено модулирующее влияние на возраст манифеста рассмотренных заболеваний. Получены новые данные о взаимодействиях генотип-среда, формирующие предрасположенность к повышенному риску развития бронхиальной астмы у детей, подвергающихся фактору пассивного курения.

Практическая значимость работы. Полученные в ходе исследования данные о взаимосвязях генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков при аллергопатологии в детском возрасте рекомендуются к применению врачамиаллергологами и врачами медико-генетических консультаций для прогнозирования, разработки индивидуальных лечебных мероприятий и предотвращения дальнейшего развития патологии.

1. Генетическими маркерами подверженности к бронхиальной астме у детей являются генотип 105IV гена GSTP1, del/del гена GSTM1 и отсутствие дикого генотипа 105II гена GSTP1. Фактором генетической предрасположенности к атопическому дерматиту – мутантный генотип 105VV гена GSTP1, делеционный генотип ded/del гена GSTT1.

2. Для мальчиков повышенный риск развития бронхиальной астмы ассоциируется с генотипами: del/del гена GSTT1, del/del гена GSTM1, 105IV гена GSTP1, а атопического дерматита с del/del гена GSTT1. Для девочек повышенный риск атопического дерматита ассоциирован с присутствием генотипа 462IV гена CYP1A1.

3. Для раннего развитие бронхиальной астмы характерно наличие генотипов: del/del гена GSTM1, del/del гена GSTT1, атопического дерматита, мутантного генотипа 105VV гена GSTP1. Позднее развитие БА ассоциировано с генотипом: 105IV гена GSTP1, АД с делеционным генотипом del/del гена GSTT1, для АР поздний возраст начала заболевания сочетается с отсутствием функционального генотипа 462II гена CYP1A1.

4. Предрасположенность к повышенному риску БА у детей определяется сочетанием средового фактора (табачный дым) и наличием определенных генотипов: 139RR гена EPHX1, 105IV гена GSTP1.

5. Установленные комбинации генотипов определяют повышенный риск возникновения. Установленные межгенные различия были обусловлены накоплением среди больных главным образом вариантных генотипов обеих фаз биотрансформации.

Апробация работы. Материалы работы доложены и обсуждены на научных конференциях: Итоговой научной сессии КГМУ и отделения медикобиологических наук Центрально-Черноземного научного центра РАМН (Курск, 2008, 2009), Международной научной конференции молодых ученых медиков (Курск, 2008, 2009, 2010), 2-го Международного конгресса «Иммунитет и болезни» (Москва, 2007), Международной дистанционной научной конференции «Инновации в медицине» (Курск, 2008, 2009, 2010), Межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность» (Курск, 2009, 2010). По материалам диссертации опубликовано 16 печатных работ, в том числе 3 статьи в рецензируемых журналах, рекомендуемых ВАК Минобрнауки РФ для публикации результатов диссертационных исследований по медицинским наукам.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 16 работ в центральной и местной печати, в том числе в 3 изданиях, рекомендуемых ВАК для публикаций материалов докторских и кандидатских диссертаций.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, трех глав результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, библиографического списка и приложений. Работа изложена на 92 страницах машинописного текста, содержит 29 таблиц. Библиографический список используемой литературы включает 198 источников, 101 из которых – зарубежный.

Личный вклад автора. Диссертационная работа представляет собой законченный, самостоятельно выполненный труд автора. Все представленные в диссертации результаты получены лично Дедковым А.А. на базе лаборатории медицинской генетики кафедры биологии, медицинской генетики и экологии ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития РФ, им проанализированы отечественные и зарубежные источники по теме диссертации, получены и обобщены результаты исследования, проведена статистическая обработка и анализ полученных данных. В работах, выполненных в соавторстве, использованы результаты исследований с долей личного участия автора 75-95%.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал исследования. Материалом для исследования послужила выборка детей, постоянно проживающих на территории Курской области. Всего было рассмотрено 450 случаев аллергических заболеваний. Из них 150 детей страдали бронхиальной астмой, 150 - аллергическим ринитом, 150 атопическим дерматитом. Молекулярно-генетический анализ проводился на базе лаборатории медицинской генетики кафедры биологии, медицинской генетики и экологии Курского государственного медицинского университета. Клиниколабораторные исследования проводились на базе областной детской клинической больницы г. Курска.

Методы исследования. Молекулярно-генетический метод. Выделение геномной ДНК осуществляли из замороженной (-20°С) венозной крови стандартным двухэтапным методом фенольно-хлороформной экстракции. Лейкоциты, осажденные дважды с PBS центрифугированием, лизировали в ТЕ-буфере протеиназой К в присутствии 0,4% додецилсульфата натрия. Клеточную суспензию инкубировали в течение ночи в термостате при температуре 42°С. Геномную ДНК экстрагировали из клеточного лизата в 3 этапа: сначала фенолом, насыщенным 10 мМ Трис-HCl (рН=8,0) (1:1), затем фенолом и хлороформом (по одному объему фенола и хлороформа на два объема надосадочной жидкости) и последний раз хлороформом (1:1). ДНК преципитировали 96% этанолом, высушивали, растворяли в ТЕ-буфере, замораживали и хранили при -20°С. Амплификацию фрагментов ДНК методом полимеpазной цепной pеакции (ПЦР) проводили в 12 мкл реакционной смеси, содержащей 0,5 мкл образца геномной ДНК. Смесь для амплификации включала: 67 мМ Трис-HCl pH=8,8, 16,6 мМ сульфата аммония, 6,7 мкМ ЭДТА, 2,0-7,0 мМ MgCl2, 1 мМ -меркаптоэтанола, 1 мМ каждого dNTPs (dATP, dCTP, dTTP и dGTP), 15 нМ каждого из праймеров и 1 е.а. Taq-полимеразы. Амплификацию проводили на многоканальном термоциклере «Терцик» (НПО «ДНК-Технология», Москва). Обработка продуктов ПЦР проводилась специфическими рестриктазами согласно протоколам, описанным производителями ферментов. После инкубации рестрикционной смеси проводили разделение фрагментов ДНК с помощью электрофореза. В зависимости от размера разделяемых фрагментов ДНК использовали агарозный гель различной концентрации 0,8-3,5%, приготовленный на основе ТВЕ буфера (0,089 М Трис-НСl, 2 мМ ЭДТА, 0,089 М борная кислота), а также 6-8% ПААГ (соотношение акриламид : метиленбисакриламид 29 : 1). После электрофореза окрашенные этидиумбромидом гели визуализировали в проходящем ультрафиолетовом свете на приборе компьютерной видеосъемки GDS-8000 (UVP Inc, США) с помощью программного аналитического пакета LabWorksTM v4. (США). В рамках проводимого исследования изучали 5 полиморфизмов 5 генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков: CYP1A1 (I462V), EPHX (H139R), GSTM1 (+/0), GSTT1 (+/0), GSTP1 (I105V).

Клинико-лабораторные методы. Первичная постановка диагноза осуществлялась на основе общеклинического обследования, проводимого квалифицированными специалистами на базе областной детской клинической больницы г. Курска.

Вся исследуемая выборка также подвергалась общеклиническому исследованию: общий анализ крови, общий анализ мочи, анализ кала на яйца гельминтов и соскоб со слизистой прямой кишки на энтеробиоз, ЭКГ.

Комплекс клинико-лабораторных методов диагностики: постановка кожных скарификационных проб с набором неинфекционных аллергенов (бытовых, клещевых, пищевых, пыльцевых) у детей старше 2 лет. Общий уровень IgЕ определяли с помощью иммуноферментного анализа.

Для больных БА в возрасте старше 6 лет проводилось исследование функции внешнего дыхания и пикфлоумерия. Отдельно у больных АР проводилась риноцитоскопия для выявления тканевой эозинофилии.

Данный комплекс методов позволил выявить не только признаки наличия аллергопатологии, но и полностью дифференцировать диагноз.

Генетико-статистические методы. Статистический анализ полученных данных проводился на ПК с использованием пакета прикладных программ Statistiсa 6.0 фирмы StatSoft Inc. (США) и MS Excel (Реброва О.Ю., 2006). Для оценки соответствия распределений генотипов ожидаемым значениям при равновесии Харди-Вайнберга (РХВ) в выборке и сравнении с частотами аллелей и генотипов разных групп проводили с помощью критерия 2 Пирсона, при условии, когда объем выборки не превышал 10 случаев, использовали критерий с поправкой Йетса. Ожидаемую гетерозиготность рассчитывали по Nei. Об ассоциации аллелей или генотипов с предрасположенностью к заболеваниям судили по величине отношения шансов (OR) - показателю, отражающему, во сколько раз вероятность оказаться в группе «случай» (больные) отличается от вероятности оказаться в группе «контроль» (здоровые) для носителя изучаемого генотипа. Межгенные взаимодействия изучали методом сопоставления частот парных сочетаний генотипов в группах больных и здоровых с расчетом критерия 2 и OR. Анализ взаимодействий генотип-среда проводился методом сопоставления величин отношения шансов (OR), рассчитанных для индивидуальных генотипов в группах, сформированных по критерию наличия (ORf+) или отсутствия (ORf-) средового фактора риска. Метод логистической регрессии использовался для оценки влияния полиморфных генов ФБК на риск развития аллергической патологии, ее клинические симптомы и особенности течения и развитие осложнений.

Результаты и обсуждение собственных исследований 1. Сравнительный анализ распределения аллелей и генотипов ФБК в детерминации аллергических заболеваний (БА, АР, АД) у детей При анализе частот аллелей полиморфных вариантов генов контрольной группы с тремя нозологическими формами аллергических заболеваний, была выявлена ассоциация вариантного аллеля 105Val гена GSTP1 с предрасположенностью к БА (OR=1,57 95%CI 1,11–2,22, p=0,01) и АР (OR=0,65 95%CI 0,44–0,95, p=0,03). Распределение частот генотипов исследуемых полиморфизмов и их соответствие популяционному равновесию Харди-Вайнберга (РХВ) проводилось раздельно в трех группах больных аллергическими заболеваниями и группе здоровых детей. Распределение генотипов в группе больных БА соответствовало ожидаемому при равновесии РХВ (р0,05). С повышенным риском БА ассоциировалось наличие гетерозиготного генотипа 105IV гена GSTP1(OR=1,69 95%CI 1,06–2,70, p=0,03), делеционного полиморфизма del/del GSTM1 (OR=1,72 95%CI 1,07–2,75, p=0,02) а также отсутствие дикого, гомозиготного генотипа 105II гена GSTP1 (OR=1,91 95%CI 1,21–3,02, p=0,01), полиморфизма + GSTM (OR=1,72 95%CI 1,07–2,75, p=0,02). Мутантный генотип 139RR гена EPHX был несколько повышен у больных бронхиальной астмой, но не достигал статистически значимых различий (p=0,08).

В группе больных АР распределение генотипов соответствовало ожидаемому при равновесии РХВ (р0,05). У детей, больных АР, наблюдалась тенденция в ассоциации дикого генотипа 462II гена CYP1A1 с предрасположенностью к заболеванию, которая не достигала статистически значимой разницы (OR=1,80 95%CI 0,94–3,44, p=0,08). Для большинства полиморфизмов в группе больных АД, распределение генотипов находилось в соответствии с РХВ (р0,05). Однако для полиморфизма 105IV гена GSTP1 отмечалось отклонение от РХВ (p=0,001), обусловленное повышением уровня фактической гетерозиготности (Но=0,313, Не=0,442, 2=12,7, р0,05). С повышенным риском развития АД у детей ассоциировались: наличие мутантного генотипа 105VV гена GSTP (OR=2,04 95%CI 1,02–4,08, p=0,04), делеционного полиморфизма del/del GSTT (OR=2,04 95%CI 1,16–3,59, p=0,01). Кроме того, наблюдалась тенденция в увеличении частоты нефункциональных генотипов del/del GSTM1 (OR=1,58 95%CI 0,99–2,53, p=0,06) и снижение нормальных генотипов + GSTM1 (OR=1, 95%CI 0,99–2,53, p=0,06) в группе больных АД, однако различия в частоте данных генотипов не достигали статистической значимости.

2. Изучение роли половозрастных особенностей в ассоциациях полиморфизма генов ФБК при аллергических заболеваниях у детей Учитывая известные данные что, фенотипические эффекты кандидатных генов при мультифакториальных заболеваниях проявляют половые различия по распространенности в популяции, представлялось актуальным провести анализ полиморфных вариантов генов ФБК с предрасположенностью к рассматриваемым аллергическим заболеваниям раздельно для мальчиков и девочек.

Как видно из представленных в таблице 1 результатов, наличие гетерозиготного полиморфизма 462IV гена CYP1A1 (OR=4,43 95%CI 0,95–20,59, p=0,04) и отсутствие гомозиготного генотипа дикого типа 462II гена CYP1A1 (OR=4, 95%CI 0,95–20,59, p=0,04) ассоциировалось с риском развития АД и АР (OR=5,63 95%CI 1,16–27,22, p=0,02) только у девочек.

Проявления полового диморфизма в ассоциациях генотипов генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков с предрасположенностью Генотипы Бронхиальная астма Атопический дерматит Аллергический ринит

М Д М Д М Д

М – мальчики, Д – девочки Наличие функционально неполноценного генотипа del/del GSTT1 ассоциировалось с повышенным риском развития БА (OR=2,34 95%CI 1,10–4,96, p=0,02) и АД (OR=3,87 95%CI 1,78–8,42, p=0,001) только у мальчиков. Также отсутствие нормального полиморфизма + GSTT1 ассоциировалось с предрасположенностью к БА (OR=2,34 95%CI 1,10–4,96, p=0,02) и АД (OR=3,87 95%CI 1,78–8,42, p=0,001) только у мальчиков. Отсутствие функционального генотипа + GSTM1 (OR=2,10 95%CI 1,20–3,66, p=0,01) и наличие делеционного полиморфизма del/del GSTM1 (OR=2,10 95%CI 1,20–3,66, p=0,01) ассоциировалось с повышенным риском развития БА у мальчиков. Кроме того, наличие гетерозиготного генотипа 105IV гена GSTP1 (OR=1,85 95%CI 1,06–3,22, p=0,03) и отсутствие дикого гомозиготного генотипа 105II гена GSTP1 (OR=2,05 95%CI 1,18–3,56, p=0,01) ассоциировались с повышенным риском развития БА у мальчиков.

Неблагоприятные генетические комбинации в сочетании с ухудшающимися условиями окружающей среды могут служить причиной раннего развития заболевания. Для проведения исследования нами были определены возрастные разделения детей по возрасту манифестации исследуемых заболеваний (табл. 2).

Проявления возрастных различий в ассоциациях генотипов генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков с предрасположенностью Средний возраст манифеста БА составил 5,6±2,9 года. Учитывая эти данные, мы выбрали 6-летний возраст для разделения больных БА на две группы, с ранним возрастом (до 6 лет) и поздним (старше 6 лет) манифестом. У детей с АД был выбран возраст 3 лет как пограничный. У детей с АР возраст 6 лет. В таблице 2 представлены суммированные результаты статистически значимых ассоциаций генотипов ФБК с предрасположенностью к изучаемым аллергическим заболеваниям у детей.

Установлено, что наличие делеционного полиморфизма del/del GSTM (OR=1,93 95%CI 0,93–4,01, p=0,01), как и отсутствие функционального генотипа + GSTM1 (OR=2,10 95%CI 1,10–4,01, p=0,02) ассоциировались с риском раннего развития астмы. Аналогичные отсутствие генотипа + GSTT1 (OR=1, 95%CI 0,98–3,47, p=0,05) и наличие функционально неполноценного генотипа del/del GSTT1 (OR=1,85 95%CI 0,98–3,47, p=0,05) ассоциировались с риском раннего развития БА. У детей с поздним развитием бронхиальной астмы повышенный риск развития заболевания ассоциировался с отсутствием нормального генотипа 105II гена GSTP1 (OR=2,16 95%CI 1,14–4,10, p=0,02) и носительством гетерозиготного полиморфизма 105IV гена GSTP1 (OR=2,03 95%CI 1,08–3,81, p=0,03). В группе детей с ранней манифестацией атопического дерматита мутантный полиморфизм 105VV гена GSTP1 повышал риск развития заболевания более чем в 2 раза (OR=2,40 95%CI 1,15–5,01, p=0,02). Отсутствие генотипа + GSTT1 (OR=2,79 95%CI 1,34–5,80, p=0,01) и наличие генотипа del/del GSTT (OR=2,79 95%CI 1,34–5,80, p=0,01) ассоциировались с повышенным риском позднего развития атопического дерматита. Отсутствие генотипа 462II CYP1A (OR=2,21 95%CI 1,03–4,75, p=0,02) ассоциировалось с повышенным риском позднего развития аллергического ринита у детей.

3. Оценка связи комбинаций генотипов и роль взаимодействий генотип-среда в формировании предрасположенности к аллергическим заболеваниям у детей Основные различия между группами здоровых и больных БА мальчиков определялись сочетаниями всех 5 изучаемых генных локусов, парные комбинации которых формировали 12 ассоциаций с подверженностью к заболеванию.

Так, 6 комбинаций генотипов определяли повышенный риск возникновения БА у мальчиков: GSTT1 del GSTM1 del (OR=3,80), GSTT1 del GSTP1 105IV (OR=3,50), GSTT1 del CYP1A1 462II (OR=2,83), GSTM1 del CYP1A1 462II (OR=1,88), GSTM1 del EPHX1 139HR (OR=2,87), GSTP1 105IV CYP1A1 462II (OR=1,98). В то же время сочетания генотипов GSTM1+ GSTT1+ (OR=0,42), GSTT1 + GSTP1 105II (OR=0,46), GSTT1 + CYP1A1 462II (OR=0,47), GSTT + EPHX1 139HH (OR=0,5), GSTM1 + GSTP1 105II (OR=0,29), GSTP1 105II CYP1A1 462II (OR=0,46) обладали протективными свойствами в отношении риска развития БА у мальчиков. В группе девочек, больных БА, статистически значимых комбинаций не установлено.

У мальчиков ассоциации парных комбинаций генотипов с АР формировались посредством взаимодействия следующих 4 локусов: +/del GSTT1, +/del GSTM1, I105V GSTP1, I462V CYP1A1. Так, 2 комбинации генотипов определяли повышенный риск возникновения АР у мальчиков: GSTT1 del GSTP1 105II (OR=3,41), GSTM1 del GSTP1 105II (OR=2,85). Пониженный риск развития АР у мальчиков определяло лишь одно межгенное сочетание: GSTP1 105IV CYP1A1 462II (OR=0,51). У девочек обнаружена ассоциация с предрасположенностью к АР по одной межгенной комбинации: GSTM1 del EPHX1 139HH (OR=3,48).

У мальчиков наследственная компонента предрасположенности к АД формировалась взаимодействием 5 локусов. Наиболее патогенетически важными межгенными взаимодействиями, определяющими предрасположенность к АД, а также существенно повышающими риск развития АД у мальчиков были следующие комбинации генотипов: GSTT1 del GSTM1 + (OR=2,96), GSTT1 del GSTP1 105II (OR=3,78), GSTT1 del CYP1A1 462II (OR=4,17), GSTT1 del EPHX1 139HH (OR=3,53), GSTM1 del GSTP1 105II (OR=2,96), CYP1A1 462IV EPHX1 139HR (OR=4,72). Протективными в отношении риска развития АД у мальчиков были парные межгенные сочетания генотипов: GSTT1 + GSTM1 + (OR=0,41), GSTT1 + GSTP1 105IV (OR=0,41), GSTT1 + CYP1A1 462II (OR=0,42), GSTT1 + EPHX1 139HH (OR=0,38), GSTM1 + GSTP1 105II (OR=0,50). У девочек обнаружены ассоциации 4 межгенных сочетаний генотипов с АД, образованные взаимодействием 4 генных локусов: +/del GSTM1, I105V GSTP1, H139R EPHX1, CYP1A1 I462V, эти парные сочетания, которые снижали риск развития АД, в целом совпадали с таковыми у мальчиков: GSTM + GSTP1 105II (OR=0,42), GSTM1 + CYP1A1 462II (OR=0,44), CYP1A1 462II EPHX1 139HR (OR=0,43). И лишь одна комбинация ассоциировалась с повышенным риском АД у девочек: GSTM1 del EPHX1 139HH (OR=4,69).

4. Влияние пассивного курения на предрасположенность к изучаемым аллергическим заболеваниям Типичным примером генно-средового взаимодействия, лежащего в основе любого мультифакториального заболевания, является фактор пассивного курения. В таблице 3 суммированы статистически ассоциации полиморфных вариантов генов ФБК с риском развития БА, АР, АД в зависимости от фактора курения. В группе детей, больных БА, имеющих контакт с табачным дымом, мутантный генотип 139RR гена EPHX1, был ассоциирован более чем с 9-кратным увеличением риска развития астмы (OR=9,09 95%CI 1,13–72,84, p=0,03). Кроме того, в этой же группе выявлена ассоциация гетерозиготного генотипа 105IV гена GSTP1 с повышенным риском развития БА (OR=2,10 95%CI 1,10–4,01, p=0,02).

У детей, не имеющих контакта с табачным дымом, значимых ассоциаций ни по одному полиморфизму не установлено.

Влияние табачного дыма на риск развития аллергических заболеваний Генотипы Бронхиальная астма Атопический дерматит Аллергический

НК ПК НК ПК НК ПК

НК – не подвержены курению, ПК – подвержены курению 5. Прогнозирование риска развития БА, АР, АД на основании анализа данных генотипирования полиморфизмов генов ФБК и средовых факторов С целью внедрения результатов исследования в практическую работу детских аллергологов и врачей медико-генетических консультаций для превентивной диагностики, нами были разработаны критерии прогнозирования риска возникновения БА, АД, АР с учетом полового диморфизма. Изучение влияния генотипов полиморфных вариантов генов и средовых факторов на риск развития аллергических заболеваний у детей проводили посредством логистического регрессионного анализа, который позволяет строить статистическую модель прогнозирования вероятности наступления события по имеющимся прогностически ценным признакам (в нашем исследовании это полиморфные варианты генов ферментов детоксикации ксенобиотиков и средовые факторы).

Результатом логистического регрессионного анализа является расчет оценок регрессионных коэффициентов b0, b1, b2 … bi уравнения:

где Х1…Хi – независимые признаки (прогностически ценные).

Значение у в уравнении регрессии – это натуральный логарифм отношения шансов для изучаемого события. Вероятность этого события для каждого конкретного объекта исследования может быть вычислена по формуле:

где е – математическая константа, равная 2,72.

Наиболее прогностически ценной моделью в отношении риска развития БА у мальчиков была модель, включающая следующие предикторы: 2 полиморфизма генов ФБК - +/del GSTT1, +/del GSTM1, реакция на прививки, психоэмоциональная обстановка в семье до развития болезни Пациент А. Генотип + GSTT1, генотип + GSTM1, психоэмоциональная обстановка в семье до развития болезни удовлетворительная, реакции на прививки не было.

Y = 4,35 + (-1,847 1) + (-1,963 1) + (-2,088 2) + 1,581 1 = - 2, P = 2,72-2,055/(1+2,72-2,055) = 0, Пациент Б. Генотип del/del GSTT1, генотип del/del GSTM1, психоэмоциональная обстановка в семье до развития болезни удовлетворительная, реакций на введение прививки в виде гиперемии.

Y = 4,35 + (-1,847 0) + (-1,963 0) + (-2,088 2) + 1,581 2 = 3, P = 2,723,336/(1+2,723,336) = 0, Таким образом, у пациента А. вероятность возникновения БА составляет 11%, а у пациента Б. – 96%.

Среди всех оцененных моделей в отношении риска возникновения АД у мальчиков наиболее прогностически ценной была следующая модель: генотип +/del GSTT1, фактор грудного вскармливания, частота ОРЗ.

Пациент Е. Генотип + GSTT, находился на грудном вскармливании, частота ОРЗ до 2 раз в год.

Y = 4,552 + (-1,004 1) + (-1,523 2) + (-1,15 2) = -1, P = 2,72-1,792/(1+2,72-1,792) = 0, Пациент Н. Генотип del/del GSTT1, находился на искусственном вскармливании, частота ОРЗ 3-4 раза в год.

Y = 4,552 + (-1,004 0) + (-1,523 0) + (-1,15 3) = 1, P = 2,721,102/(1+2,721,102) = 0, Вероятность развития АД у пациента Е. - 14%, а у пациента Н. составляет 75%.

В отношении риска возникновения АД у девочек наиболее значимая модель включала следующие предикторы: генотип I462V CYP1A1, фактор грудного вскармливания, частота ОРЗ.

Пациент И. Генотип 462II CYP1A1, находилась на грудном вскармливании, частота ОРЗ до 2 раз в год.

Y = 5,065 + (-1,21 1) + (-0,286 2) + (-2,079 2) = -0, P = 2,72-0,875/(1+2,72-0,875) = 0, Пациент Г. Генотип 462IV CYP1A1, находилась на искусственном вскармливании, частота ОРЗ до 2 раз в год.

Y = 5,065 + (-1,21 0) + (-0,286 0) + (-2,079 2) = 0, P = 2,720,907/(1+2,720,907) = 0, Таким образом, у пациента И. вероятность возникновения АД составляет - 29%, а у пациента Г. – 72%.

Наиболее значимая модель риска развития АР у девочек включала следующие предикторы: генотип I462V CYP1A1, фактор грудного вскармливания, частота ОРЗ, наличие вредностей на работе у матери.

Пациент Ж. Генотип 462II CYP1A1, находилась на грудном вскармливании, частота ОРЗ до 2 раз в год, на работе матери не имелось вредностей.

Y = 3,773 + (-2,197 1) + (-1,807 2) + (-1,073 2) + 1,936 1 = -2, P = 2,72-2,248/(1+2,72-2,248) = 0, Пациент В. Генотип 462IV CYP1A1, находилась на грудном вскармливании, частота ОРЗ до 2 раз в год, имелись вредности на работе матери.

Y = 3,773 + (-2,197 0) + (-1,807 2) + (-1,073 2) + 1,936 2 = 1, P = 2,721,885/(1+2,721,885) = 0, Вероятность развития АД у пациента Ж. составляет - 9%, а у пациента В.

- 86%.

Разработанные нами модели рекомендуется использовать для формирования групп риска развития аллергических заболеваний у детей с учетом полового диморфизма, а также для верификации диагноза и проведения лечебнопрофилактических мероприятий по предупреждению их развития.

ВЫВОДЫ

1. Установлены статистически значимые ассоциации генотипов ферментов биотрансформации ксенобиотиков с риском развития бронхиальной астмы генотипы 105IV GSTP1, del/del GSTM1 и отсутствие 105II GSTP1 а также атопического дерматита – генотипы 105VV GSTP1, del/del GSTT1.

2. В ассоциациях генотипов ферментов биотрансформации ксенобиотиков с изучаемыми аллергическими заболеваниями наблюдался выраженный половой диморфизм: для мальчиков повышенный риск развития бронхиальной астмы ассоциировался с генотипами del/del GSTT1, del/del GSTM1, 105IV GSTP1. Риск развития атопического дерматита для мальчиков - с полиморфизмом del/del GSTT1. Повышенный риск атопического дерматита для девочек с присутствием генотипа 462IV CYP1A1.

3. Генотипы ферментов биотрансформации ксенобиотиков оказывали модулирующее влияние на возраст манифеста рассмотренных заболеваний. На раннее развитие бронхиальной астмы оказывали влияние генотипы: del/del GSTM1, del/del GSTT1, на позднее 105IV GSTP1. Для раннего развития атопического дерматита был характерен генотип 105VV GSTP1, для позднего - del/del GSTT1. Для аллергического ринита поздний возраст начала заболевания сочетался с отсутствием функционального генотипа 462II CYP1A1.

4. Выявлены статистически значимые взаимодействия генотип-среда, формирующие предрасположенность к повышенному риску развития бронхиальной астмы у детей, подвергающихся фактору пассивного курения, потенцирующиеся влиянием генотипов 139RR EPHX1, 105IV GSTP1.

5. Анализ частот парных взаимодействий генотипов ФБК выявил статистически значимые различия в их распределении между группами больных и здоровых детей. Установленные межгенные различия были обусловлены накоплением среди больных, главным образом, вариантных генотипов обеих фаз биотрансформации.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Рекомендовать для внедрения в практику медико-генетического консультирования тестирование полиморфизма генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков в качестве превентивной диагностики бронхиальной астмы, атопического дерматита, аллергического ринита.

2. При консультировании детей для оценки вероятности развития бронхиальной астмы, атопического дерматита, аллергического ринита рекомендуется использовать приемы математического прогнозирования с учетом комплекса диагностически ценных признаков, разделенных по полу, установленных в ходе логистического регрессионного анализа.

3. Рекомендовать введение в практику лабораторной диагностики аллергических заболеваний (бронхиальной астмы, аллергического ринита и атопического дерматита) и тестирования полиморфизмов генов ФБК с последующим их использованием в вопросах прогнозирования и разработки индивидуальных лечебных мероприятий для предупреждения дальнейшего развития заболеваний.

Список работ, опубликованных по теме диссертации 1. Дедков А.А. Связь генетических и иммунологических факторов в формировании атопического дерматита у детей / А.Д. Богомазов, Н.Г. Булатникова // Иммунитет и болезни: материалы 2-го Междунар. конгр. – М., 2007. – С. 73.

2. Дедков, А.А. Некоторые генетические аспекты бронхиальной астмы у детей / А.Д. Богомазов, Н.Г. Булатникова // Иммунитет и болезни: материалы 2-го Междунар. конгр. – М., 2007. – С. 73.

3. Дедков, А.А. Иммунологические факторы развития аллергического ринита у детей / А.Д. Богомазов, Н.Г. Булатникова // Иммунитет и болезни: материалы 2-го Междунар. конгр. – М., 2007. – С. 74.

4. Дедков, А.А. Генетические и иммунологические механизмы в развитии бронхиальной астмы у детей / Н.Г. Дедкова, А.Д. Богомазов, И.Ю. Расторгуев // Молодежная наука: от фундаментальной идеи до инновационных проектов: материалы 73-й межвуз. науч. конф. студентов и молодых ученых (15-16 апр. 2008 г.): в 2 ч. – Курск: Изд-во КГМУ, 2007. – Ч. I. – С. 296.

5. Дедков, А.А. Анализ заболеваемости детей бронхиальной астмой на территории Курской области / Н.Г. Дедкова, А.Д. Богомазов, И.Ю. Расторгуев // Молодежная наука: от фундаментальной идеи до инновационных проектов: материалы 73-й межвуз. науч. конф. студентов и молодых ученых (15-16 апр.

2008 г.): в 2 ч. – Курск: Изд-во КГМУ, 2007 – Ч. I. – С. 297-298.

6. Дедков, А.А. Анализ заболеваемости аллергическим ринитом у детей Курской области / Н.Г. Дедкова, А.Д. Богомазов // Материалы Первой Международной дистанционной научной конференции «Инновации в медицине» / КГМУ. – Курск, 2008. – С. 86-87.

7. Дедков, А.А. Генетические аспекты наследования бронхиальной астмы / Н.Г. Дедкова, А.Д. Богомазов // Материалы Первой Международной дистанционной научной конференции «Инновации в медицине» / КГМУ. – Курск, 2008. – С. 88-89.

8. Дедков, А.А. Влияние наследственности на уровень заболеваемости детей атопическим дерматитом на территории Курской области / А.Д. Богомазов, В.П. Иванов, В.А. Афанасьев // Университетская наука: теория, практика, инновации: сб. тр. 73-й науч. конф. КГМУ и сессии Центр.-Чернозем. науч.

центра РАМН: в 3 т. – Курск: Изд-во КГМУ, 2008 – Ч. I. – С. 384-386.

9. Дедков, А.А. Изучение некоторых генетических аспектов и структуры заболеваемости бронхиальной астмы у детей на территории Курской области / А.Д. Богомазов, В.П. Иванов, В.А. Афанасьев // Университетская наука: теория, практика, инновации: сб. тр. 73-й науч. конф. КГМУ и сессии Центр.-Чернозем.

науч. центра РАМН: в 3 т. – Курск: КГМУ, 2008 – Ч. I. – С. 386-389.

10. Дедков, А.А. Наследственная предрасположенность в реализации бронхиальной астмы / Н.Г. Дедкова, М.С. Соболев // Молодежная наука и современность: материалы 74-й межвуз. итог. науч. конф. студентов и молодых ученых, посвященная Году молодежи в России (21-22 апр. 2009 г.). в 3 ч. – Курск: Издво КГМУ, 2009. – Ч. 2. – С. 23-24.

11. Дедков, А.А. Изучение структуры заболеваемости бронхиальной астмой детей на территории Курской области / Н.Г. Дедкова, М.С. Соболев, А.Н. Каплин // Молодежная наука и современность: материалы 74-й межвуз.

итог. науч. конф. студентов и молодых ученых, посвященная Году молодежи в России (21-22 апр. 2009 г.). в 3 ч. – Курск: Изд-во КГМУ, 2009. – Ч. 2. – С. 25-26.

12. Дедков, А.А. Задействованность иммунологических и генетических факторов в развитии бронхиальной астмы у детей на территории Курской области / А.А. Дедков, И.Г. Хмелевская // Материалы IV Международной научной конференции молодых ученых-медиков (25-26 фев. 2010 г.): в 3 т. / под ред.

В.А. Лазаренко. – Курск: Изд-во КГМУ, 2010. – Т. 1. – С. 325-327.

13. Дедков, А.А. Изучение структуры заболеваемости детей атопическим дерматитом на территории Курской области / А.А. Дедков, Хмелевская И.Г. // Материалы IV Международной научной конференции молодых ученых медиков (25-26 фев. 2010 г.) : в 3 т. / под ред. В.А. Лазаренко. – Курск: Изд-во КГМУ, 2010. – Т. 1. – С. 327-330.

14. Исследование связи полиморфизма Ile105Val гена GSTP1 с развитием атопической бронхиальной астмы у детей в Курской области / А.А. Дедков, А.Д. Богомазов, В.П. Иванов и др. // Курский науч.-практ.

вестн. «Человек и его здоровье». – 2011. – № 1. – С. 31-36.

15. Дедков, А.А. Анализ полиморфизма гена глутатион-S-трансферазы (Ile105Val) GSTP1 при атопическом дерматите у детей / А.А. Дедков, А.Д. Богомазов // Врач-аспирант. – 2011. – № 1.3(44). – С. 418-424.

16. Анализ ассоциаций полиморфизма гена микросомальной эпоксидгидролазы (His139Arg) с риском развития бронхиальной астмы у детей в Курской области / А.А. Дедков, А.Д. Богомазов, В.П. Иванов и др. // Естественные и технические науки. – 2011. - № 2(52). – С. 111-117.

Структурный полиморфизм кандидатных генов при аллергических заболеваниях (бронхиальная астма, аллергический ринит, В работе представлены результаты исследования, отражающие вовлеченность генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков в формирование аллергических заболеваний у детей. Установлен выраженный половой диморфизм и модулирующее влияние на возраст манифеста наиболее распространенных атопических заболеваний: бронхиальной астмы, аллергического ринита и атопического дерматита. Разработаны критерии раннего прогнозирования риска возникновения изучаемых заболеваний. Результаты исследования рекомендуются к использованию в научных исследованиях, а также в практической медицине.

The structural polymorphism of the candidate genes in children with the allergic diseases (bronchial asthma, allergic rhinitis and atopic dermatitis) The results of this work represent the role of the xenobiotics biotransformation enzymes genes in the developing of the allergic diseases in children. It has been found pronounced sexual dimorphism and modulating influence on the onset of manifestation of the most widespread atopic diseases: bronchial asthma, allergic rhinitis and atopic dermatitis. The prognostic criterias were elaborated to predict the risk of developing of these diseases. The results of this investigation are recommended to application in the scientific researches and practical medicine.

Сдано в набор 01.11.2011 г. Подписано в печать 03.11.2011 г.

Формат 30х421/8. Бумага офсетная. Гарнитура Times New Rom.

Издательство Курского государственного медицинского университета

 
Похожие работы:

«Черемисина Александра Игоревна ФИТОРЕМЕДИАЦИОННЫЙ ПОТЕНЦИАЛ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ АДАПТАЦИИ РАСТЕНИЙ РОДА AMARANTHUS L. К ИЗБЫТОЧНОМУ СОДЕРЖАНИЮ НИКЕЛЯ 03.01.05 - Физиология и биохимия растений Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Москва – 2012 Работа выполнена в лаборатории физиологических и молекулярных механизмов адаптации Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института физиологии растений им. К.А....»

«РЫЛЬНИКОВ Валентин Андреевич ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ И ПОДХОДЫ К УПРАВЛЕНИЮ ЧИСЛЕННОСТЬЮ СИНАНТРОПНЫХ ВИДОВ ГРЫЗУНОВ (на примере серой крысы Rattus norvegicus Berk.) 03.00.16 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Пермь – 2007 Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении науки Научно-исследовательский институт дезинфектологии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека и...»

«Шишкина Елена Сергеевна ГИДРОФИЛЬНАЯ РАСТИТЕЛЬНОСТЬ МАЛЫХ ИСКУССТВЕННЫХ ВОДОЕМОВ В САРАТОВСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.01 – ботаника 03.02.08 – экология (биология) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Саратов – 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Саратовский государственный университет имени Н.Г. Чернышевского на кафедре ботаники и экологии Научные...»

«ДУМИНА МАРИЯ ВЛАДИМИРОВНА Роль мембранных транспортных белков в регуляции продукции цефалоспорина С у Acremonium chrysogenum 03.01.06 – Биотехнология (в том числе бионанотехнологии) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва, 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Центре Биоинженерия Российской академии наук Научные руководители: кандидат биологических наук Эльдаров Михаил Анатольевич...»

«ГАЙВОРОНСКИЙ ВЛАДИМИР ГЕННАДЬЕВИЧ ОЦЕНКА УСТОЙЧИВОСТИ ПОЧВ ЮГА РОССИИ К ЗАГРЯЗНЕНИЮ МАЗУТОМ ПО БИОЛОГИЧЕСКИМ ПОКАЗАТЕЛЯМ (В УСЛОВИЯХ МОДЕЛЬНОГО ЭКСПЕРИМЕНТА) 03.00.16 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Ростов-на-Дону - 2009 2 Работа выполнена на кафедре экологии и природопользования Южного федерального университета Научный руководитель : доктор сельскохозяйственных наук, профессор Колесников Сергей Ильич Официальные...»

«БЕЛЯЕВА ЕКАТЕРИНА АНДРЕЕВНА МИКРОБИОТА КИШЕЧНИКА КОРЕННОГО ЖИТЕЛЯ ЦЕНТРАЛЬНОГО ФЕДЕРАЛЬНОГО ОКРУГА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ КАК ОСНОВА ДЛЯ СОЗДАНИЯ РЕГИОНАЛЬНЫХ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ 03.02.03 – Микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва - 2014 Работа выполнена в Государственном Бюджетном Образовательном Учреждении Высшего Профессионального Образования Тверская государственная медицинская академия Министерства...»

«Петров Виктор Юрьевич Орнитокомплексы лесных экосистем ложбин древнего стока Приобского плато 03.00.16 – экология Автореферат диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Барнаул - 2010 Работа выполнена в лаборатории зоологии ГОУ ВПО Алтайский государственный университет Научный руководитель : кандидат биологических наук, доцент Ирисова Надежда Леонидовна Официальные оппоненты : доктор биологических наук, профессор Псарёв Александр Михайлович, кандидат...»

«Тухбатова Резеда Ильгизовна МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА АРХЕОЛОГИЧЕСКИХ ПАМЯТНИКОВ НА ТЕРРИТОРИИ РЕСПУБЛИКИ ТАТАРСТАН 03.00.07 - микробиология 03.00.04 – биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань - 2008 2 Работа выполнена на кафедрах микробиологии и биохимии биолого-почвенного факультета ГОУ ВПО Казанский государственный университет им. В.И.Ульянова-Ленина Научный руководитель : доктор биологических наук, доцент...»

«НИКИТИНА Наталия Геннадьевна ОСОБЕННОСТИ СТРОЕНИЯ ЧЕРЕПА И КОЖНЫХ ПОКРОВОВ ГЕККОНОВЫХ ЯЩЕРИЦ (REPTILIA: SAURIA: GEKKOTA) И ИХ ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ Специальность 03.00.08 – зоология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург 2009 Работа выполнена в Лаборатории орнитологии и герпетологии Зоологического института РАН и МУК Ярославский зоопарк, г. Ярославль Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Н. Б....»

«АХМЕТЗЯНОВА ЛЕЙСАН ГАББАСОВНА АЛГОРИТМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЗОПАСНОГО ДЛЯ РАСТЕНИЙ И МИКРООРГАНИЗМОВ СОДЕРЖАНИЯ НЕФТЕПРОДУКТОВ В РЕКУЛЬТИВИРУЕМОЙ ПОЧВЕ 03.02.08 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук КАЗАНЬ, 2011 Работа выполнена на кафедре прикладной экологии факультета географии и экологии Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего профессионального образования Казанский (Приволжский)...»

«МЕТАЛЛОВ Алексей Владимирович ЭКОЛОГО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ АДАПТАЦИИ У СОРТОВ ЛЮЦЕРНЫ В УСЛОВИЯХ ПРЕДБАЙКАЛЬЯ 03.00.16 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Улан-Удэ, 2009 Работа выполнена в Иркутской государственной сельскохозяйственной академии доктор биологических наук, профессор Иван Научный руководитель : Экидиусович Илли доктор биологических наук, Официальные оппоненты : профессор Владимир Капсимович Кашин...»

«Краснов Алексей Николаевич Мультифункциональный ядерный белок эукариот E(y)2 и механизм его действия. Специальность 03.00.03 - Молекулярная биология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва – 2009 Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте биологии гена РАН, лаборатории регуляции экспрессии генов Научный консультант : доктор биологических наук,...»

«ПРОВОРОВ НИКОЛАЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ Эволюция микробно-растительных симбиозов: филогенетические, популяционно-генетические и селекционные аспекты Специальность 03.00.15 – генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации, представленной в виде научного доклада на соискание ученой степени доктора биологических наук Санкт-Петербург 2009 Работа выполнена в Государственном научном учреждении Всероссийский научно-исследовательский институт...»

«Семенькова Елена Геннадьевна БИОЛОГИЯ И ПЕРСПЕКТИВЫ ПРОМЫСЛА ЯПОНСКОГО МОХНАТОРУКОГО КРАБА ERIOCHEIR JAPONICA В ВОДОЕМАХ ПРИМОРЬЯ 03.00.18 – гидробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владивосток – 2007 2 Работа выполнена в лаборатории ресурсов промысловых беспозвоночных прибрежных вод и континентальных водоемов и в секторе экосистемных исследований биоресурсов прибрежных вод Федерального государственного унитарного...»

«БОНДАРЕНКО Александр Сергеевич АУТЭКОЛОГИЯ И МИГРАЦИОННАЯ АКТИВНОСТЬ МАССОВЫХ ВИДОВ ЖУЖЕЛИЦ (COLEOPTERA, CARABIDAE) НАГОРНОЙ ЧАСТИ СЕВЕРО-ЗАПАДНОГО КАВКАЗА 03.02.08 – экология (биологические наук и) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Краснодар – 2013 Работа выполнена на кафедре фитопатологии, энтомологии и защиты растений факультета защиты растений ФГБОУ ВПО Кубанский государственный аграрный университет Научный руководитель :...»

«Пархоменко Василий Михайлович БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И СТРУКТУРА ЦЕНОПОПУЛЯЦИЙ ЗВЕРОБОЯ ПРОДЫРЯВЛЕННОГО (HYPERICUM PERFORATUM L.) В УСЛОВИЯХ САРАТОВСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.01 – ботаника Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Саратов – 2012 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского на кафедре...»

«СНАКИНА Татьяна Ивановна ИНТРОДУКЦИЯ ГОЛУБИКИ ТОПЯНОЙ VACCINIUM ULIGINOSUM L. В ЗАПАДНОЙ СИБИРИ 03.00.05 – Ботаника АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Новосибирск – 2007 Работа выполнена в Центральном сибирском ботаническом саду Сибирского отделения РАН, г. Новосибирск Научный руководитель – кандидат биологических наук, профессор Горбунов Алексей Борисович. Официальные оппоненты : доктор биологических наук, с.н.с. Высочина Галина...»

«БЕЛЯКОВА СВЕТЛАНА ВИКТОРОВНА ТЕСТЫ НА ОСНОВЕ СТАБИЛИЗИРОВАННЫХ ПРЕПАРАТОВ ХОЛИНЭСТЕРАЗЫ В ЭКОЛОГИЧЕСКОМ КОНТРОЛЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ Специальность: 03.00.16 – Экология АВТОРЕФЕРЕТ диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук Казань - 2002 Работа выполнена на кафедре прикладной экологии экологического факультета Казанского государственного университета Научный руководитель : доктор химических наук, доцент Евтюгин Г.А. Официальные оппоненты :...»

«Зайцева Юлия Анатольевна ПАРТЕНОГЕНЕТИЧЕСКАЯ АКТИВАЦИЯ И ХИМИЧЕСКАЯ ЭНУКЛЕАЦИЯ ООЦИТОВ КРЫС. ПРОЦЕССЫ ДЕМЕТИЛИРОВАНИЯ ДНК У РАННИХ ПРЕДИМПЛАНТАЦИОННЫХ ЭМБРИОНОВ КРЫС И МЫШЕЙ 03.00.25 Гистология, цитология, клеточная биология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург 2008 Работа выполнена в Центре молекулярной медицины имени Макса Дельбрюка (Берлин) и в Институте цитологии Российской акдемии наук (Санкт-Петербург) Научные...»

«Брежнева Ирина Николаевна МЕТОДИКА ОЦЕНКИ АЭРОТЕХНОГЕННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА ФИТОСТРОМУ ПРИ СТРОИТЕЛЬСТВЕ СКВАЖИН (на примере Оренбургского Предуралья) 03.02.01 – ботаника АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Оренбург – 2010 2 Работа выполнена в Волго-Уральском научно-исследовательском и проектном институте нефти и газа, г. Оренбург доктор биологических наук, профессор, Научный Рябинина Зинаида Николаевна руководитель доктор...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.