WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

СОМОВА РЕГИНА ШАМИЛЕВНА

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

ДОЛГОЛЕТИЯ И СТАРЕНИЯ

НА МОДЕЛЬНЫХ ЛИНИЯХ Musca domestica L.

И В ПОПУЛЯЦИИ ЧЕЛОВЕКА

03.02.07 – генетика

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Уфа 2013

Работа выполнена в лаборатории физиологической генетики Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук

Научный руководитель:

Беньковская Галина Васильевна Доктор биологических наук, доцент

Официальные оппоненты:

Хуснутдинова Эльза Камилевна Доктор биологических наук, профессор Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН Заведующая лабораторией молекулярной генетики человека Колосова Наталья Гориславовна Доктор биологических наук, профессор, Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт цитологии и генетики СО РАН Заведующая сектором Федеральное государственное бюджетное

Ведущая организация :

учреждение науки Институт биологии Коми научного центра Уральского отделения РАН

Защита диссертации состоится “_24_”_декабря_2013 г. в _12:00_.

на заседании диссертационного совета Д002.133.01 при Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институте биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН по адресу:

450054, Уфа, пр. Октября, 71. ИБГ УНЦ РАН

С диссертацией и авторефератом можно ознакомиться в научной библиотеке Уфимского научного центра РАН по адресу: Уфа, пр. Октября, 71; с электронной версией автореферата – на сайтах ВАК РФ и ИБГ УНЦ РАН: http://ibg.anrb.ru.

Автореферат разослан «_23_» ноября 2013 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, к.б.н. С.М. Бикбулатова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Во второй половине ХХ века сформировался феномен “седеющего населения”. Произошло увеличение численности лиц пожилого и старческого возраста в развитых странах мира, а также и в Российской Федерации. В связи с выраженной тенденцией постарения населения актуальной и социально значимой является задача сохранения физических, психических и интеллектуальных качеств человека в преклонном возрасте. Очевидно, что решение такой сложной задачи неразрывно связано с развитием фундаментальных представлений о причинах и условиях вариабельности продолжительности жизни (ПЖ), о феноменах старения и долгожительства.





ПЖ представляет собой сложный количественный полигенный признак, наследуемость которого составляет около 25%. У организмов разных систематических групп выявлены гены, влияющие на ПЖ, многие из которых являются эволюционно консервативными. Большое внимание уделяется поиску аллельных вариантов генов, предрасполагающих к большей или меньшей ПЖ человека. Однако к настоящему времени полиморфизм генов-кандидатов долголетия исследован в ограниченном числе популяций и полученные результаты неоднозначны. Поэтому важной задачей является исследование полиморфизма генов-кандидатов старения и долголетия в популяциях разных народов мира. В нескольких независимых исследованиях подтверждены ассоциации с долголетием человека для полиморфных локусов генов APOE, FOXO1A, FOXO3A и AKT1 [Franceschi et al., 2007; Lunetta et al., 2007; Lescai et al., 2009; Newman et al., 2010; Boyden et al., 2010; Sebastiani et al., 2010; Deelen et al., 2011].

Существует важный аспект проблемы вариабельности ПЖ, связанный, с поддержанием адаптивного потенциала популяций, их пластичности. Популяции гетерогенны по признаку ПЖ. В них присутствуют субпопуляции особей, для которых характерны разные жизненные стратегии, ассоциированные со снижением или, напротив, повышением ПЖ (другими словами, с ускоренными или замедленными темпами старения). Так, в антагонизме с ПЖ находится высокая плодовитость. Исследование генетического полиморфизма субпопуляций организмов, запрограммированных на короткую и длинную ПЖ представляет значительный интерес. Эту возможность, прежде всего, предоставляют линии модельных организмов, сформированные по признаку разной ПЖ.

В целом общее положение о роли генетического полиморфизма в вариабельности внутривидовой ПЖ и сопряженных фенотипических признаков экспериментально мало обосновано. В исследованиях по генетике старения и долгожительства, проводимых на модельных объектах, этот аспект проблемы практически не изучен. Природный полиморфизм описан для сравнительно небольшого числа генов известного модельного организма - Drosophila melanogaster [Hasson et al., 1998; Balakirev, Ayala, 2003; Palsson et al., 2004]. В отдельных работах была выявлена взаимосвязь природного полиморфизма с количественными признаками, включая ПЖ [De Luca et al., 2003;

Carbone et al., 2006]. На Drosophila melanogaster впервые показана функциональная связь между полиморфизмом гена Lim3, определяющего развитие нервной системы, и ее ПЖ [Rybina, Pasyukova, 2010]. Значительный вклад в решение этой проблемы могут внести исследования на разных модельных организмах, в том числе на комнатной мухе. Комнатная муха Musca domestica L. входит в ряд объектов, на которых исследуются генетические основы резистентности к инсектицидам, фотопериодической регуляции поведенческой активности, механизмы определения пола [Scott et al., 2009].





Небольшие размеры объекта, быстрая смена поколений, удобство содержания, легкая синхронизация развития и получение больших количеств насекомых на нужной стадии компенсируют недостаточность сведений о геноме комнатной мухи В популяциях людей, в отличие от популяций модельных организмов, полиморфизм генов хорошо изучен, но из популяции людей трудно вычленить субпопуляцию, запрограммированную на «меньшую» ПЖ. Одним из подходов, позволяющим выявить генетические особенности субпопуляций человека, предрасположенных к разной ПЖ, может выступать анализ ассоциаций с возрастом аллельных вариантов генов-кандидатов старения и долголетия. Проведение такого рода исследования в популяциях человека как возможно, так и целесообразно.

Цель исследования: анализ генетического полиморфизма в модельных линиях Musca domestica L. с различной продолжительностью жизни и поиск полиморфных локусов, ассоциированных со старением и долголетием в популяции человека.

Задачи исследования:

1) формирование и поддержание линий Musca domestica L. с разной продолжительностью жизни;

2) оценка фенотипических характеристик в инбредных линиях Sh28 и L2 (продолжительность жизни имаго, скорость развития преимагинальной стадии, плодовитость, выживаемость потомства, продолжительность репродуктивного периода, устойчивость к стрессам);

3) поиск полиморфных ДНК-маркеров для исследования генетических основ ПЖ Musca domestica L.;

4) анализ ассоциаций с возрастом в популяции человека полиморфных локусов геновкандидатов старения и долголетия: генов интерлейкина 6 (IL6, –572GC, rs1800796), интерлейкина 10 (IL10, –627СА, rs1800872), субъединицы бета интерлейкина (IL12B, 1159CA, rs3212227), фактора некроза опухолей альфа (TNF, –308GA, rs1800629), янус киназы 1 (JAK1, 32454 CT, rs310216), янус киназы 3 (JAK3, CT, rs3212780), белка сигнальной трансдукции и активации транскрипции 1 (STAT1, 14228AC, rs12693591), белка сигнальной трансдукции и активации транскрипции (STAT3, 19006GC, rs2293152), белка сигнальной трансдукции и активации транскрипции 5А (STAT5А, 1985TC, rs9889323), субъединицы р150 (р50) ядерного транскрипционного фактора «каппа би» (NFKB1, 28081564TA, rs4648110), белка р (TP53, р.72PR, rs1042522), белка Bax (BAX, 919AG, rs1805419), белка Bcl2 (BCL2, 140016CT, rs12454712), траскрипционного фактора FOXO3 (FOXO3, с*35-2764АG, rs3800231), инсулиноподобного фактора роста-1 (IGF1, 17685AG, rs5742632).

Научная новизна. Впервые сформированы линии модельного организма Musca domestica L. с различающейся продолжительностью жизни. Впервые описана ранее не выявленная для имаго комнатной мухи мутация ломкости крыльев (fw- fragile wings) с зависимой от возраста экспрессивностью. Выявлены различия по частоте встречаемости мутации kdr в гене vssc1, определяющей резистентность к инсектицидам, между линиями S, Sh28 и L2 комнатной мухи.

Впервые охарактеризовано распределение частот аллелей и генотипов полиморфных локусов генов-кандидатов старения и долголетия IL6 (–572GC), IL10 (– 627СА), IL12B (1159CA), TNF (–308GA), JAK1 (32454CT), JAK3 (14385CT), STAT1 (14228AC), STAT3 (19006GC), STAT5А (1985TC), NFKB1 (28081564TA), TP53 (р.72PR), BAX (919AG), BCL2 (140016CT), FOXO3 (с*35-2764АG), IGF (17685AG) в разных возрастных группах, включая стариков и долгожителей, в популяции татар. Выявлены ассоциации с возрастом аллельных вариантов этих генов у мужчин и женщин. Определены как генотипы, предрасполагающие к меньшей ПЖ, так и генотипы, способствующие долголетию.

Научно-практическая значимость работы. Сформированы линии модельного организма Musca domestica L. с различающейся ПЖ, которые могут быть использованы для дальнейшего изучения молекулярно-генетических основ старения и долголетия, а также как тест-объекты для скрининга предполагаемых геропротекторов.

Полученные в ходе исследования результаты представляют собой новые знания в области генетики человека, которые дополняют и расширяют представления о роли полиморфизма генов в старении и долголетии. Они могут иметь значение для разработки системы предикторов ПЖ, а также и геропротекторов для разных возрастных групп. Результаты исследования также могут быть использованы при чтении спецкурсов по генетике на факультетах биологического профиля в университетах и других ВУЗах.

Степень достоверности результатов. Все результаты основаны на обширных экспериментальных исследованиях и анализе фактических данных с помощью современных статистических методов.

Апробация результатов работы. Материалы работы представлены в виде устных и постерных докладов на следующих конференциях: VI съезд Российского общества медицинских генетиков (Ростов-на-Дону, 2010), VII Межрегиональное совещание энтомологов Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, 2010), Международная научная конференция студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов»

(Москва, 2011), «European Human Genetics Conference» (Amsterdam, 2011), Международная научная конференция «Фундаментальные проблемы энтомологии в XXI веке»

(Санкт-Петербург, 2011), «Sixth International Symposium on Molecular Insect Science»

(Amsterdam, 2011), Всероссийская школа-конференция молодых ученых (Уфа, 2012), «2nd International conference Genetics of aging and longevity» (Москва, 2012), V всероссийская конференция с международным участием «Пренатальная диагностика и генетический паспорт – основа профилактической медицины в век нанотехнологий» (Новосибирск, 2012), Конференция ВОГиС «Проблемы генетики и селекции» (Новосибирск, 2013), «Genome Instability and Human Diseases» (Санкт-Петербург, 2013).

Конкурсная поддержка исследования. Исследования были поддержаны грантами РГНФ (№ 08-06-00426а), РФФИ (№ 10-04-01614), РФФИ -р_поволжье_а (№ 11ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России»

на 2009-2013 годы (ГК № П325).

Публикации. По основным результатам исследования опубликовано 18 работ, в том числе 6 статей в рецензируемых научных изданиях, 4 из них в журналах, рекомендованных ВАК, 1 статья в зарубежном научном издании.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из 3 глав, заключения, выводов, списка цитированной литературы и приложений. Она изложена на 174 страницах машинописного текста. Список использованной литературы включает 400 источников, в том числе 354 на английском языке.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Имаго комнатной мухи содержали в стандартных условиях по принятой методике (Рославцева, 1978). Линии Short span general (Shgen) и Long span general (Lgen) получали путем массового отбора на раннее и позднее репродуктивное усилие из исходной линии S (Cooper). Линии Sh28 и L2 получали путем индивидуального отбора на короткую и продленную ПЖ имаго в парах, отобранных из массовых линий Shgen и Lgen. В массовых линиях отбор проводили в каждом поколении. Показатели приспособленности (продолжительность развития на преимагинальных стадиях, выживание потомства, плодовитость, длительность репродуктивного периода) и чувствительность к стрессорам разного типа определяли для каждой линии в ряду экспериментов по описанным методикам (Беньковская, 2009, 2010). Для оценки чувствительности к токсическим и температурному стрессам использовали стадию личинок, реакцию на изменение светового режима оценивали на стадии имаго. В качестве стрессоров использовали химические нейротоксиканты, измененную продолжительность светового дня и резкие изменения температуры. ПЖ имаго определяли в ходе повторяющихся через 10 поколений экспериментов в 5-кратной повторности по 40 особей. Ежедневно отмечали количество погибших особей с учетом их пола и фенотипа. Наблюдения продолжали до вымирания всей когорты. Выявление мутации «ломкое крыло» (fw) проводили у особей из линий Shgen, Lgen, Sh28 и L2. Для анализа наследуемости признака самцов с фенотипом fw скрещивали с виргинными самками, у которых данный фенотип не наблюдался. Учет количества имаго с фенотипом fw проводили спустя 35суток с момента выхода из пупариев. Гибридологический анализ для выяснения влияния родительских генотипов на ПЖ потомства проводили в трех независимых сериях реципрокных скрещиваний между имаго из линий Sh28 и L2. Потомство F содержали по стандартной методике, регистрировали длительность развития на преимагинальной стадии, плодовитость самок и ПЖ самок и самцов.

Выделение ДНК из насекомых проводили методом ферментативного протеолиза с протеиназой К [Aljanabi, Martinez, 1997] с фенол-хлороформной экстракцией [Маниатис, 1984; Chomczynski, Sacchi, 1987]. Мутацию kdr гена натриевых каналов Vssc1 выявляли с использованием метода ПЦР-ПДРФ [Rinkevitch et al., 2006]. Для RAPD-ПЦР использовался праймер 5'- GTTTCGCTCC -3' [Сидоренко, Березовская, 2001]. Измерение длины амплифицированных последовательностей проводили в программе GelAnalyzer [Lazar, 2010]. Достоверность различий между группами считали по матрицам попарных генетических расстояний между особями всех групп с использованием теста Мантеля [Mantel, 1967; Mantel, Valand, 1970; Sokal, 1979] в программе Passage 2 [Rosenberg, Anderson, 2011].

В соответствии с требованиями биоэтики было проведено анкетирование жителей Республики Башкортостан в возрасте от 13 до 109 лет, татар по этнической принадлежности, из них 759 мужчин и 924 женщины, в том числе 352 лица пожилого, 601 лицо старческого возраста и 184 долгожителей.

Выборку дифференцировали на отдельные возрастные группы согласно классификации, принятой на 7-й Всесоюзной конференции по проблемам возрастной морфологии, физиологии и биохимии. ДНК из цельной венозной крови человека (8-10 мл) выделяли методом фенольнохлороформной экстракции. Типирование аллельных вариантов генов проводили методом ПЦР или ПЦР-ПДРФ. Подбор условий проведения эксперимента, последовательностей олигонуклеотидных праймеров и рестриктаз осуществляли с помощью электронных баз данных (www.snopper.chip.org, www.ncbi.nlm.gov/SNP) и пакета программ DNASTAR V.5.0. Для статистического анализа результатов исследования использовали программное обеспечение MS Excel 98 (Microsoft), компьютерную программу GENEPOP, а также пакет программ SPSS (V. 13.0). При сравнении групп по частотам генотипов и аллелей применяли точный критерий Фишера или критерий с поправкой Йетса.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Фенотипический полиморфизм в модельных линиях комнатной мухи Модельные лабораторные популяции комнатной мухи, отличающиеся по многим фенотипическим показателям, представляют особый интерес, поскольку позволяют исследовать многие процессы на органном и тканевом уровне у отдельных особей, и в то же время позволяют выявлять различные популяционные закономерности, в том числе и изменения ПЖ [Zwaan et al., 1995; Reed, Bryant, 2000; Matsushima et al., 2007]. Многие корреляции признака ПЖ с другими демографическими характеристиками – репродуктивным потенциалом, жизнеспособностью и скоростью развития потомства, а также формирование адаптивных реакций изучаются именно на модельных популяциях комнатной мухи [Fletcher et al., 1990; Kence, Kence, 1993; Reed, Bryant, 2004].

Линии Sh28 и L2, выделенные как инбредные из полиморфной линии S, достоверно отличаются друг от друга по показателям минимальной и максимальной ПЖ поколения. Линия Sh28 отличается по минимальной и средней ПЖ и от исходной линии (рис. 1), тогда как для линии L2 показано достоверное отличие от исходной линии по максимальной ПЖ.

количество кладок масса пупариев, продолжительность развития на преимагинальной стадии) для двух инбредных линий близки, достоверно только различие по жизнеспособности личинок (р=0.045) – в линии Sh28 жизнеспособность личинок снижена.

для линии с сокращенной ПЖ характерен частый (2 суток) воспроизводящийся ритм репродуктивных циклов, тогда как для линии с увеличенной ПЖ такой ритм не зарегистрирован, а сроки массовой откладки яиц существенно смещены (рис. 2). Эти данные свидетельствуют о дифференциации репродуктивных стратегий для особей с разной ПЖ.

Для характеристики линий с разной ПЖ исследовали также чувствительность личинок к стрессорным воздействиям, которую расценивали как сложный феногенетический признак. Оценив чувствительность личинок конца III стадии развития к токсикантам из 3-х различных химических классов – фипронилу (фенилпиразолы), пиримифосметилу (фосфорорганические соединения), дельтаметрину (пиретроиды), мы установили, что для личинок из линии L2 показатель, характеризующий чувствительность данной линии, СК50 (концентрация, смертельная для 50% обработанных особей) выше, чем для личинок из линии Sh28 (табл. 1). Различия между показателями чувствительности значимы на уровне 0.05 для дельтаметрина, 0.01 для пиримифосметила и на уровне 0.001 для фипронила. Таким образом, для линии с большей ПЖ показана более высокая устойчивость личинок к токсическому стрессу.

Таблица 1 – Чувствительность к инсектицидам личинок комнатной мухи (III стадия) из линий с различающейся ПЖ Sh 28 0.000123±0.00002 0.001286±0.00028 0.001005±0. * - д.в. – действующее вещество Значения полулетального периода экспозиции при высокой (+65°C) температуре также ниже для особей из линий с пониженной ПЖ: для личинок L2 этот период составляет не менее 6.5 минут, тогда как для личинок Sh28 – не более 3 минут. Эти различия достоверны на уровне значимости 0.01. По всей видимости, для особей из линии с увеличенной ПЖ характерна более высокая устойчивость к температурному стрессу.

Оценка чувствительности имаго к изменению светового режима показала, что при постоянном содержании в темноте ПЖ в обеих линиях увеличилась достоверно, но в разной степени: на 8% в линии Sh28 и на 22 % в линии L2. Использование в наших экспериментах ингибитора рецепторов гамма-аминомасляной кислоты типа А (GABA-RA) фипронила позволило продемонстрировать зависимость ПЖ имаго комнатной мухи от участия механизмов, опосредующих влияние фотопериода.

Одна из проблем, связанных с изучением генетических основ признака ПЖ – вклад генотипа в формирование и проявление признака у потомства. В наших экспериментах была проведена оценка ПЖ самок и самцов в 30 парах, выделенных из массовых линий с коротким и длительным периодом жизни имаго, а также самок и самцов их потомства F 1. Отмечена достаточно высокая степень корреляции ПЖ потомства с ПЖ самок родительского поколения у короткоживущих особей (коэффициент корреляции Пирсона, r, для самок составляет 0.77, для самцов 0.78 при p0.05). Связь ПЖ самцов родительского поколения и потомства менее выражена (r для самок – 0.48, для самцов – 0.54 при p 0.05). В линиях долгоживущих особей также отмечена менее выраженная зависимость ПЖ потомства от ПЖ родительского поколения, хотя коэффициент корреляции для самок родительского поколения и потомства составлял не менее 0.56.

В серии реципрокных скрещиваний между имаго из инбредных линий мы установили, что основные признаки, по которым шел отбор, проявляются у гибридного потомства с определенными изменениями (табл. 2.).

Таблица 2 – Продолжительность жизни и плодовитость потомства в первом поколении реципрокных скрещиваний Примечание: * - достоверное отличие от материнской линии, р 0. У гибридного потомства в варианте скрещивания Sh28L2 ПЖ сократилась в среднем на 52%, тогда как в варианте скрещивания L2Sh28 отмечено увеличение в 1,8 раза. Расчеты фенотипической корреляции для значений ПЖ дали значения 2 р = 0.712 для линии Sh28 и 0.608 для линии L2. Коэффициент наследуемости признака ПЖ (h2) составил 0.208 (р 0.01). Результаты свидетельствуют о наличии ассортативности спаривания, что выражается в снижении плодовитости при скрещиваниях в варианте Sh28L2 и о повышении уровня вариабельности всех регистрируемых признаков в варианте скрещивания 28 и вариабельности ПЖ в варианте Sh28L2. Сопоставление результатов скрещивания с картиной четкого выделения двух пиков смертности как для самок, так и для самцов в исходной линии (рис. 3) позволяет нам утверждать, что в исходной полиморфной популяции присутствует не гетерогенная смесь фенотипов, а генетически обособленные вследствие ассортативности спаривания и, вероятно, наличия других видов репродуктивной изоляции группы особей, различающиеся как по репродуктивным стратегиям, так и по ПЖ.

смертность, % Рисунок 3. Динамика смертности в исходной линии (S, F 45).

Обнаружение новой, сцепленной с полом мутации ломкости крыльев (fw) у Musca domestica L. с зависимой от возраста экспрессивностью Спустя 14-20 суток с момента выхода имаго из пупариев мы неоднократно отмечали в лабораторных линиях комнатной мухи проявление ломкости крыловой пластинки (рис. 4). После скрещивания отобранных по наличию этого фенотипа особей, все из которых оказались самцами, с виргинными самками из исходной линии, мы наблюдали в потомстве разделение самцов на две равновеликие группы – с проявлением фенотипа «ломкого крыла» и с нормальными крыльями. Далее все полученное потомство содержали как отдельную линию, периодически повторяя скрещивания внутри неё. Результаты последующих скрещиваний внутри полученного потомства представлены в таблице 3.

Таблица 3 – Расщепление признаков при скрещиваниях брат/сестра Сохранение во всех последующих поколениях практически равных долей самцов с фенотипом fw и самцов с нормальными крыльями, а также единичные случаи встречаемости мутантного фенотипа у самок можно рассматривать как подтверждение предположения о сцепленности мутации fw с Х-хромосомой и летальном эффекте мутантного аллеля в гомозиготном состоянии, что возможно только у самок.

RAPD-анализ генотипических различий линий комнатной мухи с разной Проанализирована генетическая структура исходной линии комнатной мухи, а также линий, различающихся по ПЖ имаго с помощью RAPD-анализа. Для исследования был выбран праймер LD5. В итоге выявлено четыре полиморфных локуса с длинами фрагментов 1155, 475, 203 и 422 п.о. (рис. 5).

Мы провели попарные сравнения получившихся результатов посредством программы PopGene. Среднее межгрупповое разнообразие (Gst) по линиям составило 0.0876, в то время как по половой принадлежности 0.036. Данный результат показывает значительную дифференциацию между линиями в частотах RAPD-локусов. Таким образом, мы можем сделать вывод о том, что линии с различающейся ПЖ генотипически значительно отличаются от исходной и друг от друга по нескольким полиморфным RAPD-локусам.

Рисунок 5. RAPD – анализ полиморфизма ДНК линий комнатной мухи с разной продолжительностью жизни А - частоты встречаемости RAPD-маркеров ДНК имаго комнатной мухи;

Б - электрофореграмма RAPD-маркеров ДНК имаго комнатной мухи.

Полиморфизм по наличию мутации kdr в линиях комнатной мухи с разной Основной задачей нашего исследования линий комнатной мухи является проверка предположения о генотипических различиях линий M. domestica L. с разной ПЖ.

Одним из индикаторов генотипических различий между линиями комнатной мухи может служить динамика частот встречаемости мутантных генотипов. В качестве маркера была выбран полиморфизм L1014F (аллель R – 1014F, аллель S – 1014L), который возник на основе мутации kdr в гене натриевых каналов Vssc1. Частоту встречаемости генотипов определяли с помощью ПЦР в выборках из 20 имаго каждой линии S, L2 и Sh28. Согласно полученным результатам, в линиях S, L2 и Sh28 обнаруживаются носители генотипов как гетерозиготных (RS), так и гомозиготных (RR) по мутации kdr ( рис. 6).

Частоты встречаемости генотипов достоверно различаются как между каждой инбредной и исходной линиями (р0.001), так и между обеими инбредными линиями (р0.01). Генотип SS отсутствует у всех представленных особей. Частота генотипа RS увеличивается, а частота генотипа RR, напротив, уменьшается в линиях Sh28 и L2 по сравнению с исходной S линией. Если в линии L2 генотип RR все-таки имеется у большинства особей, то в линии Sh28 доминирует генотип RS, то есть баланс генотипов в линии L2 ближе к тому, что наблюдается в исходной линии. Резкое отличие структуры линии Sh 28 может иллюстрировать существующие между инбредными линиями генотипические различия.

Анализ ассоциаций с возрастом полиморфных локусов генов-кандидатов Для исследования в популяции человека в качестве маркеров были выбраны полиморфные локусы генов-кандидатов старения и долголетия: IL6, IL10, IL12B, TNF, JAK1, JAK3, STAT1, STAT3, STAT5А, NFKB1, TP53, BAX, BCL2, FOXO3, IGF1. Эти гены кодируют белки, которые принимают участие в регуляции многих процессов, как на клеточном, так и на организменном уровне, и тем самым контролируют процессы развития, роста и устойчивости к стрессу.

Анализ ассоциаций частот генотипов с возрастом осуществляли с использованием разных подходов. Было проведено сравнение возрастных групп по частотам генотипов и аллелей и бинарный логистический регрессионный анализ взаимосвязи возраста и частоты генотипа. Подразделение выборки на возрастные группы было основано на схеме возрастной периодизации онтогенеза человека, учитывающей особенности морфо-функциональных изменений организма в разном возрасте. Применение этого подхода дало возможность наблюдения за изменениями в популяции представленности генотипов и аллелей в разные возрастные периоды. Модель логистической регрессии позволяет оценивать вероятность наблюдения генотипа как функции возраста, допуская, что частота генотипа, который влияет на индивидуальную выживаемость, может изменяться в генотипическом пуле с повышением возраста. Анализ материалов исследования с помощью методов построения ROC-кривой и логистической регрессии предоставляет возможности поиска возрастных диапазонов, в пределах которых происходят изменения в распределении частот генотипов.

Основные результаты, полученные нами с использованием этого подхода отражены в таблице 4. Принимая во внимание диапазоны лет, в пределах которых наблюдается ассоциация частот генотипов с возрастом, и величину показателя отношения шансов (OR1 или OR1), можно выделить отдельные группы генотипов. Одну из них составляют генотипы, которые ассоциированы с возрастом в диапазоне лет, не превышающих старческого возраста (75 лет) или включающих начало старческого периода (75-82 года). В выборке мужчин это генотипы IL6(-572)*G/*C (OR=0.978), IL6(-572)*G/*G (OR=1.023), IL10(-627)*C/*C (OR=0.956), IL10(-627)*C/*A (OR=1.034), JAK1(32454)*Т/*Т (OR=0.818), JAK1(32454)*C/*Т (OR=1.201), TP53(72)*P/*R (OR=0.953), TP53(72)*P/*P (OR=1.028), BCL2(140016)*C/*C JAK1(32454)*Т/*Т (OR=0.928), JAK1(32454)*C/*Т (OR=1.098), JAK1(32454)*C/*С (OR=1.184), JAK3(14385)*Т/*С (OR=1.024), JAK3(14385)*C/*С (OR=0.802), STAT5А(1985)*Т/*Т (OR=0.965), STAT5А(1985)*Т/*С (OR=1.044), TP53(72)*P/*R (OR=0.891), TP53(72)*P/*P (OR=0.889), TP53(72)*R/*R (OR=1.094). Можно полагать, что обозначенные генотипы являются маркерами выживаемости главным образом в пожилом возрасте. Те из них, которые «отрицательно» (OR1) ассоциированы с возрастом у мужчин ((IL6(-572)*G/*C, IL10(-627)*C/*C, JAK1(32454)*Т/*Т, STAT5А(1985)*Т/*Т, TP53(72)*P/*R, TP53(72)*P/*P)), характеризуют часть популяции с потенциально меньшей ПЖ, в основе которой иная популяционная стратегия, чем долгожительство.

Следующая группа генотипов включает те, которые отрицательно и/или положительно ассоциированы с возрастом на протяжении главным образом старческого возрастного периода (75-89 лет) и периода долгожительства (90 и более лет), т.е. маркируют шансы выживания у тех, кто достиг старческого возраста.

Таблица 4 - Основные результаты анализа ассоциаций с возрастом полиморфных локусов генов-кандидатов старения и долголетия в популяции татар (–572GC) (1159CA) (32454CT) (1985TC) Продолжение таблицы (28081564TA) (р.72PR) (919AG) (140016CT) Отрицательно ассоциированы с возрастом в указанном диапазоне лет в выборке мужчин генотипы STAT3(19006)*G/*C, STAT5А(1985)*Т/*Т, NFKB1(28081564)*T/*T и BAX(919)*G/*G, BCL2(140016)*C/*C и IGF1(17685)*A/*G. В этот же кластер входят генотипы положительно ассоциированные с возрастом в выборках мужчин ((JAK1(32454)*С/*Т, TP53(72)*R/*R, IGF1(17685)*A/*G)) (NFKB1(28081564)*T/*А, NFKB1(28081564)*А/*А, BAX(919)*А/*А, BCL2(140016)*Т/*Т, IGF1(17685)*G/*G)). Таким образом, выявлены генотипы, вероятность представленности которых в популяции татар среди долгожителей понижена или повышена. Шансы дожития до 100 и более лет повышены у женщин старческого возраста с генотипами BCL2(140016)*T/*T, BAX(919)*A/*A. Также выявлены положительные ассоциации с возрастом в широком диапазоне лет генотипов FOXO3(с*35G/*G и BAX(919)*А/*А (18-98 лет), STAT3(19006)*C/*C (25-98 лет) у мужчин, генотипа TNF(-308)*G/*A (23-95 лет) у женщин. Эти генотипы можно расценивать как предрасполагающие в популяции татар к долгожительству.

Сведения о функциональной значимости аллельных вариантов анализируемых генов ограничены и противоречивы, поэтому обоснование наблюдаемых ассоциаций частот генотипов с возрастом затруднительно. Однако согласно литературным данным, полиморфизм целого ряда генов, и, в частности, генов цитокинов, TP53, NFKB и других из анализируемых в данном исследовании, может вносить вклад в заболеваемость и смертность людей.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Как следует из полученных нами результатов, вариабельность продолжительности жизни в модельных линиях комнатной мухи не является случайной. Сосуществование в исходной популяции генетически обособленных групп, различающихся по ПЖ, может объясняться плейотропными эффектами главных генов, контролирующих скорость и успех онтогенеза, трансформации в ходе метаморфоза, выбор репродуктивной стратегии. Популяционные механизмы, участвующие в реализации жизненной программы, исследуются на модельных популяциях, поскольку человек не может быть объектом подобных экспериментов. Однако универсальный характер проявления действия плейотропных генов, выражающийся в изменении интегральных показателей, и в первую очередь – продолжительности жизни, в равной мере может наблюдаться и в популяциях человека. Наблюдаемое нами в линии Sh28 сокращение ПЖ сопряжено с изменением репродуктивной стратегии – укорочением и учащением репродуктивного цикла, что сопровождается изменениями и других показателей, в том числе устойчивости к стрессам. Сопоставление динамики частот генотипов, ассоциированных с ПЖ в популяциях человека, с процессами, наблюдаемыми при дивергенции по признаку ПЖ в модельных популяциях комнатной мухи, позволит подойти к пониманию роли генетического полиморфизма в определении ПЖ.

ВЫВОДЫ

1. Сформированные по признаку продолжительности жизни модельные линии комнатной мухи Musca domestica L. Sh28 и L2 достоверно отличаются как по феногенетическим характеристикам (показателям успешности развития, репродуктивным стратегиям и чувствительности к стрессовым воздействиям), так и по частотам полиморфных RAPD-локусов и мутации kdr в гене vssc1.

2. Для особей из линии с сокращенной продолжительностью жизни Sh28 характерен ускоренный ритм репродуктивных циклов, тесная связь продолжительности жизни и репродуктивного периода, а также высокий уровень корреляции продолжительности жизни самок с продолжительностью жизни потомства, что позволяет считать материнское влияние важным фактором вариабельности продолжительности жизни.

3. Описана ранее не выявленная для имаго комнатной мухи мутация ломкости крыльев с зависимой от возраста экспрессивностью. Гибридологический анализ мутации позволяет сделать вывод о сцепленности мутации с Х- хромосомой и о летальном эффекте мутантного аллеля в гомозиготном состоянии.

4. Выявлены генотипы, относительные шансы представленности которых понижены в старческом возрасте в популяции человека: генотипы IL6(-572)*G/*C, IL10(среди мужчин, генотипы 627)*C/*C, JAK1(32454)*Т/*Т, TP53(72)*P/*R JAK1(32454)*Т/*Т, JAK3(14385)*C/*С, STAT5А(1985)*Т/*Т, TP53(72)*P/*R, TP53(72)*P/*P среди женщин в популяции татар. Можно полагать, что обозначенные генотипы являются маркерами выживаемости главным образом в пожилом возрасте и характеризуют часть популяции с потенциально меньшей ПЖ, в основе которой иная популяционная стратегия, чем долгожительство.

5. Обнаружены генотипы, которые можно расценивать как маркеры выживания в популяции татар у индивидов, достигших старческого возраста. В старческом возрасте к большей продолжительности жизни предрасполагают среди мужчин генотипы JAK1(32454)*С/*Т, TP53(72)*R/*R, и IGF1(17685)*A/*G, среди женщин генотипы NFKB1(28081564)*T/*А, NFKB1(28081564)*А/*А, BAX(919)*А/*А, BCL2(140016)*Т/*Т, IGF1(17685)*G/*G. Шансы дожития до 100 и более лет повышены у женщин старческого возраста с генотипами BCL2(140016)*T/*T, BAX(919)*A/*A.

6. Выявлены генотипы, предрасполагающие в популяции татар к долгожительству:

генотипы FOXO3(с*35-2764)*G/*G, BAX(919)*А/*А и STAT3(19006)*C/*C среди мужчин, генотипы TNF(-308)*G/*A среди женщин.

ПУБЛИКАЦИИ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Мустафина, О.Е. Полиморфизм -627СА гена интерлейкина 10: анализ ассоциаций с сердечно-сосудистыми заболеваниями / О.Е. Мустафина, Я.Р. Тимашева, Г.Х., Тулякова, Т.Р.

Насибуллин, И.А. Туктарова, В.В. Паук, Р.Ш. Мустафина (Сомова), А.А. Сальманов, А.Н.

Закирова // Медицинская генетика. - 2010. - №5. - С. 12-17.

Мустафина, О.Е. Полиморфизм генов цитокинов и долголетие человека / О.Е. Мустафина, В.В. Паук, Р.Ш. Мустафина (Сомова), И.А. Туктарова, Т.Р. Насибуллин // Успехи геронтологии. - 2010. - Т.23. - №3. - С. 339-345.

Беньковская, Г.В. Выявление новой сцепленной с полом мутации ломкости крыльев (FW) у Musca domestica L. с зависимой от возраста экспрессивностью / Г.В. Беньковская, Р.Ш.

Мустафина (Сомова) // Генетика. - 2012. - Т. 48. - №2. - С. 266-269.

Беньковская, Г.В. Влияние светового режима на биохимические показатели развития стресс-реакции в линиях Musca domestica L. с различной продолжительностью жизни / Г.В.

Беньковская, Р.Ш. Мустафина (Сомова) // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. Т. 48. - № 5. - С. 433-438.

Беньковская, Г.В. Варианты реализации жизненной программы: модельные линии Musca domestica L. с различной продолжительностью жизни / Г.В. Беньковская, Ю.М. Никоноров, Р.Ш. Сомова, М.Б. Удалов // Прикладная энтомология. - 2011. - Т. 2. - № 6. - С. 21-25.

6. Benkovskaya, G.V. Life span and reproduction in Musca domestica L.: nuclear and mitochondrial DNA ratio in house fly strains with different displacement of reproductive efforts / G.V.

Benkovskaya, Yu.M. Nikonorov, R.Sh. Mustafina (Somova) // Resistant Pest Management Newsletter. - 2011. - V. 20. - No. 2. - P. 48 - 50.

Мустафина, О.Е. Полиморфизм генов-кандидатов продолжительности жизни в популяции татар / О.Е. Мустафина, В.В. Эрдман, Т.Р. Насибуллин, Р.Ш. Мустафина (Сомова), И.А.

Туктарова //Материалы VI съезда Российского общества медицинских генетиков. Ростов-на –Дону, 14-18 мая 2010 г. - Мед. Генетика.- 2010.- №2.- С. 122.

Беньковская, Г.В. Реакция на действие антагониста GABA (A)-рецептора фипронила и смену светового режима в линиях комнатной мухи, различающихся по продолжительности жизни / Г.В. Беньковская, Р.Ш. Мустафина (Сомова) // Материалы VII Межрегионального совещания энтомологов Сибири и Дальнего Востока. Новосибирск, 4-7 октября 2010 г. – Новосибирск, 2010. - С. 244 - 246.

Мустафина (Сомова), Р.Ш. Полиморфизм гена STAT3 и долголетие / Р.Ш. Мустафина (Сомова) //Материалы международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов».-2011. - С.83 (http://lomonosov-msu.ru/archive/Lomonosov_2011/ structure_2_1392.htm).

10. Erdman, V.. Role of some apoptosis genes polymorphism in aging and longevity / V. Erdman, I. Tuktarova, T. Nasibullin, R. Mustafina, O Mustafina // European Human Genetics Conference. – Amsterdam, 2011. - P. 341.

Беньковская, Г.В. Влияние светового режима на биохимические показатели развития 11.

стресс-реакции в линиях Musca domestica L. с различной продолжительностью жизни/ Г.В.

Беньковская, Р.Ш. Мустафина (Сомова) // Материалы Международной научной конференции «Фундаментальные проблемы энтомологии в XXI веке». Санкт-Петербург, 2011. - С. 20.

12. Benkovskaya, G.V. Life span and reproduction in Musca domestica L.: nuclear and mitochondrial DNA ratio in house fly strains with different displacement of reproductive efforts / G.V.

Benkovskaya, Y.M. Nikonorov, R.S. Mustafina //Sixth International Symposium on Molecular Insect Science. 2-5 October, 2011, Amsterdam, The Netherlands. – P. 2.11.

Сомова, Р.Ш. Полиморфизм генов JAK-STAT сигнального пути в популяции татар/ Р.Ш.

13.

Сомова / В сб: Актуальные проблемы генетики человека, животных, растений и микроорганизмов. Материалы Всероссийской школы-конференции молодых ученых. 24-26 сентября 2012 г. - Уфа, 2012. - С.152-155.

14. Mustafina, O. Polymorphism of genes and human longevity: association studies deliver // 2nd International conference Genetics of aging and longevity. / O. Mustafina, V. Erdman, R. Somova, T. Nasibullin, I. Tuktarova. - Moskow, 2012. - P. 63.

Эрдман, В.В. Исследование возрастной динамики частот генотипов по полиморфным 15.

маркерам генов-кандидатов старения и долголетия / В.В. Эрдман, Т.Р. Насибуллин, И.А.

Туктарова, Р.Ш. Сомова, О.Е. Мустафина // V всероссийская конференция с международным участием «Пренатальная диагностика и генетический паспорт – основа профилактической медицины в век нанотехнологий». – Новосибирск, 2012. - С.125.

16. Benkovskaya, G.V. Models of life programme realization: strains of Musca domestica L. with different life span / G.V. Benkovskaya, Y.M. Nikonorov, R.Sh. Somova, M.B. Udalov // 2nd International Conference Genetics of aging and longevity. Moscow, April 22-25, 2012.

Abstract

book. Moscow, 2012. - P. 10-11.

Эрдман, В.В. Продолжительность жизни и генетический полиморфизм / В.В. Эрдман, 17.

Т.Р. Насибуллин, И.А. Туктарова, Р.Ш. Сомова, Д.Д. Каримов, О.Е. Мустафина // Конференция ВОГиС «Проблемы генетики и селекции». - Новосибирск, 1 – 7 июля 2013 г.

http://conf.nsc.ru/files/conferences/vogis2013/.pdf Мустафина (Сомова), Р.Ш. Исследование молекулярно-генетических основ продолжительности жизни на модельном объекте Musca domestica L.Мустафина (Сомова) Р.Ш., Беньковская Г.В. // Конференция ВОГиС «Проблемы генетики и селекции». - Новосибирск, 1 – июля 2013 г. http://conf.nsc.ru/files/conferences/vogis2013/.pdf

 
Похожие работы:

«САДЕКОВА ОЛЬГА НИКОЛАЕВНА Генетические маркеры привычного невынашивания беременности I триместра 14.01.01 - Акушерство и гинекология 03.01.04 – Биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва 2012 Работа выполнена на кафедре биохимии и молекулярной медицины Факультета фундаментальной медицины ФГБОУ ВПО Московский государственный университет имени М.В.Ломоносова Научные руководители: ООО Клиника на Петровке доктор медицинских...»

«Волкова Елена Константиновна СИНТЕЗ И ОПТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОЛУПРОВОДНИКОВЫХ НАНОЧАСТИЦ ДЛЯ БИОЛОГИЧЕСКИХ ПРИМЕНЕНИЙ 03.01.02 – Биофизика Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Саратов 2013 2 Работа выполнена в ГОУ ВПО Саратовский государственный университет имени Н.Г.Чернышевского На кафедре Оптики и биофотоники Научный руководитель : доктор физико – математических наук, профессор Кочубей Вячеслав Иванович Официальные...»

«Горовцов Андрей Владимирович ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ СТРУКТУРА БАКТЕРИОЦЕНОЗОВ УРБОПОЧВ Г. РОСТОВА-НА-ДОНУ 03.02.08 – экология (биологические наук и) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Ростов-на-Дону – 2013 2 Работа выполнена на кафедре биохимии и микробиологии ФГАОУ ВПО Южный федеральный университет доктор биологических наук, профессор Научный руководитель : Внуков Валерий Валентинович Официальные оппоненты : Киреева Валерия Васильевна,...»

«САВИНОВ Иван Алексеевич Система и эволюция порядка Celastrales на основе данных сравнительной морфологии 03.02.01 – Ботаника Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Санкт-Петербург - 2011 2 Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина РАН и в ГОУ ВПО Московский государственный университет прикладной биотехнологии Официальные оппоненты : доктор биологических наук, профессор,...»

«Андреева Татьяна Анатольевна ИНТЕГРАЛЬНАЯ ОЦЕНКА ВОЗДЕЙСТВИЯ НЕФТЯНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ НА ПАРАМЕТРЫ ХИМИЧЕСКОГО И БИОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ПОЧВ ТАЕЖНОЙ ЗОНЫ ЗАПАДНОЙ СИБИРИ 03.00.27 – почвоведение Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Томск – 2005 1 Работа выполнена на кафедре почвоведения и экологии почв Томского государственного университета Научный руководитель : доктор биологических наук Середина Валентина Петровна Официальные...»

«Калмыкова Ольга Геннадьевна ЗАКОНОМЕРНОСТИ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ БУРТИНСКОЙ СТЕПИ (ГОСЗАПОВЕДНИК ОРЕНБУРГСКИЙ) 03.00.16 – Экология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург – 2008 Работа выполнена в лаборатории биогеографии и мониторинга биоразнообразия Института степи Уральского отделения Российской академии наук Научный руководитель : доктор биологических наук Сафронова Ирина Николаевна Официальные...»

«Тюрин Владимир Анатольевич МАРАЛ (CERVUS ELAPHUS SIBIRICUS SEVERTZOV, 1873) В ВОСТОЧНОМ САЯНЕ (РАСПРОСТРАНЕНИЕ, ЭКОЛОГИЯ, ОПТИМИЗАЦИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ) 03.02.08 – экология (биологические наук и) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Улан-Удэ – 2014 Работа выполнена на кафедре прикладной экологии и ресурсоведения Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего профессионального образования Сибирский...»

«Степанова Нина Юрьевна ФЛОРА КУМО-МАНЫЧСКОЙ ВПАДИНЫ 03.02.01 – ботаника Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Москва – 2012 Работа выполнена в лаборатории Гербарий Федерального государственного бюджетного учреждения науки Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина РАН Научный руководитель : ИГНАТОВ МИХАИЛ...»

«Волынкин Антон Валерьевич Видовое разнообразие и экология совок (Insecta, Lepidoptera, Noctuidae (s. l.) Русского Алтая 03.02.08 – экология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Барнаул – 2012 2 Работа выполнена на кафедре экологии, биохимии и биотехнологии биологического факультета ФГБОУ ВПО Алтайский государственный университет Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Соколова Галина Геннадьевна Официальные...»

«КАШЕВАРОВ Глеб Сергеевич СТРУКТУРА И ПРОСТРАНСТВЕННО-ВРЕМЕННАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ДРИФТА БЕСПОЗВОНОЧНЫХ РЕК МЁША, КАЗАНКА И НОКСА (РЕСПУБЛИКА ТАТАРСТАН) Специальность 03.02.08 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань – 2013 Работа выполнена на кафедре биоресурсов и аквакультуры (ранее кафедра зоологии позвоночных) Института фундаментальной медицины и биологии ФГАОУ ВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет Научный...»

«ХРИТАНКОВА ИННА ВЛАДИМИРОВНА РАЗРАБОТКА МОДЕЛИ TDP43-ПРОТЕИНОПАТИИ И ЕЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ МЕХАНИЗМА ДЕЙСТВИЯ НЕЙРОПРОТЕКТОРНЫХ ПРЕПАРАТОВ 14.03.03 – Патологическая физиология 03.01.04 – Биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук МОСКВА – 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институт физиологически активных веществ РАН и в Федеральном государственном бюджетном учреждении...»

«Курбанова Патимат Магомедкадиевна ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ ЯРОВОЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ ПО ЭФФЕКТИВНОЙ ВОЗРАСТНОЙ УСТОЙЧИВОСТИ К ЛИСТОВОЙ РЖАВЧИНЕ Специальность: 03.02.07 – генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург 2011 Диссертационная работа выполнена в лаборатории иммунитета отдела генетики Всероссийском научно-исследовательском институте растениеводства им. Н.И. Вавилова в 2005 – 2009 гг. Научный руководитель :...»

«Алексеева Анна Юрьевна ВЛИЯНИЕ ВНЕКЛЕТОЧНОЙ ДНК НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК ЭНДОТЕЛИЯ 03.02.07 – Генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2013 2 Работа выполнена в лаборатории молекулярной биологии Федерального государственного бюджетного учреждения Медико-генетический научный центр Российской академии медицинских наук. Научный руководитель : Вейко Наталья Николаевна доктор биологических наук Официальные...»

«ФИЛИППОВ Дмитрий Андреевич СТРУКТУРА И ДИНАМИКА ЭКОСИСТЕМ ПОЙМЕННЫХ БОЛОТ БАССЕЙНА ОНЕЖСКОГО ОЗЕРА (ВОЛОГОДСКАЯ ОБЛАСТЬ) 03.00.16 – экология 03.00.05 – ботаника Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Сыктывкар – 2008 Работа выполнена на кафедре зоологии и экологии ГОУ ВПО Вологодский государственный педагогический университет Научные руководители: доктор биологических наук, профессор БОЛОТОВА Наталья Львовна доктор биологических наук,...»

«СОЛОВЬЕВА ИРИНА ВЛАДЛЕНОВНА МИКРОЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ КОРРЕКЦИИ ДИСБИОЗНОЙ МИКРОБИОТЫ ЧЕЛОВЕКА 03.02.08 – экология (биология) 03.02.03 – микробиология АВТОРЕФЕРАТ на соискание ученой степени доктора биологических наук Нижний Новгород 2013 2 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки Нижегородский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. академика И.Н.Блохиной Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и...»

«Сорокин Иван Дмитриевич Диазотрофы содовых солончаков Специальность 03.00.07 – микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва, 2008 2 Работа выполнена в Институте микробиологии им. С.Н.Виноградского РАН Научный руководитель : кандидат биологических наук И.К. Кравченко Официальные оппоненты : доктор биологических наук Т.Н. Жилина доктор биологических наук А.Л. Степанов Ведущая организация : Институт биохимии и физиологии...»

«Зайцева Юлия Анатольевна ПАРТЕНОГЕНЕТИЧЕСКАЯ АКТИВАЦИЯ И ХИМИЧЕСКАЯ ЭНУКЛЕАЦИЯ ООЦИТОВ КРЫС. ПРОЦЕССЫ ДЕМЕТИЛИРОВАНИЯ ДНК У РАННИХ ПРЕДИМПЛАНТАЦИОННЫХ ЭМБРИОНОВ КРЫС И МЫШЕЙ 03.00.25 Гистология, цитология, клеточная биология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург 2008 Работа выполнена в Центре молекулярной медицины имени Макса Дельбрюка (Берлин) и в Институте цитологии Российской акдемии наук (Санкт-Петербург) Научные...»

«Новикова Любовь Александровна СТРУКТУРА И ДИНАМИКА ТРАВЯНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ ЛЕСОСТЕПНОЙ ЗОНЫ НА ЗАПАДНЫХ СКЛОНАХ ПРИВОЛЖСКОЙ ВОЗВЫШЕННОСТИ И ПУТИ ЕЕ ОПТИМИЗАЦИИ 03.02.01 – ботаника Автореферат диссертации на соискание учной степени доктора биологических наук Саратов – 2011 2 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Пензенском государственном педагогическом университете имени В.Г. Белинского...»

«ЧЕПИНОГА Виктор Владимирович ФЛОРА БАССЕЙНОВ РЕК ИЯ И ОКА (В ПРЕДЕЛАХ ИРКУТСКОЙ ОБЛАСТИ) 03.00.05. - ботаника Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Иркутск, 2000 2 Работа выполнена на кафедре ботаники и генетики Иркутского государственного университета. Научный руководитель : кандидат биологических наук, доцент А. М. Зарубин Официальные оппоненты : доктор биологических наук, профессор, Л.И. Малышев кандидат биологических наук, М.Г....»

«РАХИМОВ Ильгизар Ильясович АВИФАУНА СРЕДНЕГО ПОВОЛЖЬЯ В УСЛОВИЯХ АНТРОПОГЕННОЙ ТРАНСФОРМАЦИИ ЕСТЕСТВЕННЫХ ПРИРОДНЫХ ЛАНДШАФТОВ Специальность 03.00.16 - экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва - 2002 Работа выполнена на кафедре зоологии и экологии биолого-химического факультета Московского педагогического государственного университета Научный консультант : доктор биологических наук, профессор КонстантиновВ.М....»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.