WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

НАСИБОВ Шаиг Насир оглы

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ

ГИБРИДИЗАЦИИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ И

ДИКИХ ВИДОВ ЖИВОТНЫХ

Специальность: 03.02.07 – Генетика

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

Дубровицы - 2010 2

Работа выполнена в Центре биотехнологии и молекулярной диагностики животных Государственного научного учреждения Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Российской академии сельскохозяйственных наук.

доктор биологических наук,

Научный консультант:

член-корреспондент РАСХН Багиров Вугар Алинияз оглы доктор биологических наук, профессор,

Официальные оппоненты:

Букаров Нурмагомед Гаджикулиевич доктор биологических наук, профессор, Ерохин Анатолий Сергеевич доктор биологических наук, профессор, Лебедев Виктор Иванович Ведущее учреждение: ФГОУ ВПО Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина.

Защита состоится «28» декабря 2010 года, в 10 часов, на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 006.013.03 при ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Россельхозакадемии.

Адрес института: 142132 Московская область, Подольский район, пос. Дубровицы, ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии, т/факс (4967) 65-11-

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГНУ ВИЖ.

Автореферат разослан «_» _ 2010 года.

Ученый секретарь совета И.В. Гусев 1. ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы. Прогресс в животноводстве возможен при наличии в популяции генетического разнообразия, существования выдающихся генотипов и адаптированных к конкретным условиям животных. Однако его результативность определяется не только этими факторами, но и спросом на продукцию, который не всегда может быть удовлетворен на основе имеющегося генетического материала. В этой связи в животноводстве стоит задача рационального использования генофонда, а также поиска и создания новых источников животноводческой продукции (Багиров В.А. и др. 2009).





Одним из путей рационального ведения животноводства связан с вовлечением в сельскохозяйственное производство ресурсов дикой фауны, в том числе, с использованием межвидовой гибридизации. Отдаленная гибридизация используется при создании новых селекционных форм сельскохозяйственных животных, характеризующихся выраженным гетерозисом, сочетающих в себе ценные свойства исходных видов и для реконструкции и восстановления исчезающих видов. Гибридизация является эффективным методом, позволяющим обогатить генофонд домашних животных путем внесения в него ценных генетических задатков, присущих диким животным (Эрнст Л.К. и др. 2004., Иолчиев Б.С. и др. 2005, Шайдуллин И.Н., Бин Н.Н. 1991).

Доминирующее значение имеет метод активного сохранения генофонда путем использования в селекционном процессе. Создание новых высокопродуктивных форм, отвечающих требованиям времени, несущих в себе наследственные задатки исходных пород, позволяет на основе генетических механизмов сохранять и совершенствовать генные комплексы бесконечно долго (Фисинин В.И., 2005).

Современные достижения генетики обеспечивают эффективность интродукции высокоценного потенциала дикой фауны в селекционный процесс.

Криоконсервация эпидидимального и тестикулярного семени является надежным методом сохранения генетических ресурсов животных, а также создания новых селекционных форм (Эрнст Л.К. 2004, Кленовицкий П.М., Багиров В.А. 2004).

Целью диссертационной работы является изучение генетических и биологических аспектов создания новых форм с использованием отдаленной гибридизации сельскохозяйственных и диких видов животных на основе разработки и усовершенствования методов сохранения и рационального использования генетического биоразнообразия.

Для достижения цели были поставлены и решены следующие задачи:

-. унифицировать метод криоконсервации генетического материала, адаптировав его для сохранения биоразнообразия животного мира;

- изучить биологические особенности семени домашних и диких видов животных, полученного разными методами: эякуляцией, электроэякуляцией и извлечением из эпидидимиса до и после глубокого замораживания;

- создать криобанк генетического материала редких и исчезающих видов животных;

-. получить новые формы животных методом отдаленной гибридизации крупного рогатого скота и яка, домашней козы и сибирского козерога, домашней овцы и архара, домашней овцы и снежного барана с использованием замороженно-оттаянного эпидидимального семени;

-.изучить особенности периода плодоношения у исходных видов и гибридов;

- провести мониторинг генетических аномалий у исходных видов и гибридов;

- выполнить сравнительный цитогенетический анализ животных разных видов и их гибридов с использованием прикладных компьютерных программ;

- провести молекулярно-генетический анализ животных разных видов и их гибридов с использованием генетических маркеров;





- изучить хозяйственно-полезные признаки гибридов.

Научная новизна. Установлено, что в процессе глубокого замораживания и оттаивания эпидидимального семени яка, сибирского козерога, архара и снежного барана сохраняется его оплодотворяющая способность и генетическая полноценность. Впервые с использованием замороженно-оттаянного эпидидимального семени получены межвидовые гибриды крупного рогатого скота и яка, домашней козы и сибирского козерога, домашней овцы и архара, домашней овцы и снежного барана.

Впервые дана сравнительная цитогенетическая и молекулярно-генетическая характеристика изучаемых видов и их гибридов. Установлены различия в продолжительности эмбрионального периода онтогенеза у исходных видов и гибридов.

Практическая значимость. Унифицирован метод криоконсервации генетического материала от диких видов и сельскохозяйственных животных.

Создан криобанк генетического материала архара памирской популяции, снежного барана якутской популяции, сибирского козерога алтайской популяции, яка памирской, алтайской популяций и зубра алтайской популяции.

Получены межвидовые гибриды, которые являются основой создания новых высокоэффективных селекционных форм сельскохозяйственных животных.

Проведен генетический мониторинг изучаемых животных на носительство наследственных аномалий. Адаптирован метод криоконсервации эпидидимального семени архара, снежного барана, сибирского козерога, яка и зубра.

Модифицирован метод искусственного осеменения овец и коз как элемент рационального использования генетических ресурсов.

Положения, выносимые на защиту:

замораживания эпидидимального семени архара, снежного барана, сибирского козерога, яка и зубра, позволяющий сохранять его биологическую полноценность и оплодотворяющую способность, как метод сохранения и рационального использования генетических ресурсов диких видов животных;

- криобанк генетического материала диких животных - архара, снежного барана, сибирского козерога, яка, и зубра и домашних овец;

- новые формы животных, полученные с использованием межвидовой гибридизации крупного рогатого скота и яка, домашней козы и сибирского козерога, домашней овцы и архара, домашней овцы и снежного барана;

- технология рационального использования генетических ресурсов овец и коз на основе модифицированного метода искусственного осеменения и внутритрубного осеменения микродозами семени;

- молекулярно-генетические и цитогенетические профили гибридов как критерии отбора генетически полноценных особей при сохранении генетических ресурсов животных;

- биологические и хозяйственно-полезные особенности гибридов.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях ученого совета ВНИИ животноводства (2003гг.), на 15 научных конференциях (Москва 2004, 2006, Санкт-Петербург 2004, 2007, 2009, Дубровицы 2003-2009, Боровск 2005, Гаага 2005, Рим 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 31 научная работа, из них 8 в журналах, рекомендуемых ВАК Российской Федерации и монографии.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов исследований и обсуждения, заключения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы. Материал изложен на страницах компьютерного текста, содержит 25 таблиц и 32 рисунков. Список литературы включает 284 источника, в т.ч. 156 - на иностранных языках.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена в 2003-2010 гг. в ГНУ Всероссийском научноисследовательском институте животноводства, в экспериментальном хозяйстве ФГУП «Кленово-Чегодаево». Для получения генетического материала проведены экспедиции в Черекский район Кабардино-Балкарской Республики, Горно-Бадахшанскую Автономную область Таджикской Республики, п.

Кош-агач Алтайской Республики, Оймяконский район Республики Саха (Якутия).

Исследования проводили по схеме, представленной на рисунке 1.

Эксперименты проводили на следующих видах животных: зубр (Bos bison) алтайской популяции, як (Bos mutus) памирской, кабардино-балкарской и алтайской популяции, архар (Ovis ammon) памирской популяции, снежный баран (Ovis nivicola lydekkeri) якутской популяции, козерог (Capra sibirica sibirica) алтайской популяции.

Семя от домашних баранов брали традиционным методом, с помощью искусственной вагины (Милованов В.К., 1962), от баранов диких видов методом электроэякуляции или извлечением сперматозоидов из эпидидимиса.

Генетические аспекты сохранения диких видов животных и перспективы Унификация и адаптация метода криоконсервации Методы сохранения и рационального использования Морфо-физиологический оценка Комплексная оценка сперматозоидов разных Характеристика биологической разных видов животных прикладных компьютерных технологий до и после криоконсервации Получения межвидовых гибридов с использование генетических ресурсов диких видов животных В ряде случаев для взятия семени от особо ценных козловпроизводителей, которые не могут давать семя на вагину, рекомендуется использование электроэякулятора (производитель: Minitub, Германия). Подсчитывали концентрацию сперматозоидов с помощью компьютерных прикладных программ. Замораживание семени проводили на охлажденной в жидком азоте фторопластовой пластине (Ющенко Н.П., 1968). Оттаивание семени осуществляли сухим методом с помощью оттаивателя, предложенного Кононовым В.П. и Нарижным А.Г. (1986). Морфологическую сохранность акросом, изучали с использованием видеокамеры и компьютерной программы Image Scope (г. Москва, ООО «Системы для микроскопии и анализа»).

Для проведения цитогенетических исследований, тонких микроскопических исследований использовали микроскоп, оборудованный цифровой камерой и программным обеспечением Image Scope (Производитель ООО «Системы для микроскопии и анализа», г. Москва).

Цитогенетические и молекулярно-генетические исследования проводили на гибридных потомках и исходных видах. Материалом для цитогенетического анализа служили лимфоциты периферической крови, полученные стерильно из яремной вены. В качестве митогена использовали коноковалин А (КоА производства фирмы ПанЭко, Москва).

Для молекулярно-генетического анализа генотипа изучали образцы ДНК у яков разных популяций. Для сравнения частоты встречаемости микросателлитных маркеров и оценки вариабельности в исследуемых популяциях использовали ДНК.

ДНК выделяли из образцов ткани. Анализ ДНК и постановку полимеразной цепной реакции (ПЦР) выполняли по стандартным методикам.

Выбор микросателлитных локусов осуществляли в соответствии с рекомендациями ISAG. Электрофоретическое разделение фрагментов ДНК методом капиллярного электрофореза проводили на приборе ABI 3130xl Genetic Analyzer. Для идентификации аллелей исследованных микросателлитных локусов использовали программу ABI GeneMapper v. 4.0.

Статистическую обработку данных проводили по стандартным методикам (10-12), применяя программное обеспечение MS Excel, MSA_WIN v.

2.65, GenAlEx 6.0, Phylip.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Сохранение биоразнообразия животного мира методом криоконсервации генетического материала Унификация и адаптация метода глубокого замораживания эпидидимального семени диких видов животных состояла в создании универсальной криопротективной среды, пригодной для эпидидимального семени, полученного от самцов разных видов.

В результате этих исследований была предложена унифицированная среда с рН 7,0 следующего состава: лактоза - 2,0 г; лимонная кислота – 1, г;Трис – 2,5 г; глицерин – 4,0 мл; желток куриного яйца – 10 мл; вода бидистиллированная – 100 мл.

Результаты применения унифицированной среды показали, что она обеспечивает оптимальные условия сохранения биологической полноценности заморожено-оттаянного эпидидимального семени разных видов животных.

3.2. Методы получения семени для сохранения генетических ресурсов С целью создания генетического криобанка нами была дана сравнительная характеристика семени баранов, полученного разными методами. Результаты сравнительного анализа приведены в рисунке 2.

Рис. 2. Характеристика семени, полученного разными методами Результаты, приведенные на рисунке 2 показывают, что подвижность эпидидимального семени сразу после получения существенно ниже, чем при других методах взятия. Это объясняется высокой концентрацией сперматозоидов в эпидидимальном семени, не разбавленном секретами добавочных половых желез и накоплением молочной кислоты, которая подавляет подвижность сперматозоидов. После разбавление и эквилибрации семени снимается кислотная инактивация подвижности.

Семя, полученное разными способами по другим биологическим характеристикам не имеет существенных отличий, это указывает на то, что биологическая полноценность семени не зависит от метода его получения.

Проведенные исследования показали, что полученное (постмортально или прижизненно) эпидидимальное семя не уступает эякулированному по биологическим показателям до и после криоконсервации. Этот метод является надежным для сохранения генетических ресурсов редких и исчезающих видов животных.

В наших исследованиях с целью рационального использования и сохранения генетического биоразнообразия одновременно подвергали глубокому замораживанию сперматозоиды из тела, головки эпидидимиса и тестикулярные, что открывает новые перспективы в направлении сохранения и рационального использования генетических ресурсов редких и исчезающих видов животных.

3.3. Комплексная оценка сперматозоидов с использованием С целью повышения достоверности комплексной оценки качества семени и ускорения проведения анализа, у разных видов животных нами было адаптировано программное обеспечение Зоосперм 1 фирмы Биотест (СанктПетербург). Данная программа была использована нами при создании уникального криобанка семени редких и исчезающих видов животных.

Рис. 3. Оценка и классификация сперматозоидов по подвижности.

Данное програмное обеспечение определяет траектории, скорость продвижении, по средней траектории, скорость движения сперматозоида вдоль прямой линии, % прямолинейного движения и др., а также следующих морфометрических показателей: площадь, периметр, фактор круга, округлость.

По результатам обработанных данных программное обеспечение проводит автоматическую классификацию сперматозоидов и формирует базу данных по оценке резервируемого криобанка семени.

3.4. Сохранение генетических ресурсов животного мира 3.4.1. Создание криобанка эпидидимального семени животных Нами во Всероссийском НИИ животноводства создана уникальная криоколлекция семени редких и исчезающих видов животных. Оригинальность данной работы состоит в том, что впервые в создании криобанка семени использовали эпидидимальные сперматозоиды не только от хвоста эпидидимиса, а также от головки и тела эпидидимиса и тестикулярные сперматозоиды для дальнейшей интрацитоплазматической инъекции.

Сохранение генетических ресурсов зубра алтайской популяции Несмотря на то, что в последние десятилетия численность зубра постоянно увеличивается по международному статусу зубр все еще относится к категории вида, находящегося в состоянии угрозы исчезновения - «EN» и внесен в Красную книгу.

В нашу задачу входило получение и создание криобанка генетического материала зубра алтайской популяции. Семя было получено прижизненно по методу односторонней кастрации. С этой целью была организована экспедиция в Республику Алтай, в результате которой получено эпидидимальное семя зубра. Семя на месте было подвергнуто криоконсервации, доставлено в ВИЖ и заложено в криобанк.

Количество и оценочные характеристики семени зубра алтайской популяции, заложенного в криобанке приведены в таблице 1.

Создание криобанка семени зубра алтайской популяции Показатели Доля фракций в общей сумме эпидидимальных сперматозоидов, % Концентрация сперматозоидов после разбавления, млрд.

Подвижность свежеполученных сперматозоидов 60+1,8 70+2, Подвижность сперматозоидов после разбавления 84+1,4 80+0, Подвижность сперматозоидов после эквилибрации 73+0,9 71+1, Подвижность семени после замораживаниеоттаивания Установлено, что после замораживания-оттаивания сперматозоиды зубра сохраняют свою биологическую полноценность. Получение и создание банка криоконсервированного семени не только надежный метод сохранения генофонда этого вида, но и открывает перспективы для создания в мясном скотоводстве новых селекционных форм с более высоким генетическим потенциалом.

Сохранение генетических ресурсов памирской и алтайской С целью получения и создания криобанка генетического материала яка алтайской и памирской популяции были организованы экспедиции в Республику Алтай и Горно-Бадахшанскую Автономную область Таджикской Республики, в результате которых получено эпидидимальное семя яков. Семя было подвергнуто криоконсервации и заложено в криобанк ВНИИ животноводства. Характеристики семени яков приведены в таблице 2.

Показатели Доля фракций в общей сумме сперматозоидов, % 63,2 36, Концентрация сперматозоидов после разбавления, млрд. 3,5 1, Подвижность свежеполученных сперматозоидов, % 65+2,1 62+1, Подвижность сперматозоидов после разбавления, % 90+2,4 85+1, Подвижность сперматозоидов после эквилибрации,% 83+2,2 78+2, Подвижность семени после оттаивания, % 35+0,8 32+1, Сохранность акросом, после оттаивания, % 64+2,4 61+3, Показано, что замороженное семя яка сохраняет биологическую полноценность и пригодно для плодотворного осеменения самок и может эффективно использоваться для улучшения племенных качеств одомашненных яков и отдаленной гибридизации.

Сохранение генетических ресурсов сибирского козерога Козероги самый крупный представитель рода Capra. С целью получение и создание криобанка генетического материала сибирского козерога алтайской популяции была организована экспедиция в Республику Алтай пос. Кош-Агач.

Создание криобанка семени сибирского козерога алтайской популяции Показатели Доля фракций в общей сумме сперматозоидов, % 69,3 30, Концентрация сперматозоидов после разбавления, млрд. 8,3 2, Подвижность свежеполученных сперматозоидов, % 60+2,4 55+2, Подвижность сперматозоидов после разбавления, % 92+2,1 84+3, Подвижность сперматозоидов после эквилибрации, % 87+1,5 81+2, Подвижность семени после оттаивания, % 55+1,9 43+1, Сохранность акросом, после оттаивания, % 74+1,4 67+2, В результате которой получено эпидидимальное семя и создан криобанк. Количество и характеристики семени сибирского козерога алтайской, заложенного в криобанке приведены в таблице 3.

Результаты исследования показали, что эпидидимальное семя козерога обладает высокой криоустойчивостью. Подвижность сперматозоидов после замораживание-оттаивания по первой фракции составила 55%, а во второй 43%. Показано, что замороженное семя козерога сохраняет биологическую полноценность и пригодно для плодотворного осеменения самок.

Сохранение генетических ресурсов снежного барана Снежный баран якутской популяции Ovis nivicola lydekkeri занесен в Красную книгу и охраняется в рамках различных международных программ.

Была организована экспедиция в Оймяконский район Республики Саха (Якутия) для получения семени и создание криобанка генетического материала для сохранения этого вида.

Оценка полученного и заложенного в криобанке семени, приведены в таблице 4.

Создание криобанка семени снежного барана якутской популяции Концентрация сперматозоидов после разбавления, млрд. 7,8 2, Подвижность свежеполученных сперматозоидов, % 65+1,2 69+2, Подвижность сперматозоидов после разбавления, % 90+1,8 87+1, Подвижность сперматозоидов после эквилибрации, % 86+2,8 83+3, Подвижность семени после оттаивания, % 45+0,8 38+1, Сохранность акросом, после оттаивания % 69+2,4 68+3, Из представленных в таблице 4 результатов исследований видно, что эпидидимальное семя снежного барана, замороженное по унифицированной технологии, характеризируется высокой биологической полноценностью.

Подвижность сперматозоидов после замораживания-оттаивания по первой фракции составила 45%, а во второй 38%.

Архар относится к исчезающим видам животных. Он внесен в Красную книгу и охраняется под эгидой различных международных организаций. В нашу задачу входило создание криобанка генетического материала архара памирской популяции. С этой целью была организована экспедиция в ГорноБадахшанскую Автономную область Таджикской Республики, в результате которой получено эпидидимальное семя архара. Семя было подвергнуто криоконсервации, доставлено во ВНИИ животноводства и заложено в криобанк. Оценка показателей эпидидимального семени архара памирской популяции приведена в таблице 5.

Создание криобанка семени архара памирской популяции Показатели Доля фракций в общей сумме сперматозоидов, % 67,4 32, Концентрация сперматозоидов после разбавления, млрд. 6,5 2, Подвижность свежеполученных сперматозоидов, % 55+1,3 50+2, Подвижность сперматозоидов после разбавления, % 78+2,0 72+1, Подвижность сперматозоидов после эквилибрации, % 73+2,2 68+3, Подвижность семени после оттаивания, % 40+1,8 33+1, Сохранность акросом после оттаивания, % 62+1,1 57+1, Из таблицы 5 видно, что подвижность эпидидимальных сперматозоидов архара памирской популяции после замораживаниеоттаивания по первой фракции составила 40%, а во второй 33%, при этом сохранность акросом составила 62% и 57% соответственно.

Предложенная нами технология позволила продолжить исследования, начатые нашими предшественниками по отдаленной гибридизации в овцеводстве с целью получения новых селекционных форм животных.

Сохранение генетических ресурсов овец разных пород Главная задача создания криобанка семени баранов-производителей заключается в сохранении разнообразия генофонда овец. В последнее время обозначился выраженный поворот к мясному направлению овцеводства.

Гиссарская и эдильбаевская породы обладают ярко выраженными мясными качествами и отличаются скороспелостью. Уникальная романовская порода овец отличается высоким многоплодием. Нами создан криобанк семени баранов-производителей этих пород, характеристика их представлена в таблице 6.

Показатели Романовская Эдильбаевская Гиссарская свежевзятого, % Из таблицы 6 видно, что подвижность сперматозоидов барановпроизводителей этих пород после замораживания-оттаивания находилась практически на одном уровне с колебаниями от 41 до 44%, а сохранность акросом варьировала в пределах от 65 до 69%.

3.5. ОТДАЛЕННАЯ ГИБРИДИЗАЦИЯ В ЖИВОТНОВОДСТВЕ

3.5.1. Получение межвидовых гибридов яка и В результате эксперимента по искусственному осеменению замороженным эпидидимальным семенем яка было осеменено 15 коров. От 8 из них были получено гибридные потомки: 6 телок и 2 бычка (рис. 4), а 3 коровы абортировали на разных стадиях стельности.

Рис. 4. Гибриды первого поколения - телки, полученные от осеменения коров черно-пестрой породы эпидидимальным семенем яка.

В результате проведенных исследований было показано, что срок плодоношения у коров, осемененных эпидидимальным семенем яка состовляет 255 дней и имеет промежуточный характер между продолжительностью стельности у исходных видов.

3.5.2. Получение межвидовых гибридов сибирского козерога В ходе эксперимента замороженным эпидидимальным семенем сибирского козерога с использованием модифицированных инструментов было однократно осеменено 10 коз зааненской породы, от 8 из них получили гибридное потомство рисунок 5.

Рис. 5. Гибриды F1 козы зааненской породы с сибирским козерогом.

Проведенные исследования по получению гибридов показали, что срок плодоношения у самок, осемененных семенем сибирского козерога соответствовал среднестатистическому продолжительности плодоношения у коз.

Результаты проведенных исследований, показали, что гибридные самцы первого поколения оказались плодовитыми, что является редким случаем при отдаленной гибридизации. Плодовитость гибридных самцов позволить мультитиражировать высокоценных особей, что является основой перспективы создания новых высокопродуктивных популяции.

3.5.3. Получение гибридов снежного барана якутской популяции и Идея создания северных овец с использованием гибридизации с снежным бараном принадлежит профессору Мантейфелю П.А., а 80-годы прошлого столетия Шайдуллиным И.Н. были проведены исследования по получению гибридов с использованием свежеполученного и охлажденного эпидидимального семени снежного барана камчатского подвида.

С целью получения новых селекционных форм приспособленных к условиям севера России, нами было использовано семя снежного барана якутской популяции при осеменении овец романовской породы.

Метод внутритрубного осеменения (рис.6.) овец позволяет визуально контролировать состояния яичников на разных стадиях развития фолликулов, что дает возможность наиболее эффективно использовать уникальный генетический материал.

В отличие от предшественников нами были использованы современные биотехнологические методы. При получении межвидовых гибридов применяли метод внутритрубного осеменения овец, с целью рационального использования генетического материала, который позволяет мультитиражировать уникальные генотипы. Нами было осеменено овцематки - из них одна принесла двух ягнят (рис.7), а одна абортировала двойней на 4-месяце суягности.

Рис. 6. Введение семени в верхушку рога матки.

романовской овцы.

Предложенные нами биотехнологические методы открывают новые перспективы для сохранения и рационального использования генофонда разных видов овец и служат основой при создании новых селекционных форм приспособленных к экстремальным условиям Севера России.

3.5.3. Получение межвидовых гибридов архара Другой вид представляющий интерес для получения новых селекционных форм в овцеводстве - это архар (Ovis ammon). В 1934 году под руководством Бутарина Н.С. с использованием свежеполученного семени архара была начата работа по созданию породы тонкорунных овец мясошерстного направления - Казахский архаромеринос.

В отличие от наших предшественников мы использовали замороженное-оттаянное семя Ovis ammon памирской популяции для отдаленной гибридизации с целью получения новых селекционных форм овец мясного направления для альпийского и субальпиского овцеводства. В качестве материнской породы использовали уникальную отечественную породу - романовских овец, отличающихся высоким многоплодием и полиэстеричностью.

Мы применяли метод внутритрубного осеменения овец, что позволяет рационально использовать генетический материал для получения межвидовых гибридов. Были внутритрубно осеменены 3 овцематки романовской породы - одна из них принесла 1 ягненка (рис.8) и одна абортировала 3 ягнят на 5-месяце.

Рис. 8. Гибрид архара и романовской породы овец самец.

Продолжительность плодоношения у овцематок романовской породы осемененных заморожено-оттаянным эпидидимальным семенем архара памирской популяции составила 150 дней. Тогда как у архара варьирует от 155 до 170 дней.

В результате проведенных исследований впервые была показана возможность получения потомства от архара и домашней овцы замороженнооттаянным эпидидимальным семенем. Предлагаемые подходы открывают новые перспективы для сохранения и рационального использования генетических ресурсов овец и являются основой в созданий новых форм овец мясного направления для альпийского и субальпийского овцеводства.

3.6. Генетические и биологические характеристики гибридов 3.6.1. Генетические характеристики гибридов Нами проведены молекулярно-генетические исследования полиморфизма по тринадцати микросателлитным маркерам крупного рогатого скота в разных популяциях яков.

Оценка генетической консолидированности изучаемых животных по Peatkau, (рис. 9) показала достаточно небольшой внутрипопуляционный разброс в генетической типичности особей, обусловленный региональной принадлежностью.

Рис. 9. Результаты анализа принадлежности яков к конкретной популяции (в %) по 13-ти микросателлитам.

Генетические дистанции различных популяций яков (по Nei, 1983) Анализируя данные таблицы 7 и рисунка 10 можно сказать, что наименьшей генетической удаленностью характеризовались яки алтайской и кабардино-Балкарской популяций (0,3920). Животные, обитающие на Памире, генетически более изолированы от двух предыдущих популяций, что выражается в более высоких значениях, характеризующих генетические расстояния (0,5231).

Рис. 10. Филогенетическое древо различных популяций яков.

Анализ индивидуальных различий изученных яков показал, что изученный массив животных формирует три четкие ветви, объединенные географической общностью происхождения (рис.11).

Рис. 11. Индивидуальное филогенетическое дерево различных популяций яков Результаты этого анализа подтверждают отмеченную выше большую генетическую близость яков Алтая с животными Кабардино-Балкарии, что, по всей видимости, связано с их более близким происхождением.

Полученное гибридное потомство было подвергнуто молекулярногенетическому анализу для изучения аллельных вариантов генов каппаказеина и BLAD, а также обследовано на носительство вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС). У гибридов и их сверстниц были изучены кариотипы и основные биохимические и гематологические показатели.

Ни у одной из гибридных телок (F1) не было обнаружено мутации в гене CD18 в позиции 383АG, обуславливающей в гомозиготном состоянии развитие дефицита лейкоцитарной адгезии или BLAD - синдрома.

Обследованные животные оказались свободными и от носительства ВЛКРС. Кроме того у всех телок был выявлен В-аллель гена каппа-казеина, положительно влияющий на технологические качества молока.

Большую роль в решении ряда теоретических и прикладных вопросов играют цитогенетические исследования. Они получили широкое применение в систематике и при анализе филогенеза млекопитающих (Орлов В.Н. и Булатова Н.Ш.,1983; Дзуев Р.И., 1998). А в последние десятилетия они нашли свое место и в решении прикладных задач. В том числе комплекс мероприятий, связанных с сохранением генетических ресурсов, включает в себя цитогенетическую аттестацию самцов, используемых для создания криобанка.

Хромосомный набор домашнего быка (род Bos) состоит из 29 пар аутосом, образующих по своей величине плавно убывающий ряд, и пары половых хромосом. Аутосомы представлены акроцентрическими хромосомами, X-хромосома - крупный субметацентрик, и Y-хромосома - мелкая хромосома субметацентрической формы (рис.12).

Рис.12. Кариотип быка (B. taurus). Окраска по Романовскому-Гимза.

Кариотип яка по числу и морфологии хромосом идентичен кариотипу крупного рогатого скота (рис. 13): содержит 29 пар акроцентрических аутосом. X- и Y-хромосомы яка по морфологии и размерам сходны с половыми хромосомами у крупного рогатого скота.

Рис. 13. Кариотип самца яка (B. mutus). Окраска по Романовскому-Гимза.

У трех обследованных гибридных телок хромосомный набор содержал 29 пар акроцентриков, образующих по своей величине плавно убывающий ряд, и две крупные метацентрические X-хромосомы (рис.14). Диплоидное число у исследованных гибридов было равно 60. Хромосомы гибридов не имели визуальных отличий от хромосом крупного рогатого скота.

Рис. 14. Кариотип самки (гибрид F1 як х крупный рогатый скот).

Окраска по Романовскому-Гимза.

Сопоставление кариотипов гибридных телок и крупного рогатого скота свидетельствует об их высоком сходстве. Однако, делать вывод о полной идентичности хромосом крупного рогатого скота и яка на основании только одного цитогенетического анализа мы считаем преждевременным.

У обследованных животных не было выявлено каких-либо конституциональных аномалий хромосомного набора, в том числе встречающихся у домашнего крупного рогатого скота различных вариантов робертсоновских транслокаций. Следовательно, как гибридные телки, так и их черно-пестрые матери свободны от наследственных нарушений хромосомного аппарата.

Нами был исследован уровень основных биохимических показателей у гибридов первого поколения и их сверстниц черно-пестрой породы. Материалы биохимического исследования гибридов крупного рогатого скота с яком и контрольных животных приведены в таблице 8.

Сравнительная характеристика биохимических показателей крови крупного рогатого скота и его гибридов с яком По большинству изученных биохимических показателей у гибридных телок и их сверстниц достовернее различия отсутствовали. Однако концентрация альбумина и фосфора в сыворотке крови у гибридных телок была достоверно выше, чем у крупного рогатого скота, что объясняется эффектом гетерозиса.

3.6.2. Характеристика хозяйственно-полезных признаков Результаты наших исследований показали, что гибридные телята по сравнению со своими аналогами по материнской породе имеют существенное преимущество, начиная с месячного возраста, они превосходят аналогов исходной материнской породы (рис.15). Гибридные животные отличаются более высокой интенсивностью роста до девяти месячного возраста. Высокая энергия роста гибридных животных обусловлена эффектом гетерозиса, что является основой для производства высококачественной телятины с низкой себестоимостью.

Рис.15.Сравнительная динамика живой массы гибридов и их сверстников.

Проведенные нами исследования экстерьерных показателей гибридных животных показали, что они превосходят своих сверстниц по таким промерам как глубина груди, обхват груди и косая длина туловища (рис.16).

Рис.16. Промеры экстерьера гибридных первотелок и их сверстниц Нами были проведены исследования молочной продуктивности гибридов первого поколения яка с черно-пестрой породой. Показатели, характеризующие молочную продуктивность, приведены в таблице 9.

Показатели молочной продуктивности гибридных первотелок Из таблицы 9 видно, что молоко гибридных животных обладает высокой питательной ценностью и значительно отличается от материнской породы жирномолочностью и белковомолочночностью.

Изучение молочной продуктивности гибридов позволило, выявить еще одну особенность характерную для гибридных животных - это очень высокий коэффициент постоянства лактации. Его минимальное значение у гибридных первотелок равно 87%, тогда как у чистопородных аналогов этот показатель составил 60%.

3.6.3. Генетические характеристики гибридов сибирского козерога Проведенное нами сопоставление кариотипов гибридных животных и домашней козы свидетельствует об их высоком сходстве. Диплоидное число хромосом у домашней козы равно 60. Кариотип этого вида содержит 29 пар акроцентрических аутосом. X-хромосома является крупным акроцентриком, а Y-хромосома метацентрична и является одной из самых мелких хромосом набора (рис. 17).

Рис. 17. Кариотип домашней козы. Окраска по Романовскому-Гимза.

Кариотип сибирского козерога также содержит 29 пар акроцентрических аутосом. X-хромосома, как и у всех представителей рода Capra, является крупным акроцентриком, а морфология Y-хромосомы из-за ее малых размеров не ясна.

У обследованных гибридных козлят хромосомный набор содержал пар акроцентрических аутосом, образующих по своей величине плавно убывающий ряд, и две половые хромосомы. Фенотипический пол соответствовал генетическому, определенному по половым хромосомам. Диплоидное число у исследованных гибридов было равно 60. На рис.18 и 19 показаны кариотипы гибридных самца и самки первого поколения.

Рис. 18. Кариотип гибридного козла. Окраска по Романовскому-Гимза.

Рис. 19. Кариотип гибридной козы. Окраска по Романовскому-Гимза.

Хромосомы гибридов не имели визуальных отличий от хромосом домашней козы. Точная идентификация хромосом у этих двух видов и их гибридов, за исключением Y-хромосомы, возможна лишь с применение дифференциальной окраски. Результаты проведенных исследований свидетельствуют об отсутствии внешних различий в системе аутосом и половых хромосом у сравниваемых видов и их гибридов. Однако, делать вывод о полной идентичности хромосом домашней козы и сибирского козерога только на основании одного цитогенетического анализа мы считаем преждевременным..

В породах домашних коз, в том числе и зааненской, довольно часто встречаются различные варианты робертсоновских транслокаций. Но ни у одного из обследованных нами животных не было выявлено каких-либо конституциональных аномалий хромосомного набора. Следовательно, использованные нами в опыте животные свободны от наследственных нарушений хромосомного аппарата.

Мы провели сравнительный анализ основных биохимических показателей у гибридов первого поколения сибирского козерога с зааненскими козами и их чистопородных сверстников. Материалы биохимического исследования гибридов и контрольных животных приведены в таблице 10.

Сравнительная характеристика биохимических показателей крови домашней козы скота и ее гибридов с сибирским козерогом Гемоглобин (г/л) 105,97±3,62 153,52±4, Креатинин (мкМ/л) 74,66±18,18 128,0±10,32 53, По большинству изученных биохимических показателей у гибридов и их сверстников достоверные различия отсутствовали. Однако активность АЛТ в сыворотке крови у гибридов была достоверно выше, чем у домашних коз (p0,05). Отмечено также достоверное увеличение содержания гемоглобина у гибридных животных (p0,01), что связано с эффектом гетерозиса.

3.6.4. Характеристика хозяйственно-полезных признаков у гибридов F1 сибирский козерог х домашняя коза Результаты проведенных исследований по получению гибридов сибирского козерога с домашней козой показали, что при рождении гибридные козлята не отличаются по живой массе от домашних. В зависимости от многоплодия они рождались с массой тела 2,5-3,5кг.

Нами были изучены промеры тела у гибридов и их сверстников, которые приведены в рисунке 20.

Установлено, что гибридные животные превосходят своих аналогов по высоте в холке на 24,3%, в крестце на 22,2%, косой длине туловища 11,11%, по обхвату груди и глубине 14,2% и 16,6% соответственно. Гибридные животные отличаются высокой интенсивности роста и развития. Среднесуточный прирост у гибридов составляла 280-320 г.

Рис.20. Промеры гибридов сибирского козерога и сверстников.

3.6.5. Генетические характеристики гибридов диких баранов Род Ovis включает несколько видов, различающихся между собой по диплоидному числу хромосом: у камчатского снежного барана – 2n=52, у снежного барана канадского подвида – 2n=54, у муфлона и домашней овцы – 2n=54, у архара –2n=56 и у уриала – 2n=58.

На рисунке 21 показан кариотип архара (Ovis ammon).

Рис.21. Кариотип архара. Самец. Окраска по Романовскому-Гимза.

Кариотип домашней овцы содержит 27 пар хромосом. Из них 3 пары аутосом метацентрические, а 23 пары акроцентрики. Y-хромосома – метацентрик, X-хромосома – крупный акроцентрик (рис. 22).

Рис.22. Кариотип домашней овцы. Окраска по Романовскому-Гимза.

На основании анализа дифференциальной структуры хромосом овцы считают, что хромосома 1-й пары у O. аries L. соответствует 1 и 3; 2 – 2 и 8;

3 – 5 и 11 парам хромосом B. Taurus L. и C. Hircus L. (Яковлев А.Ф., 1989).

Но проведенный Кленовицким П.М. и др. (2001, 2004) анализ локализации на хромосомах 147 общих для этих видов структурных генов и микросателлитов показал, что у крупного рогатого скота и овец существует 36 общих групп сцепления. Это соответствует 10 межхромосомным перестройкам, связанным с перегруппировкой генетического материала в ходе эволюционного расхождения данных видов.

В литературе по систематике выделяют один вид снежного барана O.

Canadensis. Хромосомный набор O. Canadensis аналогичен кариотипу домашней овцы. Однако известно, что камчатский снежный баран (O.

Nivicola nivicola) отличается от канадского толсторога по числу хромосом:

его кариотип содержит 52 хромосомы, а половые хромосомы идентичны половым хромосомам домашней овцы.

Рис. 23. Метафаза и кариотип снежного барана. Окраска по Романовскому-Гимза.

На рисунке 24 показан кариотип гибрида якутского снежного барана и романовской овцы Диплоидный набор гибридной самки содержит по сравнению с исходными видами промежуточное число хромосом равное 53, включающее 7 метацентриков, из них 3 пары двухплечих хромосом, общие для овцы и снежного барана, и одну непарную метацентрическую хромосому, унаследованную от отца, и 44 акроцентрика, образующих плавно убывающий ряд. Плечи дополнительной метацентрической хромосомы гибрида по размерам близки к хромосомам 6 и 7 пар у домашней овцы. Половые хромосомы гибрида Ovis nivicola lydekkeri сходны с половыми хромосомами домашней овцы.

ВЫВОДЫ

1. Для сохранения генетического материала разных видов животных унифицирована и адаптирована среда для глубокого замораживания эпидидимального семени архара, снежного барана, сибирского козерога, яка и зубра, позволяющая сохранить биологическую полноценность и оплодотворяющую способность сперматозоидов.

криоустойчивостью при замораживании-оттаивании, сравнимой с эякулированным и электроэякулированным семенем. После криоконсервации и оттаивания подвижность сперматозоидов составила у яков 35%, у зубров у козерогов - 55%, снежного барана - 45%, у архаров - 40%, а сохранность акросом - 64, 64, 74, 69 и 62%, соответственно.

3. Создан криобанк семени архара, снежного барана, сибирского козерога, яка, зубра и баранов-производителей романовской, эдильбаевской, гиссарской пород.

4. Усовершенствованный метод искусственного осеменения коз замороженным эпидидимальным семенем сибирского козерога позволяет при однократном осеменении получать 80% суягности.

5. Получено полноценное потомство от внутритрубного осеменения домашней овцы заморожено-оттаянным эпидидимальным семенем архара и снежного барана.

заморожено-оттаянного эпидидимального семени получены гибриды крупного рогатого скота и яка, домашней козы и сибирского козерога, домашней овцы и архара, домашней овцы и снежного барана.

7. Установлен промежуточный характер продолжительности эмбрионального периода онтогенеза у гибридов яка с крупным рогатым скотом составляет 255 дней, у гибридного потомства романовской породы овец снежным бараном - 155 дней и с архаром - 150 дней.

8. На основании анализа полиморфизма 13 микросателлитных локусов установлено, что наиболее близки между собой яки Алтая и Кабардино-Балкарии. Генетическое расстояние составило между ними 0,392, это связано с общим происхождением животных из этих популяций. Между Алтайской и Памирской популяциями генетическая дистанция была равна 0,432, а между Памирской и Кабардино-Балкарской – 0,523.

9. Установлено, что гибриды крупного рогатого скота с яком свободны от носительства BLAD и ВЛКРС, кроме того, все они имеют «желательный» В-аллель гена каппа-казеина. Полученные данные свидетельствуют о том, что эти животные могут быть использованы в дальнейшей селекционной работе.

10. Цитогенетический мониторинг исходных видов и гибридов с использованием прикладных компьютерных программ показал что, исследованные нами виды в пределах родов Bos и Capra характеризуются высокой степенью сходства кариотипов по числу и морфологии хромосом. У всех исследованных животных не было обнаружено конституциональных нарушений в хромосомном наборе.

11. Установлено превосходство гибридов крупного рогатого скота и яка по скорости роста в период от рождения до 6-и месяцев по сравнению аналогами материнской породы. По среднесуточному приросту в месячном возрасте гибриды превосходили своих черно-пестрых сверстников на 260 г, в 6 мес. - на 220 г, в 9 мес. - на 70 г. Аналогичная тенденция прослеживалась и у гибридов сибирского козерога с заанеской породой коз: среднесуточный прирост гибридного молодняка составлял 280-320 г.

12. Показано, что гибриды крупного рогатого скота и яка и зааненской козы и сибирского козерога характеризуются более высокими показателями развития по сравнению с материнскими культурными видами:

у гибридов сибирского козерога с заанеской породой коз высота в холке была на 24,3%, в крестце - на 22,2%, косая длина туловища – на 11,11%, обхват груди – на 14,2% и глубина груди - на 16,6% выше по сравнению с чистопородными козами.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для повышения эффективности сохранения генетических ресурсов животного мира, предлагаем унифицированную криопротективную среду для глубокого замораживания эпидидимального семени яка, зубра, архара, снежного барана и сибирского козерога, сохраняющую высокую биологическую полноценность сперматозоидов.

2. Для сохранения и рационального использования генетического биоразнообразия и дальнейшего его использования с целью получения новых селекционных форм сельскохозяйственных животных, рекомендуем проводить мониторинг на основе молекулярно-генетических и цитогенетических критериев с использованием прикладных компьютерных программ при отборе генетически полноценных особей.

1. Насибов Ш.Н. Генетический потенциал дикой фауны в создании новых селекционных форм животных/ Достижения науки и техники АПК-2010. - №8. С.59-62. / Насибов Ш.Н., Багиров В.А., Кленовицкий П.М., Иолчиев Б.С., Зиновьева Н.А., Воеводин В.А., Амиршоев Ф.С.

2. Насибов Ш.Н. Криосохранение и рациональное использование генетических ресурсов овец и коз./ Насибов Ш.Н., Иолчиев Б.С., Кленовицкий П.М., Багиров В.А., Воеводин В.А., Эрнст Л.К., Зиновьева Н.А., Кононов В.П./ Достижения науки и техники АПК-2010. №9.- С.52-54.

3. Багиров В.А. Сохранение и рациональное использование генетических ресурсов яка (Bos mutus)./ Багиров В.А., Гладырь Е.А., Эрнст Л.К., Кленовицкий П.М., Насибов Ш.Н Зиновьева Н.А./ Сельскохозяйственная биология.- 2009.-№ 2 - С.37-42.

4. Багиров В.А. Сохранение биоразнообразия животного мира и использование отдаленной гибридизации в животноводстве. / Багиров В.А., Эрнст Л.К., Насибов Ш.Н., Кленовицкий П.М., Иолчиев Б.С., Зиновьева Н.А./Достижения науки и техники АПК-2009.-№7. - С.54-56.

5. Кленовицкий П.М. Цитогенетический анализ при отдаленной гибридизации полорогих./ Кленовицкий П.М., Насибов Ш.Н., Багиров В.А., Иолчиев Б.С., Зиновьева Н.А., Эрнст Л.К./ Достижения науки и техники АПК-2009. - №8. - С.41-43.

6. Насибов Ш.Н.Рациональное использование генетических ресурсов и гибридизация в козоводстве. / Насибов Ш.Н., Багиров В.А., Кленовицкий П.М., Иолчиев Б.С., Зиновьева Н.А., Эрнст Л.К., Кононов В.П., Гусев И.В./ Сельскохозяйственная биология. - 2009. - № 6, 37-44.

7. Багиров В.А. Сохранение и рациональное использование генофонда животных. / Багиров В.А., Насибов Ш.Н., Кленовицкий П.М., Лесин С.А., Воеводин В.А., Зиновьева Н.А., Эрнст Л.К., Калашников В.В., Солошенко В.А. / Доклады РАСХН.

– 2009. - №2. – С.37-40.

8. Багиров В.А. Технология криоконсервации семени - метод сохранения и рационального использования разных видов животных. / Багиров В.А., Эрнст Л.К. Насибов Ш.Н./ Ветеринарная патология. 2008., № 2, С. 152-154.

9. Кленовицкий П.М. Цитогенетика животных. /Кленовицкий П.М., Багиров В.А., Зиновьева Н.А., Насибов Ш.Н., Иолчиев Б.С./Москва.-Россельхозакадемия.– 2008.

10. Ельчанинов В.В. Морфофункциональная асимметрия гонад, е роль в физиологии и паталогии функции размножения. / Ельчанинов В.В., Чомаев А.М., Насибов Ш.Н., Гольдина А.А., Юрин М.И./ ВИЖ п. Дубровицы, 2004 г., стр. 11. Кленовицкий П.М. Изучение и сравнительный анализ кариотипов шести видов семейства полорогих./ Кленовицкий П.М., Багиров В.А., Насибов Ш.Н., Иолчиев Б.С./ Материалы 6-й международной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных» Дубровицы - 2006. С.31-35.

12. Багиров В.А.Новые методы сохранения генетических ресурсов редких, уникальных и исчезающих видов животных. /Багиров В.А.,Эрнст Л.К., Насибов Ш.Н./ Актуальные проблемы биологии в животноводстве. Четвертая Международная конференция. г. Боровск, 2006. стр. 224-225.

13. Насибов Ш.Н. Биотехнологические аспекты сохранения и рационального использования генофонда редких, уникальных и исчезающих видов животных.

/Насибов Ш.Н., Багиров В.А.,Эрнст Л.К. /Материалы 6-й международной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных» Дубровицы 2006. С.35-41.

14. Насибов Ш.Н. Криоконсервации семени и его роль в сохранении биоразнообразие животных./ Насибов Ш.Н., Эрнст Л.К., Багиров В.А. / Материалы международной научно-практической конференции "Актуальные проблемы биологии воспроизводства животных" / ВИЖ, 2007. - С. 35-40.

15. Багиров В.А. Биологические особенности гибридов крупного рогатого скота с яком. /Багиров В.А., Кленовицкий П.М., Гладырь Е.А., Гусев И.В., Насибов Ш.Н., Лесин С., Зиновьева Н.А./ Материалы 7-й международной конференции школы «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных: роль нанотехнологии в реализации приоритетных задач биотехнологии» Дубровицы 2008. — С.120-124.

16. Насибов Ш.Н. Сравнительный анализ сперматозоидов разных видов животных. / Насибов Ш.Н., Багиров В.А., Кленовицкий П.М., Лесин С.А., Воеводин В.А., Зиновьева Н.А., Эрнст Л.К. / Материалы международной конференции «Проблемы увеличения производства продуктов животноводства в России и пути их решения». Дубровицы -2008. С.353-356.

17. Насибов Ш.Н. Сравнительная характеристика кариотипов трех видов семейства полорогих (BOVIDAE) / Насибов Ш.Н., Багиров В.А., Кленовицкий П.М., Иолчиев Б.С. /Материалы международной конференции «Проблемы увеличения производства продуктов животноводства в России и пути их решения». - Дубровицы. С. 361-364.

18. Багиров В.А. Сохранение генетических ресурсов овцебыков (Ovibos moschatus).

/Багиров В.А., Насибов Ш.Н., Кленовицкий П.М., Эрнст Л.К/ Материалы международной конференции «Проблемы увеличения производства продуктов животноводства в России и пути их решения».Дубровицы-2008.С. 473-475.

19. Багиров В.А. Новые методы в сохранении Сайгака (Saiga tatarica) / Багиров В.А., Насибов Ш.Н., Арылов Ю.Н., Кленовицкий П.М., Эрнст Л.К. / Материалы международной конференции «Проблемы увеличения производства продуктов животноводства в России и пути их решения». - Дубровицы. - 2008. С.476-478.

20. Насибов Ш.Н. Криобанк семени редких и исчезающих видов животных. / Насибов Ш.Н., Багиров В.А., Лесин С.А., Кленовицкий П.М., Воеводин В.А., Зиновьева Н.А., Эрнст Л.К. /Материалы международной конференции «Проблемы увеличения производства продуктов животноводства в России и пути их решения». Дубровицы. - 2008. С. 479-480.

21. Насибов Ш.Н. Сохранение яков разных популяции. / Багиров В.А., Кленовицкий П.М., Зиновьева Н.А., Эрнст Л.К. /Материалы международной конференции «Проблемы увеличения производства продуктов животноводства в России и пути их решения». Дубровицы.- 2008.С.480-483.

22. Багиров В.А., Биотехнологические методы сохранения и рационального использования генофонда редких и исчезающих видов животных. / Багиров В.А., Насибов Ш.Н., Лесин С.А., Кленовицкий П.М. Эрнст Л.К. / Биофизика живой клетки - 2008. - Т.9.- С.21-24.

23. Багиров В.А. Биологические особенности гибридов домашней козы и сибирского козерога./ Багиров В.А., Кленовицкий П.М., Насибов Ш.Н., Воеводин В.А., Иолчиев Б.С., Гусев И.В., Зиновьева Н.А / 5-я международная научная конференцияшкола Современные достижения и проблемы генетики и биотехнологии сельскохозяйственных животных «Био ТехЖ-2009» Дубровицы. - 2009. - С 38-42.

24. Насибов Ш.Н. Биотехнологических методы в получении новых селекционных форм сельскохозяйственных животных 5-я международная научная конференцияшкола / Насибов Ш.Н., Багиров В.А., Эрнст Л.К., Кленовицкий П.М., Зиновьева Н.А., Иолчиев Б.С./ Современные достижения и проблемы генетики и биотехнологии сельскохозяйственных животных «БиоТехЖ-2009» Дубровицы. С 108-115.

25. Насибов Ш.Н. Перспективы использования отдаленной гибридизации в животноводстве. / Насибов Ш.Н., Багиров В.А., Кленовицкий П.М., Иолчиев Б.С., Зиновьева Н.А., Эрнст Л.К./ Материалы международной научной конференции Достижения в генетике, селекции и воспроизводстве сельскохозяйственных животных. С.-П.. - 2009. Ч.1., С. 33-36.

26. Багиров В.А. Создание криобанка семени редких и исчезающих видов млекопитающих. /Багиров В.А., Кленовицкий П.М., Насибов Ш.Н., Зиновьева Н.А., Эрнст Л.К., Иолчиев Б.С./ Материалы международной научной конференции Достижения в генетике, селекции и воспроизводстве сельскохозяйственных животных. С.-П.. - 2009. - Ч.1. -, С. 37-41.

27. Багиров В.А.Использование сибирского козерога для получения новых селекционных форм в козоводстве. / Багиров В.А., Кленовицкий П.М., Насибов Ш.Н., Эрнст Л.К., Иолчиев Б.С., Зиновьева Н.А., Гусев И.В. /Научное обеспечения повышения эффективности отрасли животноводства в условиях Евро-СевероВостока России. Сборник материалов научной сессии г. Кострома 2-3 июля 28. Багиров В.А.Отдаленная гибридизация в скотоводстве / Багиров В.А., Насибов Ш.Н., Кленовицкий П.М., Эрнст Л.К., Зиновьева Н.А., Иолчиев Б.С., Гладырь Е.А., Гусев И.В. / Научное обеспечения повышения эффективности отрасли животноводства в условиях Евро-Северо-Востока России. Сборник материалов научной сессии г. Кострома 2-3 июля 2009 г. - С. 34-38.

29. Nasibov Sh. N., Animal Gene Pool Preservation and Conservation / Nasibov Sh. N., Bagirov V.A., Klenovitskii P. М., Lesin 5. А., Voevodin V. А., Zinov'eva, N. А. Ernst L. К., Kalashnikov V. V., Soloshenko V. А../ Russian Agricultural Sciences, 2009, Vol.

35, N2, рр. 112 - 115.

30. Nasibov Sh. N., The comparative analysis of Bovidae karyotypes./ Nasibov Sh. N., Klenovitsky Р.М. Zinoveva N.А. / Book of Abstracts of the 59 Annual Meeting оf the ЕААР NEWSLETTER Мау 2009. Issue.

31. Bagirov V.A. Cryoconservation of sperm as а method of saving and rational use of гаге and disappearing kinds of animals.// Bagirov V.A., Ernst L.К.Nasibov Sh. N., Klenovitsky Р.М./ Book of Abstracts of the 59 Annual Meeting of the EAAP NEWSLETTER Мау 2009. Issue.



 
Похожие работы:

«Димитриев Юрий Олегович СОВРЕМЕННОЕ ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ФЛОРЫ УРБАНИЗИРОВАННЫХ ТЕРРИТОРИЙ ЛЕСОСТЕПНОЙ ЗОНЫ (НА ПРИМЕРЕ ГОРОДА УЛЬЯНОВСКА) 03.02.01 – Ботаника 03.02.08 – Экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Сыктывкар – 2011 2 Работа выполнена на кафедре ботаники ГОУ ВПО Ульяновский государственный педагогический университет имени И.Н. Ульянова Научный руководитель : кандидат биологических наук, доцент Масленников Андрей...»

«Синицына Марина Вячеславовна ЭКОЛОГО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ФЛОРЫ МАЛЫХ ИСКУССТВЕННЫХ ВОДОЕМОВ САРАТОВСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.01 – ботаника 03.02.08 – экология (биология) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Саратов – 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского на кафедре ботаники и экологии...»

«Волынкин Антон Валерьевич Видовое разнообразие и экология совок (Insecta, Lepidoptera, Noctuidae (s. l.) Русского Алтая 03.02.08 – экология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Барнаул – 2012 2 Работа выполнена на кафедре экологии, биохимии и биотехнологии биологического факультета ФГБОУ ВПО Алтайский государственный университет Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Соколова Галина Геннадьевна Официальные...»

«СИМОНОВИЧ ЕЛЕНА ИЛЬИНИЧНА ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРИМЕНЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИХ АКТИВИЗАТОРОВ ПОЧВЕННОГО ПЛОДОРОДИЯ 03.02.08 – экология (биология) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Ростов-на-Дону - 2011 2 Работа выполнена на кафедре зоологии и в НИИ Биологии Южного Федерального университета доктор биологических наук, профессор Научный консультант : Казадаев Анатолий Анисимович доктор биологических наук, профессор Официальные оппоненты :...»

«Кармазина Елена Владимировна ЭКОЛОГО-ЦЕНОТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИТИКА МОХООБРАЗНЫХ НАЦИОНАЛЬНОГО ПАРКА РУССКИЙ СЕВЕР (ВОЛОГОДСКАЯ ОБЛАСТЬ) Специальность: 03.02.01 – ботаника Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2013 Работа выполнена на кафедре геоботаники Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова доктор...»

«ПОХИЛЬКО Лидия Олеговна Экологические принципы формирования ассортимента древесных растений в озеленении г. Ростова-на-Дону 03.00.16 – экология АФТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Ростов-на-Дону - 2009 2 Работа выполнена на кафедре ботаники Южного федерального университета Научный руководитель : кандидат биологических наук, доцент Паршин Витольд Георгиевич Официальные оппоненты : доктор биологических наук, профессор Дзыбов...»

«ЛИТТИ Юрий Владимирович Анаэробное окисление аммония и метаногенез в системах аэробной очистки сточных вод с иммобилизацией микроорганизмов 03.02.03 – микробиология 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва - 2012 1 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институт микробиологии им. С. Н. Виноградского Российской академии наук Научный...»

«СУДНИК Светлана Александровна ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕПРОДУКТИВНЫХ СТРАТЕГИЙ КРЕВЕТОК 03.00.16 - Экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Калининград - 2008 Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Калининградский государственный технический университет Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Буруковский Рудольф Николаевич Официальные...»

«Легонькова Ольга Александровна БИОТЕХНОЛОГИЯ УТИЛИЗАЦИИ ОРГАНИЧЕСКИХ ОТХОДОВ ПУТЕМ СОЗДАНИЯ ГИБРИДНЫХ КОМПОЗИТОВ 03.00.23 - Биотехнология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора технических наук Москва 2009 Работа выполнена в проблемной лаборатории полимеров Московского Государственного университета прикладной биотехнологии и на кафедре микробиологии Российского Государственного Аграрного Университета МСХА им. К.А.Тимирязева. Научный консультант - академик...»

«ХАРЬКОВА Ольга Юрьевна ОРНИТОФАУНА ЮГА СРЕДНЕРУССКОЙ ВОЗВЫШЕННОСТИ: ВИДОВОЙ СОСТАВ, ДИНАМИКА И ОХРАНА 03.00.08 – зоология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2007 Диссертация выполнена на кафедре зоологии позвоночных Биологического факультета Московского государственного университета им. М.В.Ломоносова Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Беме Ирина Рюриковна Официальные оппоненты : доктор...»

«Семина Алиса Владимировна МОЛЕКУЛЯРНАЯ ЭВОЛЮЦИЯ И ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОТНОШЕНИЯ В ДВУХ ГРУППАХ РЫБ СЕМЕЙСТВ MUGILIDAE И CYPRINIDAE 03.00.15 – генетика Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владивосток – 2008 2 Работа выполнена в лаборатории генетики Института биологии моря им. А.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской Академии наук Научный руководитель доктор биологических наук, старший научный сотрудник Брыков Владимир...»

«Меркулова Ольга Сергеевна ЛИШАЙНИКИ СТЕПНОЙ ЗОНЫ ЮЖНОГО УРАЛА И ПРИЛЕГАЮЩИХ ТЕРРИТОРИЙ 03.00.24 — Микология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург – 2006 Работа выполнена в Лаборатории биогеографии и мониторинга биоразнообразия Института степи УрО РАН. Научный руководитель : кандидат географических наук Урбанавичюс Геннадий Пранасович Официальные оппоненты : доктор биологических наук, профессор Голубкова Нина Сергеевна...»

«ЛЕВЧЕНКО Тимофей Викторович ФАУНА И ЭКОЛОГИЯ ПЧЕЛ (HYMENOPTERA: APOIDEA) МОСКОВСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.05 – энтомология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва 2010 Работа выполнена на кафедре энтомологии Биологического факультета Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова Научные руководители: доктор биологических наук, профессор Чернышев Владимир Борисович доктор биологических наук Песенко Юрий Андреевич...»

«БУХАРОВА Надежда Владимировна АФИЛЛОФОРОВЫЕ ГРИБЫ ГОСУДАРСТВЕННОГО ПРИРОДНОГО ЗАПОВЕДНИКА БАСТАК 03.02.01 – ботаника АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владивосток – 2013 Работа выполнена в лаборатории низших растений Федерального государственного бюджетного учреждения науки Биолого-почвенного института ДВО РАН Научный руководитель : кандидат биологических наук Булах Евгения Мироновна Научный консультант : кандидат биологических...»

«ЧУДИНОВА Екатерина Сергеевна Гемоглобин как индикатор реакционной способности доноров NO и редуктаза в модельных NO-генерирующих системах in vitro 03.00.04 – биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Москва 2007 Работа выполнена в лаборатории химической физики ферментов отдела кинетики химических и биологических процессов Института проблем химической физики РАН, г.Черноголовка, Московская обл. Научный руководитель : доктор...»

«Волкова Елена Константиновна СИНТЕЗ И ОПТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОЛУПРОВОДНИКОВЫХ НАНОЧАСТИЦ ДЛЯ БИОЛОГИЧЕСКИХ ПРИМЕНЕНИЙ 03.01.02 – Биофизика Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Саратов 2013 2 Работа выполнена в ГОУ ВПО Саратовский государственный университет имени Н.Г.Чернышевского На кафедре Оптики и биофотоники Научный руководитель : доктор физико – математических наук, профессор Кочубей Вячеслав Иванович Официальные...»

«ЗЕНИНА Мария Александровна ОСТРАКОДЫ КАК ИНДИКАТОРЫ СОСТОЯНИЯ И ДИНАМИКИ ВОДНЫХ ЭКОСИСТЕМ (на примере северной части Амурского залива и акватории порта Владивосток) 03.00.18 – гидробиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владивосток - 2009 2 Работа выполнена в Лаборатории экологии бентоса Института биологии моря им. А.В. Жирмунского ДВО РАН Научный руководитель доктор биологических наук, старший научный сотрудник Шорников...»

«Диркс Марина Николаевна ФЛОРА МОЛОДЫХ МОРЕН ЛЕДНИКОВ ЦЕНТРАЛЬНОГО АЛТАЯ 03.00.05 – Ботаника Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Томск – 2006 Работа выполнена в группе динамики и устойчивости экосистем Института мониторинга климатических и экологических систем СО РАН Научный руководитель : доктор биологических наук, Е.Е. Тимошок Официальные оппоненты : доктор биологических наук, А.И. Пяк доктор биологических наук, Н.А. Некратова...»

«ЛУБЯНОВ Александр Александрович МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ РЕГУЛЯТОРА РОСТА РАСТЕНИЙ СТИФУНА И ЕГО ПРОТЕКТОРНЫЕ СВОЙСТВА В УСЛОВИЯХ КАДМИЕВОГО СТРЕССА Специальность 03.00.04 - биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Уфа – 2009 Работа выполнена в Учреждении Российской Академии наук Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН Научный руководитель : кандидат биологических наук Яхин Олег Ильдусович Научный консультант :...»

«Харитонцев Борис Степанович Флорогенез и фитоценогенез на юге Западной Сибири Специальность: 03.00.05 – БОТАНИКА Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Екатеринбург – 2009 Работа выполнена в Институте экологии растений и животных Уральского отделения Российской академии наук Научный консультант – академик РАН, заслуженный деятель науки РФ, доктор биологических наук, профессор Горчаковский Павел Леонидович Официальные оппоненты : доктор...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.