WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

На правах рукописи

БОЧАРОВА Екатерина Сергеевна

ОСОБЕННОСТИ РАЗМНОЖЕНИЯ

AULACTINIA STELLA (VERRILL, 1864) (HEXACORALLIA, ACTINIIDAE)

В БЕЛОМ И БАРЕНЦЕВОМ МОРЯХ

Специальности 03.02.04 – зоология и 03.02.07 – генетика

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва 2012

Работа выполнена на кафедре зоологии беспозвоночных биологического факультета Московского государственного факультета имени М.В. Ломоносова и в лаборатории популяционной биологии Всероссийского научноисследовательского института рыбного хозяйства и океанографии Научные руководители: кандидат биологических наук Косевич Игорь Арнольдович кандидат биологических наук Мюге Николай Сергеевич

Официальные оппоненты: доктор биологических наук Котов Алексей Алексеевич Учреждение Российской академии наук Институт проблем экологии и эволюции имени А.Н. Северцова РАН кандидат биологических наук Гребельный Сергей Дмитриевич Учреждение Российской академии наук Зоологический институт РАН

Ведущая организация: Учреждение Российской академии наук Институт океанологии имени П.П. Ширшова РАН

Защита диссертации состоится 21 мая 2012 г. в 17 часов 00 минут на заседании диссертационного совета Д 501.001.20 при Московском государственном университете имени М.В. Ломоносова по адресу: 119991, Москва, Ленинские горы, дом 1, строение 12, биологический факультет.

Факс: 8(495)939-43-09; Е-mail: irbeme@mail.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке биологического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова.

Автореферат разослан 20 апреля 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук, профессор И.Р. Бёме

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Актинии (Cnidaria, Actiniaria) – одиночные шестилучевые кораллы – играют заметную роль в морских биоценозах, являясь важным звеном трофических цепей, но работ по биологии размножения этих организмов в отечественной литературе немного (Лосева, 1970, 1971, 1972в, 1974а, 1974б; Костина, 1988б, 1989а, 1989б).




Для актиний известно множество вариантов полового и бесполого размножения. Половое размножение происходит при участии особей двух полов (появлению новой особи предшествует созревание и слияние мужской и женской половых клеток) или путем партеногенеза (развитие женских клеток без оплодотворения). При бесполом размножении новый организм образуется из фрагмента тела родительской особи или из его специальных разрастаний (Иванова-Казас, 1975). Одни виды актиний размножаются только половым путем, другие – только бесполым. При этом существует огромное число видов, которые сочетают разные механизмы обоих типов размножения, сменяющих друг друга в зависимости от условий окружающей среды. Стефенсон (Stephenson, 1929) считал, что способ размножения варьирует в зависимости от местообитания животных. Это предположение было подтверждено и другими авторами (Ayre, 1984a; Billingham, Ayre, 1996).

Помимо разных способов размножения, некоторые виды актиний семейства Actiniidae осуществляют заботу о потомстве, вынашивая молодь в гастральной полости (Lubbock, Allbut, 1981; Monteiro et al., 1998; Лосева, 1974б) или снаружи на стенке тела (Dunn, 1975a). В последние годы появились сообщения о том, что зародыши могут быть не только результатом полового размножения, но и клонирования родительской особи (Monteiro et al., 1998;

Sherman et al., 2007). Происхождение клональной молоди может быть связано с амейотическим партеногенезом или партеногенезом с восстановлением диплоидности яйцеклеток (Гребельный, 2005), однако точный механизм появления такого потомства в гастральной полости разных видов актиний остается неизвестным.

В свете новых представлений особенно интересны разрозненные сведения о размножении массового литорального вида Aulactinia stella (сем. Actiniidae) из Белого и Баренцева морей. Известно, что этот вид характеризуется вынашиванием потомства в гастральной полости и образует разреженные в пространстве популяции на литорали. В 1970-е гг. Лосева (1974б) обратила внимание на вынашивание потомства у A. stella в гастральной полости самок, самцов, гермафродитов и особей без половых продуктов на литорали Баренцева моря и предположила, что этому виду присуще половое размножение при последовательном гермафродитизме.

В целом, на сегодняшний день нет точных данных о способах размножения Aulactinia stella на литорали в разных местообитаниях Белого и Баренцева морей. В частности, представляет интерес происхождение и развитие потомства в гастральной полости взрослых особей этого вида в условиях изучаемых биотопов. В настоящее время для проведения таких исследований помимо традиционных зоологических стали доступны и генетические методы анализа материала.

Цель и задачи исследования. Основная цель настоящей работы – изучить особенности размножения актиний Aulactinia stella на литорали Белого и Баренцева морей.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1) Проанализировать половой состав особей и определить способы размножения A. stella на литорали Белого и Баренцева морей.





2) Изучить стадии развития зародышей из мезентериев и гастральной полости взрослых особей A. stella.

вынашивающими их особями A. stella в изучаемых районах с помощью генетических методов.

Научная новизна. Впервые для Aulactinia stella описаны поселения, состоящие только из самок и особей без половых клеток. Показано, что зародыш развивается в мезентерии родительской актинии до стадии гаструлы, а затем выходит в гастральную полость взрослой особи. Проведено сравнение (рибосомального кластера со спейсерами ITS 1 и ITS 2) и митохондриальных (12S рРНК, 16S рРНК, COIII) генетических маркеров. Впервые для A. stella установлено клонирование путем партеногенеза как основной способ размножения на литорали Белого и Баренцева морей, в то время как в Беринговом море нами показано наличие полового размножения у этого вида.

Впервые у A. stella доказано вынашивание взрослыми особями зародышей, которые являются потомками других особей того же вида, что свидетельствует об обмене зародышами между взрослыми актиниями. Впервые на литорали Баренцева моря отмечен сублиторальный вид Urticina crassicornis, образующий совместные поселения с A. stella.

Практическое значение работы. Результаты выполненных исследований позволяют получить представление об особенностях размножения широко распространенного на литорали вида актиний. Использованные подходы и методы могут быть использованы при изучении особенностей размножения и генетической структуры популяций других видов актиний, для оценки роли актиний в экосистеме. Изложенный материал будет использован для дальнейших обобщений в области экологии и биологии развития, при чтении лекций по зоологии беспозвоночных и гидробиологии. Последовательности ядерных и митоходриальных генов A. stella и U. crassicornis депонированы в базе данных GenBank (http://www.ncbi.nlm.nih.gov) и доступны исследователям всего мира для определения этих видов по небольшому фрагменту тела актиний.

Апробация работы. Результаты исследования были представлены на IX и X Съездах Гидробиологического общества РАН (Тольятти, 2006; Владивосток, 2009), на 12-м Конгрессе Европейского общества по эволюционной биологии (Турин, Италия, 2009), на 3-ей Конференции Европейского общества по эволюционной биологии развития (Париж, Франция, 2010), на Кейстоунском симпозиуме по Эволюционной биологии развития (Тахо-сити, США, 2011).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 работ (4 статьи и материалов конференций), в том числе 2 статьи в рецензируемых журналах из списка ВАК.

Структура работы. Диссертация состоит из введения, 7 глав, выводов и списка литературы, включающего 184 источника, в том числе 143 на иностранных языках. Работа изложена на 146 страницах, содержит 8 таблиц и проиллюстрирована 35 рисунками.

Благодарности. Автор выражает глубочайшую благодарность научным руководителям к.б.н. И.А. Косевичу и к.б.н. Н.С. Мюге за всестороннюю поддержку и ценные замечания при выполнении работы и подготовке рукописи. Автор благодарен д.б.н., проф. Н.Н. Марфенину за инициацию работы и замечания по тексту. Особую благодарность автор выражает чл.-корр.

РАН, проф. В.В. Малахову за поддержку и советы при выполнении работы на кафедре зоологии беспозвоночных, а также другим сотрудникам кафедры за помощь в освоении методик – Е.А. Жуковской, С.В. Пятаевой, Н.Н. РимскойКорсаковой. Автор искренне признателен коллективу лаборатории популяционной биологии ВНИРО за постоянную помощь и поддержку при работе с молекулярно-генетическими методами, в особенности – С.М.

Расторгуеву, А.А. Волкову, А.Е. Барминцевой, А.А. Сергееву, Д.А. Зелениной, М.Е. Толочковой, а также И.В. Солохину за фотографии актиний и Х.Р. Шимшилашвили за клонирование ПЦР-продуктов. Огромную благодарность за помощь в сборе материала автор выражает С.Е. Аносову, М.А. Черневой, Н.П. Санамян, А.В. Лабутину, О.Ю. Вилковой, А.М. Переладову, М.В. Переладову, Г.М. Тертицкому, В.Ю. Семашко, А.Е.

Черенкову, а также д.б.н. М.Г. Карпинскому за комментарии по тексту.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Глава 1. Краткий обзор литературы.

Глава содержит информацию о систематическом положении вида Aulactinia stella и морфологический обзор отряда Actiniaria. Рассмотрены основные этапы созревания половых продуктов и способы оплодотворения при половом размножении разных видов актиний, варианты заботы о потомстве. В главе также отражены способы клонирования у ограниченного числа видов актиний, которые выражаются в партеногенезе и нескольких вариантах бесполого размножения.

Данные об эмбриональном развитии A. stella достаточно обрывочные. До сих пор не было получено достоверных сведений о локализации зародышей на стадиях морулы и бластулы при внутреннем вынашивании потомства у актиний. Кроме того, для рядов видов, включая A. stella, остается открытым вопрос о происхождении зародышей в гастральной полости.

В середине 1970-х гг. исследователи начали использовать изоферментный анализ для изучения родственных отношений между взрослыми актиниями и потомством из их гастральной полости (Ottaway, Kirby, 1975). В последние годы появились генетические исследования популяций актиний, в которых проводили анализ последовательностей митохондриальных генов COI (Fautin, Smith, 1997), COIII (Geller, Walton, 2001), 12S рРНК (Daly et al., 2008) и 16S рРНК (Geller, Walton, 2001), микросателлитный анализ (Sherman et al., 2007), мультилокусный анализ ДНК (Edmands, 1995; Edmands, Potts, 1997), AFLP-PCR (Darling et al., 2004; Douek et al., 2002), RAPD-PCR (Pearson et al., 2002), анализ ядерного рибосомального кластера (Acua et al., 2007). Генетический анализ взрослых особей и их потомства сделал возможным обнаружение полового или клонального размножения у изучаемых видов, а также сравнение популяций одного вида и выявление разных видов среди симпатрически обитающих форм.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Сбор материала. Видовое определение актиний проводили по неопубликованному определителю С.Д. Гребельного, описаниям Л.М. Лосевой (1972а, 1972б), Н. Санамян и К. Санамян (2008). Прижизненная окраска образцов была задокументирована путем фотосъемки. Состав нематоцист анализировали по «давленым» препаратам.

Материал, используемый в настоящей работе, получен в ходе полевых исследований автора в 2002-2011 гг. на литорали некоторых районов Белого и Баренцева морей (станции 1-9; рис. 1). Материал из района биостанции "Дальние Зеленцы" Мурманского морского биологического института КНЦ РАН (станция 10) был любезно предоставлен М.А. Черневой. В Авачинском заливе Берингова моря 8 актиний A. stella были собраны Н.П. Санамян.

На основе литературных данных в главе рассматриваются географическое положение, особенности рельефа дна, береговой линии и грунтов. Также нами приведены сведения о климатических условиях и гидрологическом режиме районов исследования.

Всего было проанализировано 367 взрослых и 96 ювенильных актиний (полипов), из которых 348 взрослых и 84 ювенильных особей были представлены видом Aulactinia stella. Остальные 19 взрослых и 12 ювенильных особей были отнесены к виду Urticina crassicornis.

2.2. Изготовление гистологических препаратов. Были изготовлены серийные парафиновые поперечные срезы 61 взрослого экземпляра A. stella (по 15 особей из каждого места сбора Белого и Баренцева морей и 1 самец – из Берингова моря) и 2 экземпляра U. crassicornis. Для изготовления серийных поперечных срезов актиний в парапласте была применена стандартная методика с окраской гематоксилином Караччи (Валовая, Кавтарадзе, 1993).

Также было изучено 30 личинок из гастральной полости взрослых особей A. stella на серийных срезах в эпоксидных смолах с окраской метиленовым синим. «Давленые» препараты книдома (состава стрекательных клеток) изготавливали из фрагментов тканей щупалец, глотки, стенки колюмна и мезентерия. Исследование и фотографирование гистологических срезов и книдома проводили с помощью светового микроскопа Leica DM5000.

2.3. Молекулярно-генетические методы. Для генетического анализа было использовано 67 взрослых и 74 ювенильных особей A. stella, а также взрослых и 2 ювенильных особи U. crassicornis. Выделение ДНК из актиний, зафиксированных в 96% этаноле проводили 2 способами: по СТАВ-протоколу Рис. 1. Карта расположения мест сбора материала в Белом и Баренцевом морях. Цифрами обозначены номера станций.

(Dellacorte, 1994) и с помощью набора Wizard® SV Genomic DNA Purification System (Promega) в соответствии с инструкциями фирмы-производителя.

Амплификацию фрагментов ядерного рибосомального кластера проводили с праймерами, описанными в работе Акуны с соавторами (Acua et al., 2007).

Фрагменты амплификации содержали 3’-конец гена 18S и 5’-конец гена 28S, внутренних транскрибируемых спейсера ITS-1 и ITS-2 и находящийся между ними ген 5,8S. Фрагменты митохондриальной ДНК актиний (12S pPHK, 16S рРНК, COIII) амплифицировали с праймерами согласно описанной ранее методике (Geller, Walton, 2001).

Постановку реакции секвенирования проводили с использованием набора анализировали на капиллярном секвенаторе ABI PRISM 3100 (Applied Biosystems). Для анализа использовали также последовательности ядерных и статистической обработки последовательностей и построения дендрограмм применяли программы MEGA 5.0 и Paup 4.0 с использованием алгоритмов статистической достоверности дендрограмм использовали бутстрэп-поддержку.

crassicornis.

В главе рассматриваются особенности внешнего и внутреннего строения и состава книдома (стрекательных капсул) у особей A. stella из Белого, Баренцева и Берингова морей. Нами уточнено описание этого вида, данное Л.М. Лосевой (1972а), относительно локализации некоторых типов стрекательных капсул. У дифференцированной трубкой), среди которых выделяются тонкостенные (А) и толстостенные (B) формы. Дано описание особей U. crassicornis, обнаруженных нами на литорали Баренцева моря.

Глава 4. Распределение актинии и особенности их экологии на литорали Белого и Баренцева морей.

4.1. Структура биотопов и сообществ бентоса в районах исследований.

Aulactinia stella – бореально-арктический вид (Carlgren, 1921), который проник в Арктику из умеренных вод и заселил литораль и верхние участки сублиторали Белого и Баренцева морей (Гребельный, 1980б). Ранее считалось, что это единственный вид актиний на литорали этих морей, но в сборах из Варангер-фьорда Баренцева моря нами были обнаружены также актинии вида Urticina crassicornis.

Дано описание биотопов и сообществ, в которых обитает A. stella на литорали Белого и Баренцева морей. На литорали Варангер-фьорда актинии встречались на скалистых и смешанных грунтах. В районе ББС МГУ, Соловецких островов и Дальнезеленецкой губы особи A. stella были отмечены в биотопах смешанных (каменистая и каменисто-песчаная литораль с разной степень заиленности), а реже рыхлых и скалистых грунтов.

Преимущественно актинии поселяются в нижней литорали в сообществе фукоидов. Особи A. stella встречались в следующих сообществах зообентоса:

сообществе мидий, сообществе балянусов и сообществе рыхлых грунтов. В первых двух сообществах актинии поселяются при наличии места на твердом субстрате, в последнем – при наличии собственно твердого субстрата. Спектр питания A. stella составляют представители зообентоса и рыб, сходные по размерам с актиниями и обитающие в данном местообитании.

4.2. Условия обитания актиний A. stella на исследуемых участках литорали. На участках литорали в исследуемых районах Белого и Баренцева морей (Рис. 1) были изучены плотность распределения актиний A. stella, характер субстрата, сопутствующая флора и фауна. С бльшей подробностью был исследован участок литорали в районе ББС МГУ по 5 трансектам.

Максимальную плотность поселения актиний наблюдали на трансекте с наибольшей интенсивностью течения, а минимальную плотность – на сильно заиленном грунте с недостатком твердого субстрата.

Во всех местах сбора материала актинии A. stella были распределены неравномерно, часто со скоплениями в пределах от 5 до 18 экз./м2, что может быть связано с особенностями размножения. Размеры актиний в Белом и Баренцевом морях варьировали в одних и тех же пределах от 2 до 27 мм (достоверность различий tvalue=1,12). Молодые особи размером 2-4 мм, которые были расположены рядом с более крупными экземплярами, могли быть потомством этих взрослых особей. Молодые полипы оседают после выхода из гастральной полости поблизости от родительских особей.

Глава 5. Размножение и эмбриональное развитие Aulactinia stella.

5.1. Описание половых клеток актиний. Половые продукты A. stella развиваются в мезоглее мезентериев между мышечным валиком и мезентериальным филаментом в средней части колюмна (Рис. 2). В Белом и Баренцевом морях среди половозрелых особей были обнаружены только самки.

На поперечных срезах A. stella яйцеклетки часто встречались группами, образуя характерные выпячивания мезентериев (Рис. 3). По полученным данным, наибольшее количество яйцеклеток встречалось у этих актиний примерно от середины тела на 10% длины тела к оральному диску. При этом очевидно, что развитие ооцитов происходило асинхронно. Размеры различимых на световом уровне яйцеклеток варьировали от 5 до 270 µ.

Анимальный полюс растущих ооцитов A. stella направлен к поверхности мезентерия (в гастральную полость). У яйцеклеток размером около 50 µ на анимальном полюсе появляется углубление, в котором находятся базальные концы нескольких десятков клеток гастродермы (энтодермы). Этот пучок энтодермальных клеток образует трофонему («энтодермальную связку»), служащую для питания ооцита (Рис. 3). Ядро у такой яйцеклетки располагается ближе к анимальному полюсу почти вплотную к трофонеме (Рис. 3).

Мезоглеальная оболочка вокруг растущего ооцита A. stella растягивается (Рис. 3). Специальных оболочек у изолированного из мезентерия ооцита Рис. 2. Объединенная схема расположения половых продуктов в мезентериях Aulactinia stella.

Рис. 3. Растущий ооцит в мезентерии Aulactinia stella с трофонемой.

Обозначения: м – мезоглея, моб – мезоглеальная оболочка, тр – трофонема, ц – цитоплазма, энт – энтодерма (гастродерма), я – ядро, ядрш – ядрышко.

обнаружено не было. По мере созревания яйцеклетки ядрышко становится менее заметным, что объясняется уменьшением его активности и, следовательно, снижением содержания в нем нуклеиновых кислот. По ооцитам на поперечных срезах A. stella можно определить, что по количеству желтка яйцеклетки актиний этого вида полилецитальные, а по расположению запасных веществ – телолецитальные.

На серии поперечных срезов особей A. stella, собранных в разные месяцы (июнь-октябрь) 2003-2011 гг. на литорали Белого и Баренцева морей, из половых клеток были обнаружены только ооциты. Актинии этого вида из Берингова моря были представлены как самками, так и самцами.

5.2. Описание стадий развития зародышей актиний. На поперечных срезах A. stella и при вскрытии мезентериев были обнаружены яйцеклетки с ядрами и зародыши на стадии 4 бластомеров (Рис. 4А). В мезоглее мезентериев актиний также присутствовали зародыши на стадиях бластулы (Рис. 4Б) и гаструлы. Бластула представляла собой сплющенный с боков однослойный зародыш, бластоцель которого заполнен желтком. Клетки бластулы вытянуты в апико-базальном направлении, а их ядра смещены к периферии зародыша.

В гастральной полости взрослых актиний находились эмбрионы с ресничками и апикальным органом, из которых размеры самых маленьких были около 200 µ (Рис. 5). Бластулы в гастральной полости не обнаружены, часть эмбрионов была представлена стадиями от ранней (Рис. 5А) до поздней гаструлы. Гаструляция у обнаруженных зародышей проходила по типу инвагинации. При этом из-за большого количества желтка гаструляция у A. stella происходит с вытеснением части желтка вместе с остатками клеток из бластоцеля в гастроцель (Иванова-Казас, 1975).

Гаструляция заканчивается образованием двухслойного зародыша, у которого начинается закладка мезентериев. Такие эмбрионы вытянуты в орально-аборальном направлении, покрыты ресничками и способны к протомезентериями (Рис. 5Б) апикальный орган не выявлен.

Рис. 4. Стадии дробления и бластулы в мезентерии Aulactinia stella: А – стадия 2-го деления дробления яйца, срез прошел через 2 бластомера, Б – стадия бластулы. Обозначения: б – бластомер, бл – бластула, ж – желток в бластоцеле, м – мезоглея.

Рис. 5. Стадии развития зародышей из гастральной полости Aulactinia stella: А – раняя гаструла, Б – стадия «эдвардзии». Обозначения: б – бластопор, г – гастральная полость, ж – желток, пм – протомезенетерии, р – реснички, экт – эктодерма.

В гастральной полости большую часть зародышей составляли личинки на стадии «эдвардзии», а в меньшей степени – на стадии гаструлы, что указывает на выход зародышей из мезентериев A. stella в гастральную полость на стадии гаструлы.

На поперечном срезе взрослой особи между мезентериями был найден эмбрион с двумя циклами мезентериев и 12 щупальцами. По достижении данной стадии молодой полип покидает гастральную полость, по нашим наблюдениям, в большинстве случаев через ротовое отверстие, изредка – через пору на конце щупальца взрослой актинии.

Глава 6. Генетические исследования размножения Aulactinia stella.

6.1. Анализ фрагмента ядерной ДНК (рибосомальный кластер).

Сравнение особей с помощью генетических маркеров позволяет выявить клоны (бесполое размножение), либо подтвердить половое размножение.

Рибосомальные кластеры являются многокопийными и содержат гены рибосомальной ДНК (18S рРНК, 5.8S рРНК, 28S рРНК) и 2 внутренних транскрибируемых спейсера (ITS-1 и ITS-2), их разделяющие.

Были отсеквенированы последовательности рибосомального кластера у 59 взрослых и 74 ювенильных особей A. stella. Длина отсеквенированных фрагментов варьировала от 781 до 790 нуклеотидов из-за разного количества делеций. При выравнивании последовательностей у вида A. stella из Белого и Баренцевого морей было выявлено 4 гаплотипа, гетерозиготы между ними не обнаружены. Эти гаплотипы в гомозиготном состоянии актиний из Белого и Баренцева морей были обозначены как Hap1, Hap2, Hap3, Hap4 (Табл. 1).

Частота встречаемости гаплотипов у взрослых особей A. stella: Hap1 – 70,9%, Hap2 – 9,1%, Hap3 – 1,8%, Hap4 – 18,2%. Частота встречаемости гаплотипов у зародышей: Hap1 – 62,2%, Hap2 – 5,4%, Hap3 – 6,8%, Hap4 – 25,7%.

В целом, существенных различий в распределении гаплотипов A. stella в Белом и Баренцевом морях найдено не было. Поселение актиний в каждом местообитании состояло из одного или нескольких гаплотипов. Особи с гаплотипом Hap1 присутствовали во всех десяти местообитаниях, доминируя по численности в восьми из них. Особи с гаплотипом Hap4 доминировали по численности в двух местообитаниях: одном – в Белом и одном – в Баренцевом морях. В Белом море был больше представлен редкий гаплотип Hap2, а в Баренцевом море – редкий гаплотип Hap3. Встречаемость гаплотипов актиний A. stella в Белом море: Hap1 – 68,1%; Hap2 – 11,1%; Hap3 – 1,4%; Hap4 – 19,5%.

Встречаемость гаплотипов актиний A. stella в Баренцевом море: Hap1 – 63,9%;

Hap2 – 1,6%; Hap3 – 8,2%; Hap4 – 26,3%.

Гаплотипы по фрагментам ядерной ДНК (рибосомальный кластер) актиний Генотип A. stella 124 144 146 520 567 713 714 715 722 727 732 Помимо особей из Белого и Баренцева морей были отсеквенированы фрагменты исследуемого рибосомального кластера у 8 взрослых экземпляров A. stella из сублиторали Берингова моря (Авачинский залив). Зародыши в гастральной полости беринговоморских актиний отсутствовали. Длина отсеквенированных последовательностей у этих экземпляров варьировала от до 790 нуклеотидов. После выравнивания последовательностей рибосомального кластера было обнаружено, что среди беринговоморских актиний были представлены как гомозиготные, так и гетерозиготные особи.

Всего можно выделить четыре гаплотипа (Bering-1, Bering-3, Bering-6, Bering-8;

рис. 6).

рибосомального кластера особей Aulactinia stella из Белого и Баренцева (Hap1, Hap2, Hap3, Hap4), из Берингова моря (Bering-1, Bering-3, Bering-6, Bering-8), видов рода Aulactinia из GenBank и Urticina crassicornis (внешняя группа) из Баренцева моря. Цифрами обозначена бутстрэп-поддержка (bootstrap support) при филогенетическом анализе методом максимальной парсимонии (PAUP 4.0).

Сравнение гаплотипов A. stella из Белого, Баренцева и Берингова морей показало, что фрагменты рибосомальных генов (конец последовательности гена 18S рРНК, последовательность гена 5.8S рРНК, начало последовательности гена 28S рРНК) у исследуемых экземпляров идентичны, а отличаются они только фрагментами спейсеров ITS1 и ITS2. Сравнение фрагментов ДНК A. stella с последовательностями рибосомального региона A. incubans, размещенными в базе данных GenBank, позволило также выявить сходство участков этих рибосомальных генов у A. stella и A. incubans.

Филогенетический анализ гаплотипов A. stella из трех морей и видов рода Aulactinia из GenBank показал выделение клады A. stella из Берингова моря (бутстрэп-поддержка – 99%), а также клады этого вида из Белого и Баренцева моря (поддержка – 98%), которая вместе с группой A. incubans образует ветвь с поддержкой 66%. Вместе гаплотипы A. stella и A. incubans образуют одну кладу с поддержкой 99% (Рис. 6). Эти данные указывают, что A. stella и A. incubans могут являться синонимами одного вида.

Были проанализированы также взрослые и ювенильные особи Urticina crassicornis из Баренцева моря. Последовательности рибосомального кластера у всех этих экземпляров были представлены одним гаплотипом в гомозиготном состоянии. Фрагмент рибосомального кластера этого вида был добавлен в филогенетический анализ в качестве внешней группы (Рис. 6).

Таким образом, среди 133 экземпляров из Белого и Баренцева морей нами обнаружено 4 гаплотипа по ядерному рибосомальному кластеру и отсутствие гетерозиготных особей. Эти данные и отсутствие в выборках самцов могут свидетельствовать о наличии партеногенеза как основного способа размножения A. stella в условиях литорали Белого и Баренцева морей. В то же время в сублиторали Берингова моря присутствие гетерозиготных особей в обоеполых популяциях этого вида указывает на то, что в этих условиях обитания у A. stella происходит половое размножение.

6.1.2. Определение родственных отношений взрослых актиний и вынашиваемой С помощью ядерного маркера (рибосомальный кластер) мы проводили сравнение родительских особей актиний Aulactinia stella из Белого и Баренцева морей и потомства из их гастральной полости. Большая часть (67%) взрослых особей вынашивала зародышей с генотипом идентичным своему. Мы будем использовать термин «генотип» для обозначения гаплотипа в гомозиготном состоянии, поскольку гетерозиготные особи в Белом и Баренцевом морях нами не обнаружены.

У остальных 18 взрослых экземпляров в гастральной полости обнаружены ювенильные полипы, которые по генотипу отличались от вынашивающих их особей. В этих случаях большинство взрослых актиний (78%) содержали зародышей (от 1 до 4 экземпляров) только одного отличающегося генотипа, реже встречались два или три генотипа потомства в одной особи, один из которых совпадал с родительским. В данной ситуации возможны альтернативные гипотезы. Гипотеза H0: взрослые актинии вынашивают преимущественно свое потомство и случайно обмениваются частью зародышей. Гипотеза H1: зародыши в гастральной полости взрослых актиний являются случайной выборкой из общего пула на литорали.

определили, что зародыши с самым распространенным генотипом Hap распределялись по взрослым особям согласно частоте встречаемости последних с вероятностью более 95% (уровень значимости p0,05). Это подтверждает нашу гипотезу H1 о том, что все зародыши (по крайней мере, с генотипом Hap1) оказываются сначала во внешней среде, а потом в гастральной полости взрослых особей случайным образом. Зародыши с другими генотипами встречались реже, и достоверно оценить их мобильность не представлялось возможным.

На участках литорали Белого и Баренцева морей, где превалировал генотип Hap1 взрослых особей (частота встречаемости 83%), среди зародышей также чаще встречался генотип Hap1 (74%). В тех местообитаниях, в которых среди взрослых экземпляров по численности доминировали особи с генотипом Hap4 (54%), с приблизительно той же частотой (57%) встречались ювенильные особи с этим генотипом.

Кроме того, в случае вынашивания зародыша актинией другого генотипа, с вероятностью 76% в нашем материале присутствовала взрослая особь A. stella с идентичным конкретному зародышу генотипом. С большой вероятностью эта молодь является потомством взрослых особей A. stella из этой же группировки в данном местообитании. Изредка (в 24% случаев) встречались особи, удаленные от других и вынашивающие зародышей нескольких генотипов. В таком случае родительские особи этой молоди могли не попасть в нашу выборку, либо это можно объяснить тем, что между удаленными особями происходит обмен плавающими личинками (ранними зародышами с ресничками). То, что зародыши, после нахождения во внешней среде, опять оказываются в гастральной полости взрослой особи того же вида, вероятно определяется хорошо развитым хемотаксисом личинок.

Ранее для близкого вида Actinia equina была выдвинута гипотеза о том, что на определенной стадии развития личинка, покрытая ресничками и имеющая апикальный орган, на некоторое время выходит в планктон, а затем возвращается в случайную особь того же типа для завершения метаморфоза (Chia, Rostron, 1970). Эта гипотеза была основана на том, что во взрослых особях A. equina иногда находили зародышей другой цветовой морфы. У изучаемого в нашей работе вида A. stella Лосевой (1974б) ранее были обнаружены зародыши в гастральной полости не только самок и гермафродитных особей, но также самцов и особей без гонад, что также подтверждает наше предположение об обмене плавающими личинками между взрослыми особями.

Обмен зародышами на полипоидной стадии с бльшей вероятностью происходит между ближайшими соседями, поскольку полипы могут легко осесть на субстрат (Рис. 7). В лабораторных условиях мы наблюдали непереваренными остатками пищи, а также их случайное заглатывание.

Обнаруженные особи вида U. crassicornis содержали только зародышей своего вида, и эти зародыши не встречались во взрослых особях A. stella.

Следовательно, у взрослых актиний A. stella из Белого и Баренцева морей происходит обмен зародышами, который носит случайный характер, но только между особями своего вида (Рис. 7).

Рис. 7. Гипотетическая схема репродуктивного поведения актиний Aulactinia stella (на примере Hap4) на литорали Белого и Баренцева морей в присутствии актиний другого вида (Urticina crassicornis).

6.2. Анализ фрагментов митохондриальной ДНК. Проведен анализ фрагментов митохондриальной ДНК (12S рРНК, 16S рРНК, COIII) для выяснения, отличаются ли зародыши по этим генам от вынашивающих их особей A. stella из Белого и Баренцева морей, а также сравнения этих особей с беринговоморскими. Взрослые экземпляры A. stella из Белого и Баренцева морей были выбраны из тех актиний, потомство которых отличается по рибосомальному кластеру, а ювенильные – из этого отличающегося от своих родительских особей потомства. В филогенетический анализ были также включены последовательности митохондриальной ДНК U. crassicornis из Баренцева моря в качестве внешней группы (Рис. 8).

Все экземпляры из Белого и Баренцева морей были полностью идентичны по всем рассматриваемым фрагментам митохондриальных генов. Экземпляры из Берингова моря были полиморфны как по последовательностям рибосомального кластера, так и митохондриальных генов 12S рРНК и COIII.

Все особи A. stella имели идентичные фрагменты митохондриального гена 16S рРНК, а одна беринговоморская особь (Bering-7) была полностью идентична по митохондриальной ДНК особям из Белого и Баренцева морей (Рис. 8). Вид U. crassicornis четко отличается от A. stella только по последовательности митохондриального гена 16S рРНК (62 нуклеотида различны), а по фрагментам 12S рРНК и COIII различия составляют несколько нуклеотидов.

последовательностей митохондриальных генов (12S рРНК, 16S рРНК, COIII) Aulactinia stella из Белого и Баренцева (White-Barents), и Берингова (Bering–1-8) морей. Цифрами обозначена бутстрэп-поддержка (bootstrap support). Внешняя группа – Urticina crassicornis. Цифрами обозначена бутстрэп-поддержка при филогенетическом анализе методом максимальной парсимонии (MEGA 5.0).

Глава 7. Обсуждение результатов.

Идентичные последовательности митохондриальной ДНК и малое количество гаплотипов по ядерному рибосомальному кластеру у A. stella из Белого и Баренцева морей могут являться следствием «эффекта основателя»

(«бутылочного горлышка») при заселении актиниями этих акваторий.

Партеногенетический тип размножения, предполагаемый нами на основании отсутствия как гетерозиготных особей, так и самцов или гермафродитов, а также особенности репродуктивного поведения, позволяют A. stella успешно существовать в поселениях как высокой, так и низкой плотности в крайне неблагоприятных условиях литорали Белого и Баренцева морей.

ВЫВОДЫ

1) На участках литорали Белого и Баренцева морей взрослые особи Aulactinia stella представлены только самками и особями без половых продуктов. Размножение этого вида в исследованных местообитаниях происходит с помощью партеногенеза. Зародыш развивается в мезентерии родительской особи до стадии гаструлы и выходит в гастральную полость, где преобразуется в плавающую личинку.

2) Анализ последовательностей ядерной ДНК (рибосомальный кластер) показал, что исследуемые взрослые экземпляры A. stella и их зародыши представляют собой клоны четырех гаплотипов в гомозиготном состоянии, которые распределены в Белом и Баренцевом морях сходным образом.

3) У взрослых особей A. stella из Белого и Баренцева морей происходит обмен зародышами. Зародыши из гастральной полости родительского организма оказываются сначала во внешней среде, а затем снова попадают в гастральную полость взрослых актиний этого вида случайным образом.

4) Исследование фрагментов митохондриальных генов (12S рРНК, 16S рРНК, COIII) у актиний A. stella показало идентичность всех особей из Белого и Баренцева морей и только одного беринговоморского экземпляра.

5) Анализ исследуемых фрагментов ядерных и митохондриальных генов A. stella из Берингова моря выявил полиморфизм этих особей и наличие гетерозиготности по последовательности рибосомального кластера. Особи из Берингова моря были представлены как самцами, так и самками. Эти данные указывают, что для этого вида в сублиторали Берингова моря характерно половое размножение.

6) В Варангер-фьорде был обнаружен не отмеченный ранее на литорали Баренцева моря сублиторальный вид Urticina crassicornis, образующий совместные поселения с A. stella. Взрослые особи U. crassicornis вынашивают в гастральной полости потомство только своего вида.

Список работ, опубликованных по теме диссертации Статьи в журналах, включенных в перечень ВАК:

1. Бочарова Е.С., Косевич И.А. Варианты размножения актиний (Cnidaria, Anthozoa) // Зоологический журнал. 2011. Т. 90. № 11. С. 1283-1295.

2. Бочарова Е.С., Мюге Н.С. Актинии Aulactinia stella (Verrill, 1864) (Hexacorallia, Actiniidae) могут вынашивать потомство других особей того же вида // Доклады академии наук. 2012. Т. 444. № 2. С. 227-229.

Статьи в сборниках и др.:

1. Бочарова Е.С. Aulactinia (Bunodactis) stella // Иллюстрированный атлас беспозвоночных Белого моря / под общ. ред. Н.Н. Марфенина. М:

Товарищество научных изданий КМК, 2006. С. 74-75.

2. Бочарова Е.С., Малютин О.И., Санамян Н.П., Молодцова Т.Н. Класс Anthozoa (Коралловые полипы) // Флора и фауна Белого моря:

иллюстрированный атлас / под ред. А.Б. Цетлина, А.Э. Жадан, Н.Н.

Марфенина. М.: Товарищество научных изданий КМК, 2010. С. 88-97.

Тезисы докладов на конференциях:

1. Бочарова Е.С. К экологии актиний на литорали Белого моря // Тезисы докладов IX Съезда Гидробиологического общества РАН, г. Тольятти, 18-22 сентября 2006 г. Тольятти: ИЭВБ РАН, 2006. Т. 1. С. 54.

2. Бочарова Е.С. Размножение актинии Aulactinia stella (Verrill, 1864) в Белом море // Тезисы докладов X Съезда Гидробиологического общества при РАН, г. Владивосток, 28 сентября – 2 октября 2009 г.

Владивосток: Дальнаука, 2009. С. 51.

3. Bocharova E.S. Population genetic structure of sea anemone Aulactinia stella in the White and the Barents seas as a result of two reproductive modes // Abstracts of the 12th Congress of the European Society for Evolutionary Biology, Turin, Italy, August 24th-29th, 2009. Poster 12-16.

4. Bocharova E.S. The population genetic structure of sea anemone Actinia stella (Cnidaria: Anthozoa) subject to the origin of brooded offspring // Abstracts of the third meeting of the European society for Evolutionary Developmental Biology (EED posters), Paris, France, July 6-9, 2010. P. 11.

5. Bocharova E.S. The effects of sexual and asexual reproduction on the genetic structure of sea anemone Actinia stella populations //

Abstract

book of Keystone Symposia. Evolutionary Developmental Biology, Tahoe City, California, USA, February 27-March 3, 2011. P. 57.



 
Похожие работы:

«Мартемьянова Анна Анатольевна ОСОБЕННОСТИ КОНКУРЕНТНЫХ ОТНОШЕНИЙ МНОГОЛЕТНИХ РАСТЕНИЙ В АГРОФИТОЦЕНОЗАХ ПРЕДБАЙКАЛЬЯ 03.00.16 – экология АВТОРЕФЕРАТ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Улан-Удэ – 2009 Работа выполнена на кафедре сельскохозяйственной экологии в ФГОУ ВПО Иркутской государственной сельскохозяйственной академии Научный руководитель : Доктор сельскохозяйственных наук, профессор Хуснидинов Шарифзян Кадирович Официальные оппоненты : Доктор...»

«Нямжав Мунхжаргал ЭКДИСТЕРОИДСОДЕРЖАЩИЕ РАСТЕНИЯ ЗАПАДНОЙ МОНГОЛИИ (СКРИНИНГ, ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ, ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ) 03.00.05 – ботаника 03.00.12 – физиология и биохимия растений Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Томск – 2009 Работа выполнена в лаборатории фитохимии Сибирского ботанического сада ГОУ ВПО Томский государственный университет доктор химических наук, старший Научный руководитель : научный сотрудник Зибарева...»

«Шлеева Маргарита Олеговна ПОКОЯЩИЕСЯ ФОРМЫ БАКТЕРИЙ РОДА MYCOBACTERIUM: ПОЛУЧЕНИЕ, БИОХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ РЕАКТИВАЦИИ. Специальность 03.00.04 – биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва-2004 1 Работа выполнена в лаборатории биохимии стрессов микроорганизмов Института биохимии им. А.Н. Баха РАН Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Капрельянц Арсений Сумбатович Официальные оппоненты : доктор...»

«ЛИХАЦКАЯ Галина Николаевна МЕХАНИЗМЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ТРИТЕРПЕНОВЫХ И СТЕРОИДНЫХ ГЛИКОЗИДОВ С ЛИПИДНЫМИ МЕМБРАНАМИ Специальность: 03.00.02 – биофизика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Владивосток 2006 2 Работа выполнена в Тихоокеанском институте биоорганической химии ДВО РАН Научный руководитель : Доктор физико-математических наук Ермишкин Лев Николаевич Официальные оппоненты : Профессор, доктор физико-математических наук...»

«ГЕТМАНЕЦ Ирина Анатольевна ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ И БИОМОРФОЛОГИЯ РОДА SALIX L. ЮЖНОГО УРАЛА 03.02.08 – экология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Омск – 2011 Работа выполнена на кафедре ботаники ГОУ ВПО Челябинский государственный педагогический университет Заслуженный деятель науки РФ, Официальные оппоненты : доктор биологических наук, профессор Жукова Людмила Алексеевна доктор биологических наук, профессор Викторов Владимир...»

«Ребриков Денис Владимирович ПОЛИМОРФНЫЕ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИХ АЛЛЕЛЬНОГО СТАТУСА В СЛОЖНЫХ СМЕСЯХ МОЛЕКУЛ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ Специальности 03.00.15 – генетика 03.00.03 – молекулярная биология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва – 2008 Работа выполнена в Институте биоорганической химии им. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Институте общей генетики им. Н.И.Вавилова РАН и ЗАО НПФ ДНК-Технология (г....»

«Фахруллин Равиль Фаридович ФУНКЦИОНАЛИЗАЦИЯ КЛЕТОК МИКРООРГАНИЗМОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПОЛИЭЛЕКТРОЛИТОВ И НАНОЧАСТИЦ 03.02.03 - микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Казань - 2011 2 Работа выполнена в ФГАОУ ВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет, г. Казань, Республика Татарстан. Научный консультант : Член – корр. АН РТ, доктор биологических наук, профессор Ильинская Ольга Николаевна Официальные оппоненты :...»

«Рущук Александр Дмитриевич РАСТИТЕЛЬНЫЙ ПОКРОВ СТЕПЕЙ ЛЕВОБЕРЕЖЬЯ ДНЕСТРА: АНАЛИЗ ФЛОРЫ И КЛАССИФИКАЦИЯ РАСТИТЕЛЬНОСТИ Специальность 03.00.05 – Ботаника Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Тирасполь 2007 Работа выполнена на кафедре ботаники и экологии естественно-географического факультета ПГУ имени Т.Г. Шевченко Научные доктор сельскохозяйственных наук, руководители...»

«САИДОВ АБДУСАТТОР САМАДОВИЧ РАСПРОСТРАНЕНИЕ, СИСТЕМАТИКА, ЭКОЛОГИЯ И ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ГРЫЗУНОВ ТАДЖИКИСТАНА Специальность: 03.02.04 - зоология АВТОРЕФЕРАТ на соискание ученой степени доктора биологических наук Душанбе – 2011 Работа выполнена в Отделе экологии наземных позвоночных животных Института зоологии и паразитологии им. Е.Н.Павловского Академии наук Республики Таджикистан Научный консультант : академик АН Республики Таджикистан, доктор биологических наук,...»

«БАШМАНОВ Александр Геннадьевич ПЕЛАГИЧЕСКИЕ ОСТРАКОДЫ (OSTRACODA: MYODOCOPA) СЕВЕРНОГО ЛЕДОВИТОГО ОКЕАНА (СОСТАВ, РАСПРЕДЕЛЕНИЕ) 03.00.18 – гидробиология (Биологические наук и) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владивосток PDF created with pdfFactory trial version www.pdffactory.com Работа выполнена в Лаборатории планктонологии Института биологии моря имени А.В. Жирмунского ДВО РАН Научный руководитель доктор биологических наук,...»

«Волошин Сергей Александрович ЗНАЧЕНИЕ МЕЖКЛЕТОЧНЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ У БАКТЕРИЙ MICROCOCCUS LUTEUS И RHODOCOCCUS RHODOCHROUS ДЛЯ ИНИЦИАЦИИ РОСТА. Специальность 03.00.04 – биохимия АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Москва-2005 Работа выполнена в лаборатории Биохимии стрессов микроорганизмов Института биохимии им. А.Н. Баха РАН Научный руководитель доктор биологических наук, профессор Капрельянц Арсений Сумбатович Официальные...»

«Бушуев Андрей Владимирович ФАКТОРЫ ВАРИАЦИИ УРОВНЯ МЕТАБОЛИЗМА ПОКОЯ ПТЕНЦОВ МУХОЛОВКИ-ПЕСТРУШКИ (FICEDULA HYPOLEUCA) 03.00.08 – зоология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук МОСКВА – 2009 Работа выполнена на кафедре зоологии позвоночных биологического факультета Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова Научный руководитель кандидат биологических наук Керимов Анвар Бурханович Официальные оппоненты доктор...»

«ШАГЖИНА АЙВИ ПЕТРОВНА ЭКОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МИКРООРГАНИЗМОВ, УЧАСТВУЮЩИХ В КРУГОВОРОТЕ АЗОТА В ЩЕЛОЧНЫХ ГИДРОТЕРМАХ ПРИБАЙКАЛЬЯ 03.00.16 – экология 03.00.07 – микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Улан-Удэ 2007 1 Работа выполнена в Институте общей и экспериментальной биологии СО РАН доктор биологических наук, профессор Научный руководитель : Баир Бадмабазарович Намсараев доктор биологических наук Научный...»

«Соболева Ольга Михайловна ЭКОЛОГО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ АДАПТАЦИЯ СОСНЫ ОБЫКНОВЕННОЙ НА УРБАНИЗИРОВАННЫХ ТЕРРИТОРИЯХ КЕМЕРОВСКОЙ ОБЛАСТИ 03.00.16 – Экология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Барнаул 2009 2 Работа выполнена на кафедре технологии хранения и переработки сельскохозяйственной продукции ФГОУ ВПО Кемеровский государственный сельскохозяйственный институт, г. Кемерово Научный руководитель : доктор сельскохозяйственных наук,...»

«НЕМАНКИН Тимофей Александрович АНАЛИЗ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ ГОРОХА (Pisum sativum L.), КОНТРОЛИРУЮЩЕЙ РАЗВИТИЕ АРБУСКУЛЯРНОЙ МИКОРИЗЫ И АЗОТФИКСИРУЮЩЕГО СИМБИОЗА 03.02.03 – Микробиология 03.02.07 – Генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург – 2011 Работа выполнена в лаборатории генетики растительно-микробных взаимодействий Всероссийского научно-исследовательского...»

«СИЛАНТЬЕВА МАРИНА МИХАЙЛОВНА ФЛОРА АЛТАЙСКОГО КРАЯ: АНАЛИЗ И ИСТОРИЯ ФОРМИРОВАНИЯ 03.00.05 – “Ботаника” АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Новосибирск – 2008 Работа выполнена в Алтайском государственном университете Научный консультант : доктор биологических наук, чл.-корр. РАН Камелин Рудольф Владимирович Официальные оппоненты : доктор биологических наук, профессор Ревушкин Александр Сергеевич доктор биологических наук, профессор...»

«ПАВЛОВА Кюнна Константиновна ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К ГЕСТОЗУ В ЯКУТСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ 03.02.07 – генетика 14.01.01 – акушерство и гинекология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Томск – 2011 Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте медицинской генетики Сибирского отделения РАМН и Учреждении Российской академии медицинских наук Якутском научном центре...»

«Хархун Екатерина Викторовна ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АНТАГОНИЗМА PSEUDOMONAS CHLORORAPHIS SUBSP. AUREOFACIENS ПРИ СОЗДАНИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО БИОПРЕПАРАТА И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА СОСТОЯНИЕ МИКРОБОЦЕНОЗА ПОЧВЫ 03.02.08 – экология (биологические наук и) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Ростов-на-Дону - 2013 2 Работа выполнена на кафедре биохимии и микробиологии ФГАОУ ВПО Южный федеральный университет доктор биологических наук, профессор, Научный...»

«Андреева Татьяна Анатольевна ИНТЕГРАЛЬНАЯ ОЦЕНКА ВОЗДЕЙСТВИЯ НЕФТЯНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ НА ПАРАМЕТРЫ ХИМИЧЕСКОГО И БИОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ПОЧВ ТАЕЖНОЙ ЗОНЫ ЗАПАДНОЙ СИБИРИ 03.00.27 – почвоведение Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Томск – 2005 1 Работа выполнена на кафедре почвоведения и экологии почв Томского государственного университета Научный руководитель : доктор биологических наук Середина Валентина Петровна Официальные...»

«Духовная Наталья Игоревна ПОКАЗАТЕЛИ РАЗВИТИЯ ФИТОПЛАНКТОННЫХ СООБЩЕСТВ В ВОДОЕМАХ С РАЗНЫМ УРОВНЕМ РАДИОАКТИВНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ 03.01.01 – Радиобиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва-2011 2 Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении науки Уральский научно-практический центр радиационной медицины Федерального медикобиологического агентства Российской Федерации, г. Челябинск Научный руководитель доктор...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.