WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

Интратекальный синтез иммуноглобулинов и дисфункциональные нарушения гематоэнцефалического/гематоликворного барьера при сифилитической инфекции

На правах рукописи

Пономарева Марина Владиславовна

ИНТРАТЕКАЛЬНЫЙ СИНТЕЗ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ И

ДИСФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ НАРУШЕНИЯ

ГЕМАТОЭНЦЕФАЛИЧЕСКОГО/ГЕМАТОЛИКВОРНОГО БАРЬЕРА

ПРИ СИФИЛИТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ

14.03.09 – Клиническая иммунология, аллергология (биологические наук

и)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Челябинск – 2014 2

Работа выполнена в научном клиническом отделе сифилидологии и инфекций, передаваемых половым путем и в научном экспериментально-лабораторном отделе Федерального государственного бюджетного учреждения «Уральский научноисследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Научный руководитель кандидат медицинских наук Левчик Надежда Константиновна

Научный консультант доктор медицинских наук Зильберберг Наталья Владимировна

Официальные оппоненты Базарный Владимир Викторович – доктор медицинских наук, профессор, Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, кафедра клинической лабораторной и микробиологической диагностики, профессор Новиков Юрий Александрович – доктор медицинских наук, доцент, Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Омская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации, кафедра дерматовенерологии и косметологии, профессор

Ведущая организация Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт иммунологии и физиологии Уральского отделения Российской академии наук

Защита диссертации состоится «28» мая 2014 года в часов на заседании Диссертационного совета Д 208.117.03 при Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, по адресу: 454092, г.





Челябинск, ул. Воровского, 64.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, на сайте www. chelsma.ru Автореферат разослан «» 2014 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, доцент ШИШКОВА Юлия Сергеевна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности Сифилитическое поражение центральной нервной системы (ЦНС) является частой причиной инвалидизирующих форм неврологических, психических, офтальмологических, слуховых, вестибулярных и других нарушений. Несмотря на значительное снижение заболеваемости сифилисом в Российской Федерации, по данным государственной статистической отчетности за последнее десятилетие (2002-2011 гг) количество зарегистрированных случаев нейросифилиса увеличилось в 2,1 раза (с 471 до 987 случаев). При этом результаты анализа качества лабораторной диагностики нейросифилиса позволяют предположить значительное превышение реальной распространенности нейросифилиса над официально зарегистрированной (Катунин, Г.Л. и др. Анализ заболеваемости и качества лабораторной диагностики нейросифилиса в Российской Федерации // Вестн. дерматол. и венерол. 2011. №3. С. 18-26.). Широкое применение антибактериальных препаратов привело к увеличению частоты случаев нейросифилиса с маловыраженной и неспецифической клинической симптоматикой, при которых диагноз основывается только на результатах анализа цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) (Красносельских, Т. В., Соколовский, Е. В.

Нейросифилис: нерешенные проблемы и невыученные уроки (часть 1) // Современные проблемы дерматовенерологии, иммунологии и врачебной косметологии. 2011. № 5. С. 5-11.;

Ghanem, K.G. Neurosyphilis : a historical perspective and review // CNS Neuroscience and Therapeutics. 2010. № 16. Р. 157–168.). В тоже время лабораторная верификация сифилитического поражения ЦНС до настоящего времени остается зоной общемировой полемики: констатируется явная недостаточная диагностическая точность имеющихся «классических» критериев (Красносельских, Т. В., Соколовский, Е. В. Нейросифилис:

нерешенные проблемы … С. 5-11.; Российское общество дерматовенерологов и косметологов.

Ведение больных инфекциями, передаваемыми половым путем, и урогенительными инфекциями : клинические рекомендации. Сифилис // Москва. 2012. С. 34-68.; Ghanem, K.G.

Neurosyphilis: A Historical Perspective and Review // CNS Neuroscience and Therapeutics. 2010.

№16. Р. 157–168.; Prange, H.W. Neurosyphilis. In: Sexually Transmitted Infections and Sexually Transmitted Diseases (Ed. Gross G, Tyring S.K.). Berlin.: Springer-Verlag, 2011. Р. 163-171.), дополнительно предложенные критерии признаются требующими обоснований и пока не рекомендованы для широкого применения (Ho, E. L., Marra, C.M. Treponemal Tests for Neurosyphilis—Less Accurate Than What We Thought? // Sexually Transmitted Diseases. 2012. Vol.





39, № 4. Р. 298 – 299.), появляются работы, подвергающие сомнению уже валидированные критерии (Harding, A. S., Ghanem, K. G. The Performance of Cerebrospinal Fluid TreponemalSpecific Antibody Tests in Neurosyphilis // A Systematic Review Sexually Transmitted Diseases.

2012. Vol. 39, №4. Р. 291-297.).

В основе ликвородиагностики лежит детекция иммунного ответа в забарьерном пространстве ЦНС. На настоящий момент главным инструментом являются диагностические тесты, выявляющие присутствие в ЦСЖ сифилис-ассоциированных антител. Трудность интерпретации результатов тестов и спорность критериев обусловлена возможностью двоякого происхождения детектируемых антител. Диагностическую значимость имеют только иммуноглобулины, синтезированные интратекально плазматическими клетками периваскулярных воспалительных инфильтратов в ЦНС. Однако теоретически существует вероятность, что высокое содержание в ЦСЖ иммуноглобулинов, происходящих из системного кровотока, способно имитировать интратекальный иммунный ответ. Это может быть следствием высокого уровня антител в крови и/или так называемой «дисфункции гематоэнцефалического/гематоликворного (ГЭБ/ГЛБ) барьера» (нарушение целостности ГЭБ/ГЛБ и/или расстройства циркуляции ЦСЖ). В литературе отсутствуют сведения об особенностях изменения иммуноглобулинового состава ЦСЖ вследствие влияния интратекального иммунного ответа и дисфункциональных нарушений ГЭБ/ГЛБ при сифилисе.

Своевременная диагностика вовлечения ЦНС в инфекционный процесс при сифилисе имеет определяющее значение для благоприятного исхода заболевания и предупреждения развития осложнений. Поиск прогностических критериев нейросифилиса, основанных на исследовании периферической крови, является актуальным. Опубликованы данные, свидетельствующие о наличии связи между уровнем специфических антител в системном кровотоке и фактом установления диагноза «нейросифилис» (De Silva, Y. et al. The value of serum TPHA titres in selecting patients for lumbar puncture // Genitourin Med. 1991. № 67. Р. 37-40.;

Marra, C. M. et al.Cerebrospinal Fluid Abnormalities in Patients with Syphilis: Association with Clinical and Laboratory Features //The Journal of Infectious Diseases. 2004. № 189. Р. 369–376.).

Однако отсутствуют работы, посвященные особенностям иммуноглобулинового состава периферической крови больных сифилисом, ассоциированным с наличием интратекального гуморального иммунного ответа.

Установление закономерностей формирования иммуноглобулинового состава ЦСЖ и крови углубит понимание иммунного ответа при сифилитической инфекции и будет способствовать совершенствованию иммунодиагностики нейросифилиса.

Цель исследования: изучение интратекального синтеза иммуноглобулинов и дисфункции гематоэнцефалического/гематоликворного барьера как факторов влияния на иммуноглобулиновый состав цереброспинальной жидкости и выявление особенностей иммуноглобулинового состава крови, ассоциированных с наличием интратекального иммунного ответа, при сифилитической инфекции.

Задачи исследования:

1. Охарактеризовать интратекальный синтез иммуноглобулинов и дисфункциональные нарушения гематоэнцефалического/гематоликворного барьера у серопозитивных по сифилису пациентов с подозрением на нейросифилис, и их особенности, ассоциированные с наличием в анамнезе противосифилитической терапии.

2. Определить влияние дисфункции гематоэнцефалического/гематоликворного барьера и интратекального синтеза иммуноглобулинов на количественный и качественный состав общих иммуноглобулинов в цереброспинальной жидкости.

3. Выявить особенности интратекального синтеза иммуноглобулинов, ассоциированные с активностью воспалительного заболевания центральной нервной системы.

4. Изучить взаимосвязь между выявлением интратекального синтеза иммуноглобулинов и дисфункции гематоэнцефалического/гематоликворного барьера и результатами диагностических тестов, рекомендованными в качестве критериев подтверждения/исключения диагноза «нейросифилис».

5. Исследовать взаимосвязь между пулами иммуноглобулинов системного кровотока и цереброспинальной жидкости, выявить особенности иммуноглобулинового состава крови, ассоциированные с наличием интратекального синтеза иммуноглобулинов.

Работа выполнена в рамках НИР ФГБУ «Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии» Минздрава России (номер гос. регистрации 01201371572).

Методология и методы исследования. В работе применен комплекс иммунологических и общеклинических методов исследования цереброспинальной жидкости и крови при сифилитической инфекции.

Исследование проведено в соответствии с принципами доказательной медицины и одобрено Локальным этическим комитетом ФГБУ «УрНИИДВиИ» Минздарава России (протокол № 2 от 03.09.2010 г.) Степень достоверности, апробация результатов, личное участие автора.

Достоверность результатов исследования обеспечена обоснованностью исходных теоретических позиций, достаточным количеством пациентов и формированием групп сравнения, использованием адекватных и апробированных лабораторных методов, соблюдением рекомендаций международного консенсуса неврологов и нейрохимиков для лабораторного исследования протеинов ЦСЖ (Reiber, H. et al. Quality assurance for cerebrospinal fluid protein analysis: international consensus by an Internet-based group discussion // Clin Chem Lab Med. 2003. Vol. 41, № 3. P. 331-337.), использованием сертифицированных наборов реагентов, и применением современной компьютерной программы для статистической обработки полученных данных. О достоверности полученных результатов также свидетельствует их биологическая правдоподобность и непротиворечивость ранее проведенным исследованиям и наблюдениям, опубликованным в научной литературе.

Основные результаты работы доложены и обсуждены на XI Всероссийском съезде дерматовенерологов и косметологов (Екатеринбург, 2010 г.), региональной дерматовенерологии» (Челябинск, 2010 г.), IX конференции иммунологов Урала (Челябинск, 2011 г.), межрегиональной научно-практической конференции «Современные проблемы дерматовенерологии. Качество и доступность специализированной медицинской помощи»

(Екатеринбург, 2011 г.), XII (Москва, 2012 г.) Всероссийском съезде дерматовенерологов и косметологов, региональной междисциплинарной научно-практической конференции «Дерматология: вопросы повышения качества и доступности специализированной медицинской помощи» (Екатеринбург, 2013 г.).

Автором лично проведен научно-информационный поиск, заполнены оригинальные анкеты на основании анализа историй болезни пациентов, создан банк биологических образцов (ЦСЖ, сыворотка крови) пациентов. Семьдесят семь процентов лабораторных исследований выполнены автором лично. Статистический анализ и оценка результатов, написание глав диссертации выполнены лично автором, публикации по материалам диссертации подготовлены в соавторстве.

Положения, выносимые на защиту Интратекальный синтез иммуноглобулинов при сифилитической инфекции характеризуется разнообразием изотипических вариантов с тенденцией к более низкой распространенности продуцирования иммуноглобулинов G4, редкой встречаемости изолированного синтеза иммуноглобулинов А и рестрикции изотипического спектра под влиянием специфической терапии.

При сифилитической инфекции интратекальный иммунный ответ оказывает существенно более значимое влияние на содержание иммуноглобулинов в цереброспинальной жидкости в сравнении с дисфункциональными нарушениями гематоэнцефалического/ гематоликворного барьера, которые характеризуются преобладанием форм незначимой, легкой и умеренной степени выраженности.

Интратекальный синтез иммуноглобулинов, ассоциированный с активным воспалительным процессом в центральной нервной системе, отличается более высокой частотой синтеза иммуноглобулинов М и большей интенсивностью синтеза иммуноглобулинов G3, G2 и G1.

Современные лабораторные критерии диагностики нейросифилиса являются различными инструментами оценки интратекального гуморального иммунного ответа:

результаты тестов, подтверждающие диагноз «нейросифилис», ассоциированы с наличием признаков интратекального синтеза иммуноглобулинов, а результаты тестов, исключающие нейросифилис - с их отсутствием.

Интратекальный гуморальный иммунный ответ ассоциирован с высоким уровнем реагиновых и трепонемаспецифичных антител в системном кровотоке; содержание трепонемаспецифичных антител в крови в количестве превышающим титр реакции пассивной гемагглютинации 1:40960, может рассматриваться в качестве дополнительного прогностического критерия наличия поражения центральной нервной системы при сифилисе.

Научная новизна исследования Впервые показана значительная изотипическая вариабельность интратекального гуморального иммунного ответа при сифилисе с более низкой вероятностью синтеза IgG4 и редкой встречаемостью изолированного синтеза IgА. Установлено, что интратекальный синтез иммуноглобулинов у пациентов, получавших терапию по поводу неневрологического сифилиса, отличается более узким спектром интратекально-синтезируемых изотипов.

Показано, что нарушения функционального состояния ГЭБ/ГЛБ при сифилисе носят невыраженный характер, с преобладанием дисфункций незначимой, легкой и умеренной степени выраженности.

Впервые представлены данные, свидетельствующие о том, что содержание иммуноглобулинов в ЦСЖ значительно возрастает в результате их интратекального синтеза (особенно класса М) и умеренно увеличивается при дисфункции ГЭБ/ГЛБ.

Впервые показано, что при активной воспалительной реакции в ЦНС у серопозитивных по сифилису пациентов наблюдается повышенная частота интратекального синтеза IgM и значительное возрастание интенсивности интратекального синтеза IgG3, IgG2 и IgG1.

Впервые доказано, что наличие в ЦСЖ детектируемого количества реагиновых антител и высокой концентрации трепонемаспецифических антител ассоциировано с интратекальным гуморальным иммунным ответом и маловероятно в его отсутствие и при изолированной дисфункции ГЭБ/ГЛБ.

Впервые продемонстрировано, что интратекальный гуморальный иммунный ответ при сифилитической инфекции ассоциирован с более высоким содержанием реагиновых и трепонемаспецифичных антител в системном кровотоке.

Теоретическая и практическая значимость работы. Проведенные исследования позволили расширить представление об интратекальном иммунном ответе и нарушении функционального состояния ГЭБ/ГЛБ при сифилисе, установить закономерности изменения качественного и количественного состава иммуноглобулинов ЦСЖ в результате интратекального синтеза иммуноглобулинов и нарушенной функции ГЭБ/ГЛБ и выявить связь между интратекальным гуморальным иммунным ответом и содержанием общих и сифилисассоциированных антител в системном кровотоке. Полученные данные позволили уточнить иммунобиологическую основу существующих лабораторных критериев диагностики и прогнозирования нейросифилиса, привести аргументацию в отношении дискутабельных диагностических критериев и предложить новые прогностические критерии для дополнительного обоснования диагностической пункции (патент на изобретение №2449286, заявка на патент № 2013131721).

Полученные данные могут быть использованы в работе клинико-диагностических лабораторий и отделений венерологии, неврологии, психиатрии лечебных учреждений, а также в процессе последипломной подготовки врачей-дерматовенерологов, неврологов и врачей клинической лабораторной диагностики Внедрение результатов исследования в практику: результаты исследования внедрены в практику работы ФГБУ «Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии» Минздрава России. Результаты работы включены в лекционный курс факультета повышения квалификации и профессиональной переподготовки специалистов по специальности «Дерматовенерология» ГБОУ ВПО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, лекционный курс кафедры дерматовенерологии ГБОУ ВПО «Пермская государственная медицинская академия им. академика Е.А. Вагнера» Минздрава России.

Публикации. Автор имеет 18 опубликованных работ, из них по теме диссертации опубликованы 9 научных работ общим объемом 1,7 печатных страниц, из них 6 статей в научных изданиях, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией Минобрнауки России (5 статей в российских журналах, 1 статья в зарубежном научном журнале), 2 работы опубликованы в материалах всероссийского съезда и междисциплинарной научнопрактической конференции, получен 1 патент на изобретение № 2449286 от 27.04.2012, оформлена заявка на изобретение № 2013131721 от 27.07.2013 года.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 133 страницах, содержит таблиц и 2 рисунка, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 3 глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, включающего 145 источников ( отечественных и 93 зарубежных авторов).

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Проведенное научное исследование является: обсервационным аналитическим кросссекционным.

Характеристика обследованных пациентов.

В исследование включались серопозитивные по сифилису пациенты, подвергшиеся люмбальной пункции в отделении венерологии клиники ФГБУ «УрНИИДВиИ» Минздрава России в период с мая 2006 года по ноябрь 2011 года. Показаниями для проведения диагностической пункции являлись: неврологическая симптоматика при любых формах сифилиса; нелеченые поздние формы сифилиса; неуточненный сифилис; отсутствие положительной динамики нетрепонемных серологических тестов в рекомендуемые сроки наблюдения после специфической терапии; контроль лечения нейросифилиса. Все пациенты были проконсультированы неврологом и подписали информированное согласие. Парные образцы ЦСЖ и крови были собраны в один день. Часть ЦСЖ и сыворотки крови использовалась для проведения стандартных тестов, утвержденных приказами МЗ РФ для диагностики нейросифилиса, остатки образцов аликвотировались и хранились при температуре минус 80°С. После завершения процесса набора образцы ЦСЖ и крови были подвергнуты углубленному исследованию. Из 140 пациентов, удовлетворяющих критериям включения, четырнадцать были исключены из исследования по одной из следующих технических причин:

контаминация с кровью образцов ЦСЖ (6 человек), не было получено образцов крови в день проведения спинномозговой пункции (5 человек) и малый объем образца ЦСЖ (3 человека).

Окончательный объем выборки составил 126 пациентов (73 мужчины и 53 женщины).

Длительность заболевания пациентов превышала 5 лет. В основном это были пациенты (103 из 126, 82%) со специфической терапией в анамнезе, в том числе 15 пациентов имели в анамнезе указание на терапию высокими дозами пенициллина, предусмотренную для лечения нейросифилиса. Двадцать два из 23 пациентов с отсутствием специфической терапии в анамнезе поступили с диагнозом «поздний скрытый сифилис» (А 52.8) или «сифилис неизвестной длительности» (А 53.0).

На наличие в анамнезе черепно-мозговой травмы указывало 25 человек, ишемического инсульта - 6 пациентов, эпилепсии -3 человека, туберкулеза – 3 человека, лайм-боррелиоза - человек. У 2 пациентов диагностирована ВИЧ-инфекция.

При неврологическом обследовании у 85 пациентов были обнаружены те или иные отклонения: нарушение зрения (19 пациентов), слуха (6), головные боли (21), цереброваскулярные (6), нейропсихиатрические (29) нарушения, поражение черепно-мозговых нервов (48), нарушения двигательной функции (24), сенсорные (5), координаторные (8) расстройства, шаткость походки (4).

Лабораторное исследование ЦСЖ и сыворотки крови.

Оценка интратекального синтеза иммуноглобулинов проводилась по методологии, предложенной Н. Reiber (Reiber, H., Peter, J.B. Cerebrospinal fluid analysis: disease-related data patterns and evaluation programs // J Neurol Sci. 2001. Vol. 184, №2. P. 101- 122), путем сравнения фактического коэффициента иммуноглобулинов (QIg) и расчетного предельного коэффициента иммуноглобулинов (Qlim), определяемого индивидуально для каждого пациента и отдельно для изотипов A, M, G1, G2, G3, G4.

фактический коэффициент иммуноглобулинов данного изотипа превышал соотвествующий показатель, характеризующий предельный уровень диффузии (QIg>Qlim).

Оценка интенсивности интратекального синтеза производилась путем расчета значений минимальной интратекально-синтезируемой фракции иммуноглобулинов в абсолютном (Igloc) и относительном (IgIF) значении:

Igloc (мг/л)= [QIg-Qlim] • Igсыворотка IgIF (%)=[ Igloc /IgЦСЖ] • 100% Состояние ГЭБ/ГЛБ оценивалось с помощью коэффициента альбумина (Qalb), равного отношению концентрации альбумина в ЦСЖ (мг/л) к концентрации альбумина в сыворотке (мг/л). Значения Qalb, превышающие возрастные нормы [Qalb = (4 + возраст/15) 10-3], были расценены как дисфункция ГЭБ/ГЛБ (Reiber, H., Peter, J.B. Cerebrospinal fluid analysis… P. 120) При выявлении дисфункции ГЭБ/ГЛБ, величину Qаlb (•10-3) дополнительно оценивали на основании критериев Schliepand-Felgenhauer (Christenson, R. et al. Interpretation of cerebrospinal fluid protein assays in various neurologic diseases // Clin. chem. 1983. Vol. 29, №. 6. P. 1028-1030.):

Qalb·10 менее 9,0 – несущественные нарушения, 9,0-14,3 – небольшие нарушения, 14,3-33,3 – умеренные нарушения, 33,3-100,0 – тяжелые нарушения; больше 100,0 – «катастрофическое повреждение», также для характеристики дисфункции использовали показатель величины превышения индивидуального значения Qаlb над возрастной нормой (%), равный [(Qфактический-Qнорма)/Qнорма].

Определение содержание альбумина проводили турбидиметрическим методом, общих иммуноглобулинов различных изотипов (G1, G2, G3, G4, M, A,) - методом иммуноферментного анализа. Для повышения надежности и точности соотношения концентраций альбумина и иммуноглобулинов образцы ЦСЖ и сыворотки были проанализированы в рамках одной аналитической серии, подбирая соответствующее разведение биологических жидкостей.

Наличие трепонемаспецифических антител в ЦСЖ и сыворотке крови определяли в тестах:

- иммуноферментного анализа (ИФА) - качественное определение антител класса G - реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) - количественная оценка суммарных антител (результаты РПГА для образцов ЦСЖ считались положительными в разведении 1:4 и больше, для сыворотки крови 1:80 и больше);

- реакции иммунофлюоресценции в двух модификациях: с цельным ликвором (РИФц) и с абсорбцией антител к культуральным непатогенным трепонемам (штаммы V, VII, VIII, IX, Рейтерa) (РИФабс) (положительными считались образцы, которые давали свечение интенсивностью больше 1+ (трепонемы окрашены чуть интенсивнее фона);

- реакции связывания комплемента (РСКт) (методика постановки реакции Вассермана с ЦСЖ (О совершенствовании серологической диагностики сифилиса : приказ М-ва здравоохранения Рос. Федерации №87 от 26 марта 2001 г. Москва, 2001. 63 с.)) – качественное определение суммарных антител.

Наличие реагиновых антител в ЦСЖ и сыворотке крови определяли в тестах:

- реакции микропреципитации с кардиолипиновым антигеном (РМП) (качественный количественный варианты для сыворотки крови и ЦСЖ);

- реакции связывания комплемента (РСКк) (методика постановки реакции Вассермана с ЦСЖ (приказ МЗ РФ № 87) – качественное определение суммарных антител;

-VDRL (по названию лаборатории разработчика Venereal Disease Research Laboratory) качественное определение суммарных антител в ЦСЖ;

- RPR (Rapid Plasma Reagin) тест – качественное определение суммарных антител в ЦСЖ.

зарегистрированные в Российской Федерации диагностикумы и тест-системы.

Также был произведен расчет индексов, предложенных для оценки специфического интратекального синтеза Ig: Treponema pallidum haemagglutination assay индекс (ТРНА индекс) и Intrathecally produced T. pallidum аntibody (ITpA) индекс. Расчет ТРНА и ITpA индексов производили по формулам:

ITpA индекс = [(РПГА ЦСЖ (титр) / РПГА сыворотки (титр)/ QIgG].

За пороговую величину были приняты значения ТРНА индекса выше 70 (French, P. et al.

IUSTI: 2008 European Guidelines on the Management of Syphilis // International Journal of STD & AIDS. 2009. №20. Р. 300-309.); ITpA индекса - выше 3 (Prange, H.W. Neurosyphilis … Р. 163Статистические методы анализа Статистический анализ данных проведен согласно общепринятым методам (Гланц, С.

Медико-биологическая статистика // М.: Практика, 1999. 500 с.; Ланг, Т.А., Сесик, М. Как описывать статистику в медицине : рук. для авторов, редакторов, рецензентов. М.:

Практическая медицина, 2011. 477 с.) c использованием лицензионной программы Medcalc 12. (MedCalcSoftwarebvba, Бельгия).

Поскольку распределение большинства количественных признаков не являлось нормальным, данные приведены в виде медианы и границ межквартильного интервала (25- перцентиль). Для бинарных признаков приведены абсолютное количество и доля с 95%доверительным интервалом (95%ДИ) для доли.

Сравнительный анализ количественных признаков выполнен с помощью критерия Манн-Уитни для двух, Краскела-Уоллиса – для трех и более сравниваемых групп, качественных признаков - критерием Хи-квадрат (2); с корректировкой уровня значимости для выявления существенно различных пар при множественном сравнении с помощью процедуры Бонферрони-Холма. Для выявления взаимосвязи между двумя непрерывными переменными использовался метод ранговой корреляции Спирмена (rs). Для тестирования внутригрупповых различий между частотами различных критериев был применен Кохран (Cochran) Q тест.

Оценка предикторов по изучаемому признаку производилась с расчетом отношения шансов (ОШ) с 95% ДИ. Для всех статистических критериев ошибка первого рода устанавливалась равной 0,05. Нулевая гипотеза (отсутствие различий) отвергалась, если вероятность (p) не превышала ошибку первого рода.

Для решения первой задачи был проведен анализ структуры интратекального синтеза Ig и дисфункциональных нарушений ГЭБ/ГЛБ в целом по группе пациентов с выявленными отклонениями и в зависимости от наличия специфической терапии в анамнезе.

Признаки интратекального синтеза Ig были обнаружены у 55 пациентов. Различия в частоте выявления интратекального синтеза каждого из изотипов IgG1, IgG2, IgG3, IgM, IgA не были статистически значимы и составили 47-56%, за исключением G4, синтез которого регистрировали вдвое реже (Кохран тест Qdf5=25,3; p 3 часто (30 из 65) выявлялся в моноварианте, особенно при изолированной дисфункции ГЭБ/ГЛБ.

В целом, полученные данные свидетельствуют в пользу гипотезы, что присутствие в ЦСЖ реагиновых антител и повышенное содержание трепонемаспецифических антител является следствием интратекального иммунного ответа и позволяют рекомендовать критерий «титр РПГА-ЦСЖ > 1:320» и «ТРНА-индекс > 70» для использования при диагностике нейросифилиса у пациентов с подозрением на нейросифилис, ранее не получавших противосифилитической терапии.

Для решения пятой задачи были проанализированы показатели общих иммуноглобулинов и уровня сифилис-ассоциированных антител (титр РМП и РПГА) в системном кровотоке у пациентов с признаками ИТС Ig (n=55) и без (n=71), изучены особенности, ассоциированные с активностью воспалительного процесса в ЦНС и проведен корреляционный анализ между значениями содержания общих иммуноглобулинов в крови и ЦСЖ, а также показателями, характеризующими выраженность системного антителообразования (результаты тестов РПГА и РМП в сыворотке крови) и интенсивность ИТС Ig (абсолютное и относительное содержание интратекально-синтезированной фракции Ig в ЦСЖ). Были выделены критические значения показателей периферической крови, ассоциированные с ИТС Ig, их прогностический потенциал оценен посредством расчета отношения шансов с 95% ДИ. Полученные данные свидетельствовали, что факт наличия ИТС Ig не был ассоциирован с увеличением пула общих Ig в системном кровотоке, более того, наблюдалось статистически значимое снижение уровня IgM (1,3 (0,93-2,2) г/л против 1,7 (1,2г/л у пациентов без признаков ИТС Ig; р=0,023) (рисунок 8а). Тогда как уровень сифилисассоциированных антител в системном кровотоке был достоверно выше при выявлении

Похожие работы:

«ГУРАЛЕВ ВЛАДИМИР МИХАЙЛОВИЧ РАЗВИТИЕ ФИЗИЧЕСКИХ КАЧЕСТВ СТУДЕНТОК НА ОСНОВЕ ПОВЫШЕНИЯ СТАТОКИНЕТИЧЕСКОЙ УСТОЙЧИВОСТИ 13.00.04 – теория и методика физического воспитания, спортивной тренировки, оздоровительной и адаптивной физической культуры АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Красноярск-2004 Работа выполнена на кафедре теории и методики физической культуры и спорта Южно-Уральского государственного университета Научный...»

«РАЛКОВ Иван Александрович ВЛИЯНИЕ ИНТЕГРАЦИИ ГЕННЫХ КОНСТРУКЦИЙ MT1-GRF И WAP-hGH НА БИОЛОГИЧЕСКИЕ И ХОЗЯЙСТВЕННО-ПОЛЕЗНЫЕ ПРИЗНАКИ ТРАНСГЕННЫХ СВИНЕЙ РАЗНЫХ ПОКОЛЕНИЙ 03.02.07 – ГЕНЕТИКА 03.03.01 - ФИЗИОЛОГИЯ АВ Т ОР ЕФЕ Р АТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Дубровицы-2011 Работа выполнена в Центре биотехнологии и молекулярной диагностики животных ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Российской академии...»

«Бойко Валерий Вячеславович ДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫЙ ПОДХОД В СИСТЕМЕ ФИЗИЧЕСКОГО ВОСПИТАНИЯ ДОШКОЛЬНИКОВ 13.00.04 - теория и методика физического воспитания, спортивной тренировки, оздоровительной и адаптивной физической культуры АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Ярославль - 2008 Работа выполнена на кафедре теории и методики физического воспитания ГОУ ВПО Орловский государственный педагогический университет Научный руководитель :...»

«Владыкин Александр Львович РОЛЬ ХОЛИНЕРГИЧЕСКОЙ И ИММУННОЙ СИСТЕМ В РЕГУЛЯЦИИ ВОСПАЛЕНИЯ ПРИ АНАФИЛАКТИЧЕСКОМ И ЭНДОТОКСИЧЕСКОМ ШОКЕ 14.00.25 - фармакология, клиническая фармакология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург 2009 2 Работа выполнена в Отделе нейрофармакологии им. С.В. Аничкова Учреждения Российской академии медицинских наук Научноисследовательский институт экспериментальной медицины Северо-Западного...»

«МЕЛЬНИК ЮЛИЯ ЮРЬЕВНА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ КОРЫ ТЕМЕННОЙ ДОЛИ БОЛЬШОГО МОЗГА ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ СИНДРОМА РЕЙЕ И КОРРЕКЦИИ ЕГО ГЕПАТОПРОТЕКТОРАМИ 03.00.25 – гистология, цитология, клеточная биология 14.00.25 – фармакология, клиническая фармакология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Томск – 2003 2 Работа выполнена в Сибирском государственном медицинском университете, г. Томск Научные руководители: доктор медицинских наук,...»

«ЕГОРЫЧЕВА ЭЛИНА ВИКТОРОВНА ТЕХНОЛОГИЯ ПРИМЕНЕНИЯ СРЕДСТВ ОЗДОРОВИТЕЛЬНОЙ ФИЗИЧЕСКОЙ КУЛЬТУРЫ НА ЗАНЯТИЯХ СО СТУДЕНТКАМИ СПЕЦИАЛЬНОГО УЧЕБНОГО ОТДЕЛЕНИЯ 13.00.04 – теория и методика физического воспитания, спортивной тренировки, оздоровительной и адаптивной физической культуры АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Москва – 2014 Работа выполнена на кафедре теории физической культуры ФГБОУ ВПО Ярославский государственный педагогический...»

«СМИРНОВА Нина Анатольевна МАТЕМАТИЧЕСКОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ И СИНТЕЗ ОБУЧАЕМОГО УПРАВЛЕНИЯ УПРУГИМ МАНИПУЛЯТОРОМ ПРИ ЦИКЛИЧЕСКИХ ОПЕРАЦИЯХ (Специальность: 05.13.18 – Математическое моделирование, численные методы и комплексы программ) Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата технических наук Санкт-Петербург 2002 2 Работа выполнена на кафедре ‘Механика и процессы управления’ Санкт-Петербургского государственного политехнического университета. Научный...»

«Павлов Юрий Вячеславович ЗАКОНОМЕРНОСТИ ИЗМЕНЕНИЯ УРОЖАЙНОСТИ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ В СВЯЗИ С ТРАНСФОРМАЦИЕЙ ЛЕСНЫХ ЗЕМЕЛЬ (на примере Ленинградской области) 06.03.02 – Лесоведение, лесоводство, лесоустройство и лесная таксация АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Санкт-Петербург – 2010 Работа выполнена в ГОУ ВПО Санкт-Петербургская государственная лесотехническая академия им. С.М.Кирова Научный руководитель : доктор...»

«Коданева Любовь Николаевна ПРОГРАММНО-МЕТОДИЧЕСКОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ ФИЗИЧЕСКОГО ВОСПИТАНИЯ УЧАЩИХСЯ МЛАДШИХ КЛАССОВ СПЕЦИАЛЬНОЙ МЕДИЦИНСКОЙ ГРУППЫ 13.00.04 – теория и методика физического воспитания, спортивной тренировки, оздоровительной и адаптивной физической культуры Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Москва – 2011 2 Работа выполнена на кафедре тяжелой атлетики и гимнастики Педагогического института физической культуры ГОУ ВПО г....»

«Козлитина Оксана Николаевна ВЛИЯНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ СИСТЕМ ОБРАЗОВАНИЯ НА ФОРМИРОВАНИЕ ЛИЧНОСТНОЙ СТРУКТУРЫ У МОЛОДЕЖИ 19.00.01 – общая психология, психология личности, история психологии (психологические наук и). АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата психологических наук Ставрополь – 2004 Работа выполнена на кафедре клинической психологии Ставропольского государственного университета, кафедре психотерапии и медицинской психологии факультета...»

«Акайкин Даниил Алексеевич ОПЕРАТИВНОЕ ОБСЛЕДОВАНИЕ ПОВРЕЖДЕННЫХ НАСАЖДЕНИЙ С ПРИМЕНЕНИЕМ БЕСПИЛОТНЫХ ЛЕТАТЕЛЬНЫХ АППАРАТОВ И ГИС (на примере Сосновского участкового лесничества, Приозерского лесничества, Ленинградской области) Специальность 06.03.02 – “Лесоведение, лесоводство, лесоустройство и лесная таксация” Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Санкт- Петербург – 2012 1 Работа выполнена на кафедре лесной таксации,...»

«ПОПОВА Ольга Вячеславовна ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО ОТВЕТА ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ ИЕРСИНИОЗА 14.00.10 - инфекционные болезни Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва 2006 2 Работа выполнена в Московском Государственном медико стоматологическом университете Научный руководитель : Академик РАМН, доктор медицинских наук, профессор Ющук Николай Дмитриевич Научный консультант : кандидат биологических наук Шепелева Галина Константиновна...»

«Чекунова Наталия Валерьевна МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ИЗМЕНЕНИЙ СЛИЗИСТОЙ КУЛЬТИ ЖЕЛУДКА У БОЛЬНЫХ, ОПЕРИРОВАННЫХ ПО ПОВОДУ РАКА 14.01.17 - ХИРУРГИЯ 03.02.07 - ГЕНЕТИКА Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва 2014   1   Работа выполнена в ГБОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Минздрава России. Научные руководители: Хоробрых Татьяна Витальевна доктор медицинских наук,...»






 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.